白藜芦醇甙对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

背景脑缺血时大量的自由基生成,使脑内脂质过氧化作用加强,导致细胞及细胞屏障损害,神经元坏死或凋亡,引起和加重缺血脑组织水肿.目的通过观察白藜芦醇甙对大鼠局灶性脑缺血后脑组织自由基、脂质过氧化物含量、脑含水量及病理形态学的影响,探讨其对脑缺血的保护作用.设计随机对照实验.单位重庆医科大学附属第二医院ICU和重庆医科大学附属儿童医院儿科医学研究所.材料实验于2001-10/2002-07在重庆医科大学儿科医学研究所完成.将48只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为3组,每组16只.缺血前白藜芦醇甙处理组缺血前30 min,经颈外静脉注射6 g/L白藜芦醇甙(12 mg/kg)溶液.假手术组大鼠仅在麻醉状态下分离右侧颈总动脉,不予阻断血流.缺血模型组建立大鼠右侧大脑中动脉梗死模型.假手术组、缺血模型组与缺血前白藜芦醇甙处理组以同样方式、剂量静脉给予生理盐水.大鼠大脑中动脉阻塞后2 h在麻醉状态下快速断头取脑.每组随机选取8只大鼠测定脑组织含水量,其余8只大鼠测定脑组织自由基及脂质过氧化物含量.方法应用干-湿重法测脑组织含水量,以硫代巴比妥酸法检测丙二醛水平、黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活性、化学比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶活性、化学比色法检测一氧化氮合酶活性,以比色法测定过氧化氢酶活性,并按Folin-酚试剂法标定蛋白含量,所有操作均严格按说明书进行.主要观察指标①各组大鼠脑组织含水量.②各组大鼠脑组织中丙二醛含量,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶及一氧化氮合酶活性.③各组大鼠脑组织病理学观察.结果48只大鼠均进入结果分析.①缺血前白藜芦醇甙处理组脑组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性明显高于缺血模型组[(226.43±8.69),(193.37 ±11.14)NU/mg;(244.38±12.34),(211.71±16.50)μkat/g;(59.85±9.67),(35.51±7.67)μkat/g,(q=4.38～10.45,P＜0.01)].②缺血前白藜芦醇甙处理组脑组织中丙二醛含量、脑含水量明显低于缺血模型组[(6.38±0.54),(8.63±0.78)μmol/g;(78.72±0.43),(80.41±0.64),%,P＜0.01].③白藜芦醇甙有降低缺血脑组织中一氧化氮合酶活性的趋势,但与缺血模型组非常接近[(12.00±1.00),(12.84±1.17)μkat/g,P＞0.05].④病理学组织检查显示,白藜芦醇甙能减轻缺血所导致的脑水肿.结论白藜芦醇甙能减轻脂质过氧化反应,降低缺血脑组织中丙二醛含量,提高体内超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性,抑制或减轻脑水肿形成,保护细胞膜功能,减轻缺血神经元功能损害,对局灶脑缺血性脑损伤具有明显的保护作用.     

白藜芦醇对小鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制

目的:探讨不同剂量白藜芦醇对局灶性脑缺血后的神经保护作用及对脑内基质金属蛋白酶(matrixmetallopoteinases,MMPs)表达的影响。方法:实验于2003-11/2004-02在解放军第四军医大学西京医院神经外科研究所实验室分两部分进行。60只健康雄性昆明白小鼠,体质量18～22g。第1部分中随机分为4组,分别为白藜芦醇10,30,60mg/kg强饲预治疗组及单纯缺血组,第2部分随机分为白藜芦醇30mg/kg及单纯缺血组。各组均为10只。采用线段血管内栓塞大脑中动脉(MCA0)获得小鼠脑缺血模型,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色显示脑梗死范围,应用酶谱印记技术检测缺血后脑组织中MMPs活性。结果:各白藜芦醇强饲预治疗组的脑梗死体积和脑水肿程度均明显小于单纯缺血组犤(120±17)mm,(21.5±2.5)%犦,差异均有非常显著3性意义(P<0.01)。30mg/kg白藜芦醇强饲预治疗组的脑梗死体积和脑水肿程度犤(87±15)mm,(12.9±1.3)%犦明显小于10mg/kg组3犤(102±11)mm,(17.8±2.3)%,P<0.01犦,但与60mg/kg相比,无3明显差别犤(89±13)mm,(12.5±1.6)%,P>0.05犦。30mg/kg剂量3的白藜芦醇明显抑制了缺血后脑组织MMP-9的活性。结论:白藜芦醇具有脑保护作用,机制与对MMP-9的抑制有关。     

白藜芦醇苷对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的 研究白藜芦醇苷(PD)对大鼠局灶性脑缺血的保护机制。方法 采用改良的线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO)。将健康成年大鼠随机分为3组：假手术组、缺血模型组、缺血前PD处理组。测定脑组织含水量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)、过氧化氢酶(CAT)及一氧化氮合酶(NOS)活性，并进行病理组织学检查。结果 PD能明显提高缺血脑组织中SOD、GSH—Px、CAT活性，降低MDA含量，减轻脑水肿，并有降低缺血脑组织中NOS活性的趋势，病理组织学检查显示，PD能改善脑缺血造成的大鼠脑组织损伤。结论 PD对大鼠局灶性脑缺血有明显的保护作用，其机制可能是通过有效的拮抗自由基损伤，提高脑组织抗氧化能力来实现的。     

