大劣按蚊血淋巴酚氧化酶与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究

目的：探讨大劣按蚊血淋巴酚氧化酶（PO）与约氏疟原虫卵囊黑化的关系。方法：以大劣按蚊/约氏疟原虫模型，利用聚丙酰凝胶电泳后的酶底物显色法，比较、分析血餐后5、7、11、15d时不吸血组、吸正常血组和感染组3组的雌大劣按蚊血淋巴酚氧化酶的单酚氧化酶（MPO）和双酚氧化酶（o-DPO)活性；同时观察感染组约氏疟原虫的感染度及其卵囊黑化比率。结果：感染组的血淋巴MPO和o-DPO酶活性明显高于不吸血组和吸正常血组（P＜0.05)；但是随着约氏疟原虫卵囊黑化比率的增高，感染组血淋巴MPO和o-DPO活性逐渐下降。另外，吸正常血组的MPO和o-DPO酶活性明显高于不吸血组（P＜0.05)。结论：吸血和约氏疟原虫的感染均能激活大劣按蚊前酚氧化酶级联反应，而大劣按蚊血淋巴酚氧化酶可能在大劣按蚊对黑化约氏疟原虫卵囊中发挥重要作用。     

猪尾猴疟原虫广西株在巴拉巴按蚊体内的发育

1、本文报告用巴拉巴按蚊感染猪尾猴疟原虫广西株获得十分满意的结果,胃感染率为100％,感染度极重,64.90％的阳性蚊胃卵囊数达500个以上。腺感染率为100％,且均为3～4度,尤以4度为多,占79.55％,故巴拉巴按蚊是广西株的良好媒介。 2、猪尾猴疟原虫广西株在巴拉巴按蚊体内完成孢子增殖的时间25℃时为12天,27℃时为11天,显较猪尾猴疟原虫的孢子增殖时间为短。 3、讨论了卵囊分化的时间、发育速度、卵囊最大体积和色素的排列型式,广西株虽与猪尾猴疟原虫其他虫株有所差别,这些差别仅为株的差异。     

食蟹猴疟原虫B株—斯氏按蚊—恒河猴猴疟模型在国内的建立

我们于1985年引进食蟹猴疟原虫B株,观察其生物学特性,建成食蟹猴疟原虫B株—斯氏按蚊—恒河猴猴疟模型。B株原虫对斯氏按蚊感染性强,斯氏按蚊叮咬输血感染后7～11天的猴,其卵囊阳性率可达80～100％;第8天卵囊成熟,第10天子孢子进腺率平均52.7％。猴感染后第7天肝切片中红外期原虫不分叶,无     

大劣按蚊差异表达蛋白与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究

目的探讨大劣按蚊差异表达蛋白与约氏疟原虫卵囊黑化的相互关系.方法将雌大劣按蚊成蚊分为吸糖水组、正常小白鼠血组和约氏疟原虫感染血组,以挤压法收集各组的血淋巴,解剖中肠并利用超声波提取其蛋白,继而对血淋巴和中肠蛋白进行SDS-PAGE分离,Western blot检测丝氨酸蛋白酶和前酚氧化酶的表达差异,并利用免疫组织化学进行血细胞丝氨酸蛋白酶与前酚氧化酶的定位检测.结果 SDS-PAGE显示吸糖水大劣按蚊有34条蛋白带,而吸正常小鼠血和吸感染血蚊血淋巴有35条蛋白带,而且在分子量约160×103和66×103的蛋白差异带显著,吸正常血及感染血后表达增强.吸糖水和吸正常小白鼠血组血淋巴丝氨酸蛋白酶呈现2条带,分子量分别约160×103和150×103,3组蚊血淋巴前酚氧化酶呈现1条带,分子量约66×103,吸正常小鼠血和吸感染血组蚊1 d后血淋巴丝氨酸蛋白酶和前酚氧化酶表达均显著上调,尤其疟原虫感染后表达最强.感染1 d后中肠前酚氧化酶带型明显增宽.免疫酶化学显示,丝氨酸蛋白酶和前酚氧化酶在血细胞内均呈颗粒状分布,血细胞外血淋巴液内有少许散在颗粒分布.结论约氏疟原虫卵囊黑化期间,大劣按蚊血淋巴丝氨酸蛋白酶和前酚氧化酶表达增强,提示二者可能参与了卵囊黑化包裹反应.     

