幽门螺杆菌对胃上皮细胞分泌IL-8的影响

目的：了解幽门螺杆菌对胃上皮细胞分泌ＩＬ－８的影响。方法：将Ｈｐ与胃上皮细胞共同孵育２４ｈ，ＥＬＩＳＡ法检测上清液中ＩＬ－８的浓度。结果：Ｈｐ可直接诱导胃上皮细胞分泌ＩＬ－８；热灭活，甲醛溶液固定后的菌株该作用明显减弱（Ｐ〈０．０１），食有细胞毒素相关基因Ａ（ｃａｇＡ）株的诱导作用大于不含ＣａｇＡ株，差异明显（Ｐ〈０．０５），结论：Ｈｐ能够刺激胃上皮细胞分泌ＩＬ－８；这可能与细菌是否含有ｃａｇＡ有     

幽门螺杆菌基因与其诱导的IL-8的表达

幽门螺杆菌（HP）感染后胃黏膜持续的炎症反应导致胃黏膜损伤，IL－8（interleukin-8)等细胞因子起重要作用，HP菌株cag致病岛（cag pathogenicity island,cag PAI)的一些基因，iceA基因及编码外膜蛋白的某些基因片段与HP感染后IL－8的表达分泌及胃黏膜的损伤密切相关，深入研究两者关系有助于进一步阐明HP的致病机制。     

IL-8基因在幽门螺杆菌相关性胃疾病中的表达

目的 研究白细胞介素8(IL-8)基因与幽门螺杆菌(H.pylori)相关性胃疾病发生发展的关系.方法 采用免疫组化技术检测144例H.pylori相关性胃疾病胃黏膜标本中TL-8蛋白表达,其中浅知性胃炎54例、胃溃疡33例、萎缩性胃炎57例;另外探讨了72例不同胃黏膜标本H.pylori感染及其根除治疗对IL-8蛋白产生的影响.结果 胃疾病IL-8蛋白阳性表达率H.pylori阳性组高于H.pylori阴性组(55.4%,40.3%);浅表性胃炎IL-8蛋白阳性表达率H.pylori阳性组高于H.pylod阴性组(P<0.05);胃渍疡和萎缩性胃炎IL-8蛋白阳性表达率H.pylori阳性组高于H.pylori阴性组.H,pylori阳性组和H.pylod阴性纽从浅表性胃炎→胃溃疡→萎缩性胃炎中IL-8蛋白阳性表达率逐渐上升(P<0.05).根除H.pylori治疗后IL-8蛋白阳性表达率低于根除H.pylori治疗前.结论 IL-8表达增强可能与HP相关性胃疾病有关.H.pylori感染可能通过IL-8介导促进癌前状态的发生.根除H.pylod治疗可以影响癌前状态.     

幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞凋亡的实验研究

观察幽门螺杆菌（Ｈｐ）对胃上皮细胞凋亡与增殖的影响。方法用粗制Ｈｐ总蛋白与胃上皮细胞细胞株ＭＫＮ－２８共同孵育,测定细胞增殖（ＭＴＴ染色）与细胞凋亡（ＤＮＡ梯度、流式细胞仪和Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８染色法）。结果粗制Ｈｐ总蛋白能明显抑制胃上皮细胞的增殖,促进胃上皮细胞的凋亡,且此作用随着作用浓度的提高和时间的延长而增加。结论Ｈｐ可能通过促进胃上皮细胞凋亡导致胃癌和溃疡     

幽门螺杆菌诱导MKN 45细胞分泌IL-8及其与p38信号转导途径的关系

目的：探讨p38信号转导途径在幽门螺杆菌(Hp)诱导胃上皮细胞株MKN45(来源于低分化腺癌)IL-8蛋白分泌中的作用。方法：以特异性p38有丝分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)抑制剂SB203580与MKN45作用2h，Hp标准菌株CCUG17874与MKN45共同孵育24h，ELISA法检测IL-8表达产物的量。结果：Hp显著增加了IL-8在胃上皮细胞株MKN45的分泌，以细菌细胞数比为100时分泌量最高，作用24h时IL-8量达峰值；经终浓度为0．3、1、3、10μmol／L的SB203580作用后，Hp诱导的胃上皮细胞IL-8蛋白的分泌分别减少了28％、49％、60％、76％。结论：Hp诱导胃上皮细胞株MKN45分泌IL-8，MAPK抑制剂明显地抑制该分泌作用，提示该分泌作用可能依赖于p38信号转导途径。     

