人胆囊癌裸鼠皮下瘤模型的建立

胆囊癌是胆道系统最常见的恶性肿瘤。我们在建立人胆囊癌细胞系GBC-SD的基础上，建立了实用的人胆囊癌裸鼠皮下瘤模型，并对其生长特性及GBC-SD细胞系的致瘤性进行厂初步观察。     

系列胆囊癌实验模型生物学特性的比较

为了开展胆囊癌有关的基础研究，我们引进了3个已经建成的胆囊癌细胞系，并自建了一株胆囊癌裸鼠移植瘤模型STSX-01。我们对其在形态、生长特性、运动侵袭能力、体内成瘤性以及一些肿瘤相关蛋白的表达等方面进行了对比研究。     

人胆囊癌细胞系GBC-SD侧群细胞致瘤特性的实验研究

目的 研究人胆囊癌细胞系GBC-SD侧群细胞(side population cells,SP)的致瘤特性。方法 利用流式细胞术从GBC-SD中分选SP、非SP细胞(non-SP),分别进行软琼脂克隆形成实验和非肥胖性糖尿病联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠的移植瘤形成实验。通过流式细胞术检测5例人胆囊癌组织中SP细胞的比例。结果人胆囊癌细胞系GBC-SD中存在SP细胞,其比例约为0.87％;SP细胞的克隆形成率高于non-SP细胞（14.74％±3.53％比5.17％±1.05％,t=2.75,P＜0.05）。NOD/SCID小鼠移植瘤实验表明,5×103个SP细胞可成瘤(4/7),而non-SP细胞成瘤则需要1×105个细胞(1/7),且来源于SP细胞亚群的NOD/SCID小鼠移植瘤中存在SP、non-SP细胞。SP细胞存在于人胆囊癌组织中,其范围为0.27％～2.3％。结论来源于GBC-SD的SP细胞亚群具有类似肿瘤十细胞的高致瘤性。     

肿瘤转移抑制基因Kiss-1对构建原代人结直肠癌裸鼠肝转移瘤模型的影响

目的 构建原代人结直肠癌裸鼠盲肠原位移植瘤模型(肝转移模型),探讨Kiss-1基因在移植瘤存活、生长和转移中的作用.方法 选择Kiss-1基因阳性和阴性表达的人结直肠癌组织块各1块,分别建立裸鼠皮下移植瘤和裸鼠盲肠原位移植瘤模型,并观察移植瘤生长和肝转移.结果 裸鼠第2代皮下移植瘤模型构建成功率Kiss-1基因阳性组为37.50％,阴性组为100.00％,差异有统计学意义(P＜0.05);裸鼠盲肠原位移植瘤模型构建成功率,第1代为41.67％(Kiss-1阳性组为12.25％,阴性组75.00％),第2代为75.00％(Kiss-1阳性组为56.25％,阴性组为93.75％);Kiss-1阴性组成功率均高于阳性组,差异有统计学意义(P＜0.05);皮下移植瘤模型和第1代盲肠原位移植瘤模型中均未发现肝转移,第2代盲肠原位移植瘤模型中肝转移率Kiss-1阳性组为33.33％,阴性组80.00％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Kiss-1基因表达缺失有助于提高原代人结直肠癌裸鼠盲肠原位移植瘤肝转移模型构建的成功率,提示它具有抑制结直肠癌移植瘤存活、生长和转移的作用.     

去甲斑蝥素对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤nm23、基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2的影响

目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤nm23、基质金属蛋白酶(MMP)2和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)2的影响。方法在培养人胆囊癌GBCSD细胞的基础上建立荷瘤鼠胆囊癌模型并进行移植瘤抑制实验,实验分为空白对照、5氟脲嘧啶(FU)、NCTD、NCTD+5FU4组,观测荷瘤鼠移植瘤大小改变、抑瘤率和细胞nm23、MMP2、TIMP2蛋白表达。结果NCTD对荷瘤鼠胆囊癌移植瘤有明显的抑制作用;NCTD组呈棕褐MMP2染色的细胞明显减少,胞浆着色变淡,表达率显著降低(P<0.05);而呈nm23、TIMP2表达棕褐染色的细胞数明显增多,胞浆着色变深、变浓,表达率显著增高(P<0.05);其中均以NCTD+5FU组的作用最明显(P<0.05)。结论NCTD可明显抑制人胆囊癌的侵袭和转移,若与5FU联合应用则具协同作用。其机制可能与NCTD影响转移和基质溶解相关基因蛋白表达有关。     

心脏副神经节瘤

心脏副神经节瘤孟旭，张慧信，范涛，裴金凤，董然心脏原位副神经节瘤是十分罕见的肿瘤，我们手术治疗１例，报告如下：临床资料病人男４２岁。心悸２周，当地医院超声心动图示右心肿物来我院就诊。既往有高血压病史８年，间断服用降压药物。查体：血压１６．０／１０．７...     

