免疫性血管炎血液高凝状态及药物治疗实验研究

目的探讨免疫性血管炎是否存在血液高凝状态、其与血管病变的关系及药物作用的影响。方法建立免疫性血管炎模型,检测外周血小板数量、血小板聚集功能,流式细胞仪检测血小板活性标志Annexin V,ELISA法检测凝血酶原片断F1 2,HE染色、弹力纤维染色及电镜观察血管病理改变。结果免疫性血管炎急性期血小板数量异常增高,为(931.33±254.19)×109/L,与正常对照组(640.67±132.22)×109/L比较,差异有统计学意义。血小板聚集功能和由Annexin V检测的血小板活性标志明显升高,分别为(38.9±13.4)%比(20.9±8.5)%(22.55±6.00)%比(6.31±1.84)%,差异有统计学意义。凝血酶原片断F1 2活性在模型组有明显增高,为(215.93±66.04)pmol/L,与正常对照组(128.22±6.46)pmol/L比较,差异有统计学意义。应用阿司匹林可以明显降低上述各指标,大剂量丙种球蛋白注射(IVIG)不能降低血小板数目和功能,仅能降低凝血酶原片断F1 2活性。但阿司匹林和IVIG对血管炎病理改善的作用相似,差异无统计学意义。结论免疫性血管炎存在血液高凝状态,阿司匹林能改善血液高凝状态,减轻血管炎的病理损害。     

免疫性血管炎时IL-1β、IL-6、TNF-α与血小板变化的研究

目的 探讨炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α在免疫性血管炎中的变化及其与血小板数和功能的关系.方法 建立免疫性血管炎模型,ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,检测外周血小板数、血小板聚集功能、血小板活化标志Annexin V,分析它们之间的相关性.HE染色、弹力纤维染色和电镜观察血管病变.结果 急性期模型组炎性细胞因子IL-1β和TNF-α较正常对照组明显增高(P<0.05),细胞因子IL-6在各组之间差异无统计学意义.血小板数、血小板聚集功能和由Annexin V检测的血小板活性标志较正常对照组明显增高.相关分析显示,血小板数与IL-1β有一定程度的相关,血小板聚集功能与IL-1β、TNF-α有关,Annexin V检测的血小板活性则主要与TNF-α相关.阿司匹林治疗可明显降低上述各指标,IVIG不能降低血小板数和功能,但能降低炎性细胞因子IL-1β和TNF-α水平.两者均可明显减轻血管炎的病理损害.结论 炎性细胞因子IL-1β、TNF-α参与了血管炎的发生发展,并与血小板数和功能相关.抗血小板药物可通过抑制血小板及抑制炎性细胞因子作用,从而减轻血管炎的病理损害,达到治疗目的 .     

CD40-CD40L的功能及与疾病的关系

CD40－CD40配体（CD40L）是免疫细胞间重要的信号传导途径，不仅参与体液免疫和细胞免疫的功能调节，而且在某些炎症反应、自身免疫性疾病和免疫缺陷病的发生发展过程中起重要作用。该领域的研究拓宽了人们对免疫调控及免疫应答反应的认识。并为通过采用一些手段[如anti-CD40／CD40L单克隆抗体（MAb）阻断或基因敲除]来干预CD40－CD40L的异常表达，进而为预防和治疗疾病提供新的思路。     

阿司匹林对免疫性血管炎幼兔骨髓巨核细胞及基质细胞的影响

目的 研究阿司匹林对骨髓巨核细胞及基质细胞的影响,探讨其抗血小板作用是否与抑制骨髓功能有关.方法 建立免疫性血管炎模型,实验共分为模型组、正常对照组和阿司匹林组.检测骨髓巨核细胞集落(CFU-MK)的数量和功能以及骨髓基质成纤维细胞集落形成单位(CFU-F),同时检测其外周血血小板数量,电镜观察其血管病理改变.结果 免疫性血管炎模型组血小板数量、骨髓巨核细胞数、CFU-MK数较正常对照组均显著增加(Pa<0.05).阿司匹林治疗能够显著抑制血小板,阿司匹林组血小板[(523.50±69.70)×109 L-1]较模型组[(931.33±254.19)×109 L-1]显著降低(P<0.05);也能明显抑制骨髓巨核细胞数和CFU-MK,模型组和阿司匹林组巨核细胞分别为(29.17±8.40)个/片和(13.50±10.86)个/片(P<0.05),CFU-MK分别为(33.00±14.27)个/(2×105)和(15.67±9.79)个/(2×105)(P<0.05).阿司匹林同时能够显著抑制骨髓基质细胞,模型组CFU-F数(58.17±14.48)个/(2×106),阿司匹林组为(34.17±17.41)个/(2×106)(P<0.05).相关分析显示:血小板计数与CFU-MK的数目及形成能力呈正相关.病理组织学检查发现阿司匹林能够明显减轻血管炎的病理损害.结论 阿司匹林可能通过抑制骨髓巨核细胞和骨髓基质细胞,抑制血小板生成,从而达到减轻炎症损害的目的.     

