GDNF重组腺病毒对损伤运动神经元的保护作用

目的：观察携带胶质细胞源性神经营养因子（ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＧＤＮＦ）基因的重组腺病毒（ＡｄＣＭＶｇｄｎｆ）对损伤运动神经元的保护作用。方法：采用培养运动神经元的谷氨酸损伤模型,评价ＧＤＮＦ重组腺病毒对损伤运动神经元的影响,指标是运动神经元计数。结果：（１）建立了运动神经元谷氨酸损伤模型：当培养注保加入０．５ｍｇｏｌ·Ｌ＾－１的谷     

人神经生长因子基因真核细胞表达载体的构建与鉴定

目的：构建携带人神经生长因子（ｈ Ｎ Ｇ Ｆ） 基因的真核细胞表达载体,为应用 Ｎ Ｇ Ｆ 进行老年性痴呆（ Ａ Ｄ） 等疾病基因治疗打基础。方法：应用基因重组技术将ｈ Ｎ Ｇ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆到逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｘ Ｓ Ｎ 中,用限制性内切酶酶切分析重组质粒ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 中ｈ Ｎ Ｇ Ｆ基因的插入方向,用 Ｐ Ｃ Ｒ、斑点杂交和 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交对重组质粒ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 作进一步鉴定。结果：ｈ Ｎ Ｇ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ已正确地克隆到逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｘ Ｓ Ｎ 中,而构建成重组逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ。结论：真核细胞表达载体ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 的成功构建,为进一步开展 Ｎ Ｇ Ｆ基因治疗 Ａ Ｄ 等中枢神经系统疾病奠定了基础。     

腺病毒介导的脑源性神经营养因子表达对大鼠损伤脊髓轴突的保护作用

目的：研究腺病毒介导的脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）基因在大鼠损伤疹髓内的表达规律,观察外源性ＢＤＮＦ对损伤脊髓的作用。方法：利用激光束描记位移的重力打击装置,制备可靠 的定量损伤模型;以直接法将带有ＢＤＮＦ基因表达框的复制制陷重组腺病载体直接转移至大鼠损伤脊髓,用Ｘ－Ｇａｌ染色检测基因转移有效性,并观察损伤轴突计量形态学改变,抽伤脊髓ＢＤＮＦｍＲＮＡ表达,ＢＤＮＦ和神经中丝（Ｎｅｕｒｏｆｉｌａｎ     

非胰岛素依赖型糖尿病病人血浆vWF的测定

目的探讨非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）病人血管假血友病因子（ｖＷＦ）的改变及格列吡嗪（Ｇｌｉｐｉｚｉｄｅ）对治疗的影响。方法对２３例未出现并发症的ＮＩＤＤＭ病人血浆ｖＷＦ进行了测定，并用Ｇｌｉｐｉｚｉｄｅ治疗。结果ＮＩＤＤＭ病人血浆ｖＷＦ水平显著高于对照组（１．７９±０．３７ｖｓ１．２９±０．１６）；Ｇｌｉｐｉｚｉｄｅ治疗２个月后血浆ｖＷＦ水平显著下降（１．７９±０．３７ｖｓ１．５６±０．２９），但仍高于对照组（１．５６±０．２９ｖｓ１．２９±０．１６）。结论ＮＩＤＤＭ病人在出现并发症之前，就已有血管内皮损伤；Ｇｌｉｐｉｚｉｄｅ治疗可减轻血管内皮细胞损伤的程度，降低或延缓糖尿病血管病变的发生     

胶质源性神经营养因子对脊髓损伤后前角运动神经 …

目的：探讨胶质细胞源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）对唯物事运动神经元的保护作用。方法：大鼠分为假手术组、生理盐水（ＮＳ）组和ＧＤＮＦ组,改良Ａｌｌｅｎ法撞击致伤Ｔ１２脊髓,蛛网膜下腔分别给予ＮＳ和ＧＤＮＦ,分别取不同时间的伤段脊髓进行切片,应用酶组织化学染色方法显示脊髓前角外侧核运动神经元中胆碱酯酶（ＣｈＥ）和酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性,并结合计算机进行图像分析。结果：ＧＤＮＦ组较ＮＳ组ＣｈＥ活性显著增     

