肺癌胰岛素样生长因子-2基因印迹的研究

目的探讨胰岛素样生长因子-2(IGF2)基因印迹(genomicimprinting)与肺癌发生发展过程的关系。方法于2003年1月至2004年1月,对大连医科大学附属第一医院胸外科手术切除的标本,根据IGF2基因第9外显子具有ApaI位点多肽性,利用聚合酶链反应(PCR)技术结合限制性片段长度多态性(RFLP)技术,诊断的32例肺癌患者及其对应的癌周正常肺组织进行了IGF2基因印迹的研究。结果12例患者为杂合子信息个体(37·5%),其中10例为IGF2双等位基因表达,即发生了基因印迹缺失(LOI,83·3%),而且这10例病人中有4例的癌周正常肺组织表现为IGF2弱的双等位基因表达。结论IGF2基因的印迹缺失参与了肺癌的发生发展过程。     

肺癌胰岛素样生长因子-2基因印迹的研究

目的探讨胰岛素样生长因子-2（IGF2）基因印迹（genomic imprinting）与肺癌发生发展过程的关系。方法于2003年1月至2004年1月，对大连医科大学附属第一医院胸外科手术切除的标本，根据IGF2基因第9外显子具有ApaI位点多肽性，利用聚合酶链反应（PCR）技术结合限制性片段长度多态性（RFLP）技术，诊断的32例肺癌患者及其对应的癌周正常肺组织进行了IGF2基因印迹的研究。结果12例患者为杂合子信息个体（37，5％），其中10例为IGF2双等位基因表达，即发生了基因印迹缺失（LOI，83．3％），而且这10例病人中有4例的癌周正常肺组织表现为IGF2弱的双等位基因表达。结论IGF2基因的印迹缺失参与了肺癌的发生发展过程。     

人肝癌父系表达基因10的遗传印记状态

目的 研究人肝癌组织及肝癌细胞株中父系表达基因10(PEG10)的遗传印记状态.方法 从40例肝癌及其癌旁组织、15例正常肝组织、5株肝癌细胞(PLC/PRF/5、SMMC 7721、HepG2、Hep3B、SK-HEP-1)、2株正常肝细胞(changliver、HL7702)中提取基因组DNA,针对PEG10基因单核苷酸多态性位点设计引物进行PCR,扩增片段经测序分析基因型;从杂合样本中提取总RNA进行RT-PCR,对扩增产物测序以检测等位基因表达状态,同时进行实时荧光定量RT-PCR检测PEG10表达水平.计量资料以均数±标准差(-x±s)表示,组间比较用t检验与方差分析;两组率的比较用x2检验.结果 40例肝癌及其癌旁组织中16例呈杂合状态,15例正常肝组织中3例呈杂合状态,肝癌细胞HepG2扩增片段测序检测到一杂合突变位点,其余组织及细胞株均为纯合状态.杂合样本中,82.4%(14/17)肝癌样本(包括组织及肝癌细胞株)中PEG10基因呈双等位基因表达,发生印记丢失;17.6%(3/17)肝癌样本呈单等位基因表达,提示印记存在.PEG10在癌旁及正常肝组织中几乎不表达.发生印记丢失的肝癌组织与印记存在的肝癌组织相比,PEG10表达水平的差异无统计学意义(t=1.311,P＞0.05).结论 大多数肝癌组织中存在PEG10印记丢失现象,PEG 10印记状态与其在肝癌组织中的表达水平无明确关系.     

非小细胞肺癌组织中KISS-1、C1 QBP、ITGA7表达及相关性

目的 探究非小细胞肺癌组织中肿瘤转移抑制基因蛋白(KISS-1)、补体成分1q亚单位结合蛋白(C1QBP)、整合素α7(ITGA7)表达及相关性.方法 选取非小细胞肺癌患者319例,均行手术切除.取癌组织及癌旁组织,免疫组化检测KISS-1、C1QBP、ITGA7样本,使用Western印迹检测KISS-1、C1QBP...     

