机械应力作用皮肤成纤维细胞增殖的相关研究

目的 研究机械应力作用皮肤成纤维细胞增殖效应。方法 自行设计一种新的机械牵拉细胞培养模型，原代培养皮肤成纤维细胞，取3～5代的成纤维细胞种植在模型的弹性膜上，待细胞达到75％～80％融合度时，实施40％延长度的机械牵拉，检测实验组及对照组12、24、36、48、72h时间点的细胞数．利用MTT法检测不同时间点细胞的增殖变化，同时利用流式细胞仪检测不同时间点的细胞增殖周期。结果 采用40％延长度的机械牵拉可以明显导致细胞增殖，同时，代表细胞增殖特性的S期也随机械牵拉发生改变。结论 40％延长度的机械牵拉可以改变细胞的增殖周期，导致细胞增殖。     

机械应力作用皮肤成纤维细胞增殖的相关研究

目的研究机械应力作用皮肤成纤维细胞增殖效应.方法自行设计一种新的机械牵拉细胞培养模型,原代培养皮肤成纤维细胞,取3～5代的成纤维细胞种植在模型的弹性膜上,待细胞达到75%～80%融合度时,实施40%延长度的机械牵拉,检测实验组及对照组12、24、36、48、72 h时间点的细胞数,利用MTT法检测不同时间点细胞的增殖变化,同时利用流式细胞仪检测不同时间点的细胞增殖周期.结果采用40%延长度的机械牵拉可以明显导致细胞增殖,同时,代表细胞增殖特性的S期也随机械牵拉发生改变.结论 40%延长度的机械牵拉可以改变细胞的增殖周期,导致细胞增殖.     

机械应力对培养人皮肤成纤维细胞增殖细胞核抗原的表达的影响

目的：研究牵拉幅度为40％的单次持续牵拉作用于培养的人皮肤成纤维细胞对细胞增殖影响。方法：体外培养人正常皮肤成纤维细胞，将细胞转移至牵拉细胞培养模型中的弹性膜上，待细胞贴壁达75％-80％融合时，实施40％单次持续牵拉，用WESTERN-BLOT对牵拉组与非牵拉组48h的增殖细胞核抗原（PCNA）表达进行检测。结果：牵拉组PCNA可见阳性表达而对照组结果呈阴性。结论：单次40％持续牵拉可以引起细胞增殖细胞核抗原（PCNA）表达，应力可以促进细胞增殖。     

机械牵拉细胞方法与机械应力对培养细胞影响的研究进展

在机械应力的作用下 ,细胞的生长发生改变 ,细胞分裂增殖 ,这在医学领域中很常见 ,整形外科的皮肤软组织扩张术、牵张术 ,骨科的肢体牵引延长术以及颅颌面外科的颅颌骨牵引术等通过外力刺激因素获得“额外”组织的临床技术便是基于这一原理 ,同时此类现象亦见于一些病理变化之中 ,如肾小球高血压对系膜细胞的反复压力刺激而使之增生等。近年来 ,机械应力对组织细胞的作用机理已越来越受到有关学者的关注。尽管基于该原理的此类技术已广泛应用于临床 ,在该领域也开展了一些基础研究 ,并取得了初步的结果 ,但是 ,机械应力作用于组织促进细胞增…     

培养细胞牵拉模型的建立与牵拉后细胞生长曲线的相关研究

目的：建立一种机械作用细胞培养模型，将细胞培养在该模型上，验证模型的可行性。方法：自行设计一种机械牵拉细胞培养模型，将3－5代的皮肤成纤维细胞种植在弹性硅胶膜上，设计牵拉组与非牵拉组（牵拉组采用40％的延长率），比较牵拉与非牵拉组12h,24h,36h,48h,72h细胞数量，绘制生长曲线。结果：细胞在牵拉模型上生长良好，刺激细胞增殖，模型可以用于模拟体外应力刺激细胞效应的实验研究。     

