山楂总黄酮对人肝细胞低密度脂蛋白受体表达影响的研究

目的：检测山楂总黄酮对人肝细胞低密度脂蛋白受体表达的影响。方法：用含不同浓度山楂总黄酮的培养液培养人肝细胞,利用细胞免疫技术结合流式细胞术测定人肝细胞膜低密度脂蛋白受体的表达量和表达活性。 结果： 15-25μmol/L的山楂总黄酮对人肝细胞低密度脂蛋白受体的表达量和表达活性与空白对照组有显著性差异(P<0.05)。结论：山楂总黄酮能显著增加人肝细胞膜低密度脂蛋白受体的表达。     

姜黄素对人肝癌细胞株HepG2凋亡和细胞周期的影响

目的 本实验拟研究姜黄素对人肝癌细胞株HepG2凋亡与细胞周期的影响.方法 不同浓度姜黄素DMEM稀释液培养HepG2细胞,分别作用24、48、72h后,流式细胞术检测凋亡和细胞周期分布变化,并以正常培养细胞作为对照.结果 对照组正常生长HepG2细胞24、72h凋亡率分别为3.1%、4.2%、5.2%,加入姜黄素后凋亡率明显增加,并呈现时间和剂量依赖性.10μmol/L浓度组24、48、72h凋亡率分别为13.6%、22.9%、41.1%.细胞周期分布测定中.姜黄素药物组HepG2细胞出现明显的G2/M期阻滞,相比对照组有统计学意义(P<0.05).结论 姜黄素能抑制HipG2细胞生长,并且诱导其凋亡,阻滞细胞周期于G2/M期,其抗肿瘤活性具有广阔的应用前景,值得进一步研究.     

姜黄素通过调控微管系统干扰HepG2细胞周期研究

目的 研究姜黄素对人肝癌HepG2细胞周期的影响及微管系统在其中的作用。方法 MTT法检测姜黄素对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析姜黄素对HepG2细胞周期分布的影响;激光共聚焦显微镜观察姜黄素对HepG2细胞微管结构变化的影响;Western blotting 检测姜黄素对微管蛋白α-tubulin表达的影响;在离体条件下,观察姜黄素对微管蛋白聚合和解聚活性的影响。结果 姜黄素对HepG2细胞增殖具有抑制作用且与时间和剂量相关;随着姜黄素浓度的升高,HepG2细胞阻滞于G₂/M期的比例也逐渐增加;激光共聚焦显微镜观察可见姜黄素明显破坏细胞微管结构,改变细胞微管蛋白聚合状态的发生;Western blotting检测发现细胞内α-tubulin蛋白表达的减弱与试药浓度相关。姜黄素还可影响微管蛋白聚合和解聚活性。结论 姜黄素通过破坏HepG2细胞的微管结构及下调微管蛋白α-tubulin的表达,将HepG2细胞阻滞于G₂/M期,从而抑制肝癌HepG2细胞的生长。     

脂肪酸对HepG2肝细胞脂联素受体表达的影响

游离脂肪酸(FFA)在胰岛素抵抗中可诱发β细胞的凋亡,并可降低胰岛素介导的肝脏和骨骼肌细胞的葡萄糖摄取和利用,减弱胰岛素对肝糖原产生的抑制作用[1].脂肪因子如TNFs、脂联素、瘦素等在FFA介导的胰岛素抵抗中也起着重要作用[2].以往的研究显示,在高脂诱导的胰岛素抵抗(IR)模型中,大鼠血浆FFA明显升高且与IR有关,而脂联素的降低参与了IR的发生.我们观察了不同脂肪酸浓度培养条件下肝细胞脂联素受体(R1/R2)的表达,以判断肝细胞脂联素受体是否参与了高FFA诱导的IR过程,报告如下.     