幽门螺杆菌慢性感染诱导胃上皮细胞产生凋亡耐受

目的：建立幽门螺杆菌（Hp）慢性感染胃上皮细胞模型,并分析Hp慢性感染与胃上皮细胞凋亡的关系。方法：用HpSS1与人非肿瘤性胃上皮细胞株GES-1共培养16周,建立GES-1模型细胞,然后采用流式细胞术分析这种模型细胞对Hp和其它肠道细菌以及抗肿瘤药物凋亡诱导剂的应答。结果：成功获得了Hp慢性感染胃上皮细胞模型（GES-1模型细胞）。这种模型细胞不仅对Hp诱导的凋亡耐受,而且对其他肠道细菌和一些凋亡诱导剂也是耐受的。结论：幽门螺杆菌慢性感染诱导胃上皮细胞产生凋亡耐受,由此可能增加了胃上皮细胞癌变的危险性。     

埃索美拉唑对幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞表达细胞因子的影响

目的探讨埃索关拉唑对幽门螺杆菌（Hp）感染的胃上皮细胞的体外抗炎效应。方法体外培养胃上皮细胞系AGS,加入不同浓度埃索美拉唑和培养的Hp感染8或24h。Westernblot检测和实时定量PCR分别检测AGS细胞中红素氧合酶1（HO-1）蛋白和mRNA表达情况;ELISA检测白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-8的产生。同时采用RNA干扰HO-1表达后,观察其对Hp诱导IL-1β和IL-8产生的影响。结果埃索美拉唑孵育8h后,能显著抑制Hp诱导的IL—1β和IL-8表达。同时,埃索美拉唑能在转录翻译水平分别调控HO-1mRNA和蛋白表达。HO-1siRNA沉默HO-1表达后,与Hp组相比,IL-1β和IL-6分泌进一步增高。结论埃索美拉唑可能通过上调HO-1的表达而发挥对胃上皮细胞的抗炎作用。     

幽门螺杆菌对胃上皮细胞的凋亡作用

目的 研究幽门螺杆菌（Ｈｐ）对胃黏膜上皮细胞的凋亡作用。方法 １０例Ｈｐ阴性的非溃疡性消化不良（ＮＵＤ）患者,２５例Ｈｐ相关性胃炎患者,以ＴＵＮＥＬ法进行细胞凋亡的检测,免疫组织化学法检测凋亡调控蛋白Ｂｃｌ－２,Ｂａｘ,Ｂａｋ等的表达。结果与Ｈｐ阴性的ＮＵＤ患者相比,Ｈｐ相关性胃炎患者胃黏膜上皮细胞的凋亡指数（ＡＩ）明显增加（１９．６６％υｓ３．０３％,Ｐ〈０．０１）,其促凋亡蛋白Ｂａｋ,Ｂａｘ蛋     

幽门螺杆菌诱导大鼠胃上皮细胞凋亡与一氧化氮相关性研究

目的:研究幽门螺杆菌(Hp)感染诱导大鼠胃上皮细胞凋亡与一氧化氮(NO)的关系。方法:将60只Wistar大鼠随机分成正常对照组、Hp感染组和Hp根除组,每组20只。正常对照组正常喂养;Hp感染组大鼠按潘氏方法复制慢性胃炎模型,并参照陈氏方法感染Hp;Hp根除组大鼠感染Hp后采用四联疗法治疗。采用切口末端标记法(TUNEL)检测各组大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡情况,硝酸还原酶法检测各组血清NO水平。结果:正常对照组、Hp根除组、Hp感染组的细胞凋亡指数和血清NO水平依次升高,且差异均有统计学意义(P0.01);Hp感染组和Hp根除组胃上皮细胞凋亡指数与NO水平呈正相关关系(P0.05)。结论:Hp感染可促进胃上皮细胞凋亡,促进NO生成可能是Hp促进细胞凋亡的机制之一。     