MTT法检测国产PGA支架对人成纤维细胞增殖的影响

目的 检测国产PGA支架对瘢痕、皮肤和肌腱成纤维细胞增殖的影响.方法 体外培养人瘢痕、皮肤和肌腱成纤维细胞,取第二代细胞接种到96 孔板,以不同浓度的国产PGA支架浸提液培养,用MTT法检测成纤维细胞在国产PGA上的增殖情况.结果 不同浸提液培养的瘢痕、皮肤和肌腱成纤维细胞的生长曲线均无明显差异.结论 国产PGA支架对瘢痕、皮肤和肌腱成纤维细胞的增殖无明显影响,该材料可以用于以成纤维细胞为种子的组织构建.     

黄芪甲苷对人皮肤成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨黄芪甲苷对体外培养的有皱纹、无皱纹中老年人皮肤成纤维细胞生物学特性的影响.为黄芪甲苷用于延缓皮肤衰老和皱纹形成提供细胞水平的客观依据,为进一步探讨皮肤衰老机制和开发抗衰老护肤品提供新思路.方法体外培养中年人眼角皱纹与眼角无皱纹皮肤深处成纤维细胞;老年人面颊皮肤成纤维细胞.加入不同浓度的黄芪甲苷,干预24、72、120 h后,检测黄芪甲苷对这3例皮肤成纤维细胞系增殖活性、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、弹性蛋白合成和凋亡率的影响.结果黄芪甲苷在较低浓度（5～20μg/ml）时可促进皱纹和无皱纹皮肤成纤维细胞增殖,促进皱纹、无皱纹和老年皮肤成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成,降低皱纹和无皱纹皮肤成纤维细胞凋亡率（P＜0.01）.结论黄芪甲苷在较低浓度时具有改善皱纹和非皱纹皮肤成纤维细胞生物学特性的作用.     

不同表皮对成纤维细胞增殖及胶原含量的影响

目的 了解不同表皮对成纤维细胞（Fb）增殖的影响，并探寻其机制。方法 将10例增生期瘢痕患者自身的正常皮肤Fb＋正常表皮、瘢痕Fb＋瘢痕表皮进行非接触性共同培养，另培养不加表皮的瘢痕Fb，将这3个培养体系依次设为A、B、C组；另将10例成熟期瘢痕患者的皮肤同法培养，也建立3个培养体系依次为D、E、F组。检测各组Fb培养72h后的细胞数量、培养上清液中I型与Ⅲ型胶原含量及其比值的变化。结果 C组与A组、F组与D组比较，均表现为细胞数显著升高，培养上清液中I、Ⅲ型胶原含量上升，I型与Ⅲ型胶原比值下降（P〈0．05）；B组与C组比较，培养上清液中Ⅲ型胶原含量增高，I型与Ⅲ型胶原的比值下降（P〈0．05），细胞数和I型胶原含量两组相近；E组与F组比较，细胞数显著降低且上清液中I、Ⅲ型胶原含量下降（P〈0．05），两者比值无明显变化。B组与A组、E组与D组比较，细胞数及I、Ⅲ型胶原含量均显著增高（P〈0．05），I型与Ⅲ型胶原的比值均显著下降（A、B组为2．20±0．27、1．16±0．21，D、E组为2．18±0．14、1．93±0．26，P〈0．05）。结论 正常表皮可能通过产生某些活性物质调节Fb增殖及胶原合成，在防止瘢痕增生中发挥重要作用。     

拉应力对体外培养人足跟皮肤成纤维细胞增殖影响的实验研究

目的：观察拉应力对人足跟外倒皮肤成纤维细胞增殖的影响,为预防跟骨骨折术后切口边缘皮肤坏死、切口不愈合提供一定的理论依据.方法：取40岁男性足跟外侧皮肤成纤维细胞培养及传代后,分Oh组、6h组、24 h组进行拉应力加载试验,检测培养液中TGF-β1、IL-6含量,使用透射电镜、光镜观察线粒体、细胞核的变化.结果：在10％的拉应力下,成纤维细胞随着承受应力的时间增加,线粒体逐渐减少,TGF-β1和IL-6的分泌受到抑制,细胞增殖逐渐受到抑制.结论：人足跟外侧皮肤长时间处于拉应力状态是跟骨骨折手术后切口边缘皮肤坏死、切口不愈合的重要原因.     