反义N-ras-1基因对成纤维细胞生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的应用反义Ｎ－ｒａｓ１基因阻断成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的促增殖作用，为防治以血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖为主要特征的血管损伤后再狭窄等心血管疾病提供进一步探索的途径。方法利用构建的含反义Ｎ－ｒａｓ１基因的逆转录病毒质粒（ｆｐＧｖ１－ＭＴ－ＡｎｔｉｓｅｎｓｅＮ－ｒａｓ１）转染于培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ），ｆｐＧｖ１－ＭＴ逆转录病毒空载质粒及未转染质粒的细胞为对照，观察其对ｂＦＧＦ诱导的ＶＳＭＣ的影响。结果反义Ｎ－ｒａｓ１细胞数为（１６．８±１．３）×１０４（细胞／ｍｌ），空载质粒对照细胞为（３０．１±１．２）×１０４，两者差异有显著意义（Ｐ＜０．００１）；反义Ｎ－ｒａｓ１细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入率为７６４３±６７２（ｃｐｍ），空载质粒对照细胞为１５１３１±１３８（ｃｐｍ），两者差异有非常显著意义（Ｐ＜０．００１），同时应用反义Ｎ－ｒａｓ１基因的细胞ＲａｓｍＲＮＡ表达水平明显降低，其表达蛋白ｐ２１也明显降低。结论反义Ｎ－ｒａｓ１基因对ＶＳＭＣ及ｂＦＧＦ诱导ＶＳＭＣ增殖有抑制作用。     

GDNF在大鼠坐骨神经雪旺氏细胞中表达的研究

ＧＤＮＦ在大鼠坐骨神经雪旺氏细胞中表达的研究第三临床学院手外科崔树森徐莘香＊尹维田郑永晨ＧＤＮＦ（Ｇｌｉａｌｃｅｌｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ）是近来发现并已克隆其基因的一个蛋白因子。其对运动神经元的作用是迄今发现最强...     

神经生长因子对感觉轴突再生的作用

目的；比较前列腺素Ｅ１（ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎＥ１，ＰＧＥ１）神经生长因子（ｅｒｖｅ Ｇｒｏｗｔｈ ＦａｃｔｏｒＮＧＦ）对感觉轴突再生的作用。方法：将坐骨神经夹毁的模型大鼠分组，术后每日分别局部注射一定剂量的ＰＧＥ１，ＮＧＤ，ＮＧＦ＋腺苷（实验组）和生理盐水（对照组），用捏夹试验（ｐｉｎｃｈ ｔｅｓｔ）测感觉轴突再生的延迟时间和再生速度。结果 ：ＮＧＦ组无再生延心，ＰＧＥ１有再生延迟（１．３天     

DDPH对缺氧内皮细胞条件培养液致肺动脉平滑肌细胞PDGF mRNA表达的影响

利用地高辛标记的ｃＤＮＡ探针，原位检测ＤＤＰＨ［１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙胺基）丙烷酸盐］对缺氧内皮细胞条件培养液致猪ＰＡＳＭＣＰＤＧＦ基因表达的影响。实验分６组：常氧、低氧无血清培养液组（Ｎ、Ｈ组），常氧、低氧内皮细胞条件培养液组（ＮＥＣＣＭ、ＨＥＣＣＭ组），ＮＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ、ＨＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ组。用自动图像分析仪检测各组细胞ＰＤＧＦ－Ａ和－Ｂ链杂交产物的平均光密度（ＯＤ）值。结果：ＨＥＣＣＭ组ＰＤＧＦ－Ａ和－Ｂ链ｍＲＮＡ表达量分别是ＮＥＣＣＭ组的１．４０、１．４９倍（Ｐ＜０．０１），分别是Ｎ组的１．８倍、１．７倍（Ｐ＜０．０１），ＨＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ组ＰＤＧＦ－Ａ、－Ｂ链ｍＲＮＡ表达量分别为ＨＥＣＣＭ的０．７３倍、０．６５倍（Ｐ＜０．０１），与ＮＥＣＣＭ组相比，均无显著差异。提示ＤＤＰＨ在ＰＤＧＦ基因转录水平抑制ＨＥＣＣＭ诱导的ＰＡＳＭＣ的增殖。     

人血管生长素衍生物的重组腺病毒制备

目的：构建并鉴定血管生长素（ＡＮＧ）衍生物重组腺病毒,为心肌缺血区促血管生长因子基因转染研究作准备。方法：ＡＮＧ衍生物Ｄ１１６Ｈ－ＡＮＧ重组粘粒与腺病毒ＤＮＡ末端肽复合物混合后以磷酸钙共沉淀法转染２９３人胚肾细胞株细胞。结果：酶切结果显示,重组粘粒中,Ｄ１１６Ｈ－ＡＮＧ插入方向正确,所获重组腺病毒带有ＡＮＧ衍生物基因。结论：所获重组腺病毒为Ｅ１,Ｅ３缺陷型,可进一步用于基因治疗研究。