黄芪多糖对阿尔茨海默病小鼠海马组织的影响

目的探讨黄芪多糖(APS)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠的影响。方法小鼠随机分成对照组、模型组、吡拉西坦组、APS高、中、低剂量组(800、600、200 mg·kg-1·d-1)。采用Aβ1~42双侧脑室注射小鼠诱导AD模型。灌胃时各组给予等体积的药物或生理盐水,持续28 d。采用Morris水迷宫测试行为学指标并观察小鼠学习记忆能力,观察小鼠海马组织的镜下形态结构、脑和脾脏的脏器指数,检测小鼠脑组织含水量和伊文氏蓝(EB)含量,采用双抗体夹心法测定海马组织β-淀粉样蛋白(Aβ)和白介素(IL)-6水平。结果与模型组比较,APS高、中、低剂量组能明显改善AD模型小鼠学习记忆能力(P0.05),明显改善海马神经元细胞形态,升高脑和脾脏脏器指数(P0.05),降低脑组织含水量和EB含量(P0.05),降低海马Aβ和IL-6水平(P0.05)。结论 APS能改善AD模型小鼠的学习记忆功能及海马神经元形态结构,降低AD模型小鼠血脑屏障破坏程度。APS通过抑制Aβ和IL-6蛋白水平而在AD治疗中发挥作用。     

补肾益智方对实验性阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆水平的影响

目的探讨补肾益智方对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆功能的影响。方法实验大鼠分为五组,包括补肾益智方低、高剂量组(LD、HD)、Hup-A组(石杉碱甲对照组)、模型对照组(MC)、和正常老年对照组(SC)。除SC外,各组均接受腹腔注射D-半乳糖和双侧Meynert基底核注射Ibotenic acid造模。然后,通过Morris水迷宫测试补肾益智方高、低剂量对AD模型大鼠学习记忆的影响。结果两组补肾益智方对AD模型具有一定的影响。特别是LD组逃避潜伏期明显优于MC组和和HU组;HD也有所改善,但较LD组差,和HU群大致相当。结论补肾益智方能够改善的AD模型大鼠的学习和记忆功能障碍,其作用程度与补肾益智方剂量有关。     

绞股蓝皂甙对阿尔茨海默病小鼠海马胆碱能系统功能的影响

目的 探讨绞股蓝皂甙对D-半乳糖(D-gal)所致阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马胆碱能系统功能的影响.方法 昆明小鼠颈背部皮下注射10％ D-gal,连续6 w造模.同时,各组分别灌胃生理盐水(正常对照组、模型组)、绞股蓝(高、低剂量组).给药结束后进行水迷宫训练,24h后进行学习记忆功能测试和海马胆碱乙酰基转移酶(ChAT)与乙酰胆碱酯酶(AchE)活性测定以及Western印迹检测ChAT表达.结果 与正常对照组相比,D-gal模型组小鼠学习记忆能力,模型组ChAT活性和ChaT表达明显下降(P ＜0.05,P＜0.01);模型组AchE活性明显升高(P＜0.01).给予绞股蓝皂甙可明显改善AD模型小鼠的学习记忆功能(P＜0.05,P＜0.01),增强海马ChAT活性(P＜0.01)和降低AchE活性(P＜0.01),上调ChAT的表达(P＜0.01).结论 绞股蓝皂甙可明显提高模型小鼠的学习记忆能力,改善海马胆碱能系统功能.     

蝙蝠葛苏林碱对阿尔茨海默病小鼠海马的影响和机制

目的探讨蝙蝠葛苏林碱(DS)对阿尔茨海默病(AD)小鼠影响及机制。方法 C57BL/6小鼠随机分对照组、模型组、多奈哌齐组(0.001 g·kg-1)及DS高、中和低剂量组(1.08、0.54、0.27 g/kg)。采用β-淀粉样蛋白(Aβ)1~42(80 pmol/μl)脑室注射诱导AD模型。治疗30 d后测小鼠学习记忆能力,透射电镜观察海马CA3区,测脏器指数和脑伊文氏蓝(EB),酶联免疫吸附法测海马β-淀粉样蛋白前体蛋白(APP)、Aβ1~42、白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)。结果与模型组比较,DS改善AD小鼠学习记忆能力(P<0.05)和海马结构,明显升高脾和胸腺指数(P<0.05),其他脏器指数改变不明显(P>0.05),EB、APP、Aβ1-42、IL-1β、TNF-α和MDA明显降低(P<0.05),T-AOC、SOD和GSH-Px明显升高(P<0.05)。结论 DS改善AD小鼠学习记忆及海马结构,增强免疫和抗氧化,抑制APP、Aβ1-42、IL-1β和TNF-α可能是抗AD机制。     