幽门螺杆菌调控胃上皮细胞基因表达的机制

目的：在基因转录调节水平上研究幽门螺杆菌生物活性物质调控胃上皮细胞基因表达的机制。方法：人胃上皮癌细胞株SGC-7901采用常规方法培养,幽门螺杆菌菌株NCTC11637采用马血清琼脂培养基培养,收获后用超声粉碎法提取生物活性物质,基因转录采用报告基因方法分析。结果：幽门螺杆菌提取物使SRE反式激活的基因转录增加（P〈0．01）,而对CRE反式激活的基因转录没有明显影响（P〉0．01）。结论：幽门螺杆菌生物活性物质通过顺式转录调控元件SRE调控细胞基因表达。     

CagA 阳性Hp培养滤液诱导转化的胃上皮细胞表达泛素活化酶E1基因

目的 研究CagA阳性Hp培养滤对人胃粘膜上皮细胞（GES－1）作用的机制。方法 将CagA阳性Hp培养滤液诱导恶性转化的GES－1细胞与CagA阴性Hp培养滤液处理的GES-1细胞进行mRNA差异显示，以寻找Hp致胃癌发病的相关基因。结果 mRNA差异显示片断之一命名为PFN1，仅在Hp(CagA^ )培养滤液处理的GES－1细胞中表达，斑点杂交结果与之一致。与Gene Bank资料序列同源性比较分析提示PFN1与泛素活化酶E1同源性99％，即为人类泛素活化酶E1基因的一部分。结论 泛素－蛋白水解酶复合体通路中的泛素活化E1在与了Hp的CagA诱导的胃上皮细胞恶化转化过程。     

CagA基因阳性Hp培养滤液对人胃粘膜上皮细胞系DNA损伤作用

目的 研究 CagA阳性幽门螺杆菌（Hp）培养滤液对人胃粘膜上皮细胞（GES－1）DNA的损伤作用。方法 制备Hp培养滤液,PCR鉴定CagA基因。采用单细胞微凝胶电泳观察Hp（CagA＋）培养滤液对GES－1细胞DNA的损伤作用。结果 Hp（CagA＋）培养滤流可使GES－1细胞形成彗星现象。结论 Hp（CagA＋）培养滤液可以导致GES－1细胞的DNA损伤。DNA损伤可能是CagA诱导GES－1细胞恶性转化的机制之一。     

幽门螺杆菌感染对胃粘膜上皮细胞增殖的影响

用免疫组织化学染色方法，对３０例幽门螺杆菌（Ｈｐ）相关慢性胃炎和１５例Ｈｐ阴性胃粘膜基本正常胃占膜中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）标记指数（ＬＩ％）和表皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）的表达进行了检测，结果表明：Ｈｐ阳性患ＰＣＮＡＬＩ％为１３．９４±１．６４，Ｈｐ阴性对照组为７．７１±０．９２，有显差别（Ｐ〈０．００１）。ＥＧＦ－Ｒ表达与ＰＣＮＡ呈正相关（ｒ＝０．４４８７，Ｐ〈０．０１），ＰＣＮＡＬＩ     

Effect of cagE gene on Helicobacter pylori-associated gastritis and levels of interleukin-8

Helicobacterpylori (H .pylori)playsanimportantroleinthedevelopmentofchronicgastritis ,pepticulcer,gastricadenocarcinomaandgastricmucosa associatedlym phoidtissue (MALT)lymphoma .Mostpatientsremainla tentinfectionandonlysomedevelopintodiseasessuchaspepticulcerorgastriccancer[1,2 ] .Althoughwhatcausesaninfectionremainsunknown ,thereareseveralputativeviru lencefactorsthatmaycontributetothemucosaldamageandthenleadtovariousclinicaloutcomesbyH .pyloriinfec tion .cagpathogenicityisland (PAI)wascon…     

人类线粒体tRNAs基因在CagA阳性Hp培养滤液诱导转化的胃上皮细胞中表达

目的 研究CagA阳性Hp培养滤液对人胃粘膜上皮细胞（GES－1）作用的机制。方法 将CagA阳性Hp培养滤液诱导恶性转化的GES－1细胞与CagA阴性Hp培养滤液处理的GES－1细胞进行mRNA差异显示,以寻找Hp致胃癌发病的相关基因。结果 mRNA差异显示片断之一命名为PFN2,仅在Hp(CagA^ )培养滤液处理的GES－1细胞中表达,斑点杂交结果与之一致。与Gene Bank资料序列同源性比较分析提示PFN2与人类线粒体tRNAs同源性100％,即为人类线粒体tRNAs基因的一部分。结论 人类线粒体tRNAs基因可能参与了Hp的CagA诱导的胃上皮细胞恶性转化过程。     