手术方式与T2期胆囊癌预后的关系

目的探讨手术方式与肿瘤侵犯胆囊壁全层但未穿透浆膜的他期胆囊癌预后的关系。方法回顾性分析1990-2004年收治的24例佗期胆囊癌的临床资料，采用Kaplan-Meier法分析胆囊癌根治组（14例）和单纯胆囊切除组（10例）的生存率和无瘤生存率。结果根治组和单纯胆囊切除组术后的1、3、5年生存率分别为100％、71％、54％和70％、30％、20％，两组生存时间的差异有统计学意义（x^2=4．659，P=0．031）。根治组和单纯胆囊切除组的中位临床无瘤生存时间分别为45和13．5个月，两组临床无瘤生存时间的差异有统计学意义（x^2=3．854，P=0．049）。结论对佗期胆囊癌应积极行胆囊癌根治手术，胆囊癌根治术是提高佗期胆囊癌长期生存率及临床无瘤生存率的有效手段。     

裸鼠人胃癌转移模型的建立及比较

我们分别采用了新鲜组织块皮下及原位种植及细胞悬液皮下注射成瘤后原位种植方法建立裸鼠人胃癌转移模型．并对它们的成瘤、转移情况及种植瘤、转移瘤的病理结构特点进行分析。     

胆囊癌组织中细胞凋亡rasp21,p16蛋白表达及其意义

目的 探讨癌基因ｒａｓ、抑癌基因ｐ１６和细胞凋亡在胆囊癌形成中的作用。方法 采用原位末端标记法和免疫组化技术对３６例胆囊癌和１６例胆囊腺癌中的凋亡细胞，ｒａｓｐ２１及ｐ１６蛋白的表达进行检测。     

C57BL6近交系小鼠前列腺癌原位移植瘤模型的建立

目的建立C57BL6近交系小鼠前列腺癌原位移植瘤模型并探讨其应用价值.方法用微量注射器在C57BL6近交系小鼠的前列腺左右背外侧叶包膜下接种小鼠前列腺癌RM-1细胞2×106个建立原位移植瘤模型,以皮下移植瘤模型作为对照比较两者的肿瘤转移发生情况及生存期.结果原位模型小鼠全部发生肿瘤转移,其中盆腔淋巴结和肺的转移发生率分别为(10/10)、(8/10),对照组仅有肿瘤的局部生长和浸润,无转移发生;原位模型的小鼠平均生存期为(11.0±2.4)d较对照组(23.0±4.7)d明显缩短,差异有非常显著性(P＜0.01).结论小鼠的前列腺癌原位移植瘤模型较好地模拟了人癌体内的自然生长状况,是观察转移性前列腺癌较为适宜的模型.     

细胞凋亡在胆囊肿瘤发生发展中的作用

为探讨细胞凋亡在胆囊肿瘤形成中的作用，我们用原位末端标记法对２４例胆囊癌和１６例胆囊腺瘤中的凋亡细胞进行测定。结果显示：胆囊腺瘤中的细胞凋亡数低于原发性胆囊癌（Ｐ〈０．０１），高分化及Ｎｅｖｉｎ分期Ｉ、Ⅱ、Ⅲ期腺癌中的凋亡细胞数低于低分化及Ｎｅｖｉｎ分期Ⅳ、Ⅴ期者（Ｐ〈０．０５）。因此作者认为细胞凋亡在胆囊癌发病中起重要作用，可以作为预测胆囊癌病程和预后的指标。     

蟾毒灵对裸鼠结肠癌原位移植瘤凋亡基因Caspase-3表达的影响

目的:探讨蟾毒灵治疗裸鼠结肠癌原位移植瘤的作用及机制。方法 :应用不同剂量蟾毒灵(0.5、1.0、1.5 mg/kg)处理人结肠癌细胞株HCT-116建立的裸鼠原位移植瘤模型,分别用生理盐水(NS)(0.2 mL/只)、5-FU(25 mg/kg)做阴性(NS组)和阳性对照(5-FU组),测量移植瘤的体积,观察蟾毒灵对移植瘤的肿瘤抑制率、裸鼠生存期的影响;HE染色观察移植瘤的坏死程度;TUNEL标记法检测肿瘤细胞的凋亡指数;荧光定量PCR方法检测基因Caspase-3 mRNA的表达,免疫组化法和Western印迹法检测Caspase-3蛋白的表达。结果:蟾毒灵各剂量组和5-FU组裸鼠原位移植瘤体积明显小于NS组(P<0.05);蟾毒灵各组移植瘤的凋亡指数与NS组相比明显增加(P<0.05)。结论:蟾毒灵能够抑制裸鼠人结肠癌原位移植瘤的生长,促进肿瘤细胞凋亡,其机制可能与上调基因Caspase-3表达有关。     

