疮灵液调控慢性创面金属蛋白酶表达促进愈合的实验研究

目的:探查疮灵液对慢性创面肉芽金属蛋白酶表达的影响及促进创面愈合的部分作用机制。方法:采用大鼠背部创面金黄色葡萄球菌液注射模型,实验分为疮灵液组与对照组,疮灵液组以疮灵液覆盖创面,对照组以生理盐水纱布覆盖创面,隔日换药,术时、术后3 d、术后7 d、术后14 d创面照相测面积,取分泌物测TNF-α、IL-6含量及粒细胞总数,取肉芽测金属蛋白酶(MMP1、MMP2、MMP9)及其抑制剂(TIMP1)与羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)含量。结果:术后3~14 d,疮灵液组创面面积显著小于对照组,具有极显著统计学差异(P0.01);疮灵液组创面分泌物中白细胞总数均显著少于对照组,14 d时,疮灵液组白细胞总数接近正常;疮灵液组创面分泌物中TNF-α、IL-6含量于术后7 d恢复正常,均显著低于对照组;术后3 d起,创面肉芽内MMP1、MMP2及MMP9均显著低于对照组(P0.01),其中以MMP9表达影响疗效最显著,疮灵液对TIMP1未见明显影响;创灵液组在术后7、14 d肉芽中羟脯氨酸含量升高较明显,与对照组相比,有显著性差异。结论:疮灵液能够下调肉芽中金属蛋白酶含量,抑制慢性创面分泌物炎症因子分泌,并能够调节创面羟脯氨酸含量,从而促进慢性创面愈合。     

氯沙坦对动脉粥样硬化兔金属蛋白酶基因表达的影响

目的研究氯沙坦对动脉粥样硬化 (AS)兔基质金属蛋白酶 (MMP )基因表达的影响。方法通过高脂饮食和内皮损伤术建立兔AS模型 ,16只新西兰大白兔随机分单纯高脂饮食组和高脂饮食加氯沙坦 (2 5mg·kg -1·d-1)组 ,喂养 4个月。应用免疫组化法测定MMP 9和MMP抑制剂 - 1(TIMP 1)蛋白表达 ,RT PCR测定MMP 9和TIMP 1的mRNA表达。结果单纯AS组MMP 9蛋白和mRNA表达水平明显高于氯沙坦治疗组 (P <0 .0 1) ;两组TIMP 1蛋白和mRNA水平比较无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论大量MMP 9基因的表达可能与AS斑块不稳定性有关 ;氯沙坦可能通过抑制MMP 9蛋白和mRNA的表达而稳定斑块。     

MEBT/MEBO对皮肤创面愈合过程中VEGF、bFGF、EGF mRNA表达影响的研究

目的探讨MEBT/MEBO促进创面愈合的作用机制。方法建立大鼠急性损伤创面模型,观察MEBT/MEBO对模型创面组织VEGF、bFGF、EGF mRNA表达的影响。结果①创面肉芽组织生长大体情况:造模后第8天,MEBT/MEBO组、贝复济组大鼠创面肉芽组织生长情况明显好于模型组,MEBT/MEBO组和贝复济组大鼠创面较红润,可见散在的肉芽颗粒生长,模型组大鼠创面较苍白,生长缓慢。②愈合时间:MEBT/MEBO组大鼠创面平均愈合时间为(12.50±0.83)天,短于贝复济组(13.15±0.88)天,明显短于模型组(14.20±1.28)天,MEBT/MEBO组与贝复济组、模型组在愈合时间方面相比差异均有显著性(P<0.05,P<0.01)。③VEGF、bFGF、EGF mRNA表达:模型组大鼠的表达量在造模后8天时相点显著低于MEBT/MEBO组、贝复济组(P<0.01),MEBT/MEBO组在造模后8天时相点比贝复济组的表达量稍高,差异有显著性(P<0.05)。结论①MEBT/MEBO可以提高大鼠肉芽组织中VEGF、bFGF、EGFmRNA的表达水平,推测MEBO可能通过对VEGF、bFGF、EGF的调控,促进创面成纤维细胞的分裂增殖及新生毛细血管的增殖,从而促进肉芽组织形成,加速创面愈合。②MEBT/MEBO能明显缩短实验性SD雄性大鼠体表创伤创面修复愈合时间,具有促进大鼠体表创伤创面愈合的作用。     

