D-半乳糖对小鼠肝脏ROS及细胞凋亡的流式细胞术分析

目的 以流式细胞术探讨D-半乳糖给予剂量、给予时间对实验动物肝脏活性氧（ROS）水平及细胞凋亡的影响。     

猕猴桃籽油对D-半乳糖衰老大鼠肝细胞凋亡的影响

目的研究猕猴桃籽油对D-半乳糖拟衰老大鼠肝细胞凋亡的影响。方法30只SD大鼠随机分为3组。正常对照组：每鼠胃灌服生理盐水和背部皮下注射150ms／（kg·d）生理盐水；模型组：每鼠胃灌服生理盐水和背部皮下注射150ms／（kg·d）25％D-半乳糖溶液；猕猴桃籽油干预组：每鼠胃灌服猕猴桃0．670/（kg·d）和背部皮下注射150ms／（kg·d）25％D-半乳糖溶液；每组时间均为8周。8周后制备大鼠肝组织石蜡切片，且行末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺13末端标记（TUNEL）法，检测肝细胞凋亡指数（AI），并对染色结果行计算机图像分析。结果模型组大鼠肝细胞凋亡指数比正常组显著增加（P〈0．01），猕猴桃籽油干预组肝细胞凋亡指数与模型组相比明显减少（P〈0．01）。结论猕猴桃籽油可减少D-半乳糖衰拟老大鼠肝细胞凋亡的发生。     

湖北巴戟天对D-半乳糖所致衰老模型小鼠的抗衰老作用

目的：研究湖北巴戟天是否对D-半乳糖所致衰老模型小鼠具有抗衰老作用。方法：60只昆明种雄性小鼠随机分成6组,分别为正常组,模型组,维生素E（VitE）阳性对照组（100 mg·kg^-1·d^-1）和湖北巴戟天醇提物低、中、高3个剂量组（15,30,45 mg·kg^-1·d^-1）。除正常组颈背部皮下注射等体积生理盐水外,其余各组颈背部皮下注射D-半乳糖（150 mg·kg^-1·d^-1）建立衰老模型,为期60 d。统计各组小鼠在跳台和Morris水迷宫实验中错误次数或穿越次数,计算各组小鼠的脏器指数,测量血清及脑组织中SOD、CAT、GSH-Px活力和MDA含量,并测定各组小鼠脑细胞凋亡指数。结果：湖北巴戟天醇提物3个剂量组均能减少跳台错误次数（P<0.05或P<0.01）,增加水迷宫穿越次数（P<0.05或P<0.01）;升高小鼠血清及脑组织中SOD、CAT、GSH-Px活力（P<0.01）,降低MDA含量（P<0.05）;提高衰老小鼠脑、胸腺、脾脏和睾丸及附睾指数（P<0.05或P<0.01）,减少细胞凋亡（P<0.01）,呈剂量依赖性。结论：湖北巴戟天对D-半乳糖所致衰老模型小鼠具有较好的抗衰老作用。     

D-半乳糖葡胺增敏小鼠对非致死剂量细菌脂多糖致死作用与肝脏DNA片段化的高度相关性

目的：本实验研究了以非致死剂量脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）攻击半乳糖葡胺（D-galactosamine,D-GalN）增敏小鼠的残废是否伴有重要器官的凋亡特征。方法：实验小鼠以LPS（0.05μg）与D-GalN(20mg)直接攻击,而对照组小鼠仅仅以LPS或D-GalN,在规定实验时间经乙醚麻醉后,取出脑、肾、心、脾、肺、肝,并立即匀浆和抽提DNA,对所抽提的各器官的DNA以常规琼脂糖凝胶电泳分析是否存在DNA梯度现象;并测定血浆中乳酸脱氢酶和谷氨酸草酰乙酸转移酶,同时将DNA片段化现象与小鼠致死作用的关联性在实验组和对照组间做比较。结果：LPS攻击D-GalN增敏的小鼠4h时,在所检测的器官中,仅仅肝脏可见重叠凋亡特征DNA片段化现象,至7h时小鼠死亡,而仅用LPS或D-GalN攻击的对照组小鼠,不仅全部存活而且肝脏DNA分子完整。结论：LPS攻击D-GalN增敏的小鼠,肝脏是唯一出现DNA片段化的靶器官,由细菌LPS引发小鼠的死亡,肝脏的损伤可能是关键的原因。     

