抗—HBs单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

给BAlB/C小鼠注射HBsAg,取脾细胞与Sp2/O瘤株融合,经ELISA和PHA方法检测杂交瘤上清获得19个阳性孔。经4次克隆化,建立了2株分泌抗-HBs的杂交瘤。2个月在体外传代6次,液氮中经4次反复冻融仍稳定地分泌抗体。接种BALB/C小鼠腹腔后产生高滴度抗体腹水。 1975年kohler和Milstin首创杂交瘤技术以来,Shih,Wands和郭恒昌先后在国外和国内报道建立分沁抗-HBs的细胞系。我们实验室应用这一技术将亲和层析纯化得到的HBsAg免疫小鼠亦获得2株抗-HBs单克隆抗体,现报告如下;     

抗HBs单克隆抗体Fv段基因的克隆及其表达

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）获得抗－ＨＢｓ单克隆抗体Ｆｖ段轻、重链基因，经连接后形成一条单链含轻、重链的Ｆｖ基因（ＳｃＦｖ），并在重组－噬菌体－抗体系统（ＲＰＡＳ）中获得表达，用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）证明表达的Ｆｖ段具有特异性抗原结合活性。     

抗HBs单克隆抗体Fv段基因的克隆及其表达

用聚克酶链反应（ＰＣＲ）获得抗－ＨＢｓ单克隆抗体Ｆｖ段轻、重链基因，经连接后形成一条单链含轻、重链的Ｆｖ基因（ＳｃＦｖ），并在重组－噬菌体－抗体系统（ＲＰＡＳ）中获得表达，用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）证明表达的Ｆｖ段具有特异性抗原结合活性。     

抗乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)单克隆抗体的研究

用纯化HBsAg致敏的BALB/C小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤株NS-1进行体细胞杂交,获得了6株分泌抗HBsAg McAb的杂交瘤。6个瘤株分泌的McAb在培养上清及接种裸鼠和BALB/C小鼠腹水中均有较高滴度,能与HBsAg在琼脂双扩散中形成免疫沉淀线,其中4C1、4C3、3B6为抗-a决定簇,1 B10为抗-d决定簇。6个McAb均为IgG1亚类。这些McAb试用于ELISA、RIA中包被固相载体和标记、以及免化定位肝癌组织内HBsAg,显示了较好的应用前景。     

抗CD20单克隆抗体研究进展

CD20是一种特异性、高表达在正常B淋巴细胞和恶性B淋巴细胞的表面标识,是治疗B细胞相关性疾病理想的靶点。近年来对其研究不断深入,有多个抗CD20分子的单克隆抗体用于B细胞非霍启金淋巴瘤（NHL）及其相关疾病的治疗,取得了明显的疗效。本文综述CD20单抗研究的主要药物及其进展,探讨其未来的发展前景。     

一株具有抗HBc及抗HBs双重反应性的抗HBV单克隆抗体细胞株的选育

以富含Dane颗粒的HBV抗原作免疫原进行研究，选育出一株分泌具有抗HBc及抗HBs双重反应性McAb的杂交瘤细胞株。该细胞株经5次连续克隆化证实其克隆单一性，常规染色体检查证实为双倍体细胞（染色体89.5±3.6条），在ELISA中能与基因重组HBcAg、血源性富含Dane颗粒之HBV抗原、小圆颗粒HBV抗原及HBsAg阳性血清发生反应。对四者的反应效价大致相同，但对HBcAg的反应强度显著高于其它三者。此外还发现该McAb在改良双抗原夹心ELISA中能与桥连方式同时与HBcAg及HBsAg相结合。     

不同背景抗—HBs,抗—HBs血清中HBVDNA的PCR研究

为探讨HBV感染后不同背景抗-HBs，抗-HBc的意义，用多聚酶链式反应（PCR）检测HBV感染者血清中HBVDNA。抗-HBs( )病例的HBVDNA检出率显著性低于抗-HBs（一）病例的检出率，支持抗-HBs对机体的保护作用；17.7%单项抗-HBs( )的既往感染者有HBVDNA的存在，说明抗-HBs对HBV的清除受其它因素的影响；单项抗-HBc，抗-HBc/抗-HBs，抗-HBc/HBsAg,HBeAg阳性的病例有不同的HBVDNA检出率，说明不同血清学背景的抗-HBc有不同的HBV复制情况，不同类型的肝炎HBVDNA检出率无显著性差异。     

分离小鼠腹水中抗HBs/a单克隆抗体杂交瘤细胞制备小鼠腹水

探讨利用从小鼠腹水中分离获得的单克隆抗体杂交瘤细胞,大量制备小鼠单克隆抗体腹水的方法收集已接种单克隆抗体杂交瘤细胞的小鼠腹水,用淋巴细胞分离液离心分离腹水中的杂交瘤细胞;再将此分离出的杂交瘤细胞,注入其他小鼠腹腔又制得腹水。每只小鼠分离得到的杂交瘤细胞可供5只小鼠腹腔注射,平均每只小鼠产腹水3.97ml。此法可规模制备大量高效价的单克隆抗体腹水。     