非小细胞肺癌组织中let-7、K-ras基因的表达变化及意义

目的观察非小细胞肺癌组织中let-7、K-ras基因的表达变化,并探讨其意义。方法采用实时定量PCR技术检测30例非小细胞肺癌组织及其癌旁正常组织中的let-7、K-ras基因。结果 let-7基因在非小细胞肺癌组织中的表达量为0.761 6±0.388 3,低于癌旁正常组织的2.279 0±1.163 1（P〈0.01）,K-ras基因在非小细胞肺癌组织中的表达量为3.296 6±1.328 4,高于癌旁正常组织的1.387 3±0.681 2（P〈0.01）。非小细胞肺癌组织中let-7与K-ras基因的表达呈负相关（r=-0.834 3,P〈0.01）。结论非小细胞肺癌组织中let-7表达下降而K-ras基因表达上升,两者共同参与了非小细胞肺癌的发生、发展过程。     

老年非小细胞肺癌生存素基因表达与微血管密度

目的探讨老年非小细胞肺癌中生存素(Survivin)基因表达及其与微血管密度(MVD)的关系。方法应用免疫组织化学方法(SP法)检测36例非小细胞肺癌(NSCLC)中生存素基因表达水平及其与临床病理特征的关系,分析生存素基因表达与MVD的相互关系。结果肺癌患者生存素蛋白表达水平639%(23/36)明显高于癌旁组织(P<005),随着生存素表达强度的增加MVD逐渐增高,生存素表达与MVD明显相关(F=9691,P<0005)。结论肺癌组织中生存素蛋白表达显著增高,可以作为肺癌临床诊断的可靠指标,生存素基因的过度表达与肺癌组织的微血管密度有关,生存素基因参与了肿瘤的血管生成。     

MDR1介导LncRNAFENDRR对非小细胞肺癌细胞特性的影响及机制研究

目的探究多耐药基因1(MDR1)介导的长链非编码RNA FENDRR(LncRNA FENDRR)对非小细胞肺癌细胞特性的影响,并探讨其作用机制。方法选择非小细胞肺癌患者癌组织标本及癌旁组织标本,对比非小细胞肺癌组织及癌旁组织中的FENDRR基因表达差异,选择A549细胞系,分为空白对照组和FENDRR组,对比两组细胞的增殖活力及凋亡情况。结果与癌旁组织相比,FENDRR在非小细胞肺癌组织中呈现明显低表达(P0.05); FENDRR表达与非小细胞肺癌分化程度及T分期具有相关性,癌细胞分化程度越低、T分期越高,FENDRR表达越低(P0.05),与M、N分期无关(P0.05);与空白对照组相比,FENDRR组细胞中mRNA表达明显升高,细胞迁移能力及侵袭能力均明显降低,同时A549细胞凋亡率明显上升(P0.05)。结论 LncRNAFENDRR与非小细胞肺癌的发生、发展密切相关,其过表达可抑制癌细胞增殖,降低癌细胞迁移与侵袭,促进癌细胞凋亡。     

肺癌组织中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体的表达及其临床意义

目的　探讨不同类型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAILR )在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法　采用RT PCR检测 40例肺癌组织、对应癌旁非癌肺组织以及非小细胞肺癌细胞株A5 49不同类型TRAILR的表达 ,并结合临床资料进行分析。结果　 40例肺癌组织表达死亡受体DR4,3 5例肺癌组织表达死亡受体DR5 ;40例癌旁肺组织均表达死亡受体DR5和DR4,3 3例肺癌组织不表达诱捕受体DcR1,2 5例肺癌组织不表达DcR2 ,而 40例癌旁肺组织均表达DcR。肺癌细胞株A5 49中有DR5、DR4、DcR2的表达 ,但DcR1表达缺失。肺癌组织中DR的表达水平与肿瘤的分期有关 ,Ⅲ期肿瘤DR的表达显著低于Ⅰ /Ⅱ期DR表达 (P <0 .0 5 )。DR的表达与病人的性别、年龄、病理学分型无关。结论　肺癌存在TRAILR类型的表达差异 ,诱捕受体 (特别是DcR1)的表达缺失为TRAIL治疗肺癌提供了靶点     