约氏疟原虫卵囊黑化期间大劣按蚊血淋巴蛋白的分析

目的　初步探讨大劣按蚊 (Anophelesdirus)黑化包被约氏疟原虫 (Plasmodiumyoelii)卵囊相关蛋白。方法　挤压法分别收集血餐后第 1、3、4、5天时不吸血组、吸正常血组和感染组的雌大劣按蚊血淋巴 ,经SDS PAGE分离后 ,银染显色。同时 ,用烟草天蛾 (ManducaSexta)前酚氧化酶 (Prophenoloxidase ,PPO)亚基 1IgG检测正常雌大劣按蚊血淋巴中的PPO。结果　SDS PAGE发现感染约氏疟原虫后 ,部分大劣按蚊的血淋巴蛋白带增强 ,而部分血淋巴蛋白带却减弱 ,免疫印迹发现大劣按蚊血淋巴PPO有 87× 10 3 、6 7× 10 3 、6 3× 10 53条蛋白带 ,而相应分子量的 3条蛋白带在约氏疟原虫感染后第 4、5天开始增强 ,其中尤以 87× 10 3 的增强最为明显。结论　大劣按蚊在对约氏疟原虫卵囊黑化包被期间诱导合成的某些血淋巴蛋白与前酚氧化酶级联反应主要成分有关联     

与按蚊唾液腺抗疟原虫子孢子入侵相关的差异表达cDNA文库构建

目的 构建与按蚊唾液腺抗疟原虫子孢子入侵相关的差异表达cDNA文库,为进一步筛选、克隆按蚊唾液腺抗疟原虫子孢子入侵差异新基因奠定基础.方法 以大劣按蚊-约氏疟原虫为实验模型,分别将饱吸约氏疟原虫感染鼠血和正常鼠血后14 d的大劣按蚊作为T 组和D 组,采用抑制差减杂交方法和T/ A克隆技术构建按蚊唾液腺抗疟原虫子孢子入...     

广西熊猴体内发现的一种疟原虫的研究

1975年在广西产的一只熊猴体内首次发现了一种自然感染的猴疟原虫,并对其形态和生活史进行了研究。一、这种猴疟原虫的红细胞内裂殖周期为72小时,其形态特征基本上与猪尾猴疟原虫相似。二、这种疟原虫不能感染雷氏按蚊;在斯氏按蚊体内能发育即卵囊分化,但迅即出现退变,不能完成孢子增殖;在巴拉巴按蚊体内发育良好,12天(25℃)完成孢子增殖。三、用阳性巴拉巴按蚊感染一只熊猴和4只恒河猴,原虫血症前期前者为8天,后者一致为9天。四、观察了这种猴疟原虫对恒河猴的感染过程。正常不切脾猴引起中等度感染;切脾猴则引起重度感染,感染猴出现严重贫血,甚至死亡。五、根据文献,对这种猴疟原虫与猪尾猴疟原虫进行了比较和讨论,认为这是猪尾猴疟原虫的一个株。     

抗生素对重组约氏疟原虫BY265株感染斯氏按蚊的影响

目的 探讨抗生素对斯氏按蚊感染重组约氏疟原虫BY265-GFP株的影响.方法 在疟原虫感染斯氏按蚊前后分别饲含抗生素的糖水,分别于7 d、16 d观察蚊胃卵囊和唾液腺子孢子情况.结果 饲加入抗生素糖水组蚊胃感染度和感染率、唾液腺子孢子数量明显高于对照组.结论 抗生素可提高重组约氏疟原虫对斯氏按蚊的感染能力.     

猪尾猴疟原虫感染大劣按蚊最适时机的研究

目前,疟疾免疫,疟疾防治和疟原虫理论的研究,需要在蚊体内获取大量子孢子,以提供实验研究的物质基础。如何在蚊体内获取大量子孢子,关键是掌握感染的最适时机。1984年1月至9月,采用猪尾猴疟原虫(Plasmodium inui)感染大劣按蚊(Ano-pleles dirus)的实验,以探索猪尾猴疟原虫感染大劣按蚊的最适时机。     

猴疟B株感染后猴抗体水平与虫血症对蚊媒感染情况的观察

用食蟹猴疟原虫Ｂ株子孢子感染３只恒河猴，虫现前期分别是８、１０和１１ｄ，虫血症高峰时间在１４－２５ｄ，３只猴均有两个以上高峰，原虫密度波动于０．０３％－５９．６％。初次抗疟原虫抗体反应於感染后１３－１７ｄ测得，抗体高峰在感染后１６－２０ｄ。在虫血症显著期供４６批大劣按蚊血餐，获得好的感染蚊３０批，平均为１０批，好的感染蚊批的血餐时间分布在抗体滴度高峰期前为２３．３３＾，高峰期为３３．３３％，平均为     