皮肤成纤维细胞在体外培养中的成骨作用

本实验采用新西兰家兔背部中厚皮片，通过组织培养获得成纤维细胞。成纤维细胞经传代培养８天时，发现标本中有不透光的骨小结节形成。培养３７天时，发现一些小结节扩大、延伸，形成骨小梁样结构；也有骨小片状结构形成。经四环素活体标记后，这些结节在蓝紫光荧光显微镜下显示金黄色荧光，表明它们是新生骨组织。该结构的钙盐染色、胶原染色也都呈阳性，充分反映骨结构中的钙及胶原成分，以及皮肤成纤维细胞在体外培养中的成骨作用     

皮肤伸展术对皮肤生物力学性质的影响

目的：观察皮肤伸展术对皮肤生物力学性质的影响。方法：将动物随机分为实验和对照两组，实验组3.5kg拉力持续牵拉伸展7d，对照组不予皮肤伸展，实验后1、2、3、4、6、8周两组分别切取蝶型皮肤标本，用WDW－100型Testing测力机测试其生物力学性质变化。结果：实验组平均破坏应力及延伸率1周时明显下降（断裂负荷开始即高），此后三者逐渐升高，4周时达高峰，此后逐渐恢复，6周时仍高于对照组和正常值（P＜0．01），实验组皮肤最大刚度1周时明显增高（P＜0．01），然后逐渐下降，8周时仍高于对照组和正常值。结论：伸展术后皮肤的韧性逐渐增强，皮肤的弹性降低，皮肤伸展术早期能引起生物力学特性的变化，但随后即逐渐恢复正常。     

周期性单轴牵张力对前软骨干细胞增殖影响的实验研究

目的观察周期性单轴牵张力对前软骨干细胞增殖能力的影响。方法免疫磁珠分选新生大鼠前软骨干细胞(precartilaginous stem cells,PSCs),取生长良好的第三代PSCs,通过四点弯曲细胞加压装置对细胞加载不同的机械牵张力(2 000、4 000μstrain),并在不同时间点(1、2、4和8 h)收集细胞,采用流式细胞仪检测应力刺激后PSCs的细胞周期及增殖指数的变化,揭示不同的牵张力在不同的时间点对PSCs增殖活性的影响。结果周期性单轴牵张力能影响大鼠PSCs的增殖活性。2 000μstrain机械牵张力组与对照组相比,增殖指数升高(P<0.05),促进细胞增殖,并且S期DNA合成率增多(P<0.05);而4 000μstrain机械牵张力组与对照组比较,增殖指数降低,抑制细胞增殖(P<0.05),同时S期细胞DNA合成率减少(P<0.05)。结论适宜的机械牵张力能促进PSCs增殖,过大的机械牵张力反而抑制细胞增殖。     

皮肤伸展术在皮瓣供区关闭中的应用

目的　探讨皮肤伸展术在皮瓣供区关闭中的应用 ,为关闭皮瓣供区提供一种新方法。方法　回顾总结 2 4例应用皮肤伸展术关闭皮瓣供区的病例。患者年龄为 3～ 48岁 ,游离皮瓣供区 2 1例 ,轴型皮瓣供区 3例 ,皮瓣宽度为 8～ 16cm。结果　全部病例的供区通过牵张后直接关闭缝合 ,随访结果显示无显著瘢痕增生和增宽。结论　皮肤伸展术操作简单 ,效果良好 ,是快速关闭比较宽的皮瓣供区的一种行之有效的方法     