T-钙黏蛋白基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 研究T-钙黏蛋白(CDH13)基因在非小细胞肺癌组织中的表达水平及其意义.方法 采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测该基因在肺癌组织中的表达水平.结果 在35例非小细胞肺癌患者癌组织中CDH13的表达较正常肺组织明显减低(P＜0.05);CDH13在非肺癌患者切除肺组织中的表达与正常组织无明显异常(P＞0.05).结论 在非小细胞肺癌中基因CDH13呈明显低表达,提高CDH13水平将有望成为提高非小细胞肺癌愈后的新治疗方向.     

NORE1A基因在肺癌组织中的表达缺失及相关因素分析

目的探讨抑癌基因NORE1A在肺癌组织中的表达缺失情况及其临床意义。方法采用RT-PCR技术检测46例肺癌组织及相应癌旁正常组织中NORE1A基因的表达缺失情况。结果(1)NORE1A基因在正常肺组织均有表达,在肺癌组织中表达缺失率为45%;(2)NORE1A基因在不同病理细胞类型标本中的表达缺失率不存在明显差异,P>0.05;(3)吸烟组和非吸烟组间NORE1A基因的表达缺失比较差异无显著性,吸烟组缺失率为48%,非吸烟组为42%(P>0.05);(4)淋巴结转移组的NORE1A基因的表达缺失率高于无淋巴结转移组标本,分别为60%和18%(P<0.01)。结论不能认为吸烟是导致NORE1A基因失活的一个具有重要影响的因素。NORE1A基因的表达缺失与肺癌发生有关,不仅发生于早期肺癌,而且可能在其晚期亦存在继发性大量失活。     

中国人P53基因内含子1内VNTR区的多态性及其在肺癌研究中的应用

目的：检测抑癌基因P53内含子内的数目可变的串联重复序列（VNTR）在中国汉族人中的多态性，为其应用于P53基因染合性缺失（LOH）的检测提供依据，探讨P53基因的LOH与肺癌的关系。方法：常规方法提取150例无亲属关系健康中国人外周血标本及33例肺癌病人肿瘤组织及癌旁正常组织标本DNA。PCR方法扩增P53内含子1内的VNTR区，产物进行15％非变性聚炳烯酰胺凝胶电泳。结果：150例健康中国人中，102例（68％）表现VNTR区等位基因的杂合型；33例肺癌病人癌旁正常组织中，29例（87．8％）为杂合型，其中6例与之相对应的肿瘤组织（20．7％）为P53基因的LOH；小细胞癌P53基因的LOH率（75％）高于非小细胞肺癌（12．5％）；P53基因的LOH与年龄，分期有预后无明显关系，结论：中国人P53基因内含子1的VNTR区有高度多态性，杂合型达68％，可用于P53基因的LOH的检测。     

传导信号胞质蛋白4在非小细胞肺癌患者中表达及与临床生物学行为关系

目的研究传导信号胞质蛋白(SMAD)4在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,探讨其与NSCLC临床生物学关系。方法采用逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)、荧光定量(FQ)-PCR和蛋白质印迹法(Western印迹)检测54例NSCLC组织及相应癌旁组织和57例非肿瘤性肺组织中SMAD4 mRNA和蛋白的表达,分析其与NSCLC临床生物行为关系。结果 RT-PCR和FQ-PCR结果显示肺癌组织SMAD4 mRNA表达量均显著低于癌旁组织及对照组(1.28±0.25比3.94±0.13比5.47±1.29,0.41±0.05比1.04±0.10比2.59±0.35,均P<0.01);Western印迹结果显示肺癌组织SMAD4蛋白表达显著低于癌旁组织及对照组(0.61±0.10比2.18±0.61比4.51±0.98,P<0.01)。RT-PCR和Western印迹结果提示肺癌组织SMAD4 mRNA和蛋白阳性表达率(13/54和12/54)显著低于癌旁组织(32/54和34/54)及对照组(48/54和47/54)(均P<0.01)。肺癌SMAD4表达下调或缺失与肿瘤类型、病理分化程度、淋巴结转移和临床TNM分期有关(P<0.05)。结论 SMAD4的低表达或缺失与NSCLC的发生、发展及转移密切相关。     

