端粒酶逆转录酶的研究进展

端粒是真核细胞染色体末端的特有结构，正常情况下随细胞分裂而缩短。端粒长度是决定细胞增殖能力和寿命的分子标志。人端粒酶是一种核糖核蛋白复合物，由人端粒酶逆转录酶（hTERT）、人端粒酶RNA组分（hTR）以及人端粒酶相关蛋白（hTEPl等）组成。端粒酶利用其自身hTR所携带的RNA为模板，在hTERT的逆转录催化下，将端粒重复序列合成到染色体末端，     

选择性剪接与肿瘤的发生发展

选择性剪接是产生蛋白质组多样性的重要机制，其过程受多种顺式作用元件和反式作用因子的调控。已经证明异常剪接与肿瘤的发生发展相关联。核苷酸序列内剪接调节因子的突变和细胞内剪接调控机制的改变都可导致许多肿瘤相关基因的剪接类型发生变化。本文总结了当前肿瘤中异常选择性剪接的机制和一些肿瘤相关基因的剪接改变而产生的生物学后果。目前也正在讨论选择性剪接可望作为肿瘤新的治疗手段。     

端粒酶的结构功能与前列腺癌的相关性研究进展

目的：端粒酶是一种特殊的DNA聚合酶，它能以自身内源性RNA为模板合成端粒序列并添加到染色体末端上，稳定染色体，阻止细胞分裂衰亡。端粒酶的激活是肿瘤获得无限生长能力的关键步骤，是众多肿瘤发展所必需的：对端粒酶的结构、功能及其对前列腺癌早期诊断、预防及为保存前列腺器官功能的早期治疗中的价值进行综述。资料来源：应用计算机检索Medline数据库1990—01／2003—12相关端粒酶的文章，检索词“telomerase，prostate neoplasm”，限定文章语言种类为英文。同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库2000—01／2003—12相关端粒酶的文章，检索词“端粒酶；前列腺肿瘤”，限定文章语言种类为中文。资料选择：对资料进行初审。纳入标准：有关端粒酶的结构功能与前列腺癌相关性的文献。排除标准：文献中重复研究、综述、Meta分析类文资料提炼：共收集到13篇有关端粒酶结构功能的文献，10篇有关端粒酶与前列腺癌相关性的文献。查找全文。资料综合：将所选资料按照以下顺序归纳总结：①端粒酶的结构与功能。②端粒酶与肿瘤的关系。③端粒酶在前列腺癌诊断、治疗中的应用。结论：端粒酶的激活与细胞的永生化和恶性肿瘤的发生发展密切相关。端粒酶活性的检测和以端粒酶为靶点的基因治疗为前列腺癌预防和早期干预提供实验学价值。     

端粒、端粒酶与肿瘤

人类对肿瘤及肿瘤细胞系研究表明端粒酶活性对于永生性肿瘤细胞生长可能起到关键作用 ,而正常体细胞大多未检出端粒酶活性 ,仅胚胎细胞、男性生殖细胞、造血干细胞和活化淋巴细胞中有表达。因此 ,分析和研究端粒酶活性 ,对于癌变的诊断、作为癌症化疗策略的抗端粒酶药物的潜在作用 ,都是十分令人感兴趣的 [1 ,2 ] 。1　端粒、端粒酶的结构与功能端粒 (telomere)是真核细胞染色体末端的特殊 DNA-蛋白质结构 ,端粒 DNA内含有大量的 5′TTAGGG3′重复序列 ,在体外形成发夹样折叠的 2级结构 ,为染色体末端提供了一个保护性的“帽子”,对防…     

端粒酶相关的抗肿瘤疗法

端粒、端粒酶与肿瘤发生的关系是近年来肿瘤研究领域的热点之一。端粒酶在 85 %以上的恶性肿瘤组织中阳性表达 ,在癌旁正常组织或良性肿瘤中仅为 4 2 % ,而在正常体细胞则一般为阴性。因此 ,有两种端粒酶相关的方式治疗端粒酶阳性的肿瘤细胞 ,一种是直接抑制端粒酶活性 ,另一种是靶向端粒酶表达的肿瘤细胞。把端粒酶作为肿瘤治疗的靶点为恶性肿瘤的早期诊断、预后估计及基因治疗开辟了一条新的途径     