机械牵张对豚鼠膀胱组织Cajal间质细胞形态学及兴奋性的影响

目的 探讨机械牵张对豚鼠膀胱组织Cajal间质细胞(ICC)形态及兴奋性的影响.方法 建立雌性豚鼠膀胱颈部分梗阻(PBOO)模型作为实验组.并设假手术组作为对照.术后4周取膀胱组织制片,免疫荧光染色观察2组ICC形态和分布情况;胶原酶消化豚鼠膀胱制细胞悬液,免疫荧光标记,流式细胞仪检测2组c-kit阳性细胞比率.在弹性硅胶膜七原代培养膀胱ICC,利用Fluo-4钙荧光指示剂检测机械牵张对ICC钙信号的影响.结果 2组豚鼠膀胱组织铺片均可见c-kit染色阳性典型长梭形有突起的ICC,主要分布于平滑肌肌束间;PBOO组膀胱平滑肌间质增厚,c-kit染色阳性细胞数量及其突起明显增多,互相连接呈网络状;PBOO组c-kit阳性细胞比率为(6.7±1.7)%,显著高于对照组的(1.0±0.5)%,差异有统计学意义(P＜0.05).体外培养的ICC可检测到自发性钙波,机械牵张刺激可诱导ICC发生钙波增强现象.结论 机械牵张可诱导膀胱ICC兴奋性增强;PBOO膀胱组织中ICC数量及相互联系显著增多.ICC可能参与了膀胱牵张感受功能并在长期牵张应力负荷下发生一定的适应性改变.     

皮肤牵张闭合器在儿童肢体创面缺损的治疗应用

目的:回顾性分析可调式皮肤牵张闭合器在儿童大面积肢体创面缺损的临床应用价值。方法:自2017年1月至2019年1月,应用可调式皮肤牵张闭合器处理儿童严重下肢创面缺损患儿11例,男9例,女2例,年龄4～12(8.3±2.7)岁,均为单侧下肢大面积创面缺损,其中车祸伤致肢体皮肤缺损4例,骨筋膜室切开减压术后无法缝合关闭3例,下肢骨折内固定术后钢板外露3例,皮肤撕脱伤清创缝合术后大面积缺血坏死1例。创面宽度(5.6±1.2) cm,长度(7.0±1.6) cm,均已行VSD负压引流、扩创缝合等处理,其中4例已行游离皮片植皮,2例已行局部皮瓣转移手术处理,植皮或皮瓣手术失败,前期治疗效果均不佳。结果:术后经持续牵引5～14(10.5±2.6) d后创面闭合,未再行植皮或者皮瓣修复处理。无创缘血供不佳、皮肤感染坏死、末梢感觉障碍等并发症发生。11例患儿均获随访,随访时间3～18(8.9±3.8)个月。创缘皮肤呈线性愈合,瘢痕轻微。结论:通过可调式皮肤牵张闭合器治疗儿童大面积肢体创面缺损,符合Wolff定律及组织自然重建理念,为治疗儿童肢体皮肤及软组织缺损提供了一种可供选择的有效方法。     

Possible age-associated change at cellular level in cultured fibroblasts derived from scar tissue

Summary This study was performed employing cytogerontologic analysis to investigate the in vitro proliferative capacity of the fibroblasts of scar and normal dermis obtained from the same individual. Scarderived fibroblasts had a shorter in vitro lifespan, longer cell population doubling time, diminished cell numbers at confluency and lower percentages of cell able to incoporate ³H-thymidine than comparable firoblasts derived from normal dermis. These results may indicate that the growth characteristics of scar-derived fibroblasts resemble those of late-passage levels of normal dermal fibroblasts.Presented at the 25th Annual Meeting of Japan Society of Plastic and Reconstructive Surgery, Kanazawa, May 13, 1982     

