白藜芦醇对实验性兔骨关节炎软骨细胞凋亡及bcl-2 bax表达的影响

目的 研究白藜芦醇对兔实验性骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡及凋亡调控基因bcl-2、bax表达的影响,探讨其治疗OA的机制.方法 30只新西兰大白兔随机平分为5组,A组(健康对照组)、B组(模型对照组)、C组(白藜芦醇高剂量干预组)、D组(白藜芦醇中剂量干预组)、E组(白藜芦醇低剂量干预组).除A组外,其他各组均以Hulth法复制膝OA模型.术后第4周开始,A组、B组每天以5 ml含0.1%二甲基亚砜的蒸馏水灌胃;白藜芦醇干预各组每天以相应剂量白藜芦醇溶液(浓度为60 mg/ml)灌胃,C、D、E组日剂量分别为120、60、30mg·kg-1·d-1,连续6周.第10周处死大白兔,取右膝关节股骨内髁内侧软骨,软骨组织切片用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法观察软骨细胞凋亡,免疫组织化学法观察软骨细胞bcl-2和bax的表达.结果 ①模型对照组关节软骨细胞凋亡率明显高于健康对照组;白藜芦醇干预各组可不同程度地降低OA软骨细胞凋亡率,差异有统计学意义(P＜0.05),且呈剂量依赖性.②与健康对照组相比,模型对照组关节软骨细胞bcl-2和bax阳性率均升高(P＜0.01),bcl-2/bax的比值降低;白藜芦醇干预后,bcl-2阳性率升高更为明显(P＜0.01);而bax阳性率有不同程度降低(P＜0.01);bcl-2/bax的比值均不同程度提高(P＜0.01).结论 白藜芦醇通过上调bcl-2的表达,下调bax的表达,提高bcl-2/bax的比值,以抑制兔实验性OA中软骨细胞的过度凋亡,达到保护软骨,防治OA的目的 .     

骨关节炎软骨细胞凋亡的信号传导

骨关节炎（osteoarthritis，OA）是一种严重危害老年人健康的慢性退行性骨关节疾病。在最常见的三大老年病（脑血管疾病，骨质疏松症，老年性骨关节病）中，OA患病率在世界范围内居于首位。60—70岁的老年人OA患病率约为60％，70岁以上老年人的OA患病率约为70％。联合国业已宣布2000—2010年是骨与关节的十年，以提醒人们注意骨关节疾病对世界健康的影响。而软骨细胞凋亡是骨关节炎发生的重要病理学特征，本文主要通过对骨关节炎中软骨细胞凋亡可能通过的线粒体途径、死亡受体途径、内质网应激反应性凋亡途径等信号传导通路作一综述，为今后中西医治疗骨关节炎提供一个新的思路。     

绿原酸对膝骨关节炎大鼠软骨细胞炎性凋亡及免疫反应的影响

目的 探讨绿原酸(CA)对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞炎性凋亡及免疫反应的影响。方法 采用改良伸直位固定法建立KOA大鼠模型,模型成功大鼠随机分为模型组、CA低剂量(CA-L,5 mg/kg)组、CA中剂量(CA-M,10 mg/kg)组、CA高剂量(CA-H,15 mg/kg)组、塞来昔布(24 mg/kg)组,每组12只,另取12只SD大鼠(不做处理)设为对照组。以药物分组处理后,测定各组膝关节宽度、被动活动度;番红O-固绿染色检测关节软骨病理损伤情况,并进行Mankin评分;TUNEL染色检测各组膝关节软骨细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清免疫因子干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-6、IL-10及转化生长因子(TGF)-β水平;Western印迹检测各组膝关节软骨细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果 与对照组相比,模型组膝关节宽度、Mankin评分、膝关节软骨细胞凋亡率、血清IFN-γ及IL-6水平、膝关节软骨组织Bax表达明显升高(P<0.05),膝关节被动活动度、膝关节软骨组织Bcl-2表...     

熟地黄多糖对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡及炎性因子的影响及其机制

目的 研究熟地黄多糖对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡及炎性因子的影响及其作用机制.方法 设置熟地黄多糖各浓度(0.0μg/ml、12.5μg/ml、25.0μg/ml、50.0μg/ml)实验组、RGP+anti-miR-con组(转染anti-miR-con后用50μg/ml熟地黄多糖处理)和RGP+anti-miR-1...     