白藜芦醇对小鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制

目的：探讨不同剂量白藜芦醇对局灶性脑缺血后的神经保护作用及对脑内基质金属蛋白酶(matrix metallopoteinases，MMPs)表达的影响。方法：实验于2003-11／2004-02在解放军第四军医大学西京医院神经外科研究所实验室分两部分进行。60只健康雄性昆明白小鼠，体质量18～22g。第1部分中随机分为4组，分别为白藜芦醇10，30，60mg／kg强饲预治疗组及单纯缺血组，第2部分随机分为白藜芦醇30mg／kg及单纯缺血组。各组均为10只。采用线段血管内栓塞大脑中动脉(MCA0)获得小鼠脑缺血模型，2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色显示脑梗死范围，应用酶谱印记技术检测缺血后脑组织中MMPs活性。结果：各自藜芦醇强饲预治疗组的脑梗死体积和脑水肿程度均明显小于单纯缺血组[(120&;#177;17)mm^3，(21．5&;#177;2．5)％]，差异均有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。30mg／kg白藜芦醇强饲预治疗组的脑梗死体积和脑水肿程度[(87&;#177;15)mm^3，(12．9&;#177;1．3)％]明显小于10mg／kg组[(102&;#177;11)mm^3，(17．8&;#177;2．3)％，P&;lt;0．01]，但与60mg／h相比，无明显差别[(89&;#177;13)mm^3，(12．5&;#177;1．6)％，P&;gt;0．05]。30mg／k异剂量的白藜芦醇明显抑制了缺血后脑组织MMP-9的活性。结论：白藜芦醇具有脑保护作用，机制与对MMP-9的抑制有关。     

白藜芦醇对大鼠急性心肌缺血的保护作用

背景:白藜芦醇是一种广泛存在于葡萄、花生和多种药用植物中的多酚类化合物。现已明确白藜芦醇具有多种生物活性,如抗肿瘤,抗炎等。许多证据表明白藜芦醇具有防治心血管疾病的作用,但其机制并不明确。目的:观察白藜芦醇对大鼠急性心肌缺血的保护作用及其作用机制。设计:随机分组平行对照实验。单位:哈尔滨医科大学药学院药理教研室和黑龙江省生物医药重点实验室。材料:实验于2005-03/07在哈尔滨医科大学药学院完成。选用健康成年Wistar大鼠60只,体质量250～300g。随机将大鼠分为5组:假手术组,空白对照组,白藜芦醇低、中、高剂量组(5,15,45mg/kg),每组12只。方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血模型。假手术组:只穿线不结扎。白藜芦醇组:按5,15,45mg/kg剂量静脉注射白藜芦醇(购自湖南华光生物制品有限公司,生产批号:20050221,纯度≥99%)10min后结扎。模型组:静脉注射等量生理盐水10min后结扎。分别观察大鼠左冠状动脉前降支结扎前及结扎后1,5,10,15,30min标准Ⅱ导联心电图ST段的变化情况。心肌缺血6h后进行心肌红四氮唑染色确定心肌梗死面积;紫外分光光度法测定血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶活力,确定心肌损伤程度。采用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的d-UTP缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡指数;采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法检测凋亡相关基因Fas,Bcl-2及Bax的蛋白表达情况。计量资料差异比较采用t检验。主要观察指标:各组大鼠冠状动脉结扎后的ST段上移情况,血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶活力,心肌细胞凋亡指数,凋亡相关基因Fas,Bcl-2及Bax的蛋白表达情况比较。结果:大鼠60只均进入结果分析。①结扎后1,5,10min白藜芦醇中、高剂量组ST段抬高幅度明显低于模型组(P<0.05),结扎后15,30min白藜芦醇各剂量组ST段抬高幅度明显低于模型组(P<0.05),且该种作用呈剂量依赖性。②白藜芦醇各剂量组大鼠心肌梗死面积明显小于模型组(P<0.05),且该种作用呈剂量依赖性。③白藜芦醇组血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶水平明显低于模型组(P<0.05),且该种作用呈剂量依赖性。④模型组心肌细胞凋亡指数明显高于白藜芦醇各剂量组(P<0.05),模型组Bax和Fas蛋白阳性表达指数明显高于白藜芦醇中、高剂量组(P<0.05),Bcl-2蛋白阳性表达指数明显低于白藜芦醇中、高剂量组(P<0.05),且该种作用呈剂量依赖性。结论:白藜芦醇对结扎大鼠冠状动脉诱发的急性心肌缺血损伤具有保护作用,且该种作用呈剂量依赖性;白藜芦醇发挥心肌缺血保护作用的机制与其调节Fas,Bcl-2及Bax蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡有关。     