幽门螺杆菌刺激胃癌细胞株SGC-7901分泌白细胞介素-8过程中核因子κB的作用

目的　探讨胃上皮细胞在幽门螺杆菌 (Hp)刺激下分泌白细胞介素 8(IL 8)的过程中 ,核因子 κB(NF κB)的作用。方法　电穿孔法将I κBαM(NF κB抑制蛋白 )基因转染入SGC 790 1中 ,β半乳糖苷酶分析转染效率 ,Western印迹分析I κB基因的表达。将不同浓度的Hp活菌、灭活菌及液体培养上清分别与稳定转染I κB的胃癌细胞株SGC 790 1及其空白质粒对照共同孵育 ,凝胶电泳迁移率变迁分析 (EMSA)和NF κB荧光素酶报告基因分析检测不同时间细胞内NF κB的激活 ,ELISA法检测不同时间细胞上清中IL 8的水平。结果　得到了稳定表达I κB的SGC 790 1细胞 ,命名为SGC790 1 I κB细胞 ,其空白质粒对照命名为SGC790 1 neo。Hp活菌刺激的SGC790 1 neo在 2h和 4h时可检测到明显的NF κB激活 ,灭活菌和液体培养上清刺激下无激活 ;Hp活菌、灭活菌和培养上清刺激下SGC 790 1 I κB内均无NF κB激活。 4h时 ,2× 10 7Hp/ml的Hp活菌刺激下即可检测到SGC790 1 neo内明显的IL 8分泌 ,并有时间 剂量依赖效应 ;灭活菌和液体培养上清无此作用。Hp活菌、灭活菌和液体培养上清均不能刺激SGC790 1 I κB产生IL 8。结论　Hp诱导胃上皮细胞分泌IL 8依赖于NF κB的激活。     

Effects of broth culture filtrate protein of VacA+ Helicobacter pylori on the proliferation and apoptosis of gastric epithelial cells

Background Infection with Helicobacterpylori (H.pylori) may lead to chronic inflammation of the stomach epithelium,mucosal atrophy,imbalance of proliferation and apoptosis of epithelial cells; resultin...     

液体培养VacA 幽门螺杆菌上清液粗提蛋白对胃上皮细胞增殖/凋亡的影响

[摘要] 背景：幽门螺杆菌感染可以导致胃上皮慢性炎症、粘膜萎缩、上皮细胞增殖与凋亡的失衡,从而引起慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌等不同临床结局。然而,幽门螺杆菌导致胃癌发生的确切机制还不十分清楚。本研究通过体外实验探讨液体培养幽门螺杆菌上清液粗提蛋白（BCF-P）对人胃永生上皮细胞株（GES-1）和胃癌上皮细胞株（AGS）增殖与凋亡的影响。 方法：以人胃永生上皮细胞株（GES-1）和胃癌细胞株（AGS）作为研究对象,进行了下述研究：1）应用MTT方法分析BCF-P对GES-1和AGS细胞增殖的影响。2）应用流式细胞术分析BCF-P对GES-1和AGS细胞凋亡的影响。3）应用RT-PCR技术检测BCF-P和EGF对GES-1和AGS细胞Fas /COX-2 mRNA表达水平的影响。4）免疫沉淀和酶联法检测BCF-P对GES-1和AGS细胞EGFR酪氨酸激酶活性的影响。 结果：1）BCF-P抑制GES-1和AGS细胞增殖,具有浓度依赖性。2）在与抑制增殖相同的剂量和作用时间下,BCF-P未能诱导出GES-1和AGS细胞凋亡。3）BCF-P作用使GES-1和AGS细胞Fas mRNA表达下调（P<0.05）;与EGF的作用一致。BCF-P使AGS细胞COX-2 mRNA表达下调（P<0.05）;与EGF作用相反（P<0.05）。4）BCF-P作用使GES-1和AGS细胞EGFR酪氨酸激酶活性提高3倍以上。 结论： BCF-P体外抑制AGS和GES-1细胞增殖,其增殖抑制作用与凋亡无关。BCF-P体外对胃上皮细胞的作用不完全等同于EGF。