可变剪接及其生物学意义

mRNA可变剪接在脊椎动物中尤其普遍.Johnson等[1]利用芯片杂交技术检测了人类基因组10 000多个外显子基因在不同组织和细胞中的可变剪接产物,结果表明至少74%的基因可发生可变剪接.而Wang等[2]研究表明,此比例可达到92%~94%.mRNA可变剪接极大地增加了真核生物基因表达的复杂程度和蛋白质功能的多样性,并且与人类疾病的发生存在密切联系.近来的研究多致力于可变剪接的调控机制、功能相关性可变剪接体数据库的建立及可变剪接产物的生理与病理功能.本文就可变剪接有关进展进行综述.     

端粒-端粒酶与血液病

真核生物的线状染色体与环状DNA相比具有可以进行快速重组和基因分配的优势,但同时在遗传过程中有处于不稳定的状态.在进化过程中,在染色体两端出现了一种特殊的DNA结构,由串联的重复序列(5-TTAGGG-3)组成,称为端粒(telomere).     

端粒酶的结构功能与前列腺癌的相关性研究进展

目的:端粒酶是一种特殊的DNA聚合酶,它能以自身内源性RNA为模板合成端粒序列并添加到染色体末端上,稳定染色体,阻止细胞分裂衰亡。端粒酶的激活是肿瘤获得无限生长能力的关键步骤,是众多肿瘤发展所必需的。对端粒酶的结构、功能及其对前列腺癌早期诊断、预防及为保存前列腺器官功能的早期治疗中的价值进行综述。资料来源:应用计算机检索Medline数据库1990-01/2003-12相关端粒酶的文章,检索词“telomerase,prostateneoplasm,限定文章语言种类为英文。同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库2000-01/2003-12相关端粒酶的文章,检索词“端粒酶;前列腺肿瘤”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审。纳入标准:有关端粒酶的结构功能与前列腺癌相关性的文献。排除标准:文献中重复研究、综述、Meta分析类文章。资料提炼:共收集到13篇有关端粒酶结构功能的文献,10篇有关端粒酶与前列腺癌相关性的文献。查找全文。资料综合:将所选资料按照以下顺序归纳总结:①端粒酶的结构与功能。②端粒酶与肿瘤的关系。③端粒酶在前列腺癌诊断、治疗中的应用。结论:端粒酶的激活与细胞的永生化和恶性肿瘤的发生发展密切相关。端粒酶活性的检测和以端粒酶为靶点的基因治疗为前列腺癌预防和早期干预提供实验学价     

端粒-端粒酶与血液病

真核生物的线状染色体与环状ＤＮＡ相比具有可以进行快速重组和基因分配的优势 ,但同时在遗传过程中有处于不稳定的状态。在进化过程中 ,在染色体两端出现了一种特殊的ＤＮＡ结构 ,由串联的重复序列 (5 ＴＴＡＧＧＧ 3)组成 ,称为端粒 (ｔｅｌｏｍ ｅｒｅ)。端粒可以保护染色体末端不被降解或出现端-端融合并由此保证染色体的完整性。不同种属生物的端粒的长度范围有显著差异。同一生物的不同组织的细胞。甚至相同组织的不同细胞 ,由于处于不同的生命时相 ,端粒的长度也不尽相同。体细胞无论是体内分裂或是体外传代 ,细胞每分裂一次端粒缩…     

端粒-端粒酶与血液病

真核生物的线状染色体与环状DNA相比具有可以进行快速重组和基因分配的优势,但同时在遗传过程中有处于不稳定的状态.在进化过程中,在染色体两端出现了一种特殊的DNA结构,由串联的重复序列(5-TTAGGG-3)组成,称为端粒(telomere).端粒可以保护染色体末端不被降解或出现端-端融合并由此保证染色体的完整性.不同种属生物的端粒的长度范围有显著差异.作者简介程军(1971-),男,四川邻水县人,医学硕士,主要从事血液病临床工作.……     

