鞣花鞣质肠道代谢产物urolithins研究进展

鞣花鞣质是一类具有诸多生物活性的酚类化合物,近年来研究发现其发挥作用的物质基础与其肠道菌群代谢产物——尿石素密切相关。该研究就近几年国内外关于尿石素的结构特征、类型、分布,以及其改善前列腺、乳腺、结肠相关疾病,抗癌、抗氧化、抗炎等生物活性研究进行了综述,为开发和利用尿石素奠定基础。     

姜黄素在大鼠体内的代谢研究

目的探讨姜黄素在大鼠体内的代谢行为。方法选择健康雄性大鼠,灌胃给予姜黄素500mg／kg,连续收集0-16h累积尿样。取10ml原尿加入β-葡萄糖醛酸水解酶缓冲盐溶液,反应后得酶解后尿样。原尿液和酶解后尿样经提取、浓缩、离心后用液质联用法（LC／MS—MS）进行分析。结果检测到尿中存在姜黄素原形药及7种代谢产物,即二氢姜黄素、姜黄素的葡萄糖醛酸结合物、六氢姜黄素的葡萄糖醛酸结合物、四氢姜黄素、六氢姜黄素、四氢姜黄素的葡萄糖醛酸结合物、姜黄醇,其中二氢姜黄素为首次报道。结论姜黄素在大鼠体内主要先还原为姜黄素还原物,经进一步代谢与葡萄糖醛酸结合。     

地榆提取物中不同类型鞣质的测定

目的 建立可水解鞣质和缩合鞣质测定方法,并对地榆水提物及不同极性溶剂萃取物中可水解鞣质和缩合鞣质进行测定.方法 采用酸解后HPLC分析法测定可水解鞣质;采用香草醛硫酸法测定缩合鞣质.结果 地榆水提物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水层留余物的可水解鞣质质量分数分别为(81.83±2.59)mg/g、(206.80±2.43)mg/g、(163.56±5.69)mg/g、(47.62±1.13)mg/g;缩合鞣质质量分数分别为(181.72±1.41)mg/g、(594.52±16.76)mg/g、(476.27±13.33)mg/g、(14.41±0.29)mg/g.结论 酸解后HPLC分析法和香草醛硫酸法简便、快速、精密度、稳定性、重现性、专属性好,适合作为不同类型鞣质的测定方法;地榆乙酸乙酯萃取物的可水解鞣质及缩合鞣质最高.     

液质联用技术分析次乌头碱在大鼠尿液中的代谢产物

目的:检测次乌头碱在大鼠体内的代谢产物及代谢途径。方法:采用液-液萃取法对灌胃给予次乌头碱的大鼠尿液样品进行纯化,利用高效液相色谱-离子阱串联质谱检测纯化样品,根据各保留时间对应化合物的多级串联质谱数据,并与文献对照,推断次乌头碱在大鼠尿液中代谢产物的结构。结果:与空白组大鼠尿液相比,在次乌头碱给药大鼠的尿液中共检测到4个乌头类生物碱,分别为次乌头碱原型化合物,18-O-去甲基次乌头碱,N-去甲基次乌头碱,被标识为羟基化的代谢物(结构有待确证)。结论:次乌头碱在大鼠体内可能发生了去甲基、羟基化代谢反应,为该成分的药效作用研究提供参考。     

肠道菌群对石榴皮鞣质的分解代谢作用研究

目的考察肠道菌群对石榴皮鞣质的分解代谢作用,阐明石榴皮鞣质在肠道的代谢途径。方法将石榴皮鞣质与大鼠肠道菌液共同孵育4、6、8、12、24、48 h后,检测不同时间点溶液中的代谢成分。结果通过LC-MS/MS从石榴皮鞣质肠道菌群孵育液中共鉴别出了10个代谢产物,分别为尿石素B、没食子酸、焦性没食子酸、3-O-甲基没食子酸、尿石素A、甲基化尿石素A、尿石素C、尿石素-M6、葡萄糖醛酸化尿石素A、葡萄糖醛酸化尿石素C。结论石榴皮鞣质在肠道菌群中主要通过代谢酶的水解、还原等作用将其代谢成具有生理活性的小分子化合物,这些化合物有可能是石榴皮鞣质在机体内发挥药理活性的物质基础。     

