K-ras基因转染鼠肺纤维细胞粘附的超微结构研究

目的：探讨细胞间连接结构在肿瘤浸润转移中的意义。方法：利用透射电镜观察K-ras基因转染的鼠肺（KTRL）纤维细胞及同来源的正常鼠(NRL)纤维细胞两种细胞连接结构及细胞内肌动蛋白丝分布形式的差异。结果：KTRL纤维细胞连接结构存在重大缺陷，肌动蛋白丝分布发生明显改变。结论：肿瘤细胞连连结构及肌动蛋白丝分布的改变可能是其发生浸润转移的主要原因。     

卡介菌多糖核酸对肺癌细胞粘附及骨架结构的影响

目的　研究卡介苗多糖核酸 (BCG PSN)对肺癌细胞上粘附分子配体 (slex)表达及肺癌细胞质内骨架的表现特征的影响。方法　采用流式细胞仪及透射电镜观察BCG PSN对高转移人肺巨细胞癌 (PG)细胞和低转移人肺腺癌 (PAa)细胞上slex 表达的影响及胞质内骨架结构的变化。结果　①流式细胞仪分析提示PAa细胞slex 表达高 ( 66.8% ) ,PG细胞表达低 ( 5 .72 % )。经BCG PSN处理后 ,PAa细胞slex 表达呈浓度依赖下降。②超微结构观察 :PAa细胞微丝稀疏 ,PG细胞微管微丝减缺。BCG PSN处理后 ,PG细胞微丝较前丰富、完整 ,树样分布 ,PAa细胞仅见少量的微丝。结论　细胞内微管、微丝等细胞骨架成分的改变与癌细胞运动迁徙能力有关 ,BCG PSN对肺癌细胞粘附性的抑制环节不是细胞骨架介导的粘附强化 ,可能是粘附分子表达下降所致的粘附强化启动过程。     

M21黑色素瘤细胞与淋巴管内皮细胞相互作用的形态研究

目的：观察恶性黑色素瘤细胞转移时与淋巴管内皮的作用过程，探讨肿瘤淋巴转移的机理。方法：将M21黑色素瘤细胞接种在单层淋巴管内皮上，用相差显微镜和扫描电镜观察肿瘤细胞穿越淋巴管内皮的方式及两者的形态改变。结果：黑色素瘤细胞借胞膜突起与内皮粘附，粘附部位多位于内皮细胞连接处；粘附处的内皮收缩，肿瘤细胞穿越并在内皮下迁移。结论：肿瘤细胞的转移过程包括粘附、浸润和迁移；肿瘤细胞可以直接或通过内皮细胞间隙穿越淋巴管内皮向远处转移。     

不同转移潜能人肝癌细胞株与细胞外基质的粘附研究

目的：探讨肿瘤生物学特性对肝癌转移的影响。方法：采用荧光标记的体外细胞粘附方法，确定粘附最佳条件，比较高，低转移潜能人肝癌细胞株MHCC97，SMMC7721与细胞外基质成分的粘附百分比。结果：SMMC7721细胞与玻璃蛋白，纤连蛋白和纤维蛋白原的粘附百分比分别为44．9％，47．4％，59．3％，MHCC97细胞则分别为73．6％，76．4％，80．6％，对应比较均有显差异（P＜0．05），结论：肿瘤细胞粘附能力的改变与其生物特性有关，人肝癌细胞的高转移特性与其高粘附性，细胞表面粘附分子（主要是整合蛋白）表达上的差异有关。     

桂皮酸诱导高转移人肺癌细胞去恶性的研究

本文作者选用桂皮酸处理克隆化高转移人肺巨细胞癌（PGCL3）细胞，发现肿瘤细胞在形态、增殖速度、分裂指数、软琼脂集落形成能力和凝集反应等方面均出现向正常细胞表型逆转，证明栓皮酸具有抑制PGCL3细胞增殖及诱导分化的作用。我们还进行了反映肿瘤细胞浸润和转移能力的粘附、运动和降解侵袭实验，结果显示桂皮酸对PGCL3细胞的上述三种能力都有明显的抑制作用，表明桂皮酸在诱导PGCL3细胞向成熟方向分化的同时，还使肿瘤细胞的浸润和转移能力减弱。     