胡桃叶黄酮对D-半乳糖衰老模型小鼠的影响

目的 观察胡桃叶总黄酮对d-半乳糖衰老模型小鼠的SOD、ACHE、MDA的影响,探讨其抗衰老作用及机制.方法 小鼠随机均分为6组,除正常对照组外,各组每天皮下注射D-半乳糖(0.05g/kg),连续注射6周.从注射的第7天开始,3个实验组同时灌胃高、中、低剂量的胡桃叶总黄酮,阳性对照组灌以维生素E(0.05g/kg)模型对照组与正常对照组每天灌胃等量的蒸馏水,连续给药5周后测定血清SOD、ACHE和脑组织MDA的含量变化.结果 实验组的血清SOD显著高于模型对照组(P＜0.05),ACHE活力极显著高于模型对照组(P＜0.01),实验组的脑MDA含量显著低于模型对照组(P＜0.05);与正常对照组比,各项指标相近(P＞0.05).结论 胡桃叶总黄酮能提高抗氧化能力,降低自由基含量,增强胆碱能神经系统功能,从而防止衰老.     

螺旋藻多糖对D-半乳糖所致衰老小鼠的作用

雌性NIH小鼠每天颈背scD-半乳糖80mg／kg，连续42d，造成亚急性衰老模型。同时每天分别ig螺旋藻多糖（PSP）200、100mg／kg，能显著拮抗D-半乳精的作用，使小鼠肝、脑MAO－B活性显著降低，心、脑Na－K－ATP酶活性回升；能明显促进ConA诱导的小鼠淋巴细胞增殖转化，并使小鼠皮肤羟脯氨酸含量明显增加。提示PSP对D-半乳糖所致衰老小鼠有明显的改善作用。     

葛根素对D-半乳糖所致衰老大鼠肾凋亡基因表达的影响

目的研究葛根素对D-半乳糖致衰老大鼠肾Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法通过颈背部皮下注射D-半乳糖150 mg·kg^-1建立衰老大鼠模型。按照体重将大鼠随机分为5组,每组10只:在大鼠建模的同时,对照组(正常大鼠)和模型组灌胃给予0.9%NaCl 1 mL;低、中、高3个剂量实验组灌胃给予75,150,300 mg·kg^-1葛根素1 mL,均每天1次,连续8周。以免疫组化法检测各组大鼠肾原癌基因(Bcl-2)和Bcl-2相关蛋白(Bax)的阳性表达水平。结果给药后,对照组、模型组和低、中、高3个剂量实验组的大鼠肾Bcl-2蛋白表达水平分别为87.23±0.68,152.25±0.21,124.06±0.72,105.92±0.58,89.01±0.83;这5组的Bax蛋白表达水平分别为144.19±0.37,79.46±1.03,107.33±0.92,126.16±0.45,146.27±0.54。模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。3个剂量实验组的Bcl-2水平降低而Bax蛋白水平均显著升高,与模型组相比,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论葛根素可上调Bcl-2水平、下调Bax水平,这可能是其延缓肾衰老的作用机制之一。     

