葡萄球菌A蛋白抗癌机理的研究 Ⅱ、葡萄球菌A蛋白对小鼠自然杀伤细胞活性的影响

采用~(125)Ⅰ—udD标记肿瘤靶细胞RNA释放试验,对体内注射SpA纯品或SpA菌体后小鼠脾细胞自然杀伤(NK)活性进行了观测,结果表朋,SpA或SpA菌体经皮下或腹腔注射均可增强小鼠细胞NK活性,SpA菌体所诱导的NK活性似乎高于SpA纯品所诱导的NK效应。     

葡萄球菌A蛋白抗癌机理的研究 Ⅲ、葡萄球菌A蛋白对小鼠巨噬细胞和NK细胞的体外刺激效应

本文观察了纯化的SpA和SpA菌体对小鼠巨噬细胞和NK细胞的体外刺激效应,并与CP作了比较。结果表明:(1) 纯化的SpA和SpA菌体在体外刺激小鼠腹腔巨噬细胞24小时,可使后者的细胞毒性效应明显增强,但总的看来,SpA菌体激活巨噬细胞的作用不如CP。(2) 纯化的SpA和SpA菌体以及CP在体外均可提高小鼠脾细胞NK活性,三者的作用强度相近。     

含A蛋白葡萄球菌对肉瘤S180和小鼠恶性淋巴瘤ARS免疫治疗效果的初步观察

小鼠腹腔接种1×10~5个小鼠肉瘤S180或恶性淋巴瘤(ARS)瘤细胞后,腹腔注射SpA菌体,可获得明显的免疫治疗效果。注射SpA菌体时间越接近瘤细胞接种日期,免疫治疗效果越好,对S180和ARS的保护率可分别达44.5—55.4％和62.5—80％,相反,给SpA菌体的时间越晚,治疗效果越差,这表明SpA菌体的免疫治疗效果与瘤细胞增殖数量有关。根据实验结果,对SpA菌体作为免疫调整剂用于肿瘤治疗的可能性进行了讨论。     

含A蛋白葡萄球菌对小鼠淋巴细胞白血病免疫预防效果的初步观察

本文首次报道,SpA菌体腹腔免疫615系小鼠、对10~3及10~4个L615白血病细胞攻击具有明显的免疫保护效果。实验用鼠SpA菌腹腔免疫后三周,分别用1×10~4个及1×10~3个L615细胞腹腔攻击,观察一个月,死亡动物平均存活时间分别为16.2±6.7天及25.3±2.0天,比对照组(平均存活期分别为7.3±0.5及12.9±0.5天),明显延长,抑制率达128.9％及95.7％,保护率为33.3％及50％。对存活期>30天的动物,以1×10~5个L615细胞重复攻击,平均存活时间为39.0±21.7天,比对照组(平均存活期7.3±0.3天)显著延长,抑制率达437.9％。结果表明,SpA菌体腹腔免疫可诱导一定强度的抗肿瘤免疫保护效应。     

含A蛋白葡萄球菌对小鼠肝癌恶性淋巴瘤及白血病免疫预防效果的进一步研究

615系小鼠及昆明种小鼠经含A蛋白葡萄球菌SpA菌体经腹腔免疫后两周,分别用小鼠腹水肝癌(H_(22)),恶性淋巴瘤(ARS)及白血病(L7712)细胞1×10~5腹腔攻击,观察2个月,实验结果表明:SpA菌体免疫对H_(22)肝癌细胞攻击的保护率为30％,抑制率为143.6％;对ARS恶性淋巴瘤细胞攻击的保护率为15％,抑制率达207.8％;对L7712白血病细胞攻击的抑制率为216.0％。SpA菌体诱导免疫保护效应强度不低于厌氧棒状杆菌(CP)组免疫。这些结果说明,SpA菌体腹腔免疫能诱导非特异的抗肿瘤免疫效应。     

葡萄球菌A蛋白体内抗肿瘤效应及某些机理的实验研究

本研究通过~(125)I-udR标记肿瘤细胞DNA释放试验和扫描电镜,观察了SPA和SAC直接体内注射对带瘤小鼠腹腔巨噬细胞细胞毒及其超微结构和脾脏NK细胞细胞毒的影响;SPA和SAC对瘤细胞的直接毒效应。结果表明,SAC治疗后巨噬细胞明显活化,其体积可达对照组的2—3倍,表面皱褶增多、增厚,有许多粗大的伪足;SPA和SAC均能使巨噬细胞、NK细胞、细胞毒活性显著增强,与抗肿瘤效应的强弱似呈一致关系;二者无直接瘤细胞毒效应。这些结果提示,葡萄球菌A蛋白体内注射的抗肿瘤机制与其增强巨噬细胞和NK细胞活性有关,而与直接瘤细胞毒作用无关。     

