宫颈癌组织中CDC6、CDK1的表达及其与HPV16／18感染的相关性研究

目的：研究CDC6、CDK1在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16/18感染的相关性，以探讨宫颈癌的发生机制，进一步寻找宫颈癌诊断的新的分子标志物。方法：采用免疫组织化学方法对50例宫颈癌石蜡标本、宫颈上皮内瘤样病变CINI20例、CINⅡ-Ⅲ20例、正常宫颈组织20例进行CDC6、CDK1的检测，同时采用PCR技术检测HPV16/18感染情况。结果：在宫颈癌组织中CDC6、CDK1的阳性率高于CIN和正常宫颈组织，差异有显著性（均P〈0．05），且CDC6、CDKl阳性表达率与病理分级有关，差异有显著性（均P〈0．05），CDC6阳性表达率均与淋巴结转移有关（P〈0．05）；CDK1阳性表达率均与淋巴结转移无关（P〉0．05）；在宫颈癌组织中CDC6和CDK1的阳性表达率与年龄、临床分期无关（均P〉0．05）。HPV16/18在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中的阳性率逐渐升高，差异有显著性（P〈0．05），但与临床分期、病理分级、淋巴转移、年龄无关（均P〉0．05）。CDK1和CDC6的表达有正相关性（L=0．529，P〈0．05）；CDC6与HPV16/18感染有关（r=0．386，P〈0．05）；CDK1与HPV16/18感染无关（rs=0．145，P〉0．05）。结论：宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌组织中CDC6表达的改变可能与HPV16/18感染有关，且互相作用，共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生。这些指标综合分析可能为阐明HPV16/18的恶性转化机制以及为提高宫颈癌及其癌前病变诊断率提供参考依据。CDC6、CDK1的异常表达与宫颈癌的恶变程度有关，可作为宫颈癌筛查、预后判断的有用指标。     

宫颈癌组织中CDC6、TFF2的表达及其与HPV16/18感染的相关性研究

背景与目的： 研究细胞分裂周期蛋白6(CDC6)、三叶因子2(TFF2)在宫颈癌组织中的表达及其与人乳头状瘤病毒(HPV)16/18感染的相关性,以探讨宫颈癌的发生机制。 材料与方法： 选择50例宫颈癌石蜡标本、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ20例、CIN Ⅱ-Ⅲ20例、正常宫颈组织20例,采用免疫组织化学方法检测CDC6、TFF2的表达,同时采用PCR技术检测HPV16/18 DNA,并对 HPV16/18感染情况与CDC6和TFF2表达的相关性进行分析。 结果： 在宫颈癌组织中CDC6的阳性率高于CIN和正常宫颈组织,差异具有统计学意义(P<0.05),且CDC6阳性表达率与病理分级、淋巴结转移相关,差异具有统计学意义(P均<0.05)。在宫颈癌组织中TFF2的阳性率低于CIN和正常宫颈组织,差异具有统计学意义(P<0.05),TFF2阳性表达率与年龄分组相关,差异具有统计学意义(P<0.05),其阳性表达率均与临床分期、病理分级、淋巴转移无相关关系(P均>0.05);以正常宫颈组织、CIN和宫颈癌为序 HPV16/18 DNA的阳性检出率逐渐升高,各组间的差异具有统计学意义(P<0.05),但与年龄、临床分期、病理分级、淋巴转移无相关关系(P均>0.05)。在宫颈癌组织中,CDC6与HPV16/18感染呈正相关(rs=0.386, P<0.05),TFF2与CDC6、HPV16/18感染呈负相关(rs=-0.356,P<0.05;rs=-0.500,P<0.05)。 结论： 宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌组织中CDC6、TFF2表达的改变可能与 HPV16/18感染有关。CDC6的异常表达与宫颈癌的恶变程度有关。     