一步亲和纯化制备基因工程人源抗HBs单克隆抗体Fab片段

目的：探索亲和纯化人源单克隆抗体片段的简便实用方法。方法：应用自制的抗人免疫球蛋白片段抗体（Ａｎｔｉ－Ｆａｂ）与链球菌蛋白Ｇ亲和胶（Ｇａｍｍａ Ｂｉｎｄ）交联制备亲和层析柱,用一步法从工程菌培养上清中纯化人源抗ＨＢｓ单克隆Ｆａｂ片段。经依沙吖啶沉淀、离子交换、分子筛纯化人混合血清提取ＩｇＧ组分,木瓜酶处理后分离,纯化出Ｆａｂ,免疫绵羊制备高效价抗表。用Ｇａｍｍａ Ｂｉｎｄ一步纯化出抗血清中的ＩｇＧ     

分离小鼠腹水中抗HBs／a单克隆抗体杂交瘤细胞制备小鼠腹水

探讨利用从小鼠腹水中分离获得的单克隆抗体杂交瘤细胞,大量制备小鼠单克隆抗体腹水的方法：收集已接种单克隆抗体杂交瘤细胞的小鼠腹水,用淋巴细胞分离液离心分离腹水中的杂交瘤细胞;再将此分离出的杂交瘤细胞,注入其他小鼠腹腔又制得腹水。每只小鼠分离得到的杂交瘤细胞可供5只小鼠腹腔注射,平均每只小鼠产腹水3.97ml。此法可规模制备大量高效价的单克隆抗体腹水。     

抗IgE单克隆抗体治疗变应性哮喘研究进展

变应性哮喘是由IgE抗体介导的免疫机制引起的超敏反应性疾病,IgE与变应性哮喘发生和气道高反应性（AHR）形成密切相关.IgE与肥大细胞等效应细胞表面的IgE受体结合,形成IgE-IgE受体复合物,使肥大细胞等效应细胞致敏;当变应原再次进入机体,即与IgE-IgE受体复合物结合形成交联并触发效应细胞脱颗粒释放组胺及其他炎性介质,引起速发相反应和迟发相反应,诱发哮喘.鉴于IgE在哮喘发生和炎症级联反应中所起的中心作用, 人们一直试图通过阻断IgE的作用来阻断哮喘发生和进展.近年制备的一种重组人源化抗IgE单克隆抗体（mAb）omalizumab特别引人注目.Omalizumab能高度特异地与循环IgE结合并阻断IgE与效应细胞膜表面受体作用,阻止效应细胞脱颗粒,从而阻断哮喘发生和进展,其作用已在多期哮喘临床研究中证实,有望为变应性哮喘治疗带来新的突破.     

抗CD20单克隆抗体治疗自身免疫病研究进展

RTX简介 CD20是参与B细胞识刖抗原活化的主要CD分子，属跨膜糖蛋白，表达于早期B细胞和成熟B细胞阶段，分化为浆细胞后表达消失。其功能为参与跨膜Ca^2＋流动；调节B细胞增殖分化。应用抗CD20单抗不仅叮抑制丝裂原刺激的B细胞从GO期到S／G2和M期的分裂增殖，还可抑制B细胞发育分化，以及抑制EBV或PWM（美洲商陆）诱导的Ig分泌。     

抗弓形虫单克隆抗体

浙江医学研究院寄生虫病研究所研究成功抗弓形虫单克隆抗体,并得到初步应用。弓形虫病是人畜共患的寄生虫病,呈世界性流行分布,动物和人感染都较普遍。我国也有不少省流行,不仅危害人体健康,而且引起大批猪种死亡,造成经济损失,影响对外贸易。目前,该病的病原诊断比较困难,也缺少有效的预防方法。该院寄生病研究所科技人员用弓形虫速殖子可溶性抗原免疫BALA/C小鼠,并将其免疫活性脾细胞与鼠骨髓瘤细胞NS-1进     

抗HBs、抗HBc阳性活动性乙肝1例

1病例 资料患者，女，65岁，已婚，汉族，因“间断乏力、纳差1年余，加重1个月”就诊。患者2003年10月起无明显诱因出现乏力、纳差，查转氨酶升高（具体不详），保肝降酶治疗有效。后乏力、纳差症状多次出现，均经保肝降酶治疗后症状消失、肝功好转。2004年11月自觉乏力、纳差加重，查总胆红素／直接胆红素20．3／2.8μmol／L，丙氨酸氨基转移酶（ALT）140U／L、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）87U／L；乙肝五项示HBsAb、HBcAb阳性。B超：肝囊肿、胆囊息肉。为进一步治疗收住我院。患者既往体健，未曾服用损肝药物；无药物、食物过敏史，无输血、供血史，其子为乙型肝炎患者，密切接触。既往少量饮酒，已戒5年。入院查体：神志清，精神可。