影响细胞周期逆转胆囊癌化疗耐受的研究

目的　通过使用生长抑素改变细胞周期状态 ,观察离体和在体状态下 ,人胆囊癌细胞株和裸鼠移植瘤对细胞增殖期特异性化疗药物阿霉素 (DOX)的敏感性的变化。方法　离体培养人胆囊癌细胞株 GBC- SD,MTT法观察生长抑素影响细胞周期后胆囊癌细胞对 DOX敏感性的变化 ;再构建胆囊癌裸鼠移植瘤 ,采用腹腔注射方法给药 ,分别观察生长抑素和阿霉素在单独以及联合用药情况下 ,胆囊癌移植瘤生长情况的变化。结果　生长抑素诱导胆囊癌细胞生长停滞于细胞周期的 S期 ,能明显降低癌细胞对 DOX的耐药性 (P<0 .0 5 ) ;胆囊癌裸鼠移植瘤对单独作用阿霉素有耐受性。联合用药能明显抑制移植瘤的生长 (P<0 .0 5 ) ;生长抑素在在体状态下的化疗增敏作用呈现浓度 -效应依赖现象。结论　影响胆囊癌细胞的细胞周期状态能够提高离体细胞和裸鼠移植瘤的化疗敏感性     

原发性胆囊癌肝浸润及肝转移的诊治（附55例临床分析）

报道胆囊癌合并肝浸润及肝转移55例，就其诊断、肝瘤转移特性、手术方法及疗效做了探讨。认为B型超声为首选检查方祛，影像学检查意义不大。肝浸润手术以肝楔形切除、清扫肝十二指肠韧带淋巴为佳，施行半肝或扩大的半肝切除是徒劳的；肝转移行肝段或肝叶切除疗效不佳。肝动脉结扎、化疗栓塞、门静脉支栓塞有一定疗效，需进一步的临床实践。对于合并梗阻性黄疸的病人也应采取积极的外科手术治疗，其预后与手术时肿瘤所处的病理阶段密切相关。     

人源性乳腺移植模型:有效提高人源性乳腺癌细胞株在小鼠原位成瘤率的途径

目的:探索解决部分人乳腺癌细胞株在小鼠模型中成瘤率过低问题,以稳定提高乳腺癌小鼠模型的成瘤效率。方法:在雌性重症联合免疫缺陷症(severe combined immunodeficiency,SCID)小鼠的一侧胁腹皮下移植人源性正常乳腺组织,向移植组织内注射绿色荧光蛋白(GFP)标记的人乳腺癌细胞株MCF-7;同时以传统的小鼠乳腺脂肪垫(MFP)注射模型作为对照,即在雌性SCID小鼠一侧腹股沟MFP内注射同等数量GFP标记的MCF-7。从活体动物荧光成像仪和病理检测两个水平评估移植模型和MFP注射模型的原位成瘤率。结果:人源性乳腺移植小鼠模型的原位成瘤率在大体荧光观察下为95%(19/20例),在病理检测中为100%(20/20例);MFP注射模型的原位成瘤率在大体荧光观察下为0(0/20例),在病理检测中为15%(3/20例)。人源性乳腺移植模型在大体(P0.05)和镜下(P0.05)两个水平的成瘤率都远高于传统的MFP注射模型。结论:人源性乳腺移植模型可显著提高人乳腺癌细胞株在小鼠模型上的原位成瘤率。     

保留肾单位手术和肾切除术治疗单侧局限性Wilms瘤的长期结果

为了评估接受保留肾单位手术（NSS）或肾切除术的单侧局限性Wilms瘤患儿的存活率和原位复发率，作者对1968年1月至2003年12月间由同一位外科医师实施手术治疗的70例肾肿瘤患儿进行了回顾性分析研究。Wilms瘤患者64例，其中局限性非间变性Wilms瘤52例。肿瘤分级Ⅰ级27例，Ⅱ级23例，Ⅲ级2例。     