脂肪量和肥胖相关基因对骨关节炎软骨细胞凋亡和炎症反应的影响

目的探究脂肪量和肥胖相关基因(FTO)对骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡和炎症反应的影响。方法分析人正常软骨组织样本与OA软骨组织样本中FTO的表达差异, 分离并培养原代OA软骨细胞, 并构建OA大鼠模型, 从临床、动物和细胞水平检测FTO表达。利用FTO敲低慢病毒(sh-FTO)和m6A甲基化抑制剂(cycloleucine)处理细胞, 检测细胞中m6A含量和炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平;流式细胞术检测OA软骨细胞凋亡情况, 蛋白质免疫印迹(Western blot)检测凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果与正常对照比较, 人OA软骨组织、OA大鼠软骨组织及OA软骨细胞中FTO的mRNA和蛋白表达均显著上升(均P<0.05)。敲低FTO后, 原代OA软骨细胞中m6A水平上升, IL-6、TNF-α水平显著降低, 细胞凋亡率降低, 凋亡蛋白Bax表达显著下调, Bcl-2表达显著上调;而cycloleucine干预能显著降低OA软骨细胞中m6A水平, 增加IL-6、TNF-α的丰度, 促...     

伊贝沙坦对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡及相关基因Bax、Bcl-2和P53表达的影响

为探讨血管紧张素 1型受体拮抗剂伊贝沙坦对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响 ,同时检测凋亡相关基因Bax、Bcl 2和P5 3蛋白表达的变化。选用 13周龄自发性高血压大鼠 2 0只 ,随机分为 2组 :伊贝沙坦组大鼠服用伊贝沙坦 [5 0mg (kg·d) ],另一组大鼠不用药物作为高血压对照 (自发性高血压大鼠组 ) ,另设同源正常血压大鼠 10只作为正常对照 (WKY组 )。共观察 15周 ,每两周测血压和体重一次 ,实验结束时称左心室重量。应用原位标记检测技术观察高血压大鼠左心室心肌细胞凋亡的变化 ,并用免疫组织化学SP法检测凋亡相关基因Bax、Bcl 2和P5 3的蛋白表达。结果发现 ,(1)实验终结时 ,伊贝沙坦组血压明显低于自发性高血压大鼠组 (12 8± 5mmHg比193± 8mmHg ,P <0 .0 1) ,略高于WKY组 (12 1± 6mmHg) ,但无统计学差异 (P >0 .0 5 )。 (2 )自发性高血压大鼠组凋亡指数明显高于WKY组 (1.5 9± 0 .38比 0 .33± 0 .11,P <0 .0 1) ;Bax蛋白表达指数明显高于WKY组 (1.76± 0 .31比0 .5 9± 0 .11,P <0 .0 1) ;Bcl 2蛋白表达无明显差异 (0 .88± 0 .2 6比 0 .82± 0 .19) ,Bcl 2 Bax比率亦明显低于WKY组(0 .5 3± 0 .17比 1.4 1± 0 .34,P <0 .0 1)。 (3)伊贝沙坦组心肌细胞凋亡指数低于自发性高血压大鼠组 (0 .5 6     

p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对大鼠骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的 观察p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580对大鼠骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡的影响.方法 40只SD大鼠随机分为四组,A、B、C组行单侧膝关节前交叉韧带切除术(ACLT),A组于术后行关节腔内注射0.1 ml的SB203580(100 um/L),B组注射等量生理盐水(实验对照),C组不予任何处理(空白对照组),D组为正常对照组.术后8周处死动物.观察各组标本大体评分、病理组织学改变、软骨细胞凋亡指数.结果 A组病理组织学改变轻于B、C组,各组均发现有软骨细胞凋亡.D组凋亡指数与其他三组比较,P均<0.05.A组的凋亡指数低于B、C组(P均<0.05).结论 ACLT可以导致大鼠OA的软骨细胞凋亡增加,关节腔内注射p38MAPK抑制剂能有效抑制其软骨细胞凋亡.     

T-2毒素对软骨细胞P53、Bcl—xL和Caspase-3表达的影响

目的 观察T-2毒素对软骨细胞P53、Bcl-xL和caspase-3表达的影响.方法 采用胎儿软骨细胞体外培养,培养基中加入不同浓度的T-2毒素(1～20μ/L)连续培养5 d.采用Western blot检测软骨细胞P53、Bcl-xL和Caspase-3蛋白表达水平;用RT-PCR法检测软骨细胞P53、Bcl-xL和Caspase-3 mRNA的表达.结果 与对照组比较,不同浓度(1～20μL)的T-2毒素均能引起Caspase-3蛋白表达水平升高而Bcl-xL蛋白表达水平下降(P＜0.05);当T-2毒素浓度达到10～20μg/L时,P53蛋白和Caspase-3 mRNA表达水平明显升高(P＜0.05)而Bcl-xLmRNA的表达水平无显著性下调(P＞0.05);T-2毒素浓度达到20μ/L可以引起P53 mRNA表达水平明显升高(P＜0.05).结论 T-2毒素诱导软骨细胞发生的凋亡可能与T-2毒素上调软骨细胞P53、caspase-3表达,同时下调Bcl-xL表达有关.     