长链非编码RNA EXOC7在非小细胞肺癌中的表达及临床意义分析

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)EXOC7在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法本研究纳入2015年1月~2018年5月收治的75例非小细胞肺癌患者,采用实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测lncRNA EXOC7在非小细胞肺癌组织及对应癌旁组织中的表达,比较癌及癌旁组织中lncRNA EXOC7的表达差异性,并分析癌组织中lncRNA EXOC7的表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果非小细胞肺癌组织中lncRNA EXOC7的相对表达水平(7.88±1.04)明显高于癌旁组织(1.33±0.79),差异具有统计学意义(P<0.001)。不同性别、年龄、病理类型、组织分化程度的非小细胞肺癌患者组织中lncRNA EXOC7的表达无明显差异性(P>0.05),但不同TNM分期、淋巴结转移状况与非小细胞肺癌患者组织中lncRNA EXOC7的表达存在显著差异性(P<0.05)。lncRNA EXOC7高表达组无进展生存期[(10.09±1.93)个月]明显短于低表达组[(19.77±2.16)个月],差异有统计学意义(P<0.05)。lncRNA EXOC7高表达组总生存期[(14.82±2.05)个月]明显短于低表达组[(26.18±2.87)个月],差异有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA EXOC7在非小细胞肺癌组织中表达上调,其可能作为一种促癌因子参与非小细胞肺癌的发生及发展过程,并与患者的不良预后有关。     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8在肺癌组织中的表达及对肺癌细胞增殖、迁移能力的影响

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)α诱导蛋白(TNFAIP)8在非小细胞肺癌组织中的表达情况及其对肺癌A549细胞增殖和迁移能力的影响。方法用RT-PCR和Western印迹检测非小细胞肺癌组织与癌旁组织中TNFAIP8 mRNA和蛋白表达的差异。合成TNFAIP8特异性siRNA,转染肺癌A549细胞,RT-PCR和Western印迹检测TNFAIP8-siRNA对细胞中TNFAIP8 mRNA和蛋白表达的影响,MTT检测细胞增殖情况,细胞划痕实验检测细胞迁移情况,Western印迹检测基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达情况。结果非小细胞肺癌组织中TNFAIP8 mRNA和蛋白表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01)。与空白对照组相比,转染TNFAIP8-siRNA的肺癌A549细胞TNFAIP8 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01),细胞增殖和迁移能力显著降低(P<0.01),细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。阴性对照组与空白对照组之间各项检测指标无显著差异(P>0.05)。结论 TNFAIP8高表达与非小细胞肺癌的发生密切相关,沉默TNFAIP8的表达能够抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移能力。     

肺癌患者GST-π基因表达及活力测定的临床意义

采用RT-PCR法、化学比色法对60例经纤维支气管镜活检的肺癌组织及20例非癌组织进行酸性各胱甘肽S-转移酶(GST-π)检测,并动态检测肺癌患者化疗前后血浆GST-π活力。结果显示GST-π在肺癌组织中的表达阳性率45％(27/60)明显高于非癌组织的表达阳性率13.3％(3/20),腺癌阳性率最高64.7％(11/17),鳞状细胞癌次之45.5％(15/33)、小细胞未分化癌无阳性表达。肺癌组织中GST-π的表达与血浆GST-π活力呈正相关(P<0.05)。肺癌患者血浆GST-π水平明显高于对照组,与疗效呈正相关(P<0.05)。肺癌GST-π基因表达及化疗前后血浆GST-π活力变化对肺癌化疗方案的选择及疗效判断均有一定指导意义。     

EMMPRIN在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的 研究肿瘤转移基因EMMPRIN在非小细胞肺癌癌组织和癌旁组织中的表达及意义.方法 采用RT-PCR检测80例非小细胞肺癌癌组织和40例癌旁正常组织中EMMPRIN的表达.结果 EMMPRIN在肺癌细胞中表达阳性率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05),在NSCLC中,EMMPRIN表达随着肿瘤病理分级和TNM分期增加而有增高趋势.EMMPRIN的表达与有淋巴结转移呈正相关(P<0.05).结论 EMMPRIN参与了NSCLC的发生发展过程,EMMPRIN的表达可作为判断NSCLC病理分级及转移和预后的指标,为临床诊断和治疗提供依据.     