Histopathological changes of Macaca mulatta infected with Plasmodium knowlesi

目的　探讨诺氏疟原虫 (Plasmodiumknowlesi)感染恒河猴 (Macacamulatta)引起有关脏器的病理组织学变化。方法　病解 3例感染疟原虫未经治疗病死的猴 ;2例感染疟原虫经青蒿琥酯 (artesunate)栓剂治疗后又复发的猴 ;1例感染疟原虫经磷酸哌喹 (piperaquinephosphate)治愈后死于上肢坏死感染的猴。对有关脏器均进行切片检查。结果　 3例 (1号、7号和 12号 )未经治疗而病死的猴和 1例 (72号 )虽经青蒿琥酯栓剂治疗但很快被排出体外的猴的心、肝、脾、肺、肾、大小脑、胰腺、甲状旁腺、脑垂体和淋巴结等均有严重病变 ,含原虫的红细胞和疟色素聚集于这些脏器的毛细血管内。 1例 (131号 )经用哌喹治愈而死于上肢坏死的猴 ,除见多个脏器内有色素沉积或被巨噬细胞吞噬外 ,可见胰岛细胞、甲状旁腺和垂体细胞萎缩和消失等病变。 1例 (33号 )用青蒿琥酯栓剂治疗后短期原虫转阴 ,但又复燃的猴被灌药致死 ,多个脏器所见与感染后未经治疗者明显不同 ,仅见肝脏Kupffer细胞和大脑基质细胞内含原虫和疟色素 ,多个脏器均呈修复。结论　本文报导了诺氏疟原虫感染恒河猴后各有关脏器的病理组织学变化 ,特别是观察到胰岛细胞、甲状旁腺和垂体细胞的萎缩和消失与心肌细胞的溶解是国内外文献所未记载过的。     

黄连解毒汤对高血压食蟹猴血压的影响

目的:观察黄连解毒汤对高血压食蟹猴血压的影响。方法:从324只食蟹猴筛选得到16只高血压食蟹猴,随机分为卡托普利组、黄连解毒汤组,每组8只。灌胃给药4周,分别观察治疗前后的血压、血糖和血脂水平。结果:两组食蟹猴治疗前血压与治疗后比较,差异均有统计学意义(P0.05);黄连解毒汤组治疗后血压与卡托普利组比较,差异无统计学意义(P0.05)。卡托普利组给药后葡萄糖浓度显著低于给药前(P0.05);黄连解毒汤组给药后高密度脂蛋白显著低于给药前(P0.05),黄连解毒汤组给药后低密度脂蛋白显著高于给药前(P0.05),黄连解毒汤组给药后高密度脂蛋白显著低于给药前(P0.05)。结论:黄连解毒汤对高血压食蟹猴有降低血压作用,其疗效与卡托普利相当,并可改善血脂代谢。     

中缅边境地区三带喙库蚊对溴氰菊酯抗药性检测

目的明确三带喙库蚊对溴氰菊酯的抗药性及探讨吸血对抗药性的影响,以指导蚊虫抗药性的准确测定和化学杀虫剂的正确选择。方法从位于中缅边境地区的云南省德宏州盈江县现场采集吸血蚊和未吸血三带喙库蚊,采回后的第1d和第3d上午,应用WHO推荐的成蚊滤纸接触法分别测定其抗药性。结果在第1d和第3d的抗性测试中,未吸血蚊的死亡率分别是27.91%和28.15%。吸血蚊的首只击倒时间、KT50和KT95均大于相应未吸血蚊;击倒率和死亡率都小于相应未吸血蚊（击倒率,χ2=4.27,P=0.04〈0.05＆χ2=5.4,P=0.02〈0.05;死亡率,χ2=13.28,P=0.0004〈0.05＆χ2=8.88,P=0.0029〈0.05）。结论云南省盈江县的三带喙库蚊已对溴氰菊酯产生很强的抗药性,吸血可以显著增强该抗药性。因此,在蚊虫的抗药性测定中,要尽量排除吸血的影响,以获得准确地蚊虫抗药性水平,指导杀虫剂的合理使用。     

Experimental studies on combinations of pyronaridine/primaquine versus chloroquine/primaquine.

The toxicity of combined use of blood schizontocide pyronaridine (PND) and primaquine (PQ) in mice and rats was significantly lower than that of chloroquine (CQ) plus primaquine (PQ). PND 1/2 LD50 (ca 600 mg/kg) in combination with PQ reduced the toxic action of PQ in mice, while CQ 1/2 LD50 (ca 300 mg/kg) plus PQ produced synergistic toxic effect. In animal models such as Plasmodium yoelii sporozoite infection in mice and P. cynomolgi sporozoite infection in rhesus monkeys, the tissue schizontocidal action of PQ was not affected by PND. Therefore, clinical evaluation of PND/PQ in comparison with CQ/PQ in treating vivax malaria is suggested.