脓毒症患儿血清可溶性CD14表达变化的临床研究

目的 探讨严重感染患儿血清脂多糖受体可溶性CD14(sCD14)的变化及其与脓毒症严重程度、预后的关系.方法 以32例脓毒症患儿为研究对象进行前瞻性临床研究.根据诊断标准及病情程度将脓毒症患儿分为3组,脓毒症组(10例)、严重脓毒症组(12例)、脓毒性休克组(10例).于发病后1 d、3 d、7 d测定血清sCD14的浓度,同时记录当天的血白细胞计数、前降钙素、C-反应蛋白、脂多糖以及危重病例评分.对照组为20例同期儿童保健门诊健康体检儿童.结果 脓毒症组发病1 d内血清sCD14水平为(8.09±4.33)mg/L,显著高于对照组(4.28±2.74)mg/L,差异有显著性(P<0.01).发病后3 d、7 d的sCD14水平与对照组差异无显著性(P>0.05).脓毒症组、严重脓毒症组、脓毒性休克组在病程1 d血清sCD14水平分别为(4.46±2.31)、(8.52±4.07)、(11.21±3.67)mg/L,差异有显著性(P<0.05).各组在病程3 d、7 d的血清sCD14水平差异无显著性(P>0.05).sCD14与前降钙素、C-反应蛋白、危重病例评分间存在显著相关(P<0.05).结论 在脓毒症早期sCD14的水平显著升高,其升高的程度可提示炎症反应的严重程度及预后.     

CD40L在川崎病发病机制中的作用

目的探讨T淋巴细胞、血小板CD40L在急性期川崎病血管炎及冠状动脉病变发生中的可能作用。方法用流式细胞术双标法,检测23例急性期及IVIG治疗后川崎病(KD)患儿、23例非KD发热患儿T淋巴细胞、血小板CD40L表达的阳性率及平均荧光强度。结果急性期KD组T淋巴细胞表达CD40L阳性细胞率(27.91±5.47)及平均荧光强度(11.74±3.35)明显高于IVIG治疗后组(分别为12.32±1.89%及6.18±1.71%P均<0.01)及发热对照组;同样,急性期KD组血小板CD40L表达的阳性率及平均荧光强度明显高于IVIG治疗后组及发热对照组。结论T淋巴细胞、血小板CD40L在急性期KD患儿中高表达现象,可能在KD急性期血管炎及冠状动脉病变中发挥一定作用。     

sCD40L在儿童免疫性血小板减少症的表达研究

目的研究sCD40L在儿童免疫性血小板减少症(ITP)中的表达,探讨其在儿童ITP发病中的作用及临床意义。方法应用酶联免疫吸附法检测40例儿童ITP患儿血清sCD40L水平,40例健康体检儿童作为正常对照组,并对sCD40L与血小板计数进行相关分析。结果(1)血清sCD40L浓度:ITP患儿血清sCD40L浓度为(2.93±1.22)ng/mL,正常对照组为(2.35±1.19)ng/mL,ITP患儿血清sCD0L浓度明显高于正常对照组,差异显著,有统计学意义(t=2.139,P=0.036)。(2)sCD40L水平与血小板计数的相关性:相关分析显示,ITP患儿血清sCD40L水平与血小板计数无相关性(r=0.178,P=0.273)。结论血清SCD40L增高与血小板活性增强有关,而与血小板数量无关。sCD40L高表达导致的CD40L/CD40传导通路异常可能参与了儿童ITP的发病机制,阻断此传导通路可能为慢性难治性ITP患儿的靶向治疗提供一个新的治疗方向和思路,有待进一步研究。     