宫颈癌组织中MCM4、CDC6的表达及其与HPV16/18感染的相关性

目的:研究微小染色体维持蛋白4(minichromosome maintenance proteins 4,MCM4)、细胞分裂周期蛋白(cell division cycle 6,CDC6)在宫颈癌组织中的表达及其与人乳头状瘤病毒16/18型(human papilloma virus 16/18 type,HPV16/18)感染的相关性及其临床意义.方法:收集2006-2007年间山西大同市第五人民医院病理科经病理证实的50例宫颈癌、20例宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)Ⅰ、20例CINⅡ-Ⅲ、20例正常宫颈组织石蜡标本,以免疫组织化学法检测这些组织标本中MCM4、CDC6的表达,同时采用PCR技术检测HPV16/18的感染情况.结果:(1)在宫颈癌组织中MCM4、CDC6表达的阳性率显著高于CIN和正常宫颈组织(均P<0.05),且MCM4、CDC6阳性表达率与宫颈癌病理分级和淋巴转移相关(均P<0.05),而与年龄分组、临床分期无关(均P>0.05).(2)HPV16/18 感染在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌组织中的阳性率依次升高(P<0.05),但与宫颈癌患者年龄、临床分期、病理分级、淋巴转移无关(均P>0.05).(3)宫颈癌组织中MCM4和CDC6的表达呈正相关(r= 0.390;P<0.05);MCM4和CDC6表达均与HPV16/18感染相关(r=0.634, P<0.05; r=0.386, P<0.05).结论:宫颈癌及CIN组织中MCM4、CDC6表达的改变与HPV16/18感染密切相关,共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生与发展.     

宫颈癌组织IEX-1表达及其与HPV感染相关性研究

目的 即刻早期反应基因(immediate early response gene X-1,IEX-1)是一种凋亡易感基因,在多种人类恶性肿瘤中表达失调,但在宫颈癌组织中的表达相关研究较少,检测宫颈癌组织IEX-1的表达,了解其在宫颈癌发生发展中的作用,分析其与人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染的关系.方法 收集2011-01-01-2015-10-31郑州大学第一附属医院病理科存档蜡块标本132份,采用免疫组化法检测IEX-1在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及良性宫颈病变组织中的表达情况,分析IEX-1的表达与宫颈癌临床病理关系.采用RT-qPCR法及蛋白质印迹法检测Siha(HPV16+)、HeLa(HPV18+)和C-33a(HPV-)3种宫颈癌细胞株中IEX-1mRNA及蛋白的表达,siRNA法靶向沉默E6后Siha细胞E6、IEX-1的mRNA及蛋白表达,分析与HPV感染的关系.结果 IEX-1在宫颈良性病变、CIN组织和宫颈癌组织中的表达分别为72.4％、58.7％和21.1％,差异有统计学意义,x2=21.345,p=0.001.宫颈癌组织IEX-1的表达与患者年龄、病理类型、HPV感染型别及FIGO分期无关,均P＞0.05.IEX-1的表达与宫颈癌分化程度、淋巴结转移情况及宫旁浸润密切相关,均P＜0.05.C 33a细胞中IEX-1 mRNA表达量为21.652±9.020,明显高于Siha细胞的1(t=7.34,P＜0.001)和HeLa细胞的1.742±0.854(t=6.21,P＜0.001);IEX-1蛋白表达量为18.017±1.351,明显高于Siha细胞的1.519±0.391(t=8.16,P＜0.001)和HeLa细胞的1.957±0.363(t=7.19,P＜0.001).干扰组E6 mRNA水平为0.218±0.106,低于阴性对照组的1.031±0.072(t=9.21,P＜0.001)和空白对照组(t=8.46,P＜0.001);干扰组E6蛋白表达量为0.184±0.274,低于阴性对照组的0.692±0.133(t=8.71,P＜0.001)和空白对照组的0.783±0.097(t=8.06,P＜0.001).干扰组IEX-1 mRNA水平为20.083±0.672,低于阴性对照组的1.193±0.408(t=9.04,P＜0.001)和空白对照组,t=7.56,P＜0.001;干扰组IEX-1蛋白表达量为0.672±0.135,低于阴性对照组的0.137±0.071(t=7.92,P＜＜0.001)和空白对照组的0.081±0.009(t=6.47,P＜0.001).结论 IEX-1在宫颈癌中表达降低,其表达水平与宫颈癌恶性程度呈负相关,可能参与了宫颈癌的发生与发展.IEX-1在宫颈癌细胞中的表达与HPV感染有关,但与感染的HPV型别无关.     