端粒酶hTRT mRNA在口腔鳞癌及癌前病变中的表达

目的探讨端粒酶hTRT mRNA在口腔鳞癌及癌前病变组织中的表达相关性。方法采用原位杂交法检测病变组织中的hTRT mRNA的表达水平,标本取自哈尔滨医科大学第二附属医院口腔颌面外科病理室1980年至2000年的病理标本,其中口腔鳞癌46例、非典型增生18例、单纯性增生5例、肿瘤周围邻近组织5例、正常口腔黏膜2例,共76例口腔病理标本。结果80.5%鳞癌（37/46）、55.6%非典型增生（10/18）、20%单纯性增生（1/5）、20%肿瘤周围邻近组织（1/5）、0%正常口腔黏膜（0/2）,端粒酶hTRTmRNA显示阳性表达。其中口腔鳞癌与非典型增生之间端粒酶hTRTmRNA表达差异有统计学意义（P〈0.05）,重度非典型增生与轻度及中度非典型增生之间端粒酶hTRT mRNA表达差异有统计学意义（P〈0.05）,口腔鳞癌各临床分期之间差异无统计学意义（P〉0.5）。结论端粒酶hTRTmRNA在口腔鳞癌及癌前病变中均有表达,端粒酶活性的激活可能发生在口腔癌前病变晚期,其活性的激活是口腔癌前病变恶变及恶性肿瘤形成的重要因素。     

鼻咽癌端粒酶催化亚单位的表达及其临床意义

[目的]研究人端粒酶催化亚单位（端粒酶逆转录酶hTERT）在鼻咽和鼻咽癌组织中的表达,探讨端粒酶催化亚单位的表达与鼻咽癌恶性生物特性的相关性.[方法] 应用免疫组化技术检测端粒酶催化亚单位在38例鼻咽慢性炎性黏膜组织和56例鼻咽癌组织中的表达,结合临床鼻咽癌TNM分期、淋巴结转移以及患者生存期等指标进行分析.[结果]①鼻咽癌组织hTERT的阳性率为78.6%,与鼻咽慢性炎性黏膜组织hTERT的阳性率15.8%比较差异具有显著性（P〈0.01）;②端粒酶催化亚单位的表达与鼻咽癌临床分期、颈部淋巴结转移以及患者的存活期之间无显著性差异（P〉0.05）.[结论]端粒酶催化亚单位与鼻咽癌密切相关,端粒酶催化亚单位的表达改变可能在鼻咽组织癌变早期起重要作用.     

端粒和端粒酶与肝细胞的永生化

目的:端粒是位于真核细胞染色体末端的蛋白-DNA复合体,保护染色体完整性和稳定性。端粒酶是一种特殊的细胞核蛋白反转录酶,能以自身的RNA为模板,反转录合成端粒DNA序列,添加到染色体末端。端粒酶介导的端粒延长作为细胞中端粒缩短的主要补偿机制,对正常细胞以及肿瘤细胞延长分裂代数起着重要作用。分化良好并具有肝脏正常合成代谢功能的永生化肝细胞在生物医学研究,尤其是肝细胞移植、生物人工肝支持治疗以及药理学和毒理学研究方面具有广泛的应用前景。资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库1990-01/2005-12有关端粒、端粒酶和肝细胞永生化的文章,检索词“telomere,telomerase,hepatocyte,immortalization”,限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库1994-01/2005-12期间的相关文章,检索词“端粒、端粒酶、永生化、肝细胞”,限定文章语言种类为中文。资料选择:纳入标准:①有关端粒和端粒酶结构和功能的研究文献。②有关端粒、端粒酶与肝细胞永生化相关性的文献。排除标准:重复研究。资料提炼:共收集到32篇有关端粒、端粒酶与肝细胞永生化相关性的文献,查找全文,从中选取14篇作为主要参考文献。资料综合:将所选文献资料按照以下顺序归纳总结:①端粒的结构和功能:端粒是指位于真核细胞染色体末端的一种特殊结构,由富含G的DNA重复序列与端粒结合蛋白所构成的一种蛋白-DNA复合体,它既可保护染色体不受核酸酶的破坏,又避免了因DNA粘性末端的裸露而发生的染色体融合。②端粒酶的结构和功能:端粒酶是一种RNA依赖的DNA聚合酶,能以自身的RNA为模板,反转录合成端粒DNA序列,添加到染色体末端,以补偿细胞分裂时端粒DNA缩短,使细胞克服危机期,成为永生化细胞。③端粒、端粒酶在肝细胞永生化:将端粒酶基因转染正常的人体细胞能使一部分细胞的寿命延长,这一技术目前已成功用于延缓组织工程细胞的衰老。结论:端粒酶的活化和端粒长度的维持与肝细胞永生化密切相关,端粒酶介导的永生化肝细胞为生物人工肝脏、肝细胞移植等临床治疗提供了细胞学基础。     