CD40和CD40配体表达在异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病发生中的变化

目的 探讨在血缘相关人类白细胞抗原(HLA)全相合异基因造血干细胞移植(HSCT)中发生移植物抗宿主病(GVHD)患者CD40和CD40配体(CD40L)表达的变化及意义.方法 成功应用血缘相关HLA全相合异基因HSCT治疗19例重型珠蛋白生成障碍性贫血和1例遗传性溶血性贫血.其中脐血移植(UCBT)8例,异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)12例,移植前、后发生急、慢性GVHD时采用流式细胞仪检测和比较其外周血CD40和CD40L的表达.结果 UCBT 3例和allo-PBSCT 4例无急性GVHD,余13例均发生I-Ⅳ度急性GVHD.急性GVHD发生时CD4 CD40L 和CD8 CD40L T细胞表达明显升高,尤其在alloPBSCT者更明显.5例UCBT和12例allo-PBSCT发生慢性GVHD,慢性GVHD发生时患者的CD40L 、CD25 和CD69 在CD4 和CD8 T细胞上的表达增加.CD19 CD40 B细胞的表达在UCBT和allo-PBSCT后l a一直处于低水平.结论 HSCT移植后患者外周血CD40L T细胞的高表达可能与异基因HSCT GVHD的发生过程中的T细胞活化与增殖有关.     

CD40在T细胞介导的免疫反应中的作用

CD40-CD40L共刺激信号通路的激活在T细胞介导的免疫应答反应中具有举足轻重的作用.表达于抗原递呈细胞(APC)表面的CD40通过与表达于T细胞表面的CD40L结合而发生激活,在参与诱导机体抗感染所必需的早期炎症反应的同时,还介导了自身免疫性病理损伤的发生.同时,有证据表明CD40分子也表达于T细胞,并可作为共刺激...     

颗粒酶B和可溶性Fas配体在病毒性心肌炎血清中的表达与心脏超声心功能的关系

目的探讨病毒性心肌炎(VM)患儿急性期血清颗粒酶B(GrB)和可溶性FasL(sFasL)水平变化及其与心脏超声和心脏收缩功能的关系。方法采用ELISA方法检测60例VM和40例健康儿童血清GrB和sFasL水平,同时对VM患儿行心脏超声及心功能检查。测定心脏指数(CI)、射血分数(EF)、心轴缩短率(SF)、每搏指数(SI)、左室内径(LV)、左房内径(LA)、右室内径(RV)。结果VM组GrB和sFasL水平显著高于对照组(P均<0.01);VM患儿血清GrB与sFasL水平呈正相关(r=0.7608 P<0.05);VM组GrB和sFasL升高者,心脏超声检查示心脏扩大、心肌动度减弱和心功能下降发生率明显增加(P均<0.05)。结论血清GrB和sFasL可作为判断VM患儿心肌损害程度及评估心功能的辅助指标。     

新生儿缺氧缺血性脑病患儿血清sFas/sFasL水平的变化

目的观察缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血清可溶性Fas(sFas)和可溶性Fas配体(sFasL)的动态变化及其与头颅CT改变程度的相关性。方法选择HIE新生儿48例,按临床分度及头颅CT分度分为轻、中、重度3组。应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定其血清sFas、sFasL含量。结果1.HIE患儿急性期、恢复早期血清sFas、sFasL水平均明显高于对照组(P均<0.01);二者急性期均显著高于恢复早期(P均<0.01)。2.轻、中、重度HIE患儿急性期血清sFas与sFasL水平均明显高于对照组(P<0.05,0.01)。3.HIE患儿急性期血清sFas与sFasL水平呈密切正相关(r=0.51 P<0.01)。结论HIE患儿血清sFass、FasL水平增高与其病程和病情密切相关,血清sFasL和sFas水平可作为判断HIE病情的实验室指标之一。     

哮喘患儿淋巴细胞CD40/CD40L信号分子的表达

目的：CD40/CD40L是免疫应答中的一对协同刺激分子,它们在哮喘的发病中可能起到至关重要的作用,该文旨在探讨CD40/CD40L的表达与儿童哮喘的发病关系。方法：随机选择哮喘急性发作患儿32例,对照组20例。用流式细胞仪检测其外周血T、B淋巴细胞表达分化抗原CD40及其配体CD40L的百分率,并比较哮喘组与对照组之间的差异性。结果：哮喘组B淋巴细胞CD40的表达率较对照组明显增高(17.05±4.88vs13.89±3.67,P<0.05);哮喘组CD4+T淋巴细胞CD40L的表达率较对照组明显增高(8.04±3.53vs5.58±3.00,P<0.05)。结论：哮喘急性发作患儿存在的相关免疫细胞CD40/CD40L的异常表达,可能是其免疫失衡发病因素之一。     