黄芪甲苷对小鼠实验性心室重构及基质金属蛋白酶表达的影响

目的：研究黄芪甲苷对小鼠实验性心室重构的保护作用并从基质金属蛋白酶方面探讨其作用机制。方法：采用连续皮下注射异丙肾上腺素14 d诱导小鼠心室重构模型,同时以黄芪甲苷(40,80 mg/kg)和阳性对照普萘洛尔(40 mg/kg)灌胃给药;超声心动图检测左室舒张末期直径(LVIDd)、左室收缩末期直径(LVIDs)、左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS);HE染色光镜下观察心肌组织的病理学改变;RT-PCR法检测基质金属蛋白酶MMP2、MMP9及其抑制剂TIMP1、TIMP2的mRNA表达,明胶酶谱法分析MMP2、MMP9的活性。结果：与正常对照组相比,模型组LVIDd、LVIDs均显著升高,EF、FS均明显降低,心肌有纤维化样损伤,表明发生了左室重构;另外,模型组MMP2、MMP9 mRNA表达和酶活性均显著增高,而TIMP1、TIMP2 mRNA表达在各组均无明显变化。与模型组相比,黄芪甲苷可显著降低LVIDd、LVIDs,增加EF、FS,减轻心肌损伤,下调MMP2、MMP9 mRNA表达和酶活性。结论：黄芪甲苷可通过抑制MMP2、MMP9表达及活性,有效逆转心室重构,改善心功能。     

骨化三醇对肺炎支原体肺炎患儿 Th17/Treg失衡的干预作用

目的 探讨骨化三醇[1,25(OH)₂D₃]对肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumonia pneumonia,MPP)患儿Th17/Treg及相关因子表达的调节作用。方法 选取2018年9~12月在新疆医科大学第五附属医院儿科就诊的50例MPP患儿为实验组,并取健康儿童50例为对照组,酶联免疫分析法(ELISA法)检测血清中 1,25(OH)₂D₃、IL-10及IL-17的含量,流式细胞分析技术检测Th17及Treg水平。将实验组随机分为维生素D干预组、非维生素D干预组各25例,维生素D干预组儿童在常规治疗基础上口服维生素D,2周后再次检测两组患儿外周血中1,25(OH)₂D₃、IL-10、IL-17含量,Th17及Treg水平。结果 实验组患儿1,25(OH)₂D₃、Treg及IL-10水平均低于对照组,Th17及IL-17水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01)。干预组治疗后 1,25(OH)₂D₃、IL-10水平及Treg细胞比率较治疗前显著升高(P＜0.05),IL-17水平及Th17细胞比率较治疗前显著降低(P均＜0.05),且变化程度均较非干预组显著(P＜0.05)。非干预组IL-10水平及Treg细胞比率有所下降,1,25(OH)₂D₃、IL-17水平及Th17细胞比率有所增加,但治疗前后差异无统计学意义(P＞0.05)。干预组患儿咳嗽及喘息消失时间均短于非干预组(P＜0.05)。结论 MPP患儿存在一定程度的维生素D缺乏及Th17/Treg表达失衡,补充维生素D可改善患儿Th17/Treg失衡及呼吸道症状。     

金茵利胆胶囊对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的保护作用

目的 探讨金茵利胆胶囊对四氯化碳(CCl₄)诱导大鼠肝纤维化的保护作用。方法 将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、水飞蓟素(阳性药)组、金茵利胆胶囊低剂量组和高剂量组,每组8只。除空白对照组外,其余各组大鼠采用CCl₄腹腔注射,每周2次,连续6周诱导大鼠肝纤维化模型,造模期间连续灌胃给药6周。实验结束后计算肝脏、脾脏脏器指数；观察肝脏组织的病理变化和纤维化程度；检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA)等生化指标含量；SOD试剂盒检测大鼠血清抗氧化能力；采用ELISA法检测大鼠血清中IL-6、IL-1β和TNF-α炎症指标水平；免疫组化法检测大鼠肝脏中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况；实时荧光定量PCR法检测Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、Col-Ⅳ、NF-κB、MMP2、TIMP1和TGF-β1等基因的相对表达量。结果 与模型组比较,金茵利胆胶囊能显著降低肝脏指数(P < 0.01)；降低血清中ALT、AST和TBA水平(P < 0.05)；改善肝组织纤维化程度；增加了SOD的含量(P < 0.01)；降低IL-6、IL-1β和TNF-α炎症指标水平(P < 0.05)；降低α-SMA的表达水平；降低肝脏Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、Col-Ⅳ、NF-κB、MMP2、TIMP1和TGF-β1等基因的相对表达量(P < 0.05)。结论 金茵利胆胶囊对CCl₄诱导的大鼠肝纤维化有保护作用,其作用机制可能与抑制肝细胞外基质沉积和肝星状细胞活化有关。     

