RT—PCR检测急性早幼粒细胞白血病微小残留病

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，检测了２２列早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）缓解患者ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因。结果显示性率在缓解时间１年内（１１／１４）较１￣２年（２／５）及３年以上（０／３）明显高，持续阳性多预示着复发。认为检测ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因，可作为监测ＡＰＬ病情转归、评价疗效的重要指标。     

PML/RARα融合基因检测早幼粒细胞白血病微小残留病

目的:PML/RARα融合基因在监测急性早幼粒细胞白血病(APL)微小残留病(MRD)中的意义.方法:诱导缓解及巩固维持治疗期间,采用筑巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测患者骨髓细胞中PML-RARα融合基因的变化.结果:长期随访的18例完全缓解(CR)患者,2例分子学复发.其中1例发生于CRI后4个月,诱导缓解治疗后获CR2,CR2后2个月再次分子学与血液学的复发,诱导治疗1个疗程获得CR3;1例发生于CR1后74个月,诱导缓解治疗后获得CR2,随访结束时生存期已达106个月.结论:在CR期定期监测PML-RARα融合基因,可尽早发现分子学复发,及时治疗可避免血液学复发.     

急性B淋巴细胞白血病患者检测微小残留病的临床意义

采用多参数流式细胞仪对50例成人B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者缓解后的微小残留病(M RD)进行检测,结果显示,B-ALL完全缓解组和正常对照组骨髓M RD分别为(5.9462±4.8964)%和(0.5845±0.2014)%,二者比较有显著性差异(P<0.01);B-ALL持续缓解与复发者的骨髓M RD分别为(4.1436±1.6125)%和(42.3514±20.6451)%,二者比较有显著性差异(P<0.01)。诱导缓解至治疗3个月时M RD阳性患者复发率高,预后不良。提示对B-ALL患者用流式细胞术进行缓解后M RD检测,有利于其复发预测及早期个体化治疗选择。     

微小残留病在急性淋巴细胞白血病中的意义

<正>急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是一种累及骨髓早期淋巴前体细胞的克隆性疾病。该疾病从遗传背景、临床表现到预后都有很大的异质性。近年来,得益于儿童样化疗方案、异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)和CAR-T技术的应用,ALL的生存率得到了较大的提高[1-3]。在ALL治疗中对微小残留病(minimal residual disease,MRD)的监测,有助于临床医师判断治疗反应,     

现今微小残留病检测方法的临床价值

现今微小残留病检测方法的临床价值同济医科大学附属协和医院季守新综述王辨明，李崇渔审校微小残留病（ＭｉｎｉｍａＲｅｓｉｄｕａｌＤｉｓｅａｓｅＭＲＤ）是指急性白血病经过有效地化疗或骨髓移植，达到临床和血液学的完全缓解，体内残存微量白血病细胞的状态。估计此...     

急性髓系白血病的微小残留病干预治疗

<正>急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)因其含有大量的细胞遗传学或分子生物学改变而具有高度的异质性。诊断之初的上述改变可作为预后的标志[1],从而指导后续治疗,为不同危险度分层患者制定不同强度的治疗方案。在传统形态学疗效评价体系下,完全缓解(complete remission,CR)是一个重要的评价指标,指的是计数200～500个骨髓有核细胞情况下,白血病细胞占比<5%,同时中性粒细胞>1×109/L、血     

白血病微小残留病的研究进展

本文对白血病微小残留病的定义、方法学及临床应用的最新研究进展进行综述,探讨其新的概念内涵,以维持其特有的独立术语。     

急性早幼粒细胞白血病融合基因荧光定量动态检测的临床意义

目的利用逆转录荧光实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测急性早幼粒细胞白血病(APL)PML-RARα融合基因的方法,并观察其敏感度。方法建立荧光染料SYBR-Green1RQ-PCR技术,同时检测56例APL融合基因PML-RARα的表达水平,并且与传统巢式PCR方法进行敏感度比较。结果 RQ-PCR的灵敏度均可达到50拷贝,稍低于巢式PCR,但RQ-PCR定量准确,不易污染。分别取103和107拷贝的PML-RARα质粒以及患者cDNA同时作8次平行扩增,批内变异系数分别为7.31%、8.26%和5.02%,表明方法稳定。不同APL患者PML-RARα表达水平有较大差异,初诊患者PML-RARα/GAPDH比值介于0.018～0.799,中位值为0.070。结论RQ-PCR可以准确检测微小残留病(MRD)融合基因表达水平;监测融合基因表达可以有效观察治疗效果。     

免疫学方法检测急性白血病微小残留病变

急性白血病微小残留病变 ( MRD)是指经治疗达到完全缓解后 ,用传统形态学方法不能测出的体内残留微量白血病细胞。MRD在体内的存在范围很广 ,可在 1 0 0 ～ 1 0 10 之间。一般认为 MRD在 1 0 5～1 0 10时随时可导致复发 ,而 MRD在 1 0 5以下时即可依赖自身免疫机制控制残留瘤细胞。为了彻底根治白血病并避免盲目无意义的治疗 ,对 MRD检测方法的研究具有重要意义。但由于 MRD的分布、生长特点极为复杂 ,而且往往随着机体情况的变化而变化 ,因此能够随时、准确检测 MRD相当困难。免疫学方法作为主要方法之一 ,发展迅速 ,已越来越受到…     