姜黄素对HepG2细胞脂质沉积的改善作用及机制研究

目的:探讨姜黄素对油酸诱导的HepG2细胞脂质沉积的影响及其作用机制。方法:将HepG2细胞分为对照组、模型组及姜黄素低、高剂量组。除对照组外,其他3组给予0.3 mmol/L油酸干预24 h,诱导细胞脂质沉积模型。造模后,姜黄素干预组分别予以50、100μmol/L姜黄素干预9 h。油红O染色观察各组细胞内脂质沉积情况,试剂盒检测细胞内三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)含量,PCR检测各组细胞固醇调节元件结合蛋白1C(SREBP1C)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶α(ACCα)的mRNA表达。结果:与对照组相比,模型组细胞内脂滴明显增多,TG、TC水平显著升高(P0.05,P0.01),SREBP1C及其下游基因FAS、ACCα的mRNA表达水平均显著升高(P0.01)。与模型组相比,姜黄素干预组细胞内的红色脂滴明显减少,TG水平显著降低(P0.01),SREBP1C、FAS、ACCα的mRNA表达水平均显著下调(P0.05,P0.01)。姜黄素低剂量(50μmol/L)对脂质沉积的改善作用更为显著。结论:姜黄素或通过下调SREBP1C、FAS、ACCα的表达,抑制脂质的合成,进而改善HepG2细胞的脂质沉积。     

姜黄素诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡及对细胞生长周期的影响

目的研究中药姜黄素在体外诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡的机制及对细胞生长周期的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,用不同浓度的姜黄素（0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0μmol/L）刺激人肝癌HepG2细胞24、36和48h,MTT法及台盼蓝拒染法检测姜黄素对人肝癌HepG2细胞生长增值的影响并绘制生长曲线图,流式细胞术（FCM）检测其对细胞生长周期的影响。结果MTT法结果表明姜黄素对人肝癌细胞HepG2的生长具有抑制作用,2.0μmol/L浓度组在24h与对照组比较便具有统计学意义（P〈0.05）,16μmol/L浓度组与HepG2细胞作用48h后对HepG2细胞的生长抑制作用最强（54.78±2.35）%,台盼蓝拒染法发现细胞存活率与姜黄素浓度间具有剂量和时间效应;流式细胞仪检测结果表明8.0μmol/L姜黄素诱导了人肝癌HepG2细胞发生凋亡,并对细胞生长的S期有明显的阻滞作用。结论姜黄素在体外能阻滞HepG2细胞的生长增值,诱导了人肝癌HepG2细胞发生凋亡。     

姜黄素对巨噬细胞LDL受体表达的影响

目的:检测降脂中药姜黄醇提物总姜黄素对小鼠巨噬细胞LSL受体表达的影响.方法:用不同浓度的总姜黄素溶液无菌培养小鼠巨噬细胞,用酶联免疫吸附法测定巨噬细胞膜上LDL受体的表达数量.结果:不同浓度姜黄素对巨噬细胞LDL受体的表达数量与对照组比较有显著性差异.结论:0.02～0.05mmol/L的姜黄素溶液能极显著增加小鼠巨噬细胞LDL受体的表达.     

鹅去氧胆酸对HepG2细胞胆汁酸靶基因的影响及其联合姜黄素的细胞毒性

目的：探讨鹅去氧胆酸对肝癌细胞HepG2胆汁酸靶基因的影响以及联用姜黄素对HepG2细胞的毒性。方法：利用实时荧光定量PCR法检测鹅去氧胆酸对HepG2细胞胆汁酸靶基因的mRNA表达影响,MTT法检测鹅去氧胆酸和姜黄素对HepG2和SMMC-7721肝癌细胞存活率的影响,克隆形成实验检测鹅去氧胆酸和姜黄素对HepG2细胞增殖的影响。结果：随着鹅去氧胆酸浓度的提高,BSEP和SHP基因的mRNA表达水平升高,CYP7A1、CYP8B1、NTCP和β-catenin基因的mRNA表达水平降低（P值均≤0.05）,FXR基因的mRNA表达水平无变化（P>0.05）。HepG2、SMMC-7721细胞存活率随着鹅去氧胆酸和姜黄素浓度的提高和作用时间的延长呈依赖性下降（P<0.05）,鹅去氧胆酸和姜黄素联用的效果更好（P<0.05）。HepG2细胞的克隆形成率受鹅去氧胆酸和姜黄素的影响均降低（P<0.05）,鹅去氧胆酸和姜黄素联用效果更明显（P<0.05）。结论：鹅去氧胆酸对肝癌细胞HepG2的细胞毒性可能与胆汁酸代谢有关,鹅去氧胆酸联合姜黄素能更好地抑制肝癌细胞的...     