中药脑缺血合剂对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的:探讨中药脑缺血合剂对实验性脑缺血大鼠的保护作用。方法:雄性SD大鼠60只,随机分为假处理组、对照组、模型组及中药1、2、3组各10只,均采用线栓法制备局灶性脑缺血模型,假处理组仅参入手术过程,但不损伤血管。造模成功后,假处理组、模型组予生理盐水2ml灌胃,对照组给予血栓通胶囊0.25g/kg,中药1、2、3组分别给予脑缺血合剂5、10及20g/kg灌胃,6组均每日2次。结果:治疗30d后,检测脑缺血组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量及脑指数,与假处理组比较,其它各组脑指数及MDA含量均上升,SOD含量下降(P<0.01),模型组与其它组比较表现更明显(P<0.05)。中药3组与对照组各项指标比较均接近。中药1组SOD含量明显低于对照组(P<0.05)。结论:脑缺血合剂对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,且疗效与剂量的高低有关。     

白藜芦醇苷对全脑缺血再灌注大鼠脑保护的剂量依赖性作用

目的：观察白藜芦醇苷注射液对大鼠全脑缺血再灌注损伤脑保护作用的剂量依赖性关系，并以己酮可可碱作阳性对照。方法：实验于2004-06在南方医科大学基础部药理教研室完成。选择SD大鼠132只，随机分6组：假手术组、模型组、白藜芦醇苷注射液7.5，15，30mg／kg组，己酮可可碱16．5mg／kg组，每组22只。各药物组均舌下静脉给药，1次／d，连续2d，假手术组和模型组给予生理盐水注射液5mL／kg。给药第3天，将各组大鼠腹腔注射麻醉，动脉夹结扎双侧颈总动脉，缺血1h后经舌下静脉再注射各剂量药物或生理盐水，继续缺血1h后解除动脉夹实施再灌注，缝合切口。假手术组除不结扎外，其余步骤同上。于再灌注24h时各组取12只测定脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量评估脂质过氧化和氧自由基水平，各组取10只大鼠测量脑组织含水量评估脑水肿情况。结果：132只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量：模型组脑组织超氧化物歧化酶活性明显低于假手术组[（1390.3&;#177;76.2），（1853．7&;#177;64．0） μkat／g]，丙二醛含量高于假手术组[（92．33&;#177;13．05），（65．76&;#177;8．56） μmol／g，P〈0．01）]，白藜芦醇苷注射液各剂量组均能明显升高脑组织中超氧化物歧化酶活性[（1620．3&;#177;68．2），（1793．7&;#177;99．4），（2023．8&;#177;89．2） μkat／g]，降低丙二醛含量[（87．4&;#177;4．33），（70．1&;#177;2．35），（66．3&;#177;2．81） μmoL／g，（P〈0．01）]，且呈剂量依赖趋势。②各组大鼠脑组织含水量：模型组大鼠大脑右半球含水量明显高于假手术组及己酮可可碱16．5mg／kg组、白藜芦醇苷注射液7．5，15，30mg／kg组[（79．32&;#177;0．65）％，（77.36&;#177;1.33）％，（78．69&;#177;0．64）％，（78．54&;#177;1．32）％，（78．12&;#177;1．29）％，（77．63&;#177;0．99）％，（P〈0．01）]。各给药组大鼠大脑右半球含水量亦较假手术组低，同时有呈剂量依赖性的趋势（P〈0．05～0．01）。结论：白藜芦醇苷注射液能显著减轻脑缺血再灌注损伤引起的氧自由基损害，减少过氧化脂质的形成，并且可以减轻脑水肿，从而改善脑组织微循环及缺血、缺氧，作用强度有剂量依赖关系。以白藜芦醇苷注射液30mg／kg组治疗效果最好。     

黄芪甲甙对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及机制研究

【目的】探讨黄芪甲甙对局灶性脑缺血的保护作用及其可能的机制。【方法】40只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、低剂量干预组(10mg/kg.d)和高剂量干预组[20 mg/(kg.d)],每组10只。采用大脑中动脉阻塞(MACO)法制备大鼠局灶性脑缺血模型,术后24h观察神经行为学变化并评分,然后处死动物并测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)活性和丙二醛(MDA)含量,脑梗死区重量用TTC染色法测定,用原位末端标记法(TUNEL)检测脑组织细胞凋亡指数(AI)。【结果】与模型组比较,低、高剂量干预组神经学评分和脑梗死组织重量明显降低,差异有显著性(P<0.05或0.01)。低、高剂量干预组脑组织SOD、GSH活性增加,MDA含量及AI降低,与模型组相比,差异均有显著性(P<0.05或0.01)。【结论】黄芪甲甙对大鼠局灶性脑缺血有明显的保护作用,其机制可能与抗自由基及抑制细胞凋亡有关。     