清心开窍方对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力及脑组织自由基代谢的影响

目的探讨清心开窍方对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法清心开窍方组用清心开窍方治疗,脑复康组用脑复康治疗,9w后评定疗效。结果清心开窍方各组能明显改善AD小鼠学习记忆能力,与脑复康组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),清心开窍方组超氧化物歧化酶(SOD)活性明显升高(P<0.01),丙二醛(MDA)及脂褐素(LF)含量明显下降(P<0.01)。结论清心开窍方能改善AD小鼠学习记忆的能力,提高AD小鼠的抗氧化能力,降低氧自由基对机体的损伤,而对AD病具有很好的治疗作用。     

姜黄素对阿尔茨海默病小鼠学习记忆能力及海马细胞的影响

目的探讨姜黄素对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习记忆能力的改善作用及作用机制。方法将48只C57BL/6小鼠随机分为模型组、实验组、假手术组和正常对照组,每组12只。脂多糖诱导建立AD炎症模型,利用八臂迷宫刺激器进行被动回避反应和信号方位辨别反应测试,观察小鼠学习记忆能力及信号方位辨别能力的改变;观察脑内海马组织切片神经元细胞的形态改变。结果实验组小鼠学习能力和记忆保持率均显著优于模型组(P0.01);海马区神经元细胞数量也显著增多,形态明显改善,接近正常对照组和假手术组。结论姜黄素可改善AD小鼠的学习记忆能力,其机制可能与姜黄素抗炎症、抗氧化、减少神经细胞凋亡有关。     

阿尔茨海默病小鼠与野生型小鼠海马中miRNA表达差异

目的分析D-半乳糖联合Al Cl3诱导阿尔茨海默病(AD)与野生型小鼠海马microRNAs(miRNAs)表达差异。方法昆明种小鼠,随机分成AD模型组和野生型对照组,AD模型组每日腹腔注射D-半乳糖90 mg/kg和Al Cl340 mg/kg溶液,野生型对照组腹腔注射等量的生理盐水,1次/d,连续90 d。物体识别实验测试各组小鼠识别、记忆能力。miRNA芯片检测各组小鼠海马miRNAs的表达,并进行后续的生物信息学分析。结果在物体识别实验中,AD模型组小鼠探索新物体所用的时间较野生型对照组减少(P0.01),分辨指数(8.97±1.33)较野生型对照组(34.42±3.74)减低(P0.001)。在3批次AD模型组和野生型对照组间均有显著变化的17个miRNAs(≥2.0倍上调或下调)的预测靶基因重点分布在AD相关信号通路、神经营养因子信号通路、长时程增强效应相关通路,并处于这些信号通路的关键位置。结论 17个差异表达的miRNAs可能通过调节相关信号通路关键细胞因子的表达,参与AD的进程。     

益智汤对阿尔茨海默病转基因小鼠海马超微结构的影响

目的 研究益智汤对转基因阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑组织超微结构的影响,探讨益智汤治疗AD的作用机制.方法 APP695转基因小鼠分为AD模型组和益智汤治疗组,同月龄同背景转基因阴性小鼠为正常对照组.3个月后,使用电镜技术观察各组小鼠脑组织海马超微结构的变化.结果 与对照组比较,模型组小鼠海马神经细胞出现线粒体和突触损伤,血脑屏障结构异常.益智汤组小鼠神经细胞病理变化有所减轻.结论 APP695转基因小鼠脑组织超微结构出现病理变化,益智汤可通过减轻神经元线粒体和突触的损伤及改善血脑屏障的功能来维持神经细胞结构和功能的正常.     

补阳还五汤对阿尔茨海默病小鼠海马晚期糖基化终产物受体的影响

目的探讨补阳还五汤(BYHWD)对阿尔茨海默病(AD)小鼠海马晚期糖基化终产物受体(RAGE)的影响。方法选用30只APP/PS1转基因小鼠,随机分成模型组,治疗组(多奈哌齐0.001 g/kg),BYHWD高、中、低剂量组(BYHWD 37.06、18.53、9.26 g/kg),另选6只C57BL/16J小鼠分为对照组,各组连续治疗35 d后取材。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定海马APP、Aβ_(1 ~ 42)、Aβ_(1 ~ 40)和血清Aβ_(1 ~ 40)水平,采用HE染色和尼氏染色观察各组小鼠海马CA1区神经元组织形态病理改变,采用免疫组化检测海马RAGE表达,采用RT-PCR和Western印迹检测海马RAGE、VCAM和ICAM-1基因和蛋白表达。结果与模型组比较,BYHWD高、中剂量组可明显改善海马形态结构,明显降低海马APP、Aβ_(1 ~ 42)和Aβ_(1 ~ 40)水平,明显升高血清Aβ_(1 ~ 40)水平(P0.05),明显降低海马RAGE、VCAM和ICAM-1基因和蛋白表达(P0.05)。结论 BYHWD通过抑制RAGE表达来改善AD小鼠海马的形态结构。     