FAP-α在乳腺癌中的表达及作用机制研究进展

成纤维细胞活化蛋白-α(FAP-α)属于丝氨酸蛋白酶,具有特殊的生物学特性,是肿瘤微环境中肿瘤相关成纤维细胞的特异性标志物之一,常常在恶性肿瘤基质成纤维细胞和肿瘤细胞中选择性表达,在正常组织几乎不表达,在肿瘤的发生发展过程中起重要作用。FAP-α具有蛋白酶活性,与其他表面蛋白分子形成分子复合物作用于细胞信号通路,调节多种肿瘤细胞的生长、浸润、转移和复发。表达FAP-α的成纤维细胞在乳腺癌细胞的浸润转移中起重要作用。     

缺氧及氧化损伤后GEC粘附分子表达与粘附性改变

目的：探讨缺氧、氧化损伤对培养人肾小球内皮细胞（GEC）粘附分子表达及GEC与PMN粘附力的影响。方法：采用化学缺氧、氧化损伤模型，免疫荧光观察GEC粘附分子P、E选择素和ICAM-1的表达，微管吸吮直接测定单个GEC、PMN细胞间粘附力的改变。结果：缺氧、氧化损伤均可导致GEC细胞、P、E选择素和ICAM-1的表达增强，以ICAM-1最明显，同时GEC、PMN间粘附力增强，加用ICAM-1抗体可显著抑制这一粘附力的增加。结论：缺氧、氧化损伤后GEC粘附分子表达增强，GEC、PMN细胞间粘附力的改变与GEC粘附分子变化密切相关。     

成纤维细胞对肿瘤发生发展的作用研究

由于肿瘤细胞基因的易变性等缺陷 ,学者们对基因稳定而起支持作用的肿瘤间质细胞发生兴趣 ,继内皮细胞之后 ,于2 0世纪 80年代开始研究成纤维细胞。它是产生基质的主要细胞与主要的基质细胞 ,与肿瘤细胞相互作用 ,促其自身形态与生理功能发生变化 ,表达多种细胞因子、蛋白酶、粘附分子 ,不同程度增加肿瘤细胞的恶性表型 ,对肿瘤发生、生长、血管形成、浸润与转移有重要作用 ;并具有器官特异性。成纤维细胞活化蛋白 (ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔａｃｔｉｖａｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎ ,ＦＡＰ)作为肿瘤基质活化成纤维细胞的标志物已用于临床诊断与实…     

胃癌浸润转移机制的研究进展

癌转移、复发是胃癌病人死亡的主要原因 ,也是治疗的最大障碍。近年对有关胃癌浸润转移机制的研究发现 :血管增生是肿瘤生长和转移的最基本要素 ;癌转移过程肿瘤细胞需先通过粘附分子与周围细胞或基质粘附 ,在众多蛋白酶参与降解周围基质后才能通过细胞外基质屏障 ;动力因子参与肿瘤细胞的游走、趋向性、吞噬活动及接触趋向性等诸多方面 ;某些转移相关基因、抑癌基因、癌基因的改变 ,细胞周期调控蛋白的异常 ,生长因子及其受体的改变等诸多因素对肿瘤的转移及浸润也产生不可估量的影响。现综述如下。1　细胞动力因子肿瘤细胞必须获得多种生…     

RAB5A对人肺腺癌细胞系粘附能力的影响

目的：研究RAB5A基因转染后对肺腺癌粘附能力的影响。方法：采用细胞粘附能力测定,观察转染前后细胞系粘附能力的改变。结果：转染PAB5A正义表达载体的AG2Y83－α细胞系粘附能力增强,转染反义重组质粒的Anip9n3细胞系粘附能力明显减弱。结论：RAB5A在人肺腺癌转移特性的形成中具有重要的作用。     

