牛磺胆酸钠诱导急性坏死性胰腺炎大鼠模型的理想浓度

目的 探讨牛磺胆酸钠诱导急性坏死性胰腺炎(ANP)并发多器官功能衰竭(MODS)大鼠模型的量-效关系及理想浓度.方法 280只大鼠按数字随机法分为对照组(40只)和ANP组,分别采用经胰胆管逆行注射3.5%、4%、4.5%、5%牛磺胆酸钠制备ANP模型(每浓度组60只).术后1、3、6、12、24 h分批处死大鼠,检测血清淀粉酶、总胆红素、肌酐水平,行血气分析,常规胰腺病理检查并评分;各ANP组另留20只大鼠观察建模后24 h生存率.结果 各ANP组的血清淀粉酶、总胆红素、肌酐水平及氧合指数(PaO_2/FiO_2)、胰腺病理评分均随牛磺胆酸钠浓度增加而升高,呈明显的量-效和时-效关系.4.5%牛磺胆酸钠建模组于术后6 h出现肝、肾功能障碍高峰,12 h出现呼吸功能障碍高峰,其MODS发生率为52.5%,显著高于3.5%、4.0%牛磺胆酸钠建模组的15.0%和37.5%;24 h生存率为65%,显著高于5%牛磺胆酸钠建模组的30%.结论 4.5%牛磺胆酸钠诱导ANP大鼠模型具有较高的MODS发生率和24 h生存率,是ANP并发MODS诊治研究的理想建模浓度.     

中性粒细胞趋化因子在急性胰腺炎相关急性肺损害中的作用

目的:探讨中性粒细胞趋化因子(CINC)在急性胰腺炎相关的急性肺损害(ALI)中的作用.方法:分别采用ip雨蛙肽和胰胆管逆行注射50g/L牛磺胆酸钠建立大鼠轻症、重症急性胰腺炎模型.84只SD大鼠随机分为雨蛙肽组、生理盐水组、牛磺胆酸钠组和手术对照组.分别检测各组不同时间点血清淀粉酶、肺干湿重比和肺组织病理学改变,用免疫组织化学法和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织中CINC蛋白和CINCmRNA表达的变化情况.结果:雨蛙肽组各时间点CINC蛋白和CINCmRNA的表达与生理盐水组无明显差异(P>0.05);牛磺胆酸钠组与手术对照组相比,血清淀粉酶、肺干湿重比显著升高(P<0.05),术后1h肺组织CINCmRNA的表达开始升高(1h:0.23±0.07vs0.07±0.04,P<0.05;3h:0.36±0.07vs0.06±0.04,P<0.05;6h:0.56±0.07vs0.09±0.05,P<0.01;12h:0.49±0.09vs0.11±0.03,P<0.01),术后3h开始有CINC蛋白的表达,随着时间的延长表达逐渐增强,且与肺组织的病理改变呈正相关.结论:CINC可能在胰腺炎相关的急性肺损害中起了重要的作用.     

牛胆酸钠诱导大鼠急性胰腺炎系列模型的研究

目的 用牛胆酸钠纯化学制剂诱导大鼠实验性急性胰腺炎系列模型。 方法 用0.25％(n=4),1.0％(n=7),2.0％(n=7)或3.5％(n=7)牛胆酸钠溶液0.1 ml/100g逆行注入Wistar大鼠胰管内诱导急性胰腺炎。诱导急性胰腺炎前,及诱导后6,12 h分别取血分离血清,测定淀粉酶值。同时,观察各实验组胰腺病理组织光镜和电镜变化。 结果 随牛胆酸钠诱导浓度提高,血清淀粉酶逐渐升高,组织病理改变依次加重。1.0％和2.0％牛胆酸钠分别诱导轻度及重度水肿型胰腺炎;3.5％牛胆酸钠则诱导坏死型胰腺炎。 结论 胰腺病变程度与牛胆酸钠诱导浓度呈正相关,本系列模型适合评价药物的防治效应。     