补肾益智方对阿尔茨海默病模型大鼠脑内p75水平的影响

目的探讨补肾益智方对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠SM-DB区域中p75水平的影响。方法通过D-半乳糖催老和无名质区损毁的方法制备AD大鼠模型,并设立石杉碱甲对照组和老年正常组进行对比研究。通过免疫组化对SM-DB区域(包括SM、v DB和h DB三个分区)中的p75阳性细胞进行分析。结果补肾益智方高、低剂量组对SM-DB区域中的p75阳性细胞数目、平均截面积和平均灰度值均有十分明显的改善作用,其中低剂量组作用最大,高剂量组次之,两者的作用均较石杉碱甲组为优,低剂量组在三个区域的阳性细胞数、h DB区的阳性细胞平均截面积以及SM区内阳性细胞的灰度值与石杉碱甲组均有显著性差异。结论补肾益智方可以明显提高该模型脑内的p75水平,其作用优于石杉碱甲,且作用大小与用药剂量有较明显的关系。     

Increased hippocampal neurogenesis in Alzheimer's disease

Neurogenesis, which persists in the adult mammalian brain, may provide a basis for neuronal replacement therapy in neurodegenerative diseases like Alzheimer's disease (AD). Neurogenesis is increased in certain acute neurological disorders, such as ischemia and epilepsy, but the effect of more chronic neurodegenerations is uncertain, and some animal models of AD show impaired neurogenesis. To determine how neurogenesis is affected in the brains of patients with AD, we investigated the expression of immature neuronal marker proteins that signal the birth of new neurons in the hippocampus of AD patients. Compared to controls, Alzheimer's brains showed increased expression of doublecortin, polysialylated nerve cell adhesion molecule, neurogenic differentiation factor and TUC-4. Expression of doublecortin and TUC-4 was associated with neurons in the neuroproliferative (subgranular) zone of the dentate gyrus, the physiological destination of these neurons (granule cell layer), and the CA1 region of Ammon's horn, which is the principal site of hippocampal pathology in AD. These findings suggest that neurogenesis is increased in AD hippocampus, where it may give rise to cells that replace neurons lost in the disease, and that stimulating hippocampal neurogenesis might provide a new treatment strategy.     

阿尔茨海默病转基因鼠模型的建立

目的 建立阿尔茨海默病(AD)双转基因鼠,为进一步研究AD发病机制提供较为理想的实验动物.方法 将人载脂蛋白E4转基因鼠和突变APP转基因鼠杂交.结果 经PCR初筛,对阳性小鼠基因组DNA作进一步的Southern杂交鉴定,获得2只双转基因小鼠,之后传代建系.结论 为进一步研究多个基因对AD的致病作用提供较为理想的实验动物.     

Humanin对实验性阿尔茨海默病小鼠海马小胶质细胞OX-42表达的影响

目的探讨Humanin（HN）在体内是否存在对实验性阿尔茨海默病（AD）小鼠的神经保护作用以及可能的机制。方法采用β-淀粉样蛋白（Ap）脑内注射方法建立AD模型。健康雄性小鼠60只,随机分为假手术组（n=15）、AB模型组（n=15）和HN治疗组（n=30）。应用免疫组织化学方法于造模后3,7,14d观察海马小胶质细胞OX-42表达的变化;Nissl染色方法检测3组动物海马区病理改变。结果OX-42免疫组织化学染色显示,与AB模型组比较,HN治疗组造模后3,7,14d海马OX-42阳性细胞的表达均减少（P〈0．05）;A13模型组、HN治疗组在手术后各时间点Nissl染色均可见海马区病理改变,HN治疗组在相同时间点炎性的病理变化弱于Aβ模型组。结论在活体内,HN可以减少Aβ25-35毒性引起的OX-42的表达,具有神经保护作用。     