索拉菲尼对人肝癌细胞株HepG2抑制作用的研究

目的:探讨分子靶向药物索拉菲尼(Sorafenib)在体外对人肝癌细胞株HepG2的抑制作用.方法:采用MTT法检测Sorafenib对HepG2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率.结果:Sorafenib能明显抑制HepG2细胞增殖,呈时间-剂量依赖效应;6μmol/L的Sorafenib理HepG2细胞72d,时,HepG2 细胞周期中的S期比例明显升高,G0-G1期、G2-M期比例明显下降,凋亡率明显上升(P<0.05,P<0.01).结论:Sorafenib对体外人肝癌HepG2细胞具有明显的抑制作用,主要表现为抑制其增殖和促进其凋亡.     

姜黄素对SGC7901和HepG2两种细胞株生长和凋亡的影响

目的:探讨姜黄素抑制人胃癌SGC7901细胞和人肝癌HepG2细胞生长及促进两种癌细胞发生凋亡的效应。方法:将被研究细胞分为空白对照组、姜黄素组、As2O3组、姜黄素+As2O3组,用MTT法检测不同浓度姜黄素溶液作用后SGC7901、HepG2细胞的生长抑制率,观察细胞的形态改变。结果:各浓度姜黄素组、As2O3组、姜黄素+As2O3组部分细胞形态呈现凋亡表现;40μg/mL姜黄素组对两种细胞的生长抑制率最大;As2O3组、姜黄素+As2O3合用组对细胞的生长抑制率随浓度增加而增大。结论:姜黄素及As2O3均可显著抑制细胞增殖;二者合用可加强各自作用。     

兔胆囊结石形成过程中肝细胞低密度脂蛋白受体变化的研究

In order to study the mechanism of cholesterol gallstone formation through rabbit model which was induced by high cholesterol diet, we investigated the LDL receptor activity of hepatocytes binding to 125I-LDL in different phases, namely 1, 2, 3 week group and 4 week, and in a control group besides. In this animal experiment, cholesterol gallstones were induced at 2 week, 3 week and 4 week groups in 4/10, 6/10, and 7/10 cases respectively. The Bmax values of LDL receptor of hepatocytes binding to 125I-LDL decreased significantly in 3 week and 4 week groups (vs 1 week and control groups, P < 0.05). The kd values became increased in 3 week and 4 week groups (vs 1 week and control group, P < 0.05), which suggested that the activity of LDL receptor decreased gradually. In conclusions owing to the intake of high cholesterol diet with the passage of time, the decreased activity of LDL receptor of hepatocytes would reduce the synthesis of bile acid.     

促进低密度脂蛋白受体基因表达药物的最新进展

目的 介绍提高和促进低密度蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)基因表达药物的研究进展,提出提高LDLR转录和转录后水平可作为开发降脂药物的一个新靶点,从而预防高胆固醇血症和动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生.方法 以国内外发表的论文为材料,按药物对提高LDLR转录和转录后水平等分别予以介绍.结果 与结论研究证实,许多药物可提高和促进LDLR基因表达,使血中LDL水平降低.本文提出提高LDLR转录和转录后水平可作为开发降脂药物的一个新靶点,从而预防高胆固醇血症和AS的发生.     