端粒酶与肝癌的关系

端粒是染色体末端的特殊结构，其长度随细胞分裂而进行性缩短，端粒酶是由RNA和蛋白质组成的复合体，能以自身RNA为模板，合成端粒序列。端粒酶活性在永生化细胞及几乎所有急性肿瘤中被检测到，并在肝癌的发生、发展过程中起关键作用。综述如下。     

年龄相关性白内障晶体上皮细胞凋亡与端粒酶的表达

目的：探讨年龄相关性白内障及正常晶状体上皮细胞的端粒酶活性的表达及其在年龄相关性白内障发生发展中的作用。方法：实验于2003—01／06在福建医科大学附属第一医院中心实验室完成。采用端粒重复序列扩增-银染法及端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法两种方法检测9例年龄相关性白内障、3例正常晶状体上皮细胞的端粒酶活性。结果：端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法检测结果：9例年龄相关性白内障及3例正常晶状体上皮细胞中端粒酶均呈阳性，A值分别为0．5371&;#177;0．3407．1．2077&;#177;0．1545，年龄相关性白内障组晶状体上皮细胞中端粒酶活性明显低于正常组，差异具有显著性意义(X^2=66．23，P&;lt;0．05)。端粒重复序列扩增-银染法检测结果：阳性对照正常、年龄相关性白内障晶状体上皮细胞标本的提取液均为阳性，可见52bp及相差6bp的梯性条带，阴性对照标本均未见梯性条带。结论：端粒酶活性的降低可能是年龄相关性白内障晶状体上皮细胞发生凋亡的一个重要机制，端粒酶在年龄相关性白内障的发生发展中起着重要的作用。     

端粒和端粒酶与肝细胞的永生化

目的：端粒是位于真核细胞染色体末端的蛋白-DNA复合体，保护染色体完整性和稳定性。端粒酶是一种特殊的细胞核蛋白反转录酶，能以自身的RNA为模板，反转录合成端粒DNA序列，添加到染色体来端。端粒酶介导的端粒延长作为细胞中端粒缩短的主要补偿机制，对正常细胞以及肿瘤细胞延长分裂代数起着重要作用、分化良好并具有肝脏正常合成代谢功能的永生化肝细胞在生物医学研究，尤其是肝细胞移植、生物人工肝支持治疗以及药理学和毒理学研究方面具有广泛的应用前景。 资料来源：应用计算机检索Pubmed数据库1990—01／2005—12有关端粒。端粒酶和肝细胞永生化的文章，检索词“telomere，telomerase，hepatocyte，immortalization”，限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库1994-01／2005—12期间的相关文章，检索词“端粒、端粒酶、永生化、肝细胞”，限定文章语言种类为中文。 资料选择：纳入标准：（1）有关端粒和端粒酶结构和功能的研究文献：②有关端粒、端粒酶与肝细胞永生化相关性的文献：排除标准：重复研究。 资料提炼：共收集到32篇有关端粒、端粒酶与肝细胞永生化相关性的文献，查找全文，从中选取14篇作为主要参考文献。 资料综合：将所选文献资料按照以下顺序归纳总结：①端粒的结构和功能：端粒是指位于真核细胞染色体末端的一种特殊结构，由富含G的DNA重复序列与端粒结合蛋白所构成的一种蛋白-DNA复合体，它既可保护染色体不受核酸酶的破坏，又避免了因DNA粘性末端的裸露而发生的染色体融合．②端粒酶的结构和功能：端粒酶是一种RNA依赖的DNA聚合酶，能以自身的RNA为模板，反转录合成端粒DNA序列，添加到染色体末端，以补偿细胞分裂时端粒DNA缩短，使细胞克服危机期，?     