基质金属蛋白酶9及其抑制剂在慢性阻塞性肺疾病发病中的作用

目的　探讨基质金属蛋白酶 9(MMP 9)及其基质金属蛋白酶组织抑制剂 1(TIMP 1)在慢性阻塞性肺疾病 (COPD)发病机制中的作用。方法　选择COPD稳定期组 12例、COPD急性加重期组 12例、COPD急性加重期 +糖皮质激素治疗组 12例和正常对照组 12例患者 ,采用逆转录 聚合酶链的方法测定各组患者外周血单个核细胞中MMP 9和TIMP 1mRNA的表达 ,同时用明胶图谱法测定血浆中MMP 2 ,9的蛋白质水平 ,并分析其与肺功能的关系。结果　 (1)COPD各组MMP 9mRNA表达水平和MMP 9/TIMP 1的比值增加 ,与正常组相比 ,差异具有显著性 (P <0 0 5 ) ,而COPD各组间表达差异无显著性 (P >0 0 5 )。 (2 )COPD各组血浆中MMP 9蛋白水平增加 ,高于正常组 (P <0 0 5 ) ,而COPD各组间蛋白质水平差异无显著性 (P >0 0 5 )。 (3)COPD组中MMP 9mRNA的表达、MMP 9/TIMP 1比值及血浆中MMP 9蛋白质水平与FEV 1 0%占正常预计值呈负相关 (r =- 0 789,P <0 0 5 ;r =- 0 5 3,P <0 0 5 ;r =- 0 6 5 2 ,P <0 0 5 ) ,与RV/TLC %呈正相关 (r =0 375 ,P <0 0 5 ;r =0 4 4 ,P <0 0 5 ;r =0 5 2 9,P <0 0 5 )。结论　MMP 9和MMP 9/TIMP 1比例失衡在COPD的发病机制中起到了一定的作用 ,并与FEV1 0 %占正常预计值、RV/TLC %呈相关性。     

老龄大鼠肺内基质金属蛋白酶2、9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1、2、3表达变化

目的:对比观察老龄大鼠和成年大鼠肺胶原蛋白的改变、转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)水平的变化、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPS)MMP2,MMP9以及基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPS)表达调控的变化,寻找肺间质纤维化发病率随年龄增加的可能原因.方法:通过羟脯氨酸定量测定肺组织胶原含量,ELISA方法测定TGF-β1蛋白水平,荧光定量PCR(realtime PCR)技术测定MMP2,MMP9,TIMP1,TIMP2,TIMP3 mRNA表达量的变化.结果:与成年大鼠组相比,老龄大鼠肺细胞外胶原成分增加,TGF-β1蛋白水平升高[(756±160)pg/g vs(1 000±246)pg/g,P＜0.05],MMP2 mRNA(3.15±1.76 vs 0.17±0.13,P＜0.01)表达水平降低,MMP9 mRNA(1.66±0.67 vs 1.74±0.87,P＞0.05)表达水平没有明显变化.老龄大鼠组TIMP1 mRNA(2.00±1.74 vs 0.11±0.06,P＜0.01),TIMP2 mRNA(7.60±2.51 vs 2.69±1.76,P＜0.01),TIMP3 mRNA(1.32±0.46 vs 0.29±0.16,P＜0.01)表达水平均低于成年大鼠组.结论:肺老化后细胞外胶原比例增加,TGF-β1蛋白水平升高,MMP2和MMP9转录水平改变,TIMPS mRNA转录水平降低等多重因素共同构成肺间质纤维化发病率随年龄增加的基础.     