白藜芦醇苷对全脑缺血再灌注大鼠脑保护的剂量依赖性作用

目的:观察白藜芦醇苷注射液对大鼠全脑缺血再灌注损伤脑保护作用的剂量依赖性关系,并以己酮可可碱作阳性对照。方法:实验于2004-06在南方医科大学基础部药理教研室完成。选择SD大鼠132只,随机分6组:假手术组、模型组、白藜芦醇苷注射液7.5,15,30mg/kg组,己酮可可碱16.5mg/kg组,每组22只。各药物组均舌下静脉给药,1次/d,连续2d,假手术组和模型组给予生理盐水注射液5mL/kg。给药第3天,将各组大鼠腹腔注射麻醉,动脉夹结扎双侧颈总动脉,缺血1h后经舌下静脉再注射各剂量药物或生理盐水,继续缺血1h后解除动脉夹实施再灌注,缝合切口。假手术组除不结扎外,其余步骤同上。于再灌注24h时各组取12只测定脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量评估脂质过氧化和氧自由基水平,各组取10只大鼠测量脑组织含水量评估脑水肿情况。结果:132只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量:模型组脑组织超氧化物歧化酶活性明显低于假手术组犤(1390.3±76.2),(1853.7±64.0)μkat/g犦,丙二醛含量高于假手术组犤(92.33±13.05),(65.76±8.56)μmol/g,(P<0.01)犦,白藜芦醇苷注射液各剂量组均能明显升高脑组织中超氧化物歧化酶活性犤(1620.3±68.2),(1793.7±99.4),(2023.8±89.2)μkat/g犦,降低丙二醛含量犤(87.4±4.33),(70.1±2.35),(66.3±2.81)μmol/g,(P<0.01)犦,且呈剂量依赖趋势。②各组大鼠脑组织含水量:模型组大鼠大脑右半球含水量明显高于假手术组及己酮可可碱16.5mg/kg组、白藜芦醇苷注射液7.5,15,30mg/kg组犤(79.32±0.65)%,(77.36±1.33)%,(78.69±0.64)%,(78.54±1.32)%,(78.12±1.29)%,(77.63±0.99)%,(P<0.01)犦。各给药组大鼠大脑右半球含水量亦较假手术组低,同时有呈剂量依赖性的趋势(P<0.05～0.01)。结论:白藜芦醇苷注射液能显著减轻脑缺血再灌注损伤引起的氧自由基损害,减少过氧化脂质的形成,并且可以减轻脑水肿,从而改善脑组织微循环及缺血、缺氧,作用强度有剂量依赖关系,以白藜芦醇苷注射液30mg/kg组治疗效果最好。     

白藜芦醇苷对大鼠慢性常压低氧性肺动脉高压的防治作用

目的 :观察白藜芦醇苷 (PD )对大鼠慢性常压低氧性肺动脉高压的防治作用并探讨其作用机制。方法 :2 9只健康SD大鼠随机分为正常对照组、单纯低氧组和低氧加白藜芦醇苷 (PD )组。右心导管法检测大鼠平均肺动脉压力 (mPAP) ,观察右室 /左室 室间隔比值 (R/L S) ,微量滴定法、免疫生化法及化学发光法检测血浆和肺匀浆中磷脂酶A2 (PLA2 )活性、血栓素B2 (TXB2 )、6 酮 前列腺素1α(6 k PGF1α)、丙二醛 (MDA)含量及超氧化物歧化酶 (SOD)活性的变化。结果 :与单纯低氧组比较 ,应用PD 2 1d后 ,mPAP从 (4 13± 0 44 )kPa降至 (3 48± 0 3 8)kPa (P <0 0 1) ,R/L S由 0 3 6± 0 0 5降至 0 3 1± 0 0 3 (P <0 0 1) ;血浆及肺匀浆中PLA2 活性、TXB2 和 6 k PGF1α含量、MDA浓度及SOD活性改变均有显著性差异。结论 :PD可有效防治慢性常压低氧性肺动脉高压 ,其机制与抑制PLA2 活性及其相关炎症介质和降低自由基的毒性等作用有关     

葛根素对大鼠局灶性脑缺血损伤的神经保护作用

目的:探讨葛根素对缺血性脑损伤大鼠脑内保护性蛋白转化生长因子β1,以及抑制细胞凋亡和坏死的膜相关蛋白Bcl-2的影响,并以曲克芦丁为阳性对照。方法:实验于2004-09/12在大连医科大学动物实验中心进行。取72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血对照组、葛根素组曲克芦丁组4组各18只。①造模:线栓法制作大脑中动脉局灶性脑缺血模型,阻断大脑中动脉血流2h再灌注24h。假手术组不栓塞血管。②给药:葛根素组在术后即刻和术后12h腹腔注射葛根素150mg/kg(溶于3mL生理盐水中),曲克芦丁组在上述时间腹腔注射曲克芦丁125mg/kg,假手术组和缺血对照组在术后给予3mL生理盐水。③观察指标:再灌注24h时进行神经行为学评分(5分制,评分越高,说明神经功能缺损越严重);TTC染色测量脑梗死体积;免疫组化染色观察Bcl-2和转化生长因子β1蛋白的表达。结果:60只大鼠进入结果分析。①神经行为学评分结果:缺血对照组明显高于葛根素组和曲克芦丁组(3.7±0.5,2.0±0.6,2.7±0.5,P<0.01),葛根素组低于曲克芦丁组(P<0.05)。②Bcl-2阳性细胞率:葛根素组高于曲克芦丁组和缺血对照组(0.68±0.11,0.43±0.08,0.39±0.04,P<0.01)。③转化生长因子β1阳性细胞率:葛根素组高于曲克芦丁组和缺血对照组(0.50±0.08,0.33±0.09,0.26±0.05,P<0.05)。④脑梗死体积:缺血对照组明显大于其他组[(209±28)mm3,P<0.01],葛根素组小于曲克芦丁组[(130±17),(184±21)mm3,P<0.05]。结论:葛根素对短暂性局灶性脑缺血损伤有明显的保护作用,其效果优于曲克芦丁。其主要作用机制可能是通过上调转化生长因子β1和Bcl-2蛋白的表达,发挥神经保护作用。     