大鼠灌胃灯盏花素后血浆、胆汁、尿液以及粪便中代谢产物的鉴定

目的 对大鼠灌胃灯盏花素后收集的血浆、胆汁、尿液以及粪便中存在的灯盏乙素的代谢产物进行鉴定.方法 通过使用HPLC结合光电二极管阵列检测器(DAD),采用梯度洗脱的方法 ,对比分析给药组大鼠和空白组大鼠的血浆、胆汁、尿液以及粪便样品,并且在相同的液相色谱条件下与对照品的保留时间和紫外吸收特征进行对照来鉴定主要代谢产物.结果 从大鼠ig 20、200 mg/kg灯盏花素的血浆中鉴定了代谢产物野黄芩素-6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6-O-β-D-glucuronide,M5);从大鼠ig 20、200 mg/kg灯盏花素的胆汁中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1)、6-O-甲基-灯盏乙素(6-O-methylscutellarin,M3)、、野黄芩素-6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6-O-β-D-glucuronide,M5)和灯盏乙素(黄芩素苷,scutellarin,M7),从大鼠ig 20 mg/kg灯盏花素的尿液中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1),从大鼠ig 200 mg/kg灯盏花素的尿液中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1)、野黄芩素(scutellarein,M2)和灯盏乙素(scutellarin,M7);从大鼠ig 200 mg/kg灯盏花素的粪便中鉴定了代谢产物野黄芩素(scutellarein,M2).结论 灯盏乙素在大鼠体内发生了广泛的代谢,并且主要以其代谢产物的形式存在;灯盏乙素在大鼠体内产生的代谢产物主要通过尿液和胆汁排泄.     

HPLC测定地榆鞣质提取物中游离没食子酸的含量

目的:建立一种适于地榆鞣质提取物中游离的没食子酸含量测定的方法,为地榆鞣质的提取工艺和质量标准研究提供参考。方法:采用HPLC,考察色谱条件、样品溶液制备方法、专属性、线形与范围、精密度、稳定性及回收率,并测定样品含量。结果:确定色谱条件如下,检测波长为272 nm,色谱柱为安捷伦TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05%磷酸缓冲液(5∶95),流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,进样量10μL。样品溶液制备方法、专属性、线形与范围、精密度、稳定性及回收率均符合相关要求。样品中没食子酸含量在3.21%～4.05%,均值为3.71%。结论:该法科学、合理、可行,符合简便、快速、准确的要求,为地榆鞣质的相关研究奠定了基础。     

二冬汤对大鼠尿液代谢产物的影响

目的 研究滋阴方二冬汤对大鼠内源性代谢产物的影响。方法 取SD大鼠6只,灌胃给予二冬汤,分别于给药前1 d及给药5、10 d的末次给药后,收集4 h 内的尿液,经过液相色谱分离,三重四极杆质谱检测尿液中内源性代谢物信息,采用主成分分析法降维、正交信号校正、偏最小二乘法判别分析法,分析二冬汤在不同给药天数时内源性代谢产物的差别,以及可能的生物标记物。结果 给药5,10 d后引起变化的生物标记物,与给药前1 d比较,均有明显的变化。给药5 d的数据比较集中,给药10 d的数据比较分散。二冬汤给药5 d的样本点具有良好的聚类特征,提示给药5 d后二冬汤对大鼠尿液中内源性物质的代谢产生显著性影响,其中,内源性物质含量变化上升的有16个,下降的有17个。结论 二冬汤给药后对大鼠内源性物质有影响,其生物学功能可能涉及到提高机体免疫力、促进机体的能量代谢、抗菌、抗病毒、抑制肿瘤细胞转移等,为二冬汤的开发和利用提供参考。     

吴茱萸水提物给药大鼠尿液代谢组学研究

目的：研究吴茱萸水提液给药对大鼠内源性代谢产物的影响。方法：吴茱萸水提物按0.385 7 g·kg^-1给SD大鼠连续灌胃33 d,收集尿液,通过Agilent1200 6410三重四极杆质谱对尿液中内源性代谢物进行全扫描分析,SIMCA-P软件经过PCA,PLS-DA分析。结果：给药组与对照组相比,大鼠尿液代谢物白细胞三烯,棕榈酰乙醇胺,二十二碳六烯酸,8(R)-氢过氧亚油酸/花生酸等有明显变化。结论：吴茱萸水提物灌胃对正常大鼠机体代谢产生影响,为进一步阐释吴茱萸的药性研究工作提供依据。     

吴茱萸水提物给药大鼠尿液代谢组学研究

目的:研究吴茱萸水提液给药对大鼠内源性代谢产物的影响。方法:吴茱萸水提物按0.385 7 g.kg-1给SD大鼠连续灌胃33 d,收集尿液,通过Agilent 1200 6410三重四极杆质谱对尿液中内源性代谢物进行全扫描分析,SIMCA-P软件经过PCA,PLS-DA分析。结果:给药组与对照组相比,大鼠尿液代谢物白细胞三烯,棕榈酰乙醇胺,二十二碳六烯酸,8(R)-氢过氧亚油酸/花生酸等有明显变化。结论:吴茱萸水提物灌胃对正常大鼠机体代谢产生影响,为进一步阐释吴茱萸的药性研究工作提供依据。     