半夏醇提取物对人肝癌HepG2细胞增殖与细胞周期的影响

目的:探讨半夏醇提物对人肝癌细胞(HepG2)的抑制作用及其机制。方法:用半夏醇提物(PTE)与体外培养的人肝癌HepG2细胞共培养,采用MTT比色法测定不同剂量组PTE对HepG2细胞生长的影响;采用流式细胞术分析PTE对其细胞周期分布的影响;免疫细胞化学法观察细胞周期调控相关蛋白cyclin D1、c-myc和β-catenin的表达。结果:PTE作用24 h、48 h和72 h对HepG2细胞的增殖均有显著抑制作用(P     

氧化性低密度脂蛋白诱导浓度和时间对肝癌HepG2细胞胆固醇积累的影响

目的 探讨氧化性低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)促进肝癌HepG2细胞中胆固醇蓄积的最适浓度和最适作用时间。方法 将肝癌HepG2细胞接种于含10%的胎牛血清和1%双抗(青霉素、链霉素)的高糖DMEM培养基中,置于5%浓度的CO₂培养箱中培养,每3天进行一次细胞传代,取对数增长期的细胞用于实验研究。实验分为5组,空白对照组和ox-LDL组(75 mg/L、50 mg/L、25 mg/L、12.5 mg/L)。每组9个样,分3个小组,每个小组3个样,3个小组分别培养24 h、48 h和72 h后测定细胞内胆固醇的积累并用油红O染色法定性观察。应用统计学软件SPSS Statistics 17.0进行t检验分析,数据以均数±标准差表示,对胆固醇定量检测结果进行统计分析,当P<0.05时认为差异具有统计学意义。结果 与空白对照组比较,经过ox-LDL不同浓度和不同时间诱导后,总胆固醇含量(total cholesterol,TC)、游离胆固醇含量(free cholesterol,FC)及胆固醇酯与总胆固醇比值(the ratio of cholesterol ester and total cholesterol,CE/TC)均有一定程度的升高。尤以50 mg/L ox-LDL诱导48 h时[空白对照组：TC (98.21±2.85) mmol/L、FC (56.25±0.55)mmol/L、CE/TC 42.64±1.50; ox-LDL组：TC (146.7±3.59)mmol/L、FC (79.9±0.55) mmol/L、CE/TC 49.9±3.49]变化最明显。与空白对照组比较,ox-LDL组胞浆内有不同程度红色脂滴存在,且发现ox-LDL 50 mg/L作用48 h时,因含有过多脂滴而形成了红色聚集的脂团,而未加ox-LDL的空白对照组细胞内无明显脂滴颗粒。结论 ox-LDL不同诱导浓度和不同诱导时间对肝癌HepG2细胞内胆固醇(TC 、FC 、CE/TC)积累都有促进作用,而ox-LDL对肝癌HepG2细胞内胆固醇积累的影响最适浓度和时间为50 mg/L诱导48 h。     