EGFR和K-ras在结直肠癌中的表达及其临床意义

【目的】检测结直肠癌中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和K-ras蛋白的表达情况,分析其在结直肠癌组织中表达与临床病理特征之间的关系。【方法】应用免疫组化SP法检测80例原发性结直肠癌及其相应的癌旁组织中EGFR和K-ras蛋白的表达情况。【结果】EGFR、K-ras蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达显著高于其在癌旁组织中的表达(P<0.01)。EGFR蛋白的表达与肿瘤病理分化程度、浸润深度以及肿瘤Dukes分期、有无淋巴转移有关,Dukes分期越晚(χ2=8.935,P=0.030),分化程度越低(χ2=11.757,P=0.001),浸润深度越深(χ2=6.888,P=0.009)及有淋巴结转移者(χ2=10.889,P=0.001),其表达越高,而与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位无关(P>0.05);K-ras蛋白仅与肿瘤的病理分化程度有关,分化程度越低(χ2=9.528,P=0.001),其阳性表达越多。结直肠癌组织中EGFR和K-ras蛋白的共表达呈正相关性(r=0.327,P=0.002)。【结论】EGFR和K-ras在结直肠癌中存在共表达现象,二者的高表达可能促进结直肠癌的发生、发展,检测二者可辅助判断患者的预后和转移情况以及指导临床治疗。     

ALK、K-ras蛋白表达与非小细胞肺癌病理关系研究

目的：探讨ALK、K-ras蛋白表达与非小细胞肺癌的病理关系。方法分别采用免疫组织化学放大聚合物法、EUvison法检测120例NSCLC患者手术切除石蜡标本中ALK、K-ras蛋白的表达情况,分析ALK和K-ras蛋白的阳性表达与病理指标之间的关系。结果本研究中120例患者ALK蛋白阳性表达17例（14.17%）, ALK蛋白主要位于肿瘤细胞的细胞浆内,少数位于细胞膜上;K-ras蛋白阳性表达66例（55.00%）,K-ras蛋白广泛分布于肿瘤细胞的细胞浆内和细胞膜上;ALK和K-ras蛋白均在抽烟史、病理类型和分化程度分布上差异有统计学意义：ALK蛋白在有抽烟史的患者中阳性表达率显著低于无抽烟史者,在腺癌中阳性表达率显著高于鳞癌,在高～中分化癌中阳性表达率显著低于低分化癌,差异具有统计学意义（P〈0.05）;K-ras蛋白在有抽烟史的患者中阳性表达率显著高于无抽烟史者,在腺癌中阳性表达率显著高于鳞癌,在高～中分化癌中阳性表达率显著高于低分化癌,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论 ALK和K-ras蛋白的表达与NSCLC患者是否有抽烟史、临床病理类型以及肿瘤分化程度有紧密联系。     

Ezrin在肝癌中的表达及其与肿瘤黏附、侵袭和门静脉癌栓的关系

目的　探讨细胞骨架连接蛋白 (ezrin)在肝癌组织和细胞系中的表达及其与肿瘤黏附、侵袭和门静脉癌栓的关系。方法　 4 1例肝细胞肝癌及其癌旁肝组织标本按肿瘤大小、有无播散灶及远处转移、包膜、门静脉癌栓等分为高侵袭和低侵袭 2组并与同期 9例良性肝病肝组织作比较 ,分别采用RT PCR和免疫组化技术检测ezrin表达。另选MHCC97L、MHCC97H和LM 33株肝癌细胞系并检测ezrin表达 ;同时运用脂质体转染反义寡核苷酸抑制MHCC97H细胞ezrin表达 ,比较转染前后细胞黏附、侵袭能力的改变。结果　高侵袭肝癌ezrin表达显著高于低侵袭肝癌 (P <0 .0 5 ) ,癌栓组织ezrin表达强度更高 (P <0 .0 5 )。MHCC97L、MHCC97H和LM33株细胞系均表达ezrin ,其强度随侵袭性增加依次增强。脂质体转染反义寡核苷酸能显著抑制MHCC97H的ezrin表达以及黏附、侵袭能力。结论　Ezrin在肝癌、门静脉癌栓和MHCC97L、MHCC97H、LM3细胞系中均表达 ,其表达强度随侵袭性增强而增加 ;Ezrin可能主要通过影响肿瘤黏附、侵袭能力 ,从而在肿瘤侵袭及门静脉癌栓形成中起重要作用。     