一氧化氮、一氧化氮合成酶在免疫性血管炎致动脉粥样硬化中的作用

目的探讨一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)在免疫性血管炎致动脉粥样硬化(AS)中的作用。方法4周龄雄性大耳兔24只分为3组。A组:基础饲料喂养对照组8只;B组:胆固醇喂饲组8只;C组:10%牛血清清蛋白注射并喂饲胆固醇饲料8只。实验满4周,A、B、C3组分别取心脏做主动脉组织病理学检查,主动脉血管弹力纤维染色及NOS组织化学染色,测血清NO和血浆血管内皮素(ET)含量。结果B组出现轻度AS,内弹力膜不完整;C组出现严重AS,内弹力膜断裂。3组NOS均呈阳性着色反应,C组阳性着色区域较A、B组明显扩大。C组与B组比较,其脂质斑块面积(PA)增大、小动脉粥样硬化发生率(IA)增高、NOS平均光密度(A)增高,血浆ET含量升高,血清NO含量降低,均有显著差异(P<0.01)。结论免疫性血管炎为AS发病的危险因素,NO/ET平衡失调,NOS活性异常可能参与免疫性血管炎致AS形成的病理过程。     

Soluble CD40L in children and adolescents with type 1 diabetes: relation to microvascular complications and glycemic control

CD40‐soluble CD40 ligand (sCD40L) interactions might constitute an important mediator for vascular inflammation that initiates diabetic microangiopathy. Little is known about the relation between sCD40L and glycemic control. Therefore, this study aimed to evaluate sCD40L levels in patients with type 1 diabetes and its relation to microvascular complications and metabolic control. Sixty patients with type 1 diabetes were compared with 30 healthy control subjects. Detailed medical history, thorough clinical examination, and laboratory assessment of high‐sensitivity C‐reactive protein, glycemic control, and the presence of microvascular complications were performed. Measurement of serum sCD40L levels was done using enzyme‐linked immunosorbent assay. Patients were divided into two groups according to the presence of microvascular complications. Serum sCD40L levels were significantly elevated in patients with type 1 diabetes in both groups compared with healthy controls (p < 0.001). Patients with microvascular complications had higher serum sCD40L concentrations than non‐complicated cases (median, 13 000 vs. 450 pg/mL; p < 0.001). Serum sCD40L cutoff value of 530 pg/mL was able to differentiate complicated from non‐complicated cases (p < 0.001). Patients with microalbuminuria or peripheral neuropathy showed higher levels of sCD40L when compared with patients without these complications (p < 0.05). Serum sCD40L levels were positively correlated with hemoglobin A1c and urinary albumin excretion (p < 0.001). We suggest that serum sCD40L levels are elevated in type 1 diabetes, particularly in patients with microvascular complications and a significant correlation with glycemic control exists. Therefore, measurement of serum sCD40L levels in poorly controlled patients would help to identify those at high risk of developing microvascular complications.     

毛细支气管炎患儿外周血单个核细胞CD40/CD40L的表达

目的：毛细支气管炎的确切发病机制尚不明确,常给治疗带来很大困难,目前认为毛细支气管炎是在病毒感染后继发的免疫功能异常。CD40/CD40L是免疫应答中的一对协同刺激分子,它们在毛细支气管炎的发病及IgE的产生中可能起到至关重要的作用。该文旨在观察毛细支气管炎患儿外周血单个核细胞（PBMC）CD40/CD40L的表达水平及其与血清IgE的相关性及与毛细支气管炎的发病关系。方法：采用流式细胞术对30例毛细支气管炎患儿,26例支气管肺炎患儿、30例正常对照组儿童PBMC CD40及CD40L的表达情况检测,同时用ELISA方法检测血清总IgE含量。结果：与对照组相比,CD40L在毛细支气管炎组和肺炎组表达均增高（P<0.05）,且毛细支气管炎组的表达高于肺炎组（P<0.05）;CD40在毛细支气管炎组的表达高于肺炎组及对照组（P<0.01）;IgE在毛细支气管炎组的表达高于肺炎组和对照组（P<0.01）,肺炎组和对照组差异无显著性意义;在毛细支气管炎组中CD40及CD40L的表达与IgE均成正相关（r＝0.607,0.819,均P<0.01）,在肺炎组和对照组中二者无相关性。结论：毛细支气管炎患儿存在CD40/CD40L及IgE的表达增高,且二者具有正相关性,这可能是毛细支气管炎发生发展的重要机制。［中国当代儿科杂志,2009,11（5）：354-356］     