实验性自身免疫性肌炎中MMP-2,MMP-9,TIMP-1的表达及甲基强的松龙的影响

目的 :探讨基质金属蛋白酶 (MMP 2 ,MMP 9)及基质金属蛋白酶抑制剂 (TIMP 1)在实验性自身免疫性肌炎 (EAM)发病中的作用 ,以及甲基强的松龙对MMP 2 ,MMP 9,TIMP 1基因mRNA和蛋白表达的影响。方法 :应用RT PCR及免疫组织化学技术 ,研究MMP 2 ,MMP 9及TIMP 1在EAM组、甲基强的松龙治疗组 (EAMM组 )和对照组 (NS组 )大鼠外周血、脾脏、肌肉组织中的表达水平。结果 :EAMM组大鼠发病程度低于EAM组 ,炎症细胞浸润和肌纤维坏死程度减轻。MMP 2 ,MMP 9mRNA在EAM大鼠外周血、脾脏淋巴细胞中的表达上调 ;MMP 2 ,MMP 9蛋白在EAM组大鼠肌肉组织表达增加 ,与对照组相比差异有显著性。EAMM组MMP 2 ,MMP 9mRNA的表达及蛋白的表达均受到抑制 ,与EAM组比较差异有显著性。EAMM组TIMP 1基因mRNA及蛋白的表达上调 ,与EAM组相比差异有显著性。结论 :MMP 2 ,MMP 9表达增加可能与EAM发病有关 ;TIMP 1可能参与了抑制免疫反应 ;甲基强的松龙能减轻EAM发病程度 ,其作用机制可能与MMP 2及MMP 9的表达下调、TIMP 1的表达上调有关     

脑膜瘤MMP-2、MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达及其意义

目的 :研究基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9(matrixmetallo proteinase ,MMP 2、MMP 9)及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂 1(tissueinhibitorofmetalloproteinase ,TIMP 1)mRNA在脑膜瘤组织中的表达及其与肿瘤浸润性的关系。方法 :用原位杂交法检测 35例脑膜瘤组织中MMP 2、MMP 9、TIMP 1mRNA的表达。比较肿瘤浸润组与非浸润组的差异。结果 :脑浸润组MMP 2、MMP 9表达阳性率较无脑浸润组明显增高 (P <0 .0 5 ) ;MMP 2、MMP 9的表达与硬膜浸润、颅骨浸润无关 (P >0 .0 5 ) ;TIMP 1在各组肿瘤中均高表达 ,但与肿瘤浸润性无关 (P >0 .0 5 )。结论 :MMP 2、MMP 9和TIMP 1在脑膜瘤的脑浸润中起关键作用     

调经助孕胶囊对促排卵周期小鼠子宫内膜αvβ3、MMP9及TIMP1表达的影响

目的:探讨调经助孕胶囊对促排卵周期小鼠子宫内膜整合素αvβ3、基质金属蛋白酶(MMP-9)及其抑制物(TIMP-1)表达的影响。方法:60只8～9 w龄昆明种小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、实验组各20只。给予相应药物灌胃10 d后,造模,雌雄合笼。于妊娠第5天获取子宫内膜,检测小鼠子宫内膜整合素αvβ3蛋白表达及MMP9/TIMP1 mRNA表达。结果:模型对照组小鼠着床期子宫内膜MMP9及TIMP1的表达低于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。实验组小鼠着床期子宫内膜MMP9、TIMP1及其比值均高于模型对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。模型对照组小鼠着床期子宫内膜整合素αvβ3表达明显低于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05);实验组小鼠着床期子宫内膜αvβ3表达明显高于模型对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:促排卵可导致着床期子宫内膜MMP9及TIMP1mRNA表达下降,影响MMP9/TIMP1比值,整合素αvβ3蛋白表达下降,可能是促排卵影响子宫内膜容受性的机制之一。调经助孕胶囊可增加促排卵周期着床期小鼠子宫内膜整合素αvβ3蛋白表达,MMP9、TIMP1 mRNA表达,调节MMP9/TIMP1平衡。     

镁钙合金浸提液对人结肠黏膜上皮细胞中基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶抑制因子3表达的影响