白藜芦醇对D-半乳糖致衰老小鼠行为记忆功能的影响

目的：观察一定剂量的白藜芦醇对D-半乳糖致衰老小鼠模型的行为记忆功能是否有改善作用。方法：100只小鼠随机分5组，1组为空白对照组。另4组连续注射半乳糖72天，其中1组为衰老组，另3组从第23天天始至第72天分别腹腔注射3个不同剂量的白藜芦醇进行干预。采用Y迷路、Morris水迷宫检测小鼠行为记忆功能，荧光分光分度计测定小鼠脑组织脂褐素的含量。结果：低剂量白藜芦醇组和衰老组相比。检测指标无统计学差异；中高剂量白藜芦醇组织和衰老组织相比，在Y水迷路方向辨别试验中正确达岸次数增加，在Morris水迷路中潜伏期缩短，小鼠的游泳路径缩短，穿越次数增加，但是两组的组间数据无统计学差异。结论：中高剂量的白藜芦醇可以改善D-半乳糖致衰老小鼠的行为记忆功能．具有延缓衰老的作用。     

蒺藜皂苷对D-半乳糖衰老模型小鼠的作用

目的：研究蒺藜皂苷对肛半乳糖所致小鼠学习记忆能力下降和各项衰老指标的对抗作用，以期探讨蒺藜皂苷的抗衰老作用机制。方法：以肛半乳糖衰老模型小鼠为实验对象，以其体质量、免疫器官质量，肝脑丙二醛（MDA）和脂褐素（LF）的含量，全血谷胱苷肽过氧化氢酶（GSH-Px）、红细胞过氧化氢酶（CAT）和脑中超氧化物歧化酶（SOD）的活力为指标，全面考察蒺藜皂苷的抗衰老作用。结果：蒺藜皂苷（50，100mg·kg^-1，ig），能对抗连续6周给肛半乳糖[5％，0．25mL·（10g）^-1]所致小鼠脑组织中LPO、LF含量的升高，提高全血GSH—Px．、红细胞CAT和脑中SOD的活力，并对抗小鼠体质量、脾脏及胸腺指数下降。结论：蒺藜皂苷能有效地对抗D-半乳糖所致的小鼠多项衰老指标的出现，促进衰老小鼠的学习记忆能力。     

应用流式细胞术检测血小板聚集及活化功能临床观察

目的：探讨应用流式细胞术全血法检测血小板功能、影响因素及临床意义。方法：应用血小板特异性荧光抗体CD61-FITC标记血小板,并以0.82μm标准微球进行定位对照和设置机器检测条件,调节机器阈值,设门计数血小板微颗粒（PMP）占CD61阳性颗粒的百分比。以ADP及胶原诱导血小板活化,计数活化以后血小板释放的PMP,以未加血小板激活剂的标本作为零聚集对照,激活剂活化的标本以单个血小板数量的减少反应血小板聚集率的多少,并进行方法学的评价。结果：该方法能够有效的检测PMP及低浓度诱导剂诱导下的血小板聚集,检测的血小板聚集功能敏感度明显高于比浊法。应用枸橼酸钠和CTAD抗凝样本,检测结果显示CTAD抗凝的全血静息状态下血小板释放PMP的量显著低于枸橼酸钠抗凝全血释放PMP量。结论：流式细胞术全血法检测血小板功能方法准确、敏感,快速、简便适合于临床常规检测。     

流式细胞术检测新生儿网织红细胞多参数参考范围的探讨

目的建立流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测新生儿网织红细胞（reti culocyte,Ret）多参数的参考范围。方法选取2012年12月至2013年1月人住新生儿普通病区,排除感染、窒息和先天畸形,日龄≤12h的53例新生儿为研究对象。采用FCM检测生后1、3、7dRet百分率（Ret％）、网织红细胞成熟指数（reticulocyte maturityindex,RMI）及Ret平均荧光强度,并将Ret％与手工法比较。结果53例新生儿中早产儿36例,足月儿17例。早产儿生后1、3、7d流式Ret％分别为（5．18±1．34）％、（4．77±1．45）％、（1．84±0．64）％,RMI分别为（6．08±3．14）％、（5．43±3．08）％、（22．54±10．58）％,Ret平均荧光强度分别为（2626．06±808．63）、（2692．00±865．87）、（4422．37±1668．98）;足月儿生后1、3、7d流式Ret％分别为（4．53±0．98）％、（4．01±1．62）％、（1．55±0．29）％,RMI分另0为（11．17±6.31）％、（8．66±4．49）％、（24．09±5_38）％,Ret平均荧光强度分别为（3522．50±1398．45）、（3888．00±1814．06）、0731．53±1771．59）。随胎龄增加,足月儿1、3dRMI和Ret平均荧光强度明显高于早产儿（P〈0．05）,而两组不同日龄Ret％和7dRMI、Ret平均荧光强度之间差异无统计学意义。结论不同日龄和胎龄Ret多参数分析能更全面地了解新生儿Ret变化规律,为新生儿贫血的鉴别诊断、治疗和监测带来新的研究方向和发展前景。,     