葛根素对大鼠局灶性脑缺血损伤的神经保护作用

目的：探讨葛根素对缺血性脑损伤大鼠脑内保护性蛋白转化生长因子β1，以及抑制细胞凋亡和坏死的膜相关蛋白Bcl2的影响，并以曲克芦丁为阳性对照。方法：实验于2004—09／12在大连医科大学动物实验中心进行。取72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血对照组、葛根素组曲克芦丁组4组备18只。①造模：线栓法制作大脑中动脉局灶性脑缺血模型，阻断大脑中动脉血流2h再灌注24h。假手术组不栓塞血管。②给药：葛根素组在术后即刻和术后12h腹腔注射葛根素150mg／kg（溶于3mL生理盐水中），曲克芦丁组在上述时间腹腔注射曲克芦丁125mg／kg，假手术组和缺血对照组在术后给予3mL生理盐水。⑧观察指标：再灌注24h时进行神经行为学评分（5分制，评分越高，说明神经功能缺损越严重）；TTC染色测量脑梗死体积；免疫组化染色观察Bcl2和转化生长因子β1蛋白的表达。结果：60只大鼠进入结果分析。①神经行为学评分结果：缺血对照组明显高于葛根素组和曲克芦丁组（3．7&;#177;0．5，2．0&;#177;0．6，2．7&;#177;0．5，P〈0．01），葛根素组低于曲克芦丁组（P〈0．05）。②Bcl2阳性细胞率：葛根素组高于曲克芦丁组和缺血对照组（0．68&;#177;0．1l，0．43&;#177;0．08，0．39&;#177;0．04，P〈0．01）。⑧转化生长因子β1阳性细胞率：葛根素组高于曲克芦丁组和缺血对照组（0．50&;#177;0．08，0．33&;#177;0．09，0．26&;#177;0．05，P〈0．05）。④脑梗死体积：缺血对照组明显大于其他组[（209&;#177;28）mm^3，P〈0．0l]，葛根素组小于曲克芦丁组[（130&;#177;17），（184&;#177;21）mm^3，P〈0．05]。结论：葛根素对短暂性局灶性脑缺血损伤有明显的保护作用，其效果优于曲克芦丁。其主要作用机制可能是通过上调转化生长因子β1和Bcl2蛋白的表达，发挥神经保护作用。     

丹参对局灶性脑缺血大鼠氧化应激反应的保护效应

目的:探讨丹参注射液对大鼠局灶性脑缺血后氧自由基损伤的保护作用及其最佳剂量。方法:实验于2004-10-05/12-19在锦州医学院科学实验中心完成。将SD大鼠60只,随机均分为假手术组、模型组、丹参13.5g/kg组,4.5g/kg组1.5g/kg组,每组12只。除正常组不插入线栓外,其余4组均采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,术前3d及30min分别给予丹参3个剂量组腹腔注射丹参13.5g/kg,4.5g/kg,1.5g/kg。术后24h用5级评分法判定神经功能缺损,生化法测定脑组织匀浆中超氧化物歧化酶、丙二醛及病理组织切片的变化。结果:经补充60只大鼠进入结果分析。①模型组神经功能缺损评分显著高于假手术组[2.50±0.80,0.00,P<0.01];丹参13.5g/kg组,4.5g/kg组,1.5g/kg组神经功能缺损评分显著低于模型组[(1.67±0.65),(1.58±0.52),(1.50±0.80),(2.50±0.80),P<0.05],其中以1.5g/kg组最为显著(P<0.01)。②丹参13.5g/kg组,4.5g/kg组,1.5g/kg组与模型组相比,海马区神经细胞肿胀程度明显减轻,且海马CA1区神经细胞存活数明显增多[(75.3±4.1)/高倍视野,(76.3±5.0)/高倍视野,(82.5±7.1)/高倍视野,(62.8±6.8)/高倍视野,P<0.01]。③丹参13.5g/kg组,4.5g/kg组,1.5g/kg组均能明显增强脑组织中总超氧化物歧化酶活性,与模型组比较有显著差异[(55.32±6.39),(50.55±5.87),(51.44±7.06),(39.28±5.67)U/mg;P<0.01]。丹参1.5g/kg组与丹参13.5g/kg组,4.5g/kg组比较,显著增强锰超氧化物歧化酶的活性[(33.90±5.10),(34.13±3.85),(42.49±2.61)U/mg;P<0.05]。④丙二醛含量:丹参4.5g/kg组,13.5g/kg组均能明显降低丙二醛含量,与模型组比较有显著差异[(11.13±5.49),(11.73±6.87),(21.54±10.50)μmol/g;P<0.05],以1.5g/kg组更为显著[(9.96±4.08)μmol/g,P<0.01]。结论:丹参可减少自由基的生成,对神经细胞的氧化损伤具有保护作用,且以小剂量组的保护作用更加明显,其作用机制可能与增强锰超氧化物歧化酶的活性有关。     