目的研究不同浓度镁钙合金浸提液对人结肠黏膜上皮细胞NCM460中基质金属蛋白酶9(MMP9)和基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)表达的影响。方法用镁钙合金制成不同浓度(体积分数10%、50%和100%)的浸提液,并将NCM460细胞制成5×10~6L~(-1)的细胞悬液,分为空白对照组及实验1、2、3组,空白对照组每孔加入含体积分数10%胎牛血清的达尔伯克改良伊格尔高糖培养基2 000μL,实验1、2、3组每孔分别加入体积分数10%、50%及100%的镁钙合金浸提液2 000μL,分别培养1、3、5 d,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测NCM460细胞中MMP9和TIMP3 mRNA的表达,免疫印迹法检测NCM460细胞中MMP9和TIMP3蛋白表达。结果培养1 d后,实验1、2、3组NCM460细胞中MMP9 mRNA、TIMP3 mRNA表达水平均显著低于空白对照组(P<0.05);培养3、5 d后,实验1组NCM460细胞中MMP9 mRNA表达水平仍显著低于空白对照组(P<0.05),实验2、3组NCM460细胞中MMP9mRNA表达水平均显著高于空白对照组和实验1组(P<0.05);培养5 d后,实验3组NCM460细胞中MMP9 mRNA表达水平显著高于实验2组(P<0.05)。培养3、5 d后,实验1、2、3组NCM460细胞中MMP9 mRNA表达水平均显著高于培养1 d后;培养5 d后,实验1组NCM460细胞中MMP9 mRNA表达水平与培养3 d后比较差异无统计学意义(P>0.05),实验2、3组NCM460细胞中MMP9 mRNA表达水平均显著高于培养3 d后(P<0.05)。培养1 d后,实验2、3组NCM460细胞中TIMP3 mRNA表达水平均显著高于实验1组(P<0.05)。培养3 d后,实验1、2、3组NCM460细胞中TIMP3 mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05),实验2组NCM460细胞中TIMP3 mRNA表达水平均显著低于实验1、3组(P<0.05)。培养5 d后,实验1、2、3组NCM460细胞中TIMP3 mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。实验1组NCM460细胞中培养3、5 d后的TIMP3 mRNA表达水平均显著高于培养1 d后(P<0.05),培养5 d后的TIMP3 mRNA表达水平显著高于培养3 d后(P<0.05)。实验2组NCM460细胞中培养3 d后的TIMP3mRNA表达水平显著低于培养1 d后(P<0.05),培养5 d后的TIMP3 mRNA表达水平显著高于培养1、3 d后(P<0.05)。实验3组NCM460细胞中培养5 d后的TIMP3 mRNA表达水平显著高于培养1、3 d后(P<0.05)。培养5 d后,实验1组NCM460细胞中MMP9蛋白表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);实验2、3组NCM460细胞中MMP9蛋白表达水平均显著高于空白对照组和实验1组(P<0.05);实验3组NCM460细胞中MMP9蛋白表达水平与实验2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。培养5 d后,实验1、2、3组NCM460细胞中TIMP3蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05);实验1、2、3组NCM460细胞中TIMP3蛋白表达水平两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论高浓度的镁钙合金浸提液对NCM460细胞中的MMP9及TIMP3基因表达有一定的影响,容易导致早期炎症反应的发生,其机制可能与浸提液中的钙离子浓度有关。     

地塞米松对哮喘大鼠肺组织NF-κB和MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的:探讨哮喘大鼠肺组织中核因子鄄κB(NF鄄κB)与基质金属蛋白酶鄄9(MMP鄄9)及金属蛋白酶组织抑制因子鄄1(TIMP鄄1)的关系以及地塞米松对NF鄄κB、MMP鄄9和TIMP鄄1的作用。方法:建立大鼠哮喘模型,采用免疫组化法观察肺中NF鄄κB活化及MMP鄄9、TIMP鄄1的蛋白表达,用逆转录-聚合酶联反应技术(RT鄄PCR)测定肺中MMP鄄9、TIMP鄄1mRNA的表达。结果:哮喘组NF鄄κB的活化及MMP鄄9、TIMP鄄1蛋白在气道黏膜上皮的表达明显高于对照组(P<0.01)和地塞米松组(P<0.05),哮喘组MMP鄄9、TIMP鄄1在肺组织的mRNA表达也高于对照组(P<0.01)和地塞米松组(P<0.01)。MMP鄄9的表达与NF鄄κB的活化呈显著正相关(rs=0.8071,P<0.01)。TIMP鄄1的表达与NF鄄κB的活化无明显相关(rs=0.4716,P>0.05)。结论:地塞米松可能抑制气道壁NF鄄κB活化和减少MMP鄄9的表达、调节MMP鄄9/TIMP鄄1之间的失衡,对MMP鄄9的抑制作用可能部分通过抑制NF鄄κB活化而实现的。     