端粒酶hTERT基因转录调节的研究进展

端粒酶是维持端粒长度的一种逆转录酶,对细胞增殖和癌变起重要作用。端粒的磨耗限制大多数体细胞的复制,肿瘤细胞主要通过转录上调端粒酶限制成分———催化亚基端粒酶逆转录酶(hTERT)维持端粒长度。进一步认识端粒酶hTERT基因表达的调节机制,对肿瘤的诊断、防治有着重要意义。现就近几年来E-box结合蛋白、核激素、肿瘤相关病毒蛋白和RNAi抑制hTERTmR-NA表达及其他因素调节端粒酶hTERT基因表达作一综述。     

端粒酶催化亚单位在病理性瘢痕组织中的表达及意义

目的：观察反映端粒酶的活性的端粒酶催化亚单位在病理性瘢痕组织中的表达情况。方法：实验于2005—05／07在长海医院中心实验室进行。取增生性瘢痕标本和瘢痕疙瘩标本各18例，来源于2004—06／2005—05解放军第二军医大学长海医院整形外科手术患者；正常皮肤标本18例，取自瘢痕邻近的正常皮肤。采用SP免疫组化法，对3组皮肤标本中成纤维细胞端粒酶催化亚单位蛋白表达进行检测，观察其阳性颗粒的平均吸光度A值和阳性面积率。结果：①端粒酶催化亚单位阳性颗粒的平均吸光度：瘢痕疙瘩组高于正常皮肤和增生性瘢痕组（5．940&;#177;0．675，0．456&;#177;0．078，1．352&;#177;0．193，P〈0．01）．增生性瘢痕组高于正常皮肤（P〈0．05）。②端粒酶催化亚单位的阳性面积率：瘢痕疙瘩组高于正常皮肤和增生性瘢痕组[（0．203&;#177;0．025）％，（0．038&;#177;0．010）％，（0．067&;#177;0．011）％，P〈0．01]，增生性瘢痕组高于正常皮肤（P〈0．05）。结论：端粒酶在病理性瘢痕中表达增高，与病理性瘢痕发生、发展及其演变过程密切相关。设想减少端粒酶催化亚单位在病理性瘢痕成纤维细胞的过度表达从而抑制端粒酶活性或许是抑制瘢痕增生的新途径。     

端粒酶表达延长人骨髓间充质干细胞生命周期的实验

目的:构建并鉴定人端粒酶反转录酶(humantelomerasereversetranscrip-tase,hTERT)和增强型绿色荧光蛋白EGFP)双基因共表达重组真核表(达质粒并转染人骨髓间充质干细胞(humanbonemarrowderivedmes-enchymalstemcells,hBMMSCs)。比较转染细胞与非转染细胞体外培养的生命周期。方法:实验于2002-10/2003-06在第三军医大学医院烧伤研究所完成。扩增pGRN145质粒,EcoRⅠ酶切回收hTERT片断;利用基因重组技术将hTERT连接到IRES2-EGFP载体中,XhoⅠ酶切和测序分别对重组质粒进行鉴定。用NucleofectorTM技术将构建的重组质粒转染hBMM-SCs。相同条件下体外培养转染细胞与非转染细胞,分别观察其细胞形态和生命周期。结果:成功构建了hTERT和EGFP双基因共表达重组真核表达质粒并成功转染了hBMMSCs。体外培养结果显示:非转染细胞到27PD(Populationdoubling)时出现细胞衰老、死亡、增殖停止;转染细胞到70PD时细胞形态无明显改变,细胞继续生长。结论:hTERT异位表达可以显著延长hBMMSCs体外培养生命周期,这为基因修饰hBMMSCs的单克隆筛选奠定了基础。