金黄色葡萄球菌DNA对小鼠免疫功能的影响

目的探讨金黄色葡萄球菌DNA对正常小鼠免疫功能的影响。方法纯化提取金黄色葡萄球菌DNA并注射于小鼠腹腔内,测定脾脏自然杀伤(NK)细胞、腹腔巨噬细胞(Mφ)的杀伤活性以及小鼠血清内IFNγ、TNFα的活性。结果实验组NK、Mφ细胞杀伤活性分别为:(75.0±13.9)%,(74.7±6.9)%;对照组分别为:(53.2±17.4)%,(53.8±8.8)%,两组数据各自比较差异均有显著性(P<0.01)。实验组IFNγ、TNFα的活性分别为120.33±45.32,28.77±8.51;对照组分别为125.25±27.57,25.40±9.68,两组数据各自比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论金黄色葡萄球菌DNA可提高小鼠NK、Mφ细胞的活性,但对小鼠血清内IFNγ、TNFα的活性无显著影响。     

心肌特异性自身细胞毒反应中单核细胞趋化蛋白-1的作用

目的:研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在介导心肌特异性自身细胞毒反应中的作用.方法:腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3)建立病毒性心肌炎小鼠模型,正常对照组腹腔注射生理盐水.在腹腔注射后7 d和9 d分离外周血单个核细胞(PMNCs)和心肌组织浸润的单个核细胞(IMNCs),用10 μg/L MCP-1与PMNCs进行趋化试验,并用1 mg/L、2.5 mg/L和5 mg/L的抗MCP-1多抗做抗体阻断趋化试验,计算趋化指数.差异贴壁法体外分离BALB/c小鼠心肌细胞,以其作靶细胞,用经MCP-1趋化的PMNCs或分离的IMNCs作效应细胞,进行细胞介导的细胞毒试验,计算效应细胞的特异性杀伤率.结果:CVB3感染后7 d小鼠IMNCs对正常心肌细胞的特异性杀伤率是(41.3±7.3)%,高于对照组的(18.3±2.9)%(P＜0.01);与感染后7 d相比,感染后9 d的小鼠心肌IMNCs对心肌细胞的特异性杀伤率增强至(59.2±4.7)%(P＜0.05).MCP-1对CVB3感染9 d小鼠PMNCs的趋化指数为4.3±0.4,2.5 mg/L和5 mg/L的抗MCP-1抗体均可完全阻断此趋化活性.经MCP-1趋化的PMNCs对正常心肌细胞的特异性杀伤率为(43.7±4.7)%,高于对照的(12.2±2.8)%(P＜0.01).结论:病毒性心肌炎心肌组织中的IMNCs对正常心肌细胞有自身细胞毒活性.MCP-1可能是介导心肌特异性自身细胞毒性单个核细胞迁移的一个重要因素.     

SpA菌体吸收肿瘤病人血清的研究(Ⅱ、吸附有肿瘤Ig的SpA菌体对吞噬细胞吞噬功能的影响)

我们观察了吸附有肿瘤病人血清中Ig的SpA菌体对吞噬细胞吞噬功能的影响。实验发现,小鼠腹腔巨噬细胞、正常人外周血中性粒细胞和单核细胞对吸附有肿瘤病人血清Ig的SpA菌体的吞噬(吞噬率和吞噬指数)显著高于对SpA菌体的吞噬(P<0.001)。提示吸附有肿瘤病人血清中Ig的SpA菌体所明显增强吞噬细胞的吞噬功能,此结果有助于阐明SpA菌体的体内抗瘤机制。     

厌氧棒状杆菌菌苗抗癌机制研究—对小鼠腹腔巨噬细胞结构和功能的影响(文摘)

厌氧棒状杆菌菌苗(简称菌苗)对多种实验肿瘤有明显的抗癌效应,业已证明巨噬细胞是机体抗肿瘤免疫监护效应细胞之一,肿瘤内巨噬细胞聚集的数量与肿瘤扩散有密切关系。本文报道实验性小鼠腹腔注射菌苗后,观察腹腔巨噬细胞结构的变化,并同时测定上述巨噬细胞对~(125)I-尿嘧啶核苷标记肿瘤细胞的杀伤效应。     