低频脉冲超声对骨关节炎中软骨细胞的影响

超声被广泛应用于临床的诊断和治疗,但是临床上低频脉冲超声(LIPU)的应用却非常有限。在实验中,LIPU的应用却是很广泛。在许多的动物实验中证实,LIPU对许多结缔组织疾病有一定疗效。骨关节炎(OA)是以关节软骨细胞、细胞外基质、软骨下骨等合成与分解代谢失衡,关节软骨损坏为特征的全关节疾病。     

兔骨关节炎软骨细胞中bcl-2、bax mRNA及蛋白表达的意义

目的探讨bcl-2、bax基因在兔骨关节炎软骨细胞凋亡中的意义。方法新西兰白兔12只,随机分为模型组,按照石膏外固定兔后膝关节造模,以及空白对照组,6周后处死动物取得膝关节软骨。采用免疫组织化学和原位杂交检测bcl-2、bax mRNA及蛋白表达。结果模型组软骨细胞bcl-2、bax mRNA表达明显多于对照组(P＜0．05)。免疫组织化学模型组软骨细胞bcl-2、bax阳性表达灰度值明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0．05)；阳性细胞比例明显提高,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0．01)。模型组bcl-2/bax阳性细胞率比值比对照组低,差异有统计学意义(P＜0．05)。结论bcl-2和bax共同参与了兔骨关节炎模型软骨细胞凋亡的调节,结果导致软骨细胞凋亡加快。     

京尼平苷对老年大鼠软骨细胞凋亡的保护作用及机制

目的探讨京尼平苷对硝普钠诱导大鼠软骨细胞凋亡的保护作用及机制。方法取8周龄的SPF级SD大鼠20只,颈椎脱臼处死后,酶消化法提取膝关节软骨细胞。采用硝普钠终浓度0. 75、1. 00、1. 50、2. 00 mmol/L,分别加入6孔板软骨细胞中,选取合适终浓度诱导软骨细胞凋亡。终浓度分别为20、40、80、160μg/L的京尼平苷加入96孔板软骨细胞,24 h后CCK-8检测京尼平苷抑制软骨细胞增殖的效果。选择硝普钠终浓度为1 mmol/L,京尼平苷终浓度分别为80、160μg/L的6孔板软骨细胞中,Hoechst34580染色观察凋亡软骨细胞核形态,罗丹明(Rho) 123染料检测线粒体膜电位,流式细胞技术检测软骨细胞凋亡; Western印迹法检测凋亡软骨细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、Bax蛋白水平。结果硝普钠适宜浓度为1. 00 mmol/L,且细胞凋亡数与硝普钠浓度呈正相关(P<0. 05)。京尼平苷在20～160μg/L浓度范围内对体外培养二代软骨细胞无增殖抑制效果(P>0. 05)。80、160μg/L的京尼平苷对SNP诱导软骨细胞凋亡有一定保护作用,呈剂量依赖(P<0. 05);京尼平苷可降低凋亡软骨细胞中iNOS、Bax的表达(P<0. 05)。结论京尼平苷对硝普钠诱导大鼠软骨细胞凋亡有一定的保护作用,其机制可能是通过降低软骨细胞iNOS的表达、抑制软骨细胞的凋亡。     

丙酮酸乙酯对大鼠缺血再灌注心肌Bcl-2、Bax和caspase-3表达的影响

目的 探讨丙酮酸乙酯（EP）对缺血再灌注（I／R）心肌细胞凋亡的可能机制。方法 将24只雄性SD大鼠随机分为对照组、I／R组和EP组各8只，均建立Langendorff离体心脏模型，对照组K-H液持续灌流180min；I／R组平衡灌流30min，全心停灌30min，再灌120min；EP组试验程序与I／R组相同，平衡15min后和再灌注期间使用含2mmol／L EP的K-H液。分别以缺口末端标记法及免疫组化法检测各组心肌细胞凋亡指数（AI）及Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达。结果 I／R组AI和Bcl-2、Bax、caspase-3表达水平均明显高于对照组；与I／R组相比，EP组AI和Bax、caspase-3表达水平明显降低，而Bcl-2表达水平明显升高。结论 EP可抑制离体大鼠I／R损伤过程中的心肌细胞凋亡，其机制可能为下调Bax、caspase-3表达，上调Bcl-2表达。     