积雪草苷对平阳霉素诱导的大、小鼠肺纤维化的保护作用

  目的：观察积雪草苷对平阳霉素诱导的大、小鼠肺纤维化的保护作用,并探讨其作用机制。  方法：①小鼠实验:将KM小鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照(醋酸泼尼松,5 mg/kg)组和积雪草苷低剂量(40 mg/kg)、高剂量(80 mg/kg)组,每组10只。除对照组外,其他各组小鼠采用一次性气管注入平阳霉素(5 mg/kg)的方法诱导肺纤维化模型。造模次日,各组灌胃给予相应的药物干预,连续28 d。末次给药后,分离肺组织;测定肺指数;ELISA检测肺组织白介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β含量;PCR检测肺组织转化生长因子-β₁(TGF-β₁)mRNA表达。②大鼠实验:将SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照(醋酸泼尼松,4 mg/kg)组和积雪草苷低剂量(20 mg/kg)、高剂量(40 mg/kg)组,每组10只。除对照组外,其他各组大鼠采用一次性气管注入平阳霉素(5 mg/kg)的方法诱导肺纤维化模型。造模次日,各组灌胃给予相应的药物干预,连续28 d。末次给药后,分离肺组织;测定肺指数;HE染色后光镜下观察各组大鼠肺组织形态学变化;ELISA检测肺组织IL-6、TNF-α、IL-1β含量;PCR检测肺组织TGF-β₁mRNA表达。  结果：①小鼠实验:模型组小鼠肺指数,肺组织IL-6、TNF-α、IL-1β含量及TGF-β₁ mRNA表达均较对照组显著升高(P<0.01)。与模型组相比,阳性对照组与积雪草苷低、高剂量组小鼠的肺指数及肺组织IL-6、TNF-α、IL-1β含量显著降低(P<0.05,P<0.01),积雪草苷低、高剂量组小鼠肺组织TGF-β₁ mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。②大鼠实验:模型组大鼠肺指数,肺组织IL-6、TNF-α、IL-1β含量及TGF-β₁ mRNA表达均较对照组显著升高(P<0.01)。与模型组相比,阳性对照组与积雪草苷低、高剂量组大鼠肺指数显著降低(P<0.05,P<0.01),肺组织TGF-β₁ mRNA表达水平显著降低(P<0.01);阳性对照组和积雪草苷高剂量组大鼠肺组织IL-6、TNF-α、IL-1β含量较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01),积雪草苷低剂量组TNF-α、IL-1β含量较模型组明显降低(P<0.05)。③HE染色观察显示,模型组大鼠肺泡结构破坏,成纤维细胞增生,伴有大量炎症细胞浸润;积雪草苷低、高剂量组和阳性对照组大鼠上述病变均有改善,炎症细胞浸润和肺泡萎陷减轻。  结论：积雪草苷对平阳霉素诱导的大、小鼠肺纤维化具有保护作用,其机制可能与下调TGF-β₁mRNA表达、抑制炎症细胞因子激活有关。     

心房肌基质金属蛋白酶-9和组织金属蛋白酶抑制因子-1表达改变对房颤心房重构机制的研究

目的　探讨心房肌基质金属蛋白酶- 9 (MMP -9)和组织金属蛋白酶抑制因子- 1 (TIMP1)表达水平的改变与慢性房颤心房结构重构的相关关系。方法　选取进行人工瓣膜置换术的风湿性心脏病房颤24例为研究组,风湿性心脏病窦性心律12例为对照组。上述患者术前均进行经胸超声心动图检查,留取相关资料。于手术时取左心耳心肌标本,采用RT -PCR方法检测心房肌中本研究检测慢性房颤患者心房肌中MMP- 9和TIMP- 1的mRNA水平,采用免疫组织化学方法对MMP- 9和TIMP- 1蛋白质表达半定量分析。结果　与对照组比较,风心房颤组左心房内径和右心房内径均显著扩大(P<0 .05~0 .001),心肌中MMP 9mRNA表达水平较对照组升高30 .9% (P<0 .05 );TIMP 1mRNA水平较对照组下调33 .3% (P<0 .05);左心耳心肌组织中MMP 9蛋白质水平增高100% (P<0. 001),TIMP -1蛋白质水平减少36% (P<0 .01)。左心耳心肌组织MMP- 9mRNA水平与房颤持续时间、左心房内径呈显著正相关(P<0. 05~0 .001)。结论　房颤时心房肌组织MMP 9 /TIMP- 1系统相互间的作用失衡对心房壁变薄、心房扩大和几何形状改变具有重要作用,其机制是细胞外基质过度降解。     