小鼠腹腔巨噬细胞不同分离方法的比较

[摘要]　目的　比较不同方法分离的小鼠腹腔巨噬细胞的生物学特性并找出最优方法。　方法　采用3种方法分离小鼠腹腔巨噬细胞：5%淀粉肉汤小鼠腹腔注射3 d后灌洗（5%淀粉肉汤组）;直接DMEM液腹腔灌洗（无血清DMEM组）;含75%血清DMEM液腹腔注射30 min后灌洗（75%血清DMEM组）,每组6只小鼠。观察各组巨噬细胞形态、计数细胞数量、流式细胞仪测细胞纯度、台盼蓝染色测细胞存活率、划痕实验测迁移能力及ELISA检测脂多糖（LPS）刺激后巨噬细胞分泌TNFα、IL-6及IL-1β的水平。　结果　3组巨噬细胞的形态、纯度、存活率相似,75%血清DMEM组巨噬细胞数量为（80.47±0.82）×105个,明显多于5%淀粉肉汤组（5.64±0.31）×105个及无血清DMEM组（2.63±0.42）×105个（P<0.05）;75%血清DMEM组巨噬细胞迁移能力明显高于其他两组（P<0.05）;75%血清DMEM组巨噬细胞分泌TNFα(15.51±0.51)ng/mL、IL-6(415.33±1.55)pg/mL、IL-1β(421.01±2.64)pg/mL,均多于5%淀粉肉汤组TNFα(10.50±0.50)ng/mL、IL-6(386.33±1.52)pg/mL、IL-1β(375.33±2.51)pg/mL（P<0.05）,也多于无血清DMEM组TNFα(9.56±0.25)ng/mL、IL-6(384.66±1.15)pg/mL、IL-1β(393.34±2.62)pg/mL（P<0.05）。　结论　75%血清DMEM液腹腔注射30 min后灌洗是一个比较好的分离小鼠腹腔巨噬细胞的方法。     

人工脂褐素制备方法的初步探索

目的：探讨人工脂褐素的制备方法，及其组织化学特征和生物学效应。方法：提取大鼠肝脏线粒体，氧化还原交联，制备人工脂褐素，小鼠腹腔内注射，做巨噬细胞吞噬实验。取1－5d的腹腔巨噬细胞，作动态观察，结果：1－5d的腹腔巨噬细胞多种组织化学染色和荧光示踪呈阳性反应，胞质内颗粒或荧光团明显，分布特征与阳性对照相似。结论：人工脂褐素具有天然脂素的组织化学特征和生物学效应，可以作为替代 ，用于抗衰老研究。     

新城鸡瘟病毒激活巨噬细胞释放一氧化氮及对肝癌瘤株细胞毒活性的研究

目的:分析新城鸡瘟病毒Lossta系(NDV-L)对小鼠腹腔巨噬细胞是否具有激活作用并对其机制进行探讨.方法:采用电镜、氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)和Griess方法.结果:①NDV-L与小鼠腹腔巨噬细胞(PEM)作用 24h后,光镜和扫描镜均显示细胞明显增大和伪足伸出;②被NDV-L作用的PEMф与3H-标记的H22靶细胞作用 24h后,发现具有明显的细胞毒杀伤效应,且该效应与阳性对照组[卡介苗、细菌内毒素联合激活的PEMф(BCG-LPS-PEMф)]的杀伤效应接近;③收集NDV-L与PEMф作用 24h上清进行检测,发现一氧化氮(NO)分泌量增高.结论:被NDV-L激活的PEMф对肿瘤细胞的细胞毒效应与其分泌NO有关.     

SAV与CPV对带瘤小鼠巨噬细胞细胞毒作用的影响

本研究采用~3H—TdR释放试验,动态地观察了经SAV或(和)CPV作用后带瘤小鼠小鼠腹腔巨噬细胞细胞毒效应。结果表明,这两种生物制剂均能使带瘤小鼠的巨噬细胞细胞效应明显增强,通过不同途径给药,效果不尽相同。腹腔给药,其巨噬细胞细胞毒效应峰值出现时间较早。而通过皮下给药,则刺激效应持续时间较长。     

肿瘤坏死因子体内抗肿瘤活性及其对巨噬细胞激活作用的关系

在体外细胞毒活性实验中,小鼠乳腺癌Ca761-86细胞对rTNF不敏感,而在体内,rTNF却可明显抑制Ca761-86细胞的生长。根据(1)rTNF在体外可直接激活小鼠腹腔巨噬细胞杀伤Ca761-86细胞;(2)在体内由rTNF诱导和激活的腹腔和脾脏中的巨噬细胞均可杀伤体外培养的Ca761-86细胞;提示rTNF在体内对Ca761-86细胞的抑制瘤效应与其对巨噬细胞的激活作用也可能有关。     