非小细胞型肺癌癌组织中GST—Pi与癌相关基因表达的意义

肺癌的发生、发展是一个涉及多基因的变化过程 ,原癌基因激活和抗癌基因失活起关键的作用。其中原癌基因激活以 c- myc、K- ras等过量表达为主 ,抗癌基因失活则以 P53基因突变为特征。我们在研究胎盘型谷胱甘肽硫转移酶 ( GST- Pi)超微结构定位和凋亡相关基因 bcl- 2、bax表达的基础上 ,采用免疫组化方法检测非小细胞性肺癌中 GST- Pi与癌相关基因 c- myc和 P53 (突变型 )的表达 ,旨在探讨肺癌组织中 GST- Pi与癌相关基因的关系。1　资料与方法本组非小细胞型肺癌患者 2 3例 ,其中鳞癌 1 2例 ,腺癌 1 1例。取手术切除的癌组织制成切片…     

LKB1和VEGFR_2在不同分期非小细胞肺癌中的表达

目的检测LKB1、VEGFR2在不同TNM分期非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况。方法选取88例经手术治疗的不同TNM分期的非小细胞肺癌患者,切取癌组织及癌周5 cm以上无转移的正常肺组织,应用免疫组化方法测定LKB1和VEGFR2的表达情况。结果 LKB1和VEGFR2在肺癌组织及正常肺组织中均有表达。LKB1蛋白表达率在正常肺组织中明显高于癌组织(P0.01),VEGFR2在癌组织的表达率显著高于正常肺组织(P0.01);LKB1和VEGFR2在不同分期肺癌组织中的表达有显著差异(P0.05)。结论 LKB1和VEGFR2在非小细胞肺癌中的表达情况可能帮助判断非小细胞肺癌的分期及预后。     

COX-2基因mRNA在非小细胞肺癌中的表达

目的 检测非小细胞肺癌COX-2基因 mRNA的表达水平并探讨其临床意义.方法 运用两步法RT-PCR技术检测83例非小细胞肺癌组织和24例支良性非癌肺组织中COX-2 基因mRNA的表达水平.结果 83例肺癌组织中检测出44例(53.01%)阳性,24例非癌肺组织中检测出2例(8.33%)阳性,其中在腺癌表达率67.31%显著高于鳞癌表达率35.48%,差异有统计学意义(P=0.005),淋巴结转移组中表达率(65.85%)显著高于无淋巴结转移组(42.86%)(P=0.036).低分化组中表达率(85.00%)显著高于高、中分化组表达率(55.56%)(P=0.018).结论 COX-2基因在肺癌组织与非癌肺组织中mRNA表达差异有统计学意义(P=0.000),COX-2 表达与肺癌病理类型密切相关,揭示了COX-2 可以作为判断病情和预后评价的指标.     

非小细胞肺癌组织中WWOX蛋白表达及意义

目的观察非小细胞肺癌中包含氧化还原酶的ww域（WWOX）蛋白的表达,探讨其与临床病理参数的关系。方法采用免疫组化法检测79例非小细胞肺癌组织以及30例癌旁组织中WWOX蛋白,并分析其与非小细胞肺癌各临床病理参数的关系。结果WWOX蛋白在非小细胞肺癌组织的阳性率为16.4%（13/79）,较癌旁肺组织的90%（27/30）显著减低（P〈0.05）。WWOX蛋白表达与是否有淋巴结转移显著相关（P〈0.01）。结论WWOX蛋白表达在肺癌组织中表达减少或缺失,可能与肺癌的发生发展有关。