地榆中总鞣质超声提取工艺研究

目的:优选地榆中鞣质最佳提取工艺。方法:以提取物中总鞣质含量为指标,通过单因素试验研究提取溶剂、料液比、超声提取时间、超声提取次数等四个因素对总鞣质提取率的影响,利用正交试验确定地榆总鞣质最佳提取工艺。结果:地榆鞣质的最佳提取工艺为:12倍量的40%的乙醇,超声提取2次,每次75min。在最佳条件下,提取率为9.113%。结论:该工艺合理可行,重复性好,地榆鞣质的提取率高。     

地榆化学成分的研究

目的研究地榆Sanguisorba officinalis L.的化学成分。方法地榆70%乙醇提取物20%乙醇部位采用大孔树脂、Toyopearl HW-40、反相硅胶进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到13个化合物,分别鉴定为4-allyl-2-hydroxyphenyl-1-O-apiosyl-(1-6)-β-D-glucopyranosid(1)、2,3-digalloyl-O-methylglucose(2)、methyl benzoate-4-β-D-glucopyranoside(3)、1-popanone,1-[4-[2-O-(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)-β-D-galactopyranosyl]oxy]-2-hydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)(4)、1,2,3,4-tetrahydro-6-hydroxy-4-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-7-methoxy-3-methyl-2-naphthalenemethanol(5)、2R,3S,2″R,3,8″-binaringenin-7″-O-β-glucoside(6)、glucosyringic acid(7)、rosarin(8)、leeaoside(9)、(+)-isolariciresinol-9-O-β-D-glucopyranoside(10)、niga-ichigoside F_l(11)、ziyu-glycosideⅠ(12)、3β-[(α-L-arabinopyranosyl)oxy]-19α-hydroxyolean-12-en-28-oic acid 8-β-D-glucopyranoside(13)。结论化合物1～10为首次从该植物中分离得到。     

地榆药材中总皂苷及地榆皂苷- I的含量测定

目的 建立地榆药材总皂苷及地榆皂苷-I含量的测定方法,并对不同批次地榆药材中总皂苷和地榆皂苷-I的含量进行测定。方法 采用优化条件的紫外-可见分光光度法建立了地榆药材中总皂苷的含量测定方法,采用HPLC-ELSD法测定地榆药材中地榆皂苷-I的含量。结果 优选出总皂苷含量测定的显色体系为香草醛-冰醋酸-高氯酸,反应条件为15 %香草醛,1.0 mL高氯酸,80 ℃反应15 min,经测定,地榆药材中总皂苷含量为7.25 %~8.41 %;HPLC-ELSD法测得地榆药材中地榆皂苷-I的含量为5.21 %~6.18 %。结论 香草醛-冰醋酸-高氯酸法以及HPLC-ELSD法快速、简便、准确、重现性良好,分别适用于测定地榆药材中总皂苷和地榆皂苷-I的含量。     

地榆中乌索酸和齐墩果酸含量的高效液相色谱测定

目的建立地榆药材中乌索酸和齐墩果酸含量的测定方法。方法用高效液相色谱法。色谱柱为Nova-Pak C18(3.9 mm×300 mm,4μm),流动相甲醇-水(88∶12),检测波长210 nm。流速0.8 m l/m in,柱温25℃。结果乌索酸进样量在0.106 2~1.593μg,齐墩果酸进样量在0.040 6~0.609μg时呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.73%和97.59%,RSD分别为1.5%和1.7%。结论方法灵敏、快速、准确,可用于地榆中乌索酸和齐墩果酸含量的测定。     

Antiallergic activity of a disaccharide isolated from Sanguisorba officinalis

The antiallergic activity of the natural disaccharide, 5-O-alpha-D-(3-C-hydroxymethyl)lyxofuranosyl-beta-D-(2-C-hydroxymethyl)arabinofuranose was evaluated using both in vivo and in vitro experimental models. Intravenously administered compound inhibited the passive cutaneous anaphylaxis response in rats in a dose-dependent manner (ED(50) = 9.6 mg/kg). The compound inhibited histamine release evoked by both compound 48/80 and calcium ionophore A23187 in rat peritoneal mast cells indicating that mast cell stabilization is the major mechanism of action for its antiallergic activity. In passively sensitized isolated guinea-pig hearts, an in vitro anaphylaxis model in which histamine release plays a key role for functional deterioration, the compound markedly diminished both coronary flow reduction and histamine release on challenge to the antigen. These data demonstrate that this antiallergic natural disaccharide exerts its effect via inhibition of mast cell mediator release.     