丹参对局灶性脑缺血大鼠氧化应激反应的保护效应

目的：探讨丹参注射液对大鼠局灶性脑缺血后氧自由基损伤的保护作用及其最佳剂量。 方法：实验于2004-10-05／12-19在锦州医学院科学实验中心完成。将SD大鼠60只，随机均分为假手术组、模型组、丹参13．5g／kg组，4．5g／kg组，1．5g/kg组，每组12只。除正常组不插入线栓外，其余4组均采用线柃法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型，术前3d及30min分别给予丹参3个剂量组腹腔注射丹参13，5g／kg，4.5g／kg，1．5g／kg。术后24h用5级评分法判定神经功能缺损。生化法测定脑组织匀浆中超氧化物歧化酶、丙二醛及病理组织切片的变化。 结果：经补充60只大鼠进入结果分析。①模型组神经功能缺损评分显著高于假手术组[2．50&;#177;0．80，0．00，P〈0．01]；丹参13．5g／kg组，4．5g／kg组，1.5g／kg组神经功能缺损评分显著低于模型组[（1．67&;#177;0．65），（1．58&;#177;0．52），（1．50&;#177;0．80），（2．50&;#177;0．80）。P〈O．05]，其中以1．5g／kg组最为显著（P（O．01）。②丹参13．5g／kg组，4．5g／kg组，1．5g／kg组与模型组相比，海马区神经细胞肿胀程度明显减轻，且海马CAI区神经细胞存活数明显增多[（75．3&;#177;4.1）／高倍视野，（76．3&;#177;5．0）／高倍视野，（82．5&;#177;7．1）／高倍视野，（62．8&;#177;6．8）／高倍视野，P〈0．01]。③丹参13．5g／kg组，4．5g/kg组。1．5g／kg组均能明显增强脑组织中总超氧化物歧化酶活性，与模型组比较有显著差异[（55．32&;#177;6．39），（50．55&;#177;5．87），（51．44&;#177;7．06），（39．28&;#177;5．67）U／mg；P〈0.01]。丹参1．5g／kg组与丹参13．5g／kg组。4.5g／kg组比较。显著增强锰超氧化物歧化酶的活性[（33．90&;#177;5．10）。（34．13&;#177;3．85），（42．49&;#177;2．61）U／mg；P〈0．051。④丙二醛含量：丹参4．5g/kg组，13.5g／kg组均能明显降低丙二二醛含量，与模型组比较有显著差异[（11．13&;#177;5．49），（11．73&;#177;6．87），（21.54&;#177;10.50）μmol／g；P〈0．05]，以1．5g/kg组更为显著[（9．96&;#177;4．08）μmol／g，P〈0．01]。 结论：丹参可减少自由基的生成，对神经细胞的氧化损伤具有保护作用，且以小剂量组的保护作用更加明显，其作用机制可能与增强锰超氧化物歧化酶的活性有关。     

赤芍总苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护效果

目的:观察赤芍总苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用并分析可能的作用机制。方法:实验于2005-11/2006-01在安徽医科大学基础医学院生理教研室与药理学教研室完成。健康Wistar大鼠100只,随机数字表法分成5组:假手术组,模型组,赤芍总苷3mg/kg组,赤芍总苷6mg/kg组,阳性药物组(灌胃灯盏花素),每组20只。赤芍总苷3mg/kg组、赤芍总苷6mg/kg组和阳性药物组分别灌胃相应的药物,给药容积为5mL/kg体质量,1次/d,连续6d。假手术组与模型组分别灌胃等量的生理盐水。应用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,观察缺血2h再灌注24h后赤芍总苷对大鼠脑组织梗死面积(梗死百分比=梗死灶质量/右侧大脑半球质量×100%)、丙二醛含量及乳酸脱氢酶活性、Na -K -AT-Pase与Ca2 -ATPase活性的影响。结果:实验大鼠100只均进入结果分析。①实验大鼠脑组织梗死面积百分比:赤芍总苷3mg/kg组、赤芍总苷6mg/kg组、阳性药物组与模型组相比均减少[模型组(27.4±3.3)%,赤芍总苷3mg/kg组(23.3±3.6)%,赤芍总苷6mg/kg组(18.2±5.3)%,阳性药物组(19.3±4.1)%,P<0.05～0.01]。②实验大鼠脑组织中丙二醛和乳酸脱氢酶含量:模型组与假手术组相比丙二醛含量升高,乳酸脱氢酶活性降低,赤芍总苷3mg/kg组、赤芍总苷6mg/kg组、阳性药物组与模型组相比,可降低脑组织中的丙二醛含量,增高脑组织中乳酸脱氢酶活性[丙二醛含量:假手术组(2.11±0.32)μmol/g,模型组(7.43±1.24)μmol/g,赤芍总苷3mg/kg组(3.14±0.77)μmol/g,赤芍总苷6mg/kg组(2.54±1.08)μmol/g,阳性药物组(2.86±0.83)μmol/g;乳酸脱氢酶活性:假手术组(55.84±3.50)μkat/g,模型组(20.50±2.17)μkat/g,赤芍总苷3mg/kg组(28.01±5.83)μkat/g,赤芍总苷6mg/kg组(44.34±4.50)μkat/g,阳性药物组(34.01±5.17)μkat/g,P<0.05～0.01]。③实验大鼠脑组织中Na -K -ATPase与Ca2 -ATPase活性:模型组与假手术组相比均降低,赤芍总苷3mg/kg组、赤芍总苷6mg/kg组、阳性药物组与模型组相比均升高[Na -K -ATPase活性:假手术组(21.54±4.98)mkat/g,模型组(13.32±3.42)mkat/g,赤芍总苷3mg/kg组(16.74±2.76)mkat/g,赤芍总苷6mg/kg组(20.58±2.16)mkat/g,阳性药物组(18.12±4.98)mkat/g;Ca2 -ATPase活性:假手术组(15.00±2.40)mkat/g,模型组(7.32±1.44)mkat/g,赤芍总苷3mg/kg组(9.36±2.40)mkat/g,赤芍总苷6mg/kg组(13.26±1.98)mkat/g,阳性药物组(11.40±1.80)mkat/g,P<0.05～0.01]。结论:赤芍总苷可降低局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑梗死面积百分比,抑制脂质过氧化反应,改善梗死后脑组织的能量代谢。     