微小残留病指导的急性髓细胞白血病分层治疗

微小残留病(MRD)已被常规用于急性髓细胞白血病(AML)患者的疗效评估和复发预测。本文从异基因造血干细胞移植适应证、移植方式、预处理方案以及移植后复发预防等方面讨论了MRD指导的个体化分层治疗。未来的研究应聚焦AML患者MRD检测及干预新方法的建立。     

长期生存急性早幼粒细胞白血病患者微小残留病变的测定

目的探讨ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因在急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）患者中微小残留病变（ＭＲＤ）监测的作用。方法利用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），检测ＡＰＬ患者中ＭＲＤ特异标志的ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因。结果１０例ＡＰＬ患者生存期已达７７～１０７个月的ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＲＤ的结果均为阴性。结论ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＲＤ阴性结果与ＡＰＬ患者长期生存间关系肯定。     

实时定量PCR监测急性早幼粒细胞白血病患者PML/RARα融合基因的临床意义

目的 探讨实时定量PCR检测急性早幼粒细胞白血病（APL） PML/RARα融合基因表达水平的意义.方法 用扩增培养的NB4细胞的PML/RARα融合基因进行梯度稀释作为标准品,ABL作为内参,建立标准曲线.采用TaqMan法进行实时定量PCR,并对方法的可靠性、可重复性及灵敏性进行测定.对14例APL患者在初治、诱导缓解及巩固治疗3个时期的PML/RARα mRNA转录本水平进行动态定量监测,结果以NQ表示,NQ=PML/RARα mRNA的拷贝数/ABL mRNA的拷贝数×105.结果 实时定量PCR方法可以检测出1×10-5μ g NB4细胞cDNA中PML/RARα的融合基因,其重复性和稳定性Ct值变异系数分别为1.77％和2.11％.14例患者初治时骨髓PML/RARα融合基因平均水平为3 731,经全反式维甲酸、三氧化二砷双诱导缓解时PML/RARα融合基因平均水平为231,化疗与维甲酸序贯巩固治疗2个疗程后PML/RARα融合基因平均水平为116.治疗前后比较,PML/RARα基因转录本水平明显下降（P＜0.05）.结论 实时定量PCR检测PML/RARα融合基因表达敏感性好、特异性高、重复性好,可用于急性早幼粒细胞的诊断和微小残留病的检测.     

急性白血病缓解后微小残留病灶的分子生物学检测

目的了解WT1基因（Wilms’tumor gene）与急性白血病缓解后微小残留病灶的关系。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测了急性白血病（AL）及慢性粒细胞白血病（CML）中WT1基因不同剪接体的表达情况。结果AL中WT1基因阳性表达率为50％，CML中WT1基因阳性表达率为40％，正常人无WT1基因表达，WT1基因4种剪接体的表达水平相近。结论WT1基因在白血病中呈较高表达，其结果可作为白血病残留病灶检测的指标。     

微小残留病精准检测指导急性髓系白血病分层治疗新进展

<正>急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是一组异质性强、侵袭性高、恶性细胞克隆性增殖的髓系肿瘤性疾病。尽管对AML发病机制研究不断深入,但治疗方法在近几十年来并未发生实质性的改变。蒽环类药物联合阿糖胞苷的诱导治疗方案可使大部分患者的骨髓细胞形态学达到完全缓解(CR,残留白血病细胞<5%),但相当比例患者出现复发,5年总生存率依然不到50%。同种异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是唯一公认的可以治愈中     

CIK细胞对白血病微小残留病作用的研究

目的 观察CIK细胞对自体、异体原代白血病细胞的杀伤作用,对G_0期CD34~+白血病细胞的细胞毒作用,及对正常骨髓造血干细胞的影响.方法 取急性白血病(AL)化疗后、慢性粒细胞白血病(CML)慢性期及正常人外周血单个核细胞加入一系列细胞因子诱导培养CIK细胞,流式细胞仪检测CIK表型,G带法分析CIK细胞核型.冻存、复苏后作为靶细胞,MTT法测定CIK细胞对自体、异体原代白血病细胞杀伤作用.AO染色法测定复苏后G_0期急性粒细胞白血病(AML) CD34~+细胞比例及培养后CML CD34~+细胞中G_0期细胞比例.流式细胞仪检测CIK细胞杀伤前后G_0期CD34~+细胞比例变化.半固体培养法检测CIK细胞对正常骨髓CFU-GM、BFU-E集落形成的影响.结果 CIK细胞可从白血病患者外周血中获得,来源于正常淋巴细胞,对自体原代白血病细胞有明显杀伤作用,对G_0期白血病细胞有明显抑制作用,对正常造血干细胞无杀伤作用.结论 CIK细胞可作为清除残留白血病细胞的有效工具.     