Antiangiogenic Effects of Ziyuglycoside II,a Major Active Compound of Sanguisorba officinalis L.

Ziyuglycoside II, a major bioactive compound of Sanguisorba officinalis L., displays anticancer potential against several human cancer cells. However, little information concerning its antiangiogenic properties and possible mechanisms is available. The aim of this study was to investigate the inhibitory effects of ziyuglycoside II on angiogenesis. Ziyuglycoside II inhibited the proliferation, migration, and tubule formation of human umbilical vein endothelial cells, as well as the number of microvessels growing from the aortic rings. The underlying antiangiogenic mechanism of ziyuglycoside II correlated with blocking vascular endothelial growth factor receptor‐2 and the fibroblast growth factor receptor‐1 mediated signaling pathway. Moreover, an in vivo Matrigel plug assay in mice showed a significant decrease in vascularization and hemoglobin content in the plugs from ziyuglycoside II‐treated mice compared with control mice. Overall, these results suggest that ziyuglycoside II inhibits various attributes of angiogenesis, which might contribute to its reported antitumor effects. Copyright © 2017 John Wiley & Sons, Ltd.     

不同防腐措施收集大鼠尿液对其内源性代谢物的影响

目的:在大鼠尿液代谢组学研究中需要对尿液样本的采集过程采取必要的防腐措施,针对尿液收集过程中常用的几种防腐措施,研究其对尿液内源性代谢物的影响。方法:在大鼠尿液样本采集时采用冰上收集、加入叠氮化钠以及两者合用进行防腐,利用核磁共振代谢组学技术分析不同防腐措施的差异。结果:核磁共振代谢组学结果显示,冰组和叠氮化钠+冰合用组的主成分分析结果重合较多,且二者与空白组、叠氮化钠组均有较高的分离度;叠氮化钠组和空白组有小部分重叠,但是有分离的趋势。提示冰组与叠氮化钠+冰合用组的防腐效果相近,与空白组相比尿液中的缬氨酸、甜菜碱、马尿酸上升,丙氨酸和2-酮戊二酸下降。结论:在大鼠尿液代谢组学研究中,尿液样本采集时一定要有低温防腐措施,在有防护条件时加入一定量叠氮化钠有助于提高防腐效果。     

地榆促造血作用的有效部位筛选

目的:筛选地榆促造血作用的有效部位。方法:小鼠骨髓造血细胞培养在96孔培养板中,加入不同浓度的地榆提取物培养10 d,用ATP/生物发光法检测骨髓细胞增殖,体外筛选地榆促造血作用的有效部位;用1、0.5、0.1 mg.kg-1,地榆有效部位连续灌胃给予小鼠14 d,分别计数骨髓有核细胞、外周血白细胞、红细胞和血小板,进一步验证体外筛选所获有效部位的促造血作用。结果:地榆皂苷显示增强细胞因子刺激的小鼠骨髓细胞体外增殖,鞣质和黄酮类成分没有作用;以1、0.5、0.1 mg.kg-1总皂苷处理小鼠14 d后,显著增加了小鼠骨髓有核细胞数量,外周血白细胞、红细胞以及血小板数量也显著升高。结论:地榆皂苷是促小鼠骨髓细胞体外增殖的主要活性部位,地榆皂苷也能升高骨髓抑制小鼠骨髓有核细胞和外周血白细胞、红细胞以及血小板的数量。     

基于网络药理学技术的中药地榆活性成分及药理作用研究

目的 基于多个数据库软件,根据网络药理学方法探讨地榆主要成分的药理活性,并分析和预测其潜在的作用机制。方法 首先在TCMSP数据库中检索并收集中药地榆的主要成分,然后利用基因、蛋白等分析工具分析所获得成分的相关作用靶点以及信号通路。再应用DAVID在线软件,将地榆成分所对应的靶点进行富集和通路注释,并采用Cytoscape软件构建地榆的成分-靶点-信号通路网络互作图,根据互作图对地榆的传统活性进行深入分析。结果 数据库检索到地榆的成分中有20个主要活性成分,在治疗癌症、炎症、内分泌代谢疾病、神经变性疾病、免疫疾病等方面具有较强的作用。这些成分共作用于230个靶点,并涉及主要富集通路118条。结论 本研究发现地榆在抗肿瘤抗氧化等传统药理作用研究中体现出了中药多成分、多靶点、多途径的作用特点,该结果可为后续对地榆的药理药效进行全面认识和深入研究提供参考和指导。