宫颈癌组织中人乳头瘤病毒HPV16型基因组同源序列的检测

本文报道应用Southern blot核酸分子杂交技术,以标记的国内HPV16型基因组分子为探针,共检测22例宫颈癌、4例宫颈不典型增生、6例宫颈慢性炎症,5例宫颈内膜息肉,6例正常宫颈上皮组织中的HPVl6型基因组同源序列。杂交结果表明,宫颈癌组织中HPV16型基因组同源序列阳性率为36.4％(相关序列阳性率为59.1％),非癌组织和正常宫颈上皮组织均为阴性,P<0.05具有显著性差异。同时还观察到宫颈癌病理组织学特征和组织细胞体外培养CPE与HPV16型基因组同源序列检出率呈正相关,P<0.001。更进一步证明宫颈癌发病与HPV感染密切相关。并提出HPV感染的初筛检测方法。     

宫颈癌组织中MCM4、CDC6的表达及其与HPV16/18感染的相关性

摘 要 目的: 研究微小染色体维持蛋白4(minichromosome maintenance proteins 4,MCM4)、细胞分裂周期蛋白(cell division cycle 6,CDC6)在宫颈癌组织中的表达及其与人乳头状瘤病毒16/18型(human papilloma virus 16/18 type,HPV16/18)感染的相关性及其临床意义。方法：收集2006-2007年间山西大同市第五人民医院病理科经病理证实的50例宫颈癌、20例宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia, CIN）Ⅰ、20例CINⅡ-Ⅲ、20例正常宫颈组织石蜡标本，以免疫组织化学法检测这些组织标本中MCM4、CDC6的表达，同时采用PCR技术检测HPV16/18的感染情况。结果：（1）在宫颈癌组织中MCM4、CDC6表达的阳性率显著高于CIN和正常宫颈组织（均P<0.05），且MCM4、CDC6阳性表达率与宫颈癌病理分级和淋巴转移相关（均P<0.05），而与年龄分组、临床分期无关（均P>0.05）。（2）HPV16/18 感染在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌组织中的阳性率依次升高（P<0.05），但与宫颈癌患者年龄、临床分期、病理分级、淋巴转移无关（均P>0.05）。（3）宫颈癌组织中MCM4和CDC6的表达呈正相关（r= 0.390;P<0.05）；MCM4和CDC6表达均与HPV16/18感染相关（r=0.634, P<0.05; r=0.386, P<0.05）。结论：宫颈癌及CIN组织中MCM4、CDC6表达的改变与HPV16/18感染密切相关，共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生与发展。     