流式细胞术检测HLA-B27及其临床意义(附112例分析)

目的 通过流式细胞术检测外周血白细胞HLA—B27的表达，并探讨其对强直性脊柱炎（AS）的诊断价值。方法 利用流式细胞仪（FCM）检测33例AS患者、34例背痛及腰腿痛患者及45例健康体检者的外周血HLA—B27表达。结果 33例AS患者中，HLA—B27阳性30例（90．9％）；34例背痛腰腿痛患者中，HLA—B27阳性4例（11．76％）；45例健康人群中，HLA—B27阳性4例（8．9％）。结论 AS患者HLA—B27阳性率明显增高，HLA—B27检测可视为临床支持AS诊断的重要依据。     

流式细胞仪在儿童急性B淋巴细胞性白血病免疫分型中的应用

目的研究流式细胞仪检测儿童急性B淋巴细胞性白血病（B—ALL）免疫分型的临床价值，并探讨与预后的关系。方法利用流式细胞仪对39例B—ALL患儿在初诊时进行免疫分型。CD45-SSC设门，在CD19、CD10、CD20和CD22中选择两个单克隆抗体组合，进行三色组合分析。髓系抗体选用CD33和CD13根据是否伴有髓系抗原表达分为两组，并随访预后。结果①CD19、CD22、CD10的阳性率都超过或接近90％，分别为CD19：94．87％，CD22：92．31%，CD10：87．18％，而CD20只有15．38％的阳性率；有33．33％的患儿检测到髓系抗原（My）标志，其中以CD^13^＋8例，CD33^＋5例；②共有6例患儿复发，两组经，精确概率法检验，P〉0．05，差异无统计学意义。结论①流式细胞仪可以用于绝大多数的B—ALL患儿免疫表型的检测；②伴有髓系表达不具有提示复发的意义。     

In vitro and in silico approaches to unveil the mechanisms underlying the cytotoxic effect of juncunol on human hepatocarcinoma cells

Background

Juncunol is a phenanthrene isolated from the halophyte species Juncus acutus, with selective cytotoxic activity towards human hepatocarcinoma (HepG2) cells. However, its mechanism of action is unknown.

江西地区儿童白血病流式细胞术免疫分型结果分析

目的：分析了解江西地区儿童白血病（AL）各免疫亚型分布规律及各亚型在不同年龄段的发生率。方法对376例我院收治的江西地区儿童AL患儿采用CD45/侧散射（SSC）双参数散点图设门方法进行流式细胞术细胞表面及浆内分化抗原分析。结果急性淋巴细胞白血病（ALL）297例,占89.6%,急性髓性白血病（AML）79例,占21.4%;ALL中B系266例,占ALL的89.6%,T系31例、占ALL的10.4%;在B系中以普通型ALL多见,占B系ALL的66.1%;在297例ALL中有65例表达髓系CD13、CD33抗原、在79例中有15例表达淋系 CD19、CD3、CD10抗原;10岁以上组与10岁以下组比较、T 系ALL、APL好发于年龄10岁以上组。结论我院收治的江西地区儿童AL各免疫亚型分布与国内外文献报道大致相近,T系及APL好发大于10岁儿童。     