糖皮质激素对急性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的影响及其意义

目的　探讨糖皮质激素对急性胰腺炎 (AP)大鼠胰腺细胞凋亡的影响及其意义。方法　将SD大鼠 5 4只随机分为 3组 :正常对照组 ,胰腺炎组和激素治疗组 ,每组 18只。经十二指肠行胆胰管逆行加压注射 4 %的牛磺胆酸钠 ,诱导大鼠 AP模型 ,于术后 3h、6 h和 12 h采取断颈方法分批处死动物 ,应用末端脱氧核苷酸转换酶 (Td T)介导的原位末端标记 (TUNEL )法检测胰腺组织细胞凋亡变化 ,观察各组大鼠胰腺组织病理改变。结果　 (1) AP大鼠的胰腺凋亡细胞增多 ,与对照组比较均有显著差异 (P<0 .0 1) ,注射激素后 ,胰腺凋亡细胞减少 ,6 h、12 h的凋亡指数均显著低于对应时相的 AP组 (P<0 .0 5 ) ;(2 )激素治疗后 ,AP大鼠胰腺炎症细胞、坏死细胞明显减少 ,病变减轻 ,6 h、12 h病理评分均显著低于 AP组 (P<0 .0 5 )。结论　糖皮质激素具有抑制胰腺细胞凋亡的作用 ,保护腺泡细胞、阻止细胞死亡可能是糖皮质激素减轻 AP病变严重程度的一个重要因素。     

糖皮质激素对急性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的影响及其意义

目的探讨糖皮质激素对急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺细胞凋亡的影响及其意义.方法将SD大鼠54只随机分为3组:正常对照组,胰腺炎组和激素治疗组,每组18只.经十二指肠行胆胰管逆行加压注射4%的牛磺胆酸钠,诱导大鼠AP模型,于术后3 h、6 h和12 h采取断颈方法分批处死动物,应用末端脱氧核苷酸转换酶(TdT)介导的原位末端标记(TUNEL)法检测胰腺组织细胞凋亡变化,观察各组大鼠胰腺组织病理改变.结果(1)AP大鼠的胰腺凋亡细胞增多,与对照组比较均有显著差异(P＜0.01),注射激素后,胰腺凋亡细胞减少,6 h、12 h的凋亡指数均显著低于对应时相的AP组(P＜0.05);(2)激素治疗后,AP大鼠胰腺炎症细胞、坏死细胞明显减少,病变减轻,6 h、12 h病理评分均显著低于AP组(P＜0.05).结论糖皮质激素具有抑制胰腺细胞凋亡的作用,保护腺泡细胞、阻止细胞死亡可能是糖皮质激素减轻AP病变严重程度的一个重要因素.     

吡咯列酮对雨蛙肽诱导急性胰腺炎氧化应激过程的作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ激动剂吡咯列酮在雨蛙肽诱导大鼠急性胰腺炎中对氧化应激产物的影响及保护作用.方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照组、雨蛙肽+不同剂量吡咯列酮组、雨蛙肽组、雨蛙肽+吡咯列酮+GW9662组.每组6只.急性胰腺炎造模30 min后处死大鼠,光镜下观察胰腺组织病理学变化,测定各组大鼠胰腺组织质量与体重比,比色法检测胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮合酶(NOS)及组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量.结果 与对照组比较,雨蛙肽组胰腺组织水肿严重胰腺净重/体重(0.0072比0.0042)],MPO活性、MDA、NOS及iNOS含量升高(P＜0.01).与雨蛙肽组比较,吡咯列酮20 mg/kg及40 mg/kg组胰腺损伤减轻,胰腺净重/体重、MPO活性、MDA和NOS及iNOS含量降低(P＜0.05);与吡咯列酮40 mg/kg组比较,PPARγ拮抗剂GW9662逆转了吡咯列酮的保护作用(P＜0.05).结论 在雨蛙肽诱导的大鼠急性胰腺炎发病中,胰腺腺泡细胞的氧化应激损伤起了重要的作用,PPARγ激动剂吡咯列酮预先干预,通过降低氧化应激过程,对雨蛙肽诱导的大鼠急性胰腺炎有一定的保护作用.     