EGFR蛋白在胆囊良恶性病变中的表达及意义

目的:探讨EGFR蛋白表达在胆囊癌癌变过程中所起的作用;探讨EGFR蛋白表达与胆囊癌生物学行为和预后的关系。方法:采用免疫组化方法对10例慢性胆囊炎、12例胆囊良性腺瘤、3例胆囊腺瘤癌变和40例胆囊癌标本进行研究。结果:EGFR在胆囊癌中的阳性表达率明显高于慢性胆囊炎和胆囊良性腺瘤(P<0.05),EGFR表达与胆囊的分化程度、浸润深度显著相关(P<0.05)。结论:EGFR与胆囊癌的发生有关,测定EGFR有助于判断胆囊癌的恶性程度和预后。     

姑息性胆管引流术治疗晚期高位胆管癌43例报告

高位胆管癌（胆管上段癌及肝门胆管癌）常累及肝门部血管，根治切除机会很少。大多数病例只能行姑息性治疗。我院自1975～1993年间共收治高位胆管瘤89例，其中行姑息性治疗43例（48．3％），现报告如下。1临床资料1·1一般资料43例中男性29例，女性14例，年龄20～69岁，平均52．3岁。胆管瘤累及肝总管及左右肝管23例，肝总管及三管汇合处6例，1。型5例，回。型4例，累及全部肝外胆管伴周围淋巴结转移3例，胆囊癌转移至肝门部2例。全部病例均合并梗阻性黄疽，血清总胆红素为1068～376．spmol／L，因系晚期病例，故均行姑息性减黄手术。本组…     

从胆囊癌的一种新血供方式——血管生成拟态看胆囊癌诊疗观点改变

从胆囊癌的一种新的血液供应方式——血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)论述胆囊癌诊疗观点的改变。1994.1—2000.12同济医院确诊的74例原发性胆囊癌标本及其临床病理学和人口统计学资料;HE染色+CD31/PAS双重染色(Envision法),胆囊癌VM(+)/(-)临床参数单/多因素、Cox模型风险和Kaplan-Meier生存分析+log-rank检验。细胞、动物实验:胆囊癌GBC-SD、SGC-996细胞二/三维培养,侵袭力、迁移力、VM形成测定和倒置光显微镜、透射/扫描电镜VM形态学观察以及动态磁共振荷瘤鼠胆囊癌移植瘤血流动力学检测。信号通道研究:胆囊癌细胞三维培养和裸鼠移植瘤VM组织切片的免疫组化、免疫荧光、Western blotting、QRT-PCR检测,以探讨相关信号通道。13.5%(10/74)胆囊癌存VM,其中4.3%(13/306)管腔内含红细胞,即胆囊癌VM是高倍光学显微镜下由胆囊癌细胞围成管腔、内衬癌细胞而非血管内皮细胞、有圈PAS阳性界膜分隔、腔内含红细胞的管道结构;VM(+)胆囊癌腺癌居多,有较高的血行转移机会;VM是影响胆囊癌患者预后的独立危险因素,有VM存在胆囊癌患者生存期短,预后差。体外胆囊癌GBC-SD细胞三维培养、荷瘤鼠胆囊癌石蜡切片经HE染色和CD31/PAS双重染色,光/电镜观察,85.7%存在VM,其VM结构与临床结果一致;MRI增强扫描提示,荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤中心或瘤体周围存在VM血供而不致出现肿瘤坏死而呈现MRI强化信号。发现胆囊癌存在VM-相关PI3-K/MMPs/Ln-5γ2和Eph A2/FAK/Paxillin信号通路。高侵袭胆囊癌存在VM这一特殊生物学特性。因高侵袭胆囊癌VM不能被常规病理学检测,故建议对临床恶性程度高、易血行转移、预后差胆囊癌,常规开展胆囊癌标本CD31/PAS双重染色检查。对胆囊癌根治术后复发、辅助化疗+抗血管生成靶向疗效差者,应考虑存在VM,采取针对性的"抗血管生成拟态"辅助治疗。     

小肠淋巴管瘤四例

淋巴管瘤（lymphangioma）是由一些与淋巴系统不连通的淋巴组织起源的良性肿瘤，是一种先天性病变，每12000个出生者中发生1例。可分为：毛细淋巴管瘤、海绵状淋巴管瘤、囊状淋巴管瘤3种类型，常常发生在颈部或肩部。发生在小肠的淋巴管瘤极为罕见，我院自1988-2006年共收治4例，现报告如下。