神经肽K物质对小鼠烫伤创面愈合的影响及机制

目的：研究神经肽K物质对小鼠烫伤创面愈合的影响及机制。方法：建立小鼠烫面创伤模型，检测小鼠创面K物质含量；将小鼠分为3组分别对小鼠创面给予K物质、K物质拮抗剂和生理盐水，用药第5、9天后分别进行创面愈合率、组织病理学分析，检测转化生长因子a（TGF-a）、IL-1、IL-6和肿瘤坏死因子-a（TNF-a）浓度，并体外测定K物质对小鼠成纤维细胞L929增殖的影响。结果：在小鼠创伤模型中K物质含量为155ng／g，对照组为127ng／g；给予K物质后能够加速小鼠创面的愈合，而给予K物质拮抗剂使小鼠创面愈合减慢；体外细胞实验表明K物质能促进小鼠成纤维细胞的增殖；结论K物质能加速小鼠创面愈合。     

益肾汤联合强的松与依那普利对IgA肾病小鼠肾 MMP-9&#65380;TIMP-1表达的影响

 【目的】探讨中药“益肾汤”治疗IgA肾病(IgAN)的机理&#65377;【方法】用“口服牛血清白蛋白联合尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B”法复制小鼠IgAN模型&#65377;设正常组&#65380;模型组&#65380;益肾汤低浓度&#65380;益肾汤高浓度&#65380;强的松+依那普利&#65380;强的松+依那普利+益肾汤低浓度&#65380;强的松+依那普利+益肾汤高浓度7组&#65377;FQ*9鄄PCR法检测小鼠肾组织MMP*9鄄9&#65380;TIMP*9鄄1mRNA表达&#65380;免疫组化SABC法检测小鼠肾组织MMP*9鄄9&#65380;TIMP*9鄄1的含量&#65377;【结果】模型组小鼠肾间质MMP*9鄄9表达(PU值:6.9 ± 2.7 vs 5.8 ± 2.1;mRNA表达:0.297 ± 0.025 vs 0.107 ± 0.004)与正常组比较差异无显著性(P > 0.05),而模型组TIMP*9鄄1表达(PU值:18.0 ± 7.7 vs 5.2 ± 2.2;mRNA表达:0.884 ± 0.247 vs 0.109 ± 0.007)则较正常组明显上调(P < 0.05)&#65377;益肾汤低浓度组与高浓度组之间肾小管间质MMP*9鄄9&#65380;TIMP*9鄄1表达差异无显著性(P > 0.05),但益肾汤高浓度组与低浓度两组MMP*9鄄9表达均强于模型组(PU值:8.9 ± 3.0 vs 6.9 ± 2.7,8.9 ± 3.3 vs 6.9 ± 2.7;mRNA表达:0.397 ± 0.047 vs 0.297 ± 0.025,0.386 ± 0.027 vs 0.297 ± 0.025;P < 0.05),而TIMP*9鄄1的表达均弱于模型组(PU值:14.92 ± 6.07 vs 18.04 ± 7.70,15.55 ± 6.01 vs 18.04 ± 7.70;mRNA表达:0.665 ± 0.197 vs 0.883 ± 0.247,0.713 ± 0.221 vs 0.883 ± 0.247;P <0.05)&#65377;5个治疗组中强的松+依那普利+益肾汤高浓度组MMP*9鄄9 mRNA及其蛋白表达最强(PU值:34.3 ± 8.7;mRNA表达:1.265 ± 0.433)&#65380;而TIMP*9鄄1mRNA及其蛋白表达最弱(PU值:9.2 ± 3.4;mRNA表达: 0.293 ± 0.068)&#65377;【结论】益肾汤可促进IgAN小鼠肾组织MMP*9鄄9的表达&#65380;抑制TIMP*9鄄1的表达&#65377;强的松+依那普利+益肾汤的联合治疗方案较单用强的松+依那普利或单用益肾汤治疗IgAN有更好的疗效&#65377;     