Reduced hippocampal MT2 melatonin receptor expression in Alzheimer's disease

The aim of the present study was to identify the distribution of the second melatonin receptor (MT2) in the human hippocampus of elderly controls and Alzheimer's disease (AD) patients. This is the first report of immunohistochemical MT2 localization in the human hippocampus both in control and AD cases. The specificity of the MT2 antibody was ascertained by fluorescence microscopy using the anti-MT2 antibody in HEK 293 cells expressing recombinant MT2, in immunoblot experiments on membranes from MT2 expressing cells, and, finally, by immunoprecipitation experiments of the native MT2. MT2 immunoreactivity was studied in the hippocampus of 16 elderly control and 16 AD cases. In controls, MT2 was localized in pyramidal neurons of the hippocampal subfields CA1-4 and in some granular neurons of the stratum granulosum. The overall intensity of the MT2 staining was distinctly decreased in AD cases. The results indicate that MT2 may be involved in mediating the effects of melatonin in the human hippocampus, and this mechanism may be heavily impaired in AD.     

轻度阿尔茨海默病海马萎缩的磁共振研究

目的探讨轻度阿尔茨海默病(AD)海马萎缩的特征.方法对15例轻度AD患者和30名健康对照者行海马导向的磁共振成像(MRI)和简易智能状态量表(MMSE)测定,比较两组间海马体积变化的差异性及其与年龄和MMSE评分间的相关性.结果轻度AD海马结构体积较对照组显著减少[分别为(2.08±0.46)cm3及(3.11±0.09)cm3,t=2.71,P＜0.01)];轻度AD组海马体积与对照组的重叠率为13.3%;以对照组海马体积均数和标准差为参照,轻度AD平均海马结构体积减少了4.42个标准差;两组海马结构体积均存在随增龄减少的现象,但AD患者萎缩速度显著地较对照组快(t=2.07,P＜0.05);轻度AD海马体积与MMSE评分之间成正相关(r=+0.48,P＜0.05),而对照组不存在这种关系(r=0.19,P＞0.05).结论MRI反映的海马体积萎缩可有效地将轻度AD患者与健康对照者区分开来,可视为AD的一个状态指标,有助于AD早期诊断.     

Relation between hippocampal damage and cerebral cortical function in Alzheimer's disease

We investigated the relation between hippocampal damage and cerebral cortical dysfunction in Alzheimer's disease (AD) using MRI and SPECT. Nineteen patients with AD and 10 control subjects were studied. Hippocampal damage (including hippocampal formation, entorhinal cortex, and parahippocampal white matter) was assessed to evaluate the severity of atrophy and the magnetization transfer ratio (MTR) and cerebral cortical dysfunction was evaluated by quantitative cerebral blood flow (CBF) measurements using SPECT with 99mTc-ECD. Compared with controls, patients with AD had significantly more atrophy of the medial temporal lobe and a decrease in MTRs of the hippocampus and parahippocampus. There were significant correlations between the severity of hippocampal damage and regional CBF in temporoparietal lobes. Mini-Mental State Examination scores significantly correlated with the severity of hippocampal damage and regional CBFs in temporoparietal lobes. These results suggest that the functional effect of hippocampal damage occurs in temporoparietal lobes in AD, probably due to neuronal disconnections between hippocampal areas (including the entorhinal cortex) and temporoparietal lobes.     

维生素E对Alzheimer病模型大鼠的影响

采用ＡｌＣｌ３诱导，建立Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病（ＡＤ）模型大鼠。用维生素Ｅ（ＶＥ）（５ｍｇ／１００ｇ体重·ｄ－１）对ＡＤ模型大鼠进行灌胃治疗。通过行为测试，光镜形态学观察，用免疫细胞化学ＡＢＣ结合图像定量分析的方法，对ＡＤ大鼠行为改变，海马结构ＣＡ１区淀粉样蛋白免疫反应阳性神经元的形态和数目、胞体平均截面积和光密度以及β淀粉样蛋白的沉积变化进行观察。结果显示ＶＥ组大鼠治疗３个月和５个月后，受电击次数和潜伏期较对照组明显减少和延长（Ｐ＜００１），３个月与５个月之间有显著性差异（Ｐ＜００１）；ＶＥ组大鼠海马结构ＣＡ１区淀粉样蛋白免疫反应阳性神经元的形态和数目、胞体平均截面积和光密度值，３个月和５个月较对照组均有明显减少和降低（Ｐ＜００１），３个月和５个月之间也有显著性差异（Ｐ＜００１），β淀粉样蛋白样反应染色减少或消失。说明ＶＥ可以改善ＡＤ模型大鼠的学习记忆，其作用机制是通过抑制和清除海马结构ＣＡ１区β淀粉样蛋白的沉积来实现的，作用效果随治疗时间的延长而更加明显。本实验研究结果为临床应用ＶＥ治疗老年性痴呆提供了形态学依据。