骨关节炎相关致病基因的研究进展

骨关节炎（OA）的发病机制不明,现已证实炎性细胞因子基因、软骨细胞凋亡调控基因和促进生长因子表达的基因等与OA的致病有关。现将OA相关致病基因的研究现状与特点、致病机制综述如下。     

海水对兔眼视网膜细胞凋亡和Bcl-2/Bax表达的影响

实验组兔眼注入0.5 ml实验用人工海水至玻璃体中央部,对照组注入0.5 ml平衡盐溶液.分别于注入后30 min及2、6、12、24 h采用TUNEL法检测视网膜凋亡细胞,免疫组化法检测Bcl-2、Bax的表达水平.结果 对照组视网膜中基本未见TUNEL阳性细胞,实验组视网膜神经节细胞、内核层细胞可见TUNEL阳性细胞,12 h达到高峰.Bcl-2/Bax蛋白的比率在伤后开始升高,2 h组开始下降.认为海水进入眼球后视网膜组织细胞存在异常凋亡,Bcl-2/Bax比率与视网膜细胞数的减少有关.     

持续被动运动治疗脑卒中患者下肢肌痉挛的效果

目的观察持续被动运动(CPM)治疗脑卒中患者下肢肌痉挛的疗效。方法将50例脑卒中患者随机分为两组,均接受常规康复治疗。治疗组在此基础上,使用CPM运动下肢,比较治疗下肢肌痉挛的效果。结果治疗组与对照组Ashworth评分及临床痉挛指数(CSI)评分均有明显差异,治疗组患者治疗后的肌痉挛改善明显优于对照组(P<0.05)。结论 CPM训练能减轻脑卒中患者下肢肌痉挛状态,减小了康复治疗师的工作量,也为缓解脑卒中患者肌肉痉挛提供了新的治疗手段。     

糖尿病大鼠脑缺血再灌注后脑组织细胞凋亡与Bax、Bcl-2及P53基因表达

目的观察糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织细胞凋亡与Bax、Bcl-2和p53表达情况。方法将Wistar大鼠随机分成正常对照组、假手术组、正常血糖脑缺血再灌注组(NIR)和糖尿病性高血糖脑缺血再灌注组(DIR),采用链脲佐菌素腹腔注射制作糖尿病模型、线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型,应用TUNEL法和免疫组化法分别检测细胞凋亡和Bax、Bcl-2及p53表达。结果与假手术组和正常对照组比较,NIR组凋亡细胞百分率和Bax、Bcl-2、p53表达明显增加(P均<0.01);与NIR组比较,DIR组凋亡细胞百分率和Bax、p53表达明显增加,Bcl-2表达明显降低(P均<0.01)。结论糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后梗死周边区细胞凋亡增加是高血糖加重缺血性脑损伤的机制之一;Bax和p53表达上调、Bcl-2表达下调参与了糖尿病大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的调控。     

凋亡相关基因Bcl-2、Bax在NSCLC中的表达与细胞凋亡的关系

目的明确Bcl-2、Bax在NSCLC的发生、发展机制方面的作用。方法随机选择48例NSCLC手术标本及15例癌旁正常组织,应用免疫组化SP法检测Bcl-2、Bax的表达、TUNEL法检测细胞凋亡。结果NSCLC组Bcl-2、Bax、AI的表达均高于正常组织(P0.05);Bcl-2、Bax、AI在不同病理分级、TNM分期、淋巴结是否转移组中比较差异有统计学意义(P0.05);NSCLC中Bcl-2与AI成负相关关系(r=-0.609,P0.05),Bax积分与AI成正相关关系(r=0.821,P0.05)。结论Bcl-2可能参与了肺癌初期的发生、发展,抑制了癌组织的细胞凋亡;Bax与其发展、转移过程、进展中肺癌凋亡水平的升高有关。     

依那普利对心力衰竭大鼠肾细胞凋亡及凋亡基因Bcl-2、Bax的影响

心力衰竭常并发肾功能不全，为心力衰竭的治疗带来困难。但有关心力衰竭易引起肾脏损害的分子机制不清。有报道慢性心脏后负荷增加引起心功能不全时存在肾细胞凋亡，但有关血管紧张素转化酶抑制剂能否减轻心力衰竭并发的肾脏损害未见报道。我们用依那普利对压力负荷性心力衰竭大鼠肾