用流式细胞仪检测血小板P—选择素和血小板—中性粒细胞复合物

用流式细胞仪方法测定血小板的 ＣＤ６２Ｐ和 ＰＮＣ．选 ２５名健康不吸烟自愿者（男 １１名,女 １４名,年龄 ２２－６８岁,平均４２岁）．在用血小板激活物ＡＤＰ前后来评估流式细胞仪检测血小板的方法．ＣＤ６２Ｐ和ＰＮＣ在ＡＤＰ刺激后明显增高［分别为（８．０±２．７）％到（１８．８±６．４）％,Ｐ＜０．０１,（９．４±３．４）％到（１４．５±７．２）％Ｐ＜０．０１）］．论证,流式细胞仪测定血小板的方法是可行的,该方法简便,快速,敏感性高．     

流式细胞术检测急性杂合性白血病的临床分析

目的分析流式细胞术检测急性杂合性白血病的临床效果。方法对本院收治的急性杂合性白血病（HAL）患者、伴有淋系抗原表达型急性髓细胞白血病（Ly＋AML）患者及伴有髓系抗原表达型急性淋巴细胞白血病（My＋ALL）患者于治疗一、二疗程后分别行流式细胞术检测,对比检测结果。结果 HAL患者在髓系CD33免疫表型的阳性率最高为95%,在B系CyCD22免疫表型的阳性率最高为75%,在T系CD7免疫表型的阳性率最高为30%,且在CD2、CyCD3、CD5中均有表达。第一、二疗程Ly＋AML与My＋ALL的诱导缓解率均明显高于HAL（P〈0.05或P〈0.01）。结论流式细胞术检测急性杂合性白血病具有较高的阳性检出率,对于临床治疗的效果评估具有重要的指导意义。     

用流式细胞仪分析抗生素后效应中细菌的生物学特征

目的　了解亚胺培南、环丙沙星、庆大霉素、头孢他啶四种抗生素对大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌抗生素后效应 (PAE)中细菌的大小及核酸含量的改变。方法　将处于亚胺培南、环丙沙星、庆大霉素、头孢他啶后效应中的大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌 ,用碘化丙啶 (PI)染色 ,流式细胞仪检测。结果　亚胺培南、环丙沙星PAE中 ,两种菌体积与核酸含量均增大 ;庆大霉素PAE中 ,两种菌体积与核酸含量不变 ;头孢他啶作用后的大肠埃希氏菌体积、核酸含量增大 ,铜绿假单胞菌没有变化。结论　这些变化与抗生素作用机制有关。用流式细胞仪能快速、直观分析细菌的生物学特征。     

流式细胞术预测冠心病患者阿司匹林抵抗的研究

目的 利用流式细胞术制定阿司匹林抵抗(AR)的诊断标准,预测冠心病患者阿司匹林抵抗的发生率.方法 采用流式细胞术测定127例冠心病(阿司匹林组103例和空白对照组24例)患者人院时及经治疗7 d后P选择素(CD62P)和纤维蛋白原受体(PAC-1)的表达率.利用ROC曲线法设定AR诊断标准,统计AR在住院冠心病患者中的发生率.结果 阿司匹林组治疗前CD62P(10.16±6.80)%、PAC-1(14.66±10.56)%,治疗后CD62P(5.70±4.28)%、PAC-1(8.93±7.08)%;空白对照组治疗前CD62P(9.14±6.52)%、PAC-1(17.67±11.53)%,治疗后CD62P(7.81±5.72)%、PAG-1(14.97±8.05)%,差异有统计学意义(P＜0.05).根据ROC曲线设定CD62P抑制率＜21.5%或PAC-1抑制率＜17.7%为诊断AR标准,AR在住院冠心病患者中的发生率为17.5%.结论 CD62P抑制率＜21.5%或PAC-1抑制率＜17.7%为AR诊断标准.AR发生率为17.5%.