     

约氏疟原虫卵囊与唾液腺子孢子不同时相点的CSP与MAEBL基因表达研究

目的为研究约氏疟原虫在蚊体内发育过程中,卵囊子孢子与唾液腺子孢子不同时相点的环子孢子蛋白(circumsporozoite protein, CSP)与红细胞结合蛋白(erythrocyte binding protein, MAEBL)基因表达水平的变化.方法分别在约氏疟原虫感染斯氏按蚊后5、7、10 d取蚊腹部、12、15、18 d取蚊头胸部分离疟原虫总RNA,以rRNA 28S为对照,通过RT-PCR法半定量分析CSP与MAEBL mRNA表达量.结果蚊期疟原虫子孢子CSP与MAEBL转录显著上调(P<0.01),在侵入唾液腺后达到峰值.结论疟原虫唾液腺子孢子CSP和MAEBL mRNA高水平表达,提示CSP和MAEBL可能与侵入脊椎动物宿主密切相关.     

猴免疫缺陷病毒(SIV)慢性感染猴模型的建立

目的：在先前已建立了模拟人艾滋病感染者和患者的猴免疫缺陷病毒（ＳＩＶ）急性感染猴和中、晚期猴艾滋病（ＳＡＩＤＳ）模型的基础上,再摸索建立ＳＩＶ慢性感染猴模型,以期为抗区滋病药物的体内药效学介研究提供更合适的动物模型。方法：用ＳＩＶｍａｃ２５１感染恒河猴１７只,追踪观察其临床表现,体征变化,病程进展,血浆和全血病毒症规律,淋巴细胞亚群ＣＤ４的动态等。结果：临床体征有特征性,病程较长,１年内死亡２只（     

SCANNING ELECTRON MICROSCOPIC OBSERVATIONS ON LATE SPOROGONIC STAGES OF DEVELOPMENT OF PLASMODIUM FALCIPARUM

Five batches of Anopheles dirus, after taking blood meal from 3 Plasmodium falciparum infected patients were dissected 10-17 days later. 46 midgut specimens of these infected mosquitoes were examin ed with the scanning electron microscope (SEM). The surface features of early and late stage oocysts were similar to those described for other species of P. but those of the sporoblast and sporozoite ap peared somewhat different from those described by us earlier for P. yoelii yoelii, P. cynomolgi and P. vivax. It seems that the SME morphological charac- teristics, especially those of sporoblasts and sporo zoites can be utilized in differentiating these Plasmodium species.     

青蒿琥酯对猴免疫缺陷病毒感染中国恒河猴模型T淋巴细胞活化的调节作用

目的:观察注射用青蒿琥酯对猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)感染中国恒河猴模型免疫异常激活的改善情况,探讨青蒿琥酯对艾滋病的干预作用。方法:选用8只SIV感染平台期中国恒河猴模型,随机分为治疗组和对照组,每组各4只,治疗组按每天3 mg·kg~(-1)剂量肌肉注射青蒿琥酯注射液8周,对照组肌肉注射等剂量生理盐水。分别于给药前,给药后2周、4周、6周、8周,停药后4周、8周检测血浆病毒载量、全血细胞计数、淋巴细胞亚群及免疫活化相关标记物CD_(69)~+、CD_(25)~+、HLA-DR~+和CD_(38)~+表达情况。结果:青蒿琥酯可在4周内下调CD_8~+细胞CD_(69)~+、HLA-DR~+和CD_(38)~+表达水平(P0.05),对CD_4~+细胞影响较小。给药第4周出现一过性嗜中性粒细胞下降,后回升至正常水平。结论:青蒿琥酯可改善SIV感染中国恒河猴细胞毒性T细胞免疫异常激活,嗜中性粒细胞下降是可逆的。     

恒河猴感染SARS-CoV的病毒学、血清学检测

目的对感染SARS-CoV的8只恒河猴进行病毒学、血清学指标检测。方法SARS-CoV经鼻腔接种8只恒河猴,在感染的第1天开始到5、7、10、15、20、30和60天分别安乐处死时,不同时间取咽拭子、血液和脏器,进行病毒分离,RT-PCR检测和抗体测定。结果RT-PCR证实感染病毒检出时间为5~16d,8只猴中的5只分离到了病毒,感染15d后可检测到抗体。结论感染SARS-CoV的恒河猴不仅出现与SARS患者类似的临床和病理学改变,也在一定时期内排毒,出现特异免疫反应,这些指标均可作为药物筛选、疫苗评价等方面的重要参数。