PCR技术在儿童ALL微小残留病中的检测及临床意义

目的：探讨ＰＣＲ检测ＡＬＬ－ＭＲＤ的重要性及临床意义。方法：运用ＰＣＲ技术，以ＩｇＨ和ＴｅＲγ基因重排作为标志，检测了４０例急性淋巴细胞白血病（ＡＡＬ）微小残留病（ＭＲＤ）。结果：７例初治未缓，１２例部分缓解（ＰＲ），１３例完全缓解（ＣＲ）的ＡＬＬ患儿ＭＲＤ检测阳性为另８例（１例ＰＲ、７例ＣＲ）ＭＲＤ阴性。发现ＣＲ时间赵长，ＭＲＤ阳性率越低，反之，ＣＲ时间越短，ＭＲＤ阳性率越高，结论：ＭＲＤ何作为     

积极开展儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病的定量监测

传统上儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）缓解的定义基于骨髓形态学,即光镜下低于5％的骨髓白血病细胞。以发病时的白血病细胞约10^10计算,在骨髓完全缓解后,体内仍残留大约10^8的白血病细胞,这种状态称为微小残留病（MRD）,它被认为是白血病复发的首要原因。目前95％以上的儿童ALL患者在诱导化疗结束后即可达到完全缓解,但仍有约20％的患者最终复发。     

微小残留病转阴所需疗程数在预后非良好的急性髓系白血病成人患者中的临床意义

目的:探讨预后非良好的成人急性髓系白血病(AML)患者微小残留病(MRD)转阴所需的疗程与总生存时间(OS)的关系。方法:回顾性分析2017年1月—2022年5月在哈尔滨医科大学附属第一医院诊治的237例初发预后非良好AML(非APL)成人患者的年龄、骨髓原始细胞比例、达完全缓解疗程数、FAB亚型、CD7、CD19、cMPO、初诊白细胞计数等临床资料。应用多参数流式细胞术获取MRD相关数据,并根据MRD转阴所需疗程数,将预后危险度进行重新分组,其中预后中等MRD 1个疗程转阴组(A组)共73例,预后不良MRD 1个疗程转阴组(B组)共53例,预后中等MRD≥2个疗程转阴组(C组)共22例,预后不良MRD≥2个疗程转阴组(D组)共22例,预后中等MRD持续阳性组(E组)共17例,预后不良MRD持续阳性组(F组)共50例,探讨MRD转阴所需疗程数与OS的关系。结果:A组、F组在年龄上差异有统计学意义(P=0.015);A组、B组、C组、D组、E组、F组患者1个疗程后获得完全缓解的比例依次为98.6%、100.0%、36.4%、31.8%、23.5%、24.0%(P<0.05);F组患...     

实时定量RT-PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因的临床意义

目的:探讨实时定量RT-PCR方法检测急性早幼粒细胞白血病(APL) PML/RARα融合基因的临床意义.方法:采用实时定量RT-PCR方法,用Taqman探针检测32例初治APL患者的PML/RARα融合基因3种异构体表达水平,并对治疗过程中的20例患者融合基因表达水平进行动态观察. 结果:①实时定量RT-PCR的敏感度为101拷贝数/μl,标准品日间差异及日内差异平均变异系数均<5%;②32例PML/RARα融合基因阳性的初治APL患者中,21例为PML/RARα融合基因长型异构体,11例为PML/RARα融合基因短型异构体;③32例初治患者PML/RARα融合基因表达量中位数和±s分别为1.44%,(1.29±1.46)%.比较异构体长型及短型标准拷贝数(NCN)中位数和±s分别为1.40%,(1.46±1.18)%和1.28%,(1.39±1.51)%,差异无统计学意义P<0.05;④20例治疗后APL患者PML/RARα融合基因表达水平随着临床治疗而改变.结论:①建立了检测APL微小残留病的高敏感性、高特异性的实时定量RT-PCR方法;②32例初治APL患者PML/RARα融合基因长型及短型异构体mRNA NCN差异无统计学意义;③PML-RARα融合基因表达水平的变化与临床疾病发展相一致,有助于疗效评价、微小残留病的检测和预后判断.     

急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因研究及其临床意义

目的 研究急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）ＰＭＬ／ＲＡＲα基因的亚型、变化以及与临床疗效、预后的关系。方法 采用筑巢式逆转录酶－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测初治ＡＰＬ患者ＰＭＬ／ＲＡＲα融合基因的ＲＮＡ异构体,监测完全缓解（ＣＲ）ＡＰＬ患者微小残留病（ＭＲＤ）。结果 ４９例且的ＡＰＬ患者ＰＭＬ／ＲＡＰα晤基因亚型,Ｓ型为４０．８％,Ｌ型较Ｓ型预后较好。分别采用三氧化二砷（ＡＳ２Ｏ３）、全反