人结肠癌相关成纤维细胞对结肠癌Lovo细胞生物学行为的影响

目的探讨人结肠癌相关成纤维细胞（CAF）对结肠癌Lovo细胞增殖、黏附、迁移和侵袭等生物学行为的影响。方法收集人结肠CAF及正常成纤维细胞（NF）条件培养基,建立结肠CAF、NF与Lovo细胞间的共培养模型,以无血清培养基处理的Lovo细胞作为空白组．进行细胞增殖、黏附、迁移及Transwell侵袭能力检测。结果Lovo细胞与结肠CAF共培养后。增殖48和72h反映细胞增殖的吸光度（A）值分别为（0．667±0．059）和（0．709±0．030）,明显高于空白组[（0．574±0．031）和（0．593±0．031）]和NF组[（0．597±0．036）和（0．652±0．029）],差异均有统计学意义（P〈0．01）;黏附细胞的A值为（0．588±0．067）,也明显高于空白组（0．226±0．039）和NF组（O．375±0．059）,差异也均有统计学意义（P〈O．01）;12h和24h细胞迁移率分别为（35．2±8．7）％和（64．6±7．1）％,明显高于空白组[（14．7±3．6）％和（26．3±10．3）％]和NF组[（14．1±7．3）％和（35．2±9．8）％]（P〈O．01）;透膜细胞数为（56．2±4．8）个,多于空白组的（14．6±2．2）个和NF组的（22．9~4．5）个（P〈O．01）。结论人结肠CAF具有增强结肠癌Lovo细胞增殖、黏附、迁移和侵袭的能力。     

牵拉应力对三维培养的成骨样细胞的生物学效应

目的研究三维培养的克隆的鼠颅骨成骨样细胞(colonalmurinecalvarialosteoblast-likecellline,MC3T3-E1)在特定的周期性牵拉应力刺激下的增殖能力、碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)mRNA表达的变化,探讨牵拉应力对成骨细胞的生物学效应。方法以明胶海绵(2.00cm×2.00cm×0.25cm)作为MC3T3-E1的三维培养支架,每块明胶海绵种植细胞悬液100μl,细胞数目为1.25×105个。明胶海绵拉伸度为5%,频率60cycles/min,15min/h,牵拉后2、4、6、8、10d分别从牵拉组和对照组中各取3个样本,行细胞计数、细胞及培养液的ALP活性测定、细胞的OPNmRNA测定。结果牵拉后第2d牵拉组的细胞数目即多于对照组(P<0.05),细胞倍增时间从71h提前至55h。除第2d外,牵拉组细胞的ALP活性低于对照组(P<0.05),两组培养液中ALP活性均处于低水平,差异无统计学意义。各时相牵拉组OPNmRNA的表达整体水平高于对照组,对照组第4dOPNmRNA的表达接近牵拉组,其余各时相均低于牵拉组(P<0.05)。结论周期性牵拉应力促进三维培养的MC3T3-E1细胞增殖,抑制细胞的ALP活性,促进OPN的合成,增强细胞的分化能力。     

苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨苦参碱（Matrine,简称Mat）的药理活性,研究苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的抑制作用,为皮肤损伤后出现的增生性瘢痕的治疗提供理论支持及实验依据。方法：将不同浓度梯度Mat作用于体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞,测MTT反应的A。值及LDH值,利用通过流式细胞仪检测其细胞周期、DNA相对含量,用免疫组织化学检测Mat用药前后的细胞核内增殖性抗原（pr01iferatingcell nuclear antigen,PCNA）的表达。结果：增生性瘢痕成纤维细胞在一定范围内呈剂量依赖性增殖抑制,但LDH值无明显改变;DNA相对含量无明显变化,PCNA表达逐渐减弱。结论：Mat在体外能明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖而不引起细胞坏死性改变,但对DNA含量无明显影响。