芦荟提取物C诱生小鼠细胞毒因子的研究

目的：研究芦荟提取物C（Aloe Extract C,AE-C)在BALB／C鼠体内诱生细胞毒因子的作用。方法：连续5d给小鼠注射AE－C，第6d取血分离血清，应用结晶紫染色法测其细胞毒因子活性；观察经AE－C诱生的鼠血甭对多种瘤细胞的杀伤作用；杀伤作用的持续时间和对温度的敏感性及血清不同稀释度的杀伤效果。结果：AE－C能诱导小鼠产生杀伤活性较强的细胞毒因子，与对照组比较有明显的差异（P＜0.01)；并且对多种靶细胞有杀伤作用；诱生后24h达高峰，第4d下降明显，5d接近正常水平；血清标本稀释至200倍时，仍具有较强的杀伤活性；诱生后的细胞毒因子有一定的温度敏感生。结论：A－C有诱生BALB／C鼠产生细胞毒因子的作用。     

富含A蛋白的葡萄球菌菌苗的若干重要的反应性

本文研究富含A蛋白的金黄色葡萄球菌菌苗在动物试验时的反应性。用此菌苗给小鼠腹腔注射0.1～50mg/只都不引起毒性反应;给兔静脉注射时体温先下降后升高;幼猫口服和静脉注射无肠毒素毒性反应。但纯品SpA和菌苗能增强肥大细胞脱颗粒的能力。心内注射50mg菌苗,能引起25％豚鼠过敏休克死亡和37.5％豚鼠短期严重反应。用小鼠进行过敏性试验时,静脉注射10mg菌苗后,全部小鼠都有四肢无力和反应迟钝的症状,但一般在4小时后开始恢复正常。     

金黄色葡萄球菌肠毒素A抑制小鼠膀胱癌的实验研究

目的 :研究超抗原 (SAg)对膀胱肿瘤的抑癌效应。 方法 :采用已建立T739小鼠皮下可移植性膀胱肿瘤模型 60只 ,随机分为SEA组 ,BCG组和生理盐水组。观察治疗后各组的肿瘤重量和存活时间。结果 :SEA组小鼠肿瘤重量 ( 0 65± 0 .18g)明显低于生理盐水组 ( 4 2 8± 0 .86g) (P <0 0 1) ,抑瘤率为 84 7% ;小鼠存活期 ( 2 3 1± 2 .4 7d)比对照组 ( 18 6± 1.50d)延长 (P <0 0 1) ,存活延长率为 2 4 1% ;与BCG组比较 ,抑瘤率与存活延长率均无明显差异 (P >0 0 5)。结论 :超抗原做为一种新型高效的抗肿瘤生物制剂对膀胱癌有明显的抑癌效应。     

红景天甙对小鼠免疫功能的影响及杀瘤效应

目的 探讨高山红景天甙对正常小鼠免疫功能的影响。方法 用高山红景天甙腹腔注射免疫小鼠，剂量为800μg/d，采用四唑蓝比色法检测体内外的脾淋巴细胞转化反应和巨噬细胞的细胞毒效应。结果 高山红景天甙在体外显示显著的丝裂原样效应且该效应存在明显的剂量依赖性（P＜0．01）；刺激高山红景天甙免疫组小鼠的脾淋巴细胞时，脾淋巴细胞的转化反应未见进一步增强；巨噬细胞能明显杀伤HCa-F小鼠肝癌细胞，杀瘤率达2．3％（P＜0．01）。结论 高山红景天甙具有丝裂原效应；能通过非特异性免疫功能的调节促进PEMψ的杀瘤效应。高山红景天甙可能是介导双向免疫调节作用的有效成分之一。     

白细胞介素18重组腺病毒对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

目的 研究白细胞介素18重组腺病毒(AdmsIL-18)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响,并对其机理作一探讨.方法重组腺病毒腹腔注射BALB/C小鼠,每周注射1次,共 2次.2周后制备腹腔巨噬细胞,经LPS刺激,采用ELISA法检测培养上清mIL-18、mIL-1β、mTNFα的水平;酶还原法检测NO的含量;LDH释放法检测巨噬细胞的杀伤活性. 结果AdmsIL-18注射后,小鼠腹腔巨噬细胞高效表达mIL-18,同时巨噬细胞分泌 mIL-1β、mTNFα、NO水平明显增加,并增强巨噬细胞的杀伤活性,与其它对照组比较均 P<0.01.结论小鼠腹腔注射AdmsIL-18,能显著增加巨噬细胞表达mIL -18、mIL-1β、mTNFα、NO,增强巨噬细胞的杀伤活性.