急性胰腺炎兔模型血清生化指标、胰腺B超及组织病理观察

目的观察急性胰腺炎（AP）兔模型血清生化指标、胰腺B超及组织病理学改变。方法采用胰管逆行注射7％牛磺胆酸钠制备兔AP模型，分别检测造模前及造模后1、2h血清淀粉酶（AMY）、脂肪酶（LPS）、葡萄糖（GLU）、钙（Ca2＋）、C反应蛋白（CRP）水平，观察胰腺B超和组织病理学改变。结果与造模前比较，造模后1、2h血清AMY、LPS、GLU、Ca2＋升高（P均〈0．01）。造模后超声造影表现为胰腺实质不均匀增强，可见全程低增强区，随时间的延长，低增强区数量增多；造模后2h，胰腺组织病理评分（12．86±2．05）分。结论实验室检查、超声及病理学检查相结合可实现对AP的早期诊断、评估严重程度和指导治疗。     

促吞噬肽及其拮抗剂诱导炎性介质释放在急性胰腺炎中的作用与机制

目的:探讨促吞噬肽及其拮抗剂诱导炎性介质肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白介素-1(interleukin-1,IL-1)释放在急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)病情发展中的作用.方法:SD大鼠5组每组24只,分别为对照组、促吞噬肽组、A P组、A P+促吞噬肽组、AP+促吞噬肽拮抗剂组.4%牛磺胆酸钠经胆胰管内注射建立AP模型,促吞噬肽及其拮抗剂组(75μg/kg)于模型建立后20 min后从股静脉注入.按随机原则在制模后3、6、12 h处死,甲醛固定胰腺组织行HE染色观察胰腺病理变化;分离血清ELISA法测定IL-1和TNF浓度.结果:AP各组TNF、IL-1浓度均比对照组明显升高;AP+促吞噬肽组各时间段TNF、IL-1浓度均较单纯AP组升高;AP+促吞噬肽拮抗剂组在制模后6、12 h TNF、IL-1浓度明显降低,在制模后3 h无明显影响;AP模型病理学评分与TNF浓度、IL-1浓度存在正相关关系.结论:在大鼠AP模型中促吞噬肽使TNF、IL-1浓度升高,胰腺炎症反应加重;应用促吞噬肽拮抗剂可减少TNF、IL-1释放,使胰腺炎症反应减轻.     

清胰Ⅱ号对重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤的保护作用及机制探讨

目的 观察清胰Ⅱ号对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺的保护作用,并探讨其机制。方法 将56只SD大鼠随机分为3组,A、B组各24只采用胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠建立SAP模型,C组8只开腹后仅翻动肠管。A组造模清醒后予以清胰Ⅱ号灌胃1次/6 h,共4次。造模后6、12、24 h,采用ELISA法检测血清高迁移率族蛋白1(HMGB1),光镜观察胰腺组织并行病理评分。结果 B组各时点血清HMGB1较C组升高(P均<0.01),胰腺病理评分增加(P均<0.01)。A组与B组同时点相比,血清HMGB1下降(P均<0.05),胰腺病理评分降低(P均<0.05)。结论 中药制剂清胰Ⅱ号能够降低血清HMGB1水平,从而降低胰腺组织损伤。     

Necrostatin-1对雨蛙肽诱导的小鼠急性胰腺炎的保护作用

目的观察Necrostatin-1(Nec-1)对雨蛙肽诱导的小鼠急性胰腺炎(AP)的影响。方法 C57BL/6小鼠予以50μg/kg的雨蛙肽腹腔注射7次,间隔1 h,建立AP模型。于第1次雨蛙肽注射后3 h、6 h、9 h和12 h,取出胰腺组织,HE染色。Western blot检测RIP1和RIP3蛋白的表达;C57BL/6小鼠随机分为:Control组、Vehicle组、Nec-1组和Nec-1i组,予以50μg/kg的雨蛙肽腹腔注射10次,间隔1 h,第1次雨蛙肽注射2 h前,腹腔注射Nec-1(1 mg/kg,每6 h 1次)、Nec-1i或等体积溶剂和空白对照。于第1次雨蛙肽注射后12 h、18 h和24 h,收集血清和胰腺组织。检测血清淀粉酶和脂肪酶。HE染色评估胰腺损伤程度。Real-time RT-PCR检测胰腺组织IL-1β和TNF-αmRNA的表达。结果 RIP1和RIP3蛋白在雨蛙肽诱导的AP中逐渐升高,且与胰腺腺泡细胞的坏死呈正相关;应用Nec-1后,与Vehicle组和Nec-1i组比较,于12 h、18 h和24 h,小鼠血清淀粉酶和脂肪酶水平明显降低,胰腺组织病理评分也明显减少,同时胰腺组织中IL-1β和TNF-αmRNA的水平也明显降低。结论 Nec-1对实验性胰腺炎具有明显的保护作用;程序性坏死可能促进了急性胰腺炎的损伤。