先天性甲状腺功能减低症患儿治疗前后血清ghrelin的动态变化

目的 观察甲状腺素替代治疗对先天性甲状腺功能减低症(CH)患儿血清ghrelin水平的影响.方法 研究对象为2007年10月-2008年3月在徐州医学院附属医院确诊并行治疗随访的CH患儿40例及健康体检儿童30例.分组:未治疗组包括甲状腺功能减低的CH患儿20例;治疗组包括新诊断或随访中经甲状腺素片治疗后甲状腺功能正常至少1个月的CH患儿20例;健康对照组年龄、性别相当的健康儿童30例.采用夹心法酶联免疫吸附试验测定3组儿童血清ghrelin水平,采用化学发光法测定三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、促甲状腺激素刺激激素(TSH)水平,同时计算每个样本的体质量指数(BMI)用于相关分析.结果 1.未治疗组ghrelin水平[(2.35±0.23) μg·L-1]虽高于治疗组[(2.16±0.25) μg·L-1]和健康对照组[(1.96±0.27) μg·L-1],但差异无统计学意义(P=0.102).2.Ghrelin与年龄呈负相关(r=-0.325,P<0.05),但与性别、BMI、T3、T4、TSH无相关关系(Pa>0.05).结论 甲状腺激素对中枢或外周ghrelin的产生和分泌可能无调控作用.在不同生长发育时期,不同水平的ghrelin可能有不同的生理作用.     

心肌缺血预适应家兔血浆内皮素及血清一氧化氮水平变化的意义

目的探讨心肌缺血预适应家兔血浆内皮素(ET)及血清一氧化氮(NO)水平的变化,探讨其在心肌缺血预适应过程中的作用。方法16只新西兰大耳白兔随机分为2组。缺血再灌注组(I/R组):结扎其冠状动脉左室支40min后再灌注120min;缺血预适应组(IP组):先予缺血预适应的过程,结扎冠状动脉左室支5min,放松冠脉血管后再灌注5min,反复操作3次,再按照I/R组进行操作。实验开始前取血测定血清CK、LDH、NO及血浆ET水平,2组动物均在结扎左室支40min、再灌注120min复测NO及ET水平,观察NO和ET变化。结果IP组阻断40min及再灌注120min血浆ET水平及LDH升高低于I/R组,二组比较差异有统计学意义(Pa<0.01),血清NO水平升高多于I/R组,二组比较差异有统计学意义(P<0.01)。IP组再灌注120min,CK水平升高于I/R组,心肌损伤程度小于I/R组。结论心肌缺血预适应家兔NO及ET水平发生明显变化,缺血预适应过程中NO水平升高增强了心肌对缺血的耐受性,ET水平降低减少了心肌缺血过程中其对心肌的损伤。     

川崎病患儿血清可溶性血管细胞黏附分子-1、肿瘤坏死因子-α水平变化的意义

目的探讨可溶性血管细胞黏附分子-1（sVCAM-1）与肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在川崎病（KD）发病中的意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）分别测定确诊为KD34例患儿急性期血清sVCAM-1、TNF-α水平,测定其中32例恢复期患儿血清sVCAM-1、TNF-α水平,26例健康儿童为健康对照组。结果KD组血清急性期sVCAM-1、TNF-α[（97.8±35.6）、（73.9±21.7）μg/L]均高于健康对照组[（41.2±8.9）、（2.7±1.8）μg/L],差异有显著性（Pa〈0.01）;KD患儿恢复期血清sVCAM-1、TNF-α水平[（46.9±16.8）、（4.3±2.9）μg/L]下降显著与急性期比较差异有显著性（Pa〈0.01）;而KD恢复期患儿与健康对照组无显著差异（P〉0.05）,且sVCAM-1与TNF-α呈正相关（r=0.798P〈0.001）。结论sVCAM-1、TNF-α可能参与KD发病的病理过程,血清sVCAM-1、TNF-α检测有助于对KD病情发展作出判断。