甘草酸二铵脂质配体对大鼠急性肺损伤的改善作用*

目的: 研究甘草酸二铵脂质配体(DGLL)对大鼠急性肺损伤(ALI)及肺水肿的影响。方法: 雄性SD大鼠123只,体重170～200 g,(6±1)周龄,灌胃DGLL(30、60、120 mg/kg),1 h后通过腹腔内注射脂多糖(LPS)10 mg/kg建立大鼠ALI模型。6 h后,使用HE染色技术评估肺损伤。使用肺湿干重比、支气管肺泡灌洗液(BALF)中的蛋白质含量和肺组织中的Evans蓝(EB)来评估肺水肿。用ELISA法测定肺组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL-1β)的表达水平。通过免疫组织化学染色法检测髓过氧化物酶(MPO)的表达水平。Western blotting法测定细胞间黏附分子(ICAM-1)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、黏附蛋白(ZO-1)、连接黏附分子(JAM-1)等与肺部炎症和微血管通透性有关的蛋白表达水平。结果: MPO免疫反应性降低,大鼠肺组织中TNF-α、IL-1β和ICAM-1的表达水平下降,证明DGLL缓解了LPS诱导的ALI。此外,DGLL可以抑制LPS诱导的肺水肿,降低BALF的蛋白浓度及EB外渗。DGLL也降低了VE-cadherin的表达水平以及抑制LPS引起的肺组织中的连接蛋白,包括ZO-1、JAM-1的表达。结论: DGLL对LPS诱导的大鼠ALI表现出保护作用,同时也抑制了炎症细胞的浸润和微血管屏障的破坏。     

生长抑素作用Cmet抑制肝细胞癌生长的研究

目的　观察生长抑素 (Somatostatin ,SST)对Bel74 0 2肝癌细胞株以及裸鼠种植瘤生长的影响 ,同时探索SST的抑瘤机制。方法　以裸鼠人肝癌转移模型为材料 ,观察SST对种植瘤生长的影响。以MTT法测量SST对Bel74 0 2细胞增殖的影响 ,光镜下观察细胞形态的变化。以细胞迁移实验和粘附实验观察细胞侵袭和粘附能力的影响。以流式细胞仪测量细胞周期及细胞表面肝细胞生长因子受体Cmet表达的影响 ,以及检测细胞表面生长抑素受体 2 (somatostatinreceptor 2 ,SSTR2 )的阳性率。 结果　SST治疗可以明显抑制裸鼠人肝癌种植瘤的生长 ,但SST处理的 74 0 2细胞增殖能力和细胞形态无明显改变 ,细胞的侵袭和粘附能力可见明显下降 ,细胞生长静止期 (G0 /G1)的比例显著增加 (0 .4 80± 0 .0 32vs 0 .5 77± 0 .0 0 9) ,但未见凋亡峰 ,细胞表面可见SSTR2的表达 ,SST可使细胞Cmet的表达明显受抑。结论　SST能通过与SSTR结合抑制肝癌的生长 ,减少Cmet的表达可能是抑瘤的一个重要机制 ,而并非直接杀死肝癌细胞和诱导凋亡。     

神经黏附分子NECL1抑制神经胶质瘤细胞的迁移、侵袭并诱导其分化

目的 在NECL1表达缺失的神经胶质瘤细胞系中探讨神经黏附分子NECL1恢复表达后对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响.方法 在U251胶质瘤细胞系中,通过划痕及Transwell实验观察NECL1恢复表达后对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响,通过对细胞外金属蛋白酶活性的检测证明NECL1恢复表达后对肿瘤侵袭能力的影响.利用不同培养密度的U251细胞,对NECL1恢复表达后细胞形态进行观察,并通过Western blot实验验证相关蛋白的表达.结果 在NECL1表达缺失的胶质瘤细胞系U251中,恢复NECL1的表达后,肿瘤细胞的迁移及侵袭受到了抑制. NECL1恢复表达的U251细胞有向星形胶质细胞分化的趋势,星形胶质细胞标志蛋白神经胶质纤维酸性蛋白的表达上调.结论 神经黏附分子NECL1作为一个潜在的胶质瘤抑制因子,对肿瘤细胞的迁移和侵袭能力均有不同程度抑制作用,同时,NECL1具有诱导神经胶质瘤U251细胞向星形胶质细胞方向分化的潜能.     