基质金属蛋白酶-2,-9及其抑制剂1在肺癌侵袭转移中的作用

目的　探讨基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )、MMP 9及基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP 1)在肺癌侵袭转移机制中的作用。方法　收集30例经病理证实的肺癌患者和15例健康志愿者,将肺癌患者分为两组:无远处转移组(Ⅱ～Ⅲ期) 15例,远处转移组(Ⅳ期) 15例,分别用逆转录聚合酶链(RT PCR)方法测定各组患者静脉血白细胞中MMP 9、TIMP 1mRNA的表达;用聚丙烯酰胺明胶电泳法测定各组患者血浆中MMP 2、MMP 9含量,分析其与肺癌分期的关系,以及白细胞中MMP 9的mRNA表达与血浆中MMP 9蛋白水平的相关性。结果　肺癌患者外周血白细胞中MMP 9的mRNA表达和MMP 9/TIMP 1比值与正常对照组相比均显著升高(P <0 0 0 0 1) ;Ⅳ期肺癌患者比Ⅱ～Ⅲ期明显升高(P <0 0 0 0 1)。肺癌患者外周血白细胞中TIMP 1的mRNA表达与正常对照组相比无明显差异(P >0 0 5 )。肺癌患者各组血浆中MMP 9蛋白水平与正常对照组比较均升高(P <0 0 0 0 1) ;Ⅳ期肺癌患者比Ⅱ～Ⅲ期明显升高(P <0 0 0 5 )。肺癌患者各组血浆中MMP 2蛋白水平表达与正常对照组相比无明显差异(P >0 0 5 )。外周血白细胞中MMP 9mRNA表达与血浆中MMP 9蛋白水平呈正相关(r=0 4 15 ,P <0 0 5 )。结论　MMP 9/TIMP 1比例失衡在肺癌的侵袭转移中可能有一定作用     

芪榆油膏对肛瘘术后创面肉芽组织中EGF mRNA表达的影响

目的通过观察芪榆油膏对肛瘘术后创面肉芽组织中表皮生长因子(EGF)mRNA表达的影响,探讨其分子生物学水平的作用机制。方法选择2009年6月至2010年3月贵阳中医学院第一附属医院肛肠科病房低位单纯性肛瘘患者90例,随机分为观察组、对照组和凡士林组,每组30例。采用RT-PCR方法对术后用药第7天各组创面肉芽组织中EGF mRNA的表达进行检测并比较各组疗效。结果观察组术后用药第7天创面肉芽组织中EGF mRNA基因表达均明显超过对照组和凡士林组(P<0.01);创面愈合时间观察组明显少于对照组和凡士林组(P<0.05)。结论芪榆油膏对瘘术后肛创面的愈合作用可能通过上调EGF mRNA的表达介导。     

基于CSE/H2S通路探讨葱白提取物干预大鼠动脉粥样硬化的作用及机制

目的 观察葱白提取物(fistular onion bulb,FOB)对动脉粥样硬化大鼠主动脉基质金属蛋白酶(MMP7、MMP9)、黏附分子(ICAM-1、VCAM-1)、胱硫醚γ裂解酶(cystathionine γ lyase,CSE)表达的影响,并基于CSE/H₂S通路探讨葱白提取物抗动脉粥样硬化的机制。方法 将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、葱白提取物组、辛伐他汀组,每组10只。高脂饮食加肌内注射维生素D₃建立SD大鼠动脉粥样硬化模型,给予葱白提取物、辛伐他汀分别进行干预。通过主动脉Masson染色观察病变血管病理形态变化;全自动生化分析仪检测血脂水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测ApoB水平;RT-PCR检测大鼠主动脉ICAM-1、VCAM-1、CSE及心肌CSE mRNA表达水平;Western blot法检测主动脉MMP7、MMP9、ICAM-1、VCAM-1、CSE表达水平。结果 与模型组比较,葱白提取物、辛伐他汀处理后能抑制血管内膜增生,调节血脂,降低主动脉MMP7、MMP9水平,抑制主动脉ICAM-1、VCAM-1表达,上调主动脉及心肌CSE表达,且两者效果相当。结论 葱白提取物能通过调节血脂、抑制ICAM-1、VCAM-1、MMP7、MMP9表达而发挥抗动脉粥样硬化作用,其机制可能与促进CSE表达、调节CSE/H₂S通路相关。