色素上皮衍生因子对人HepG2肝细胞脂代谢的影响

【摘　要】目的：探讨色素上皮衍生因子（Pigment epithelium-derived factor, PEDF）对人HepG2肝细胞脂代谢的影响。方法：分别用重组人PEDF细胞因子和PEDF抗体干预HepG2肝细胞,采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测脂质合成和分解的关键酶mRNA及蛋白水平的变化;裂解细胞后用酶法测定细胞内甘油三酯（Triglyceride,TG）含量。结果：（1）PEDF干预人HepG2肝细胞后,固醇调节元件结合蛋白1（Sterol regulatory element-binding protein1,SREBP1）、脂肪酸合成酶（Fatty acid syn－thase,FAS）、乙酰辅酶A羧化酶1（Acetyl coenzyme A carboxylase1,ACC1）、羟甲基戊二酰辅酶还原酶（HMG-coA reductases,HMGR）mRNA的表达较正常对照分别降低39%、38%、61%、32%（P<0.05）,而脂肪甘油三酯脂酶（Adipose triglyceride lipase,ATGL）的表达增加了98%（P<0.05）;用PEDF抗体干预后,SREBP1、FAS、ACC1、HMGR mRNA的表达分别较正常对照增加92%、56%、67%、42%（P<0.05）,ATGL的表达则减少了51%（P<0.05）。（2）在蛋白水平,PEDF干预后 FAS、ACC1、HMGR表达较正常组分别减少58%、54%、43%,而 ATGL的表达增加20%（P<0.05）;用 PEDF抗体干预后,FAS、ACC1、HMGR表达较正常组分别增加41%、39%、48%,而ATGL的表达减少40%（P<0.05）。（3）PEDF的干预使细胞内TG明显减少[（410.40±13.43） mg/g vs. （234.70±35.70） mg/g,P<0.05],而 PEDF抗体干预后,细胞内TG含量有上升趋势,但无统计学差异[（410.40±13.43） mg/g vs. （440.32±25.67） mg/g,P=0.67]。结论：PEDF在 HepG2肝细胞中可抑制脂肪酸的合成,并促进脂肪分解,从而降低细胞内TG的含量。     

兔胆囊结石形成过程中肝细胞低密度脂蛋白受体变化的研究

为从脂蛋白胆固醇代谢的分子受体水平探讨胆囊胆固醇结石的成因，作者采用高胆固醇膳食建立兔胆囊胆固醇结石模型，而后对进食高胆固醇膳食后１、２、３、４周组及对照组肝细胞低密度脂蛋白（ＬＤＬ）受体活性变化进行了动态研究。结果发现：高胆固醇膳食后１周开始出现胆囊结石，２、３、４周组分别有４／１０、６／１０和７／１０只兔出现胆囊结石；１２５Ｉ－ＬＤＬ与肝细胞ＬＤＬ受体最大结合力在１周组略升高（Ｐ＞０．０５），２周组逐渐下降，３周和４周组明显下降（Ｐ＜０．０５）；解离常数Ｋｄ值逐渐升高，以３周和４周组明显（Ｐ＜０．０５）。由此提示：随着高胆固醇膳食进食时间延长，肝细胞ＬＤＬ受体活性下降，致血清ＬＤＬ清除受阻和胆汁中胆酸减少，可能在胆囊胆固醇结石形成过程中起着重要作用。     

人血小板低密度脂蛋白受体的探讨

用~(125)Ⅰ标记(Iodogen法)低密度脂蛋白(~(125)Ⅰ-LDL),其比放射性为(1.94-1.0)×10~4Bq/μg,标记率为98.44±0.9％。~(125)Ⅰ-LDL与洗涤法分离的血小板结合,37°C下孵育60 min,结合达到平衡,不需二价阳离子存在。未标记的LDL可抑制~(125)Ⅰ-LDL与血小板的结合,而纤维蛋白原,白蛋白等无此作用。每个血小板约可结合3504±735个LDL分子,具有饱和性,解离常数Kd值为(4 5±2.1)×10~(-9) mol/L。高密度脂蛋白能抑制结合。结果提示血小板有LDL特异性受体,LDL有可能通过受体介导影响血小板功能。     

地塞米松和雌二醇对HepG2细胞载脂蛋白CⅢ受体的影响

目的 探讨地塞米松和雌二醇对人肝癌细胞apoC Ⅲ 受体生理功能的影响。方法 以^125I标记的人apoC Ⅲ 为配体,利用放射性配体结合分析法,分别观察了地塞米松和雌二醇在0h、24h和48h对人肝癌细胞系HepG2细胞apoC Ⅲ 受体功能的影响。结果 地塞米松和雌二醇均对HepG2细胞apoC Ⅲ 受体的亲和力(Kd)无影响,但都能使apoC Ⅲ 受体结合容量(Bmax)显著增加,只是作用程度各异。结论 地塞米松和雌二醇对人肝apoC Ⅲ 受体的功能可能有类似的调节作用。