赤芍总苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护效果

目的：观察赤芍总苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用并分析可能的作用机制。 方法：实验于2005-11／2006-01在安徽医科大学基础医学院生理教研室与药理学教研室完成。健康Wistar大鼠100只，随机数字表法分成5组：假手术组，模型组，赤芍总苷3mg／kg组，赤芍总苷6mg／kg组，阳性药物组（灌胃灯盏花素），每组20只。赤芍总苷3mg／kg组、赤芍总苷6ms／ks组和阳性药物组分别灌胃相应的药物，给药容积为5mL／kg体质量，1次／d，连续6d。假手术组与模型组分别灌胃等量的生理盐水。应用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，观察缺血2h再灌注24h后赤芍总苷对大鼠脑组织梗死面积（梗死百分比=梗死灶质量／右侧大脑半球质量&;#215;100%）、丙二醛含量及乳酸脱氢酶活性、Na^＋-K^＋-AT-Pase与Ca^2＋-ATPase活性的影响。 结果：实验大鼠100只均进入结果分析。①实验大鼠脑组织梗死面积百分比：赤芍总苷3mg／kg组、赤芍总苷6mg／kg组、阳性药物组与模型组相比均减少[模型组（27．4&;#177;3．3）％，赤芍总苷3ms／ks组（23．3&;#177;3．6）％，赤芍总苷6mg／kg组（18．2&;#177;5．3）％，阳性药物组（19．3&;#177;4．1）％，P＜0．05&;#177;0．01]。②实验大鼠脑组织中丙二醛和乳酸脱氢酶含量：模型组与假手术组相比丙二醛含量升高，乳酸脱氢酶活性降低，赤芍总苷3mg／kg组、赤芍总苷6mg／kg组、阳性药物组与模型组相比，可降低脑组织中的丙二醛含量，增高脑组织中乳酸脱氢酶活性[丙二醛含量：假手术组（2．11&;#177;0．32）μmol／g，模型组（7．43&;#177;1．24）μmol／g，赤芍总苷3mg／kg组（3．14&;#177;0.77）μmol/g，赤芍总苷6mg／ks组（2．54&;#177;1．08）μmol/g，阳性药物组（2．86&;#177;0．83）μmol／g；乳酸脱氢酶活性：假手术组（55．84&;#177;3．50）μkat／g，模型组（20．50&;#177;2．17）μkat／g，赤芍总苷3mg／kg组（28．0&;#177;5．83）μkat／g，赤芍总苷6mg／kg组（44．3&;#177;4．50）μkat／g，阳性药物组（34．01&;#177;5．17）μkat／g，P＜0．05～0．01。③实验大鼠脑组织中Na^＋-K^＋-ATPase与Ca^2＋-ATPase活性：模型组与假手术组相比均降低，赤芍总苷3mg／kg组、赤芍总苷6ms／ks组、阳性药物组与模型组相比均升高[Na^＋-K^＋-ATPase活性：假手术组（21．54&;#177;4．98）mkat／g，模型组（13．32&;#177;3．42）mkat／g，赤芍总苷3ms／ks组（16．74&;#177;2．76）mkat／g，赤芍总苷6mg／kg组（20．58&;#177;2．16）mkat／g，阳性药物组（18．12&;#177;4．98）mkat／g；Ca^2＋-ATPase活性：假手术组（15．00&;#177;2．40）mkat／g，模型组（7．32&;#177;1．44）mkat／g，赤芍总苷3mg／kg组（9．36&;#177;2．40）mkat/g，赤芍总苷6mg／kg组（13．26&;#177;1．98）mkat／g，阳性药物组（11．40&;#177;1．80）mkat／g，P＜0.05～0.01]。 结论：赤芍总苷可降低局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑梗死面积百分比，抑制脂质过氧化反应，改善梗死后脑组织的能量代谢。     