非小细胞肺癌癌胚抗原表达的临床意义

目的　探讨肺癌患者癌胚抗原 (CEA)表达的临床意义。方法　免疫组化法检测非小细胞肺癌 (NSCLC)癌组织和淋巴结中CEA的表达 ,放免法检测同期病人血中CEA浓度。结果　血中CEA浓度异常者仅占 34 .4% ,肺癌组织CEA表达阳性率 76 .6 % ,两者相差非常显著 (P <0 .0 1 )。转移淋巴结CEA表达 6 5 .7%。 3例癌栓CEA表达均阳性。Ⅲ～Ⅳ期患者肺癌组织CEA表达高于Ⅰ～Ⅱ期(P <0 .0 5 ) ,腺癌伴淋巴结转移组 ,CEA表达显著高于淋巴结阴性组 (P <0 .0 1 )。结论　作为肿瘤标志物 ,癌组织CEA表达较外周血CEA浓度对肺癌的诊断、预后判断更有价值。作为细胞粘附分子 ,CEA在癌栓形成过程及肺癌转移中可能起重要作用。     

SMARCA5在非小细胞肺癌中的表达及作用

目的：研究SMARCA5表达与非小细胞肺癌（NSCLC）患者预后的关系,同时探讨沉默SMARCA5表达对NSCLC生物学行为的影响。方法：采用免疫组化法检测SMARCA5蛋白在NSCLC和正常肺组织中的表达情况。分析SMARCA5表达与NSCLC患者临床病理因素及生存预后的相关性。采用Western blot和RT-PCR检测SMARCA5在人正常支气管上皮细胞系和人肺癌细胞系（A549、Lu165、SK-MES-1和NCI-H520）中的表达。使用SMARCA5 siRNA沉默SMARCA5的表达。采用MTT法和Transwell法检测肺癌细胞的增殖和侵袭能力。结果：SMARCA5蛋白在78例（59.5%）NSCLC组织中高表达。SMARCA5的表达与肿瘤分化不良（χ2=16.666,P＜0.001）、TNM分期（χ2=24.462,P＜0.001）和胸膜浸润（χ2=4.601,P=0.032）显著相关。此外,SMARCA5的高表达与NSCLC患者的不良预后相关（Log-rank检验,P=0.001）。干扰SMARCA5表达可抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭（均P＜0.05）。结论：SMARCA5的高表达与NSCLC患者肿瘤TNM分期、胸膜浸润、分化不良和预后不良相关,且敲除SMARCA5表达可降低NSCLC细胞的增殖和侵袭活性。SMARCA5可能在NSCLC的肿瘤进展中发挥一定作用。     

JWA抑制人肝癌细胞的黏附和迁移侵袭潜能

探讨JWA蛋白在人肝癌细胞黏附和迁移侵袭过程中的作用?方法:应用小干扰RNA下调低转移潜能人肝癌细胞株MHCC97L中JWA蛋白表达水平,MTT法检测MHCC97L增殖;应用细胞小室检测MHCC97L在JWA不同蛋白水平时的迁移及侵袭潜能变化;黏附试验检测MHCC97L细胞黏附能力变化?结果:研究发现人肝癌细胞株MHCC97L中的JWA表达水平下降后,肝癌细胞迁移及侵袭能力明显增强,细胞对细胞外基质纤维连接蛋白的黏附力增加?结论:RNA干扰JWA引起肝癌细胞的JWA蛋白表达水平下降,导致肝癌细胞的黏附?迁移及侵袭能力增强,结果提示JWA可能抑制人肝癌细胞侵袭和转移?