三七通舒胶囊对大鼠局灶脑缺血再灌注后神经功能保护作用

目的:观察三七通舒胶囊(主要成分是三七,成都华神集团股份有限公司生产,批号:940316)对大鼠局灶脑缺血再灌注性损伤后的神经保护作用。方法:实验于2003-02／2004-04在首都医科大学附属天坛医院神经外科试验中心完成。采用Koizumi法制备大鼠脑缺血再灌注模型,88只大鼠随机分3组:假手术组(8只);缺血再灌注组,缺血2 h后进行再灌注,依照再灌注后取样时间点的不同分为1,3．7,10,15 d共5组(每组 8只);三七通舒胶囊药物干预组,缺血2 h再灌注后2 h即开始给药, 依照再灌注后取样时间点的不同亦分为1,3,7,10,15 d共5组(每组8 只)。各时相点取材,苏木素-伊红染色观察病理改变,并进行脑含水量测定;免疫组化观察脑组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及层粘连蛋白的表达变化,并使用多媒体彩色病理图像分析系统进行定量分析;利用草酸-焦锑酸钾电镜细胞化学技术观察缺血脑组织的超微结构改变。结果:脑缺血再灌注组与药物干预组脑水含量明显高于假手术组[以缺血再灌注7 d为例,缺血再灌注组、药物干预组、假手术组分别为 (70．79±2．44)％,(68.11±2．78)％,(65．76±2．57)％,P<0．05]。假手术组大鼠脑组织仅见少量VEGF表达,而层粘连蛋白表达较多[VEGF为 (18.37±4．86)个／高倍视野,层粘连蛋白为(62．76±5．99)个／高倍视野]。缺血再灌注组中,随着再灌注时间的延长,梗死灶周边区VEGF呈逐渐增强的趋势[再灌注1,3,10 d分别为(35.34±6．64),(56．96±5．86), (113．86±9．05)个／高倍视野],而层粘连蛋白的表达呈先减弱后逐渐增强的趋势[再灌注1,3,10 d分别为(30．86±4．94),(56．74±4．16),(88．36 ±3．03)个／高倍视野]。药物干预组中,随给药持续时间的延长,二者表达趋势同缺血再灌注组,且三七通舒胶囊药物干预组大鼠其VEGF、层粘连蛋白的表达较缺血再灌注组更强。结论:三七通舒胶囊可能减少缺血再灌注后脑含水量并增强VEGF及层粘连蛋白的表达,减轻缺血再灌注性脑损伤,从而起到了一定的神经保护及促进神经组织修复的作用。     

三七通舒胶囊对大鼠局灶脑缺血再灌注后神经功能保护作用

目的：观察三七通舒胶囊（主要成分是三七,成都华神集团股份有限公司生产,批号：940316）对大鼠局灶脑缺血再灌注性损伤后的神经保护作用.方法：实验于2003-02/2004-04在首都医科大学附属天坛医院神经外科试验中心完成.采用Koizumi法制备大鼠脑缺血再灌注模型,88只大鼠随机分3组：假手术组（8只）;缺血再灌注组,缺血2 h后进行再灌注,依照再灌注后取样时间点的不同分为1,3,7,10,15 d共5组（每组8只）;三七通舒胶囊药物干预组,缺血2 h再灌注后2 h即开始给药,依照再灌注后取样时间点的不同亦分为1,3,7,10,15 d共5组（每组8只）.各时相点取材,苏木素-伊红染色观察病理改变,并进行脑含水量测定;免疫组化观察脑组织血管内皮生长因子（vascular endothelialgrowthfactor,VEGF）及层粘连蛋白的表达变化,并使用多媒体彩色病理图像分析系统进行定量分析;利用草酸-焦锑酸钾电镜细胞化学技术观察缺血脑组织的超微结构改变.结果：脑缺血再灌注组与药物干预组脑水含量明显高于假手术组[以缺血再灌注7 d为例,缺血再灌注组、药物干预组、假手术组分别为（70.79&;#177;2.44）%,（68.11&;#177;2.78）%,（65.76&;#177;2.57）%,P＜0.05].假手术组大鼠脑组织仅见少量VEGF表达,而层粘连蛋白表达较多[VEGF为（18.37&;#177;4.86）个/高倍视野,层粘连蛋白为（62.76&;#177;5.99）个/高倍视野].缺血再灌注组中,随着再灌注时间的延长,梗死灶周边区VEGF呈逐渐增强的趋势[再灌注1,3,10 d分别为（35.34&;#177;6.64）,（56.96&;#177;5.86）,（113.86&;#177;9.05）个/高倍视野],而层粘连蛋白的表达呈先减弱后逐渐增强的趋势[再灌注1,3,10 d分别为（30.86&;#177;4.94）,（56.74&;#177;4.16）,（88.36&;#177;3.03）个/高倍视野].药物干预组中,随给药持续时间的延长,二者表达趋势同缺血再灌注组,且三七通舒胶囊药物干预组大鼠其VEGF、层粘连蛋白的表达较缺血再灌注组更强.结论：三七通舒胶囊可能减少缺血再灌注后脑含水量并增强VEGF及层粘连蛋白的表达,减轻缺血再灌注性脑损伤,从而起到了一定的神经保护及促进神经组织修复的作用.