p53和HPV—16、18E6蛋白在宫颈癌的表达

目的探讨宫颈癌中抑癌基因p53蛋白与HPV-16、18癌基因E6蛋白的表达及其意义.方法采用SP免疫组织化学方法,检测68例宫颈癌和8例慢性宫颈炎上皮组织中p53和HPV-16、18E6蛋白的表达.结果68例宫颈癌中有17例p53蛋白和60例HPV-16、18E6蛋白呈阳性表达,阳性率分别为25.0%和88.2%.p53蛋白阳性表达与组织学类型有关,其阳性率在宫颈腺癌中为83.3%和宫颈鳞癌中为17.2%,有极显著性差异(P＜0.01);p53蛋白表达也与临床分期相关,该蛋白阳性表达率随着临床分期上升而增高.p53表达同肿瘤分化程度,淋巴结转移无关(P＞0.05).HPV-16、18E6蛋白在宫颈癌组织中的表达同肿瘤分化程度、淋巴结转移、组织学类型和临床分期无关(P＞0.05).在慢性宫颈炎上皮组织中均无p53和HPV-16、18E6蛋白表达.结论p53蛋白阴性和弱阳性表达以及HPV-16、18E6蛋白过度表达与宫颈癌发生有关,但在宫颈腺癌和临床分期升高的宫颈癌组织中,p53蛋白阳性表达的增强可能是p53基因突变的结果,或者与其他细胞蛋白结合,阻止了HPV-16、18E6蛋白对p53蛋白的降解作用,使p53蛋白稳定性增加和阳性表达水平提高.     

Bcl-2 Survivin CD44v6的表达HPV16/18感染及其与宫颈癌发生的相关性探讨

目的：研究Bcl-2、Survivin、CD44v6在宫颈癌的表达及其与HPV16/18感染的相关性，以探讨宫颈癌的发生机制、方法：采用免疫组化对宫颈癌、上皮内瘤样病变（CIN）和正常宫颈进行Bcl-2、Survivin、CD44v6的检测，同时采用PCR检测HPV16/18感染情况。结果：Bcl-2、Survivin、CD44v6的阳性率在宫颈癌与CIN、正常宫颈间有显著差异，且随着临床分期、病理分级的升高阳性率差异有显著性，其阳性率与淋巴结转移有关．HPV16/18在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中的阳性率逐渐升高，差异有显著性。Bcl-2和Survivin均与HPV16/18感染有相关性。结论：宫颈癌中Bcl-2、Survivin、CD44v6的异常表达和HPV16/18感染有关，与宫颈癌的恶变程度有关．可作为宫颈癌筛查预后判断的有利指标。     

HPV16 E6、P21^WAF1、CDK2、Livin在宫颈癌中的表达及其意义

目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）16E6、P21^WAF1、CDK2、livin在宫颈癌中的表达及P21^WAF1、CDK2、livin与E6的关系。方法采用免疫组化SP法检测HPV16E6、P21P21^WAF1、CDK2、livin在20例宫颈癌、40例宫颈上皮内瘤变（CIN）及20例正常对照组中的表达。应用图像分析软件分别对此四个因子的表达进行平均光密度分析。结果E6、P21^WAF1、CDK2、livin蛋白于宫颈癌组高于CIN1-2组及正常组（P〈0．05）,CIN3组高于CIN1-2组及正常组（P〈0．05）,宫颈癌组与CIN3组之间差异无统计学意义（P〉0．05）,CIN1-2组与正常组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。E6分别与P21^WAF1、CDK2、livin成正相关（相关系数r分别为0．706、0．713、0．711,P〈0．05）。结论E6、CDK2与宫颈癌的发生、发展密切相关,E6、CDK2异常高表达可能是宫颈疾病恶变早期事件。livin可能成为宫颈癌潜在的治疗分子靶向。     

应用组织芯片研究HPV6/11、HPV16/18与子宫颈病变的关系

目的 通过检测低危型HPV6/11及高危型HPV16/18在慢性子宫颈炎、子宫颈尖锐湿疣不伴非典型增生、子宫颈鳞状上皮CIN Ⅰ级、子宫颈鳞状上皮CIN Ⅲ级、子宫颈浸润性鳞状细胞癌五种子宫颈病变中的表达情况,探讨HPV与子宫颈病变的相关性、作用机制及其临床意义.方法 应用组织芯片技术,将150例子宫颈病变患者的标本制成组织芯片,用原位杂交法对其进行6/11型及16/18型HPV的测定,应用SPSS 10.0统计软件进行数据分析.结果 低危型HPV6/11在慢性子宫颈炎、子宫颈尖锐湿疣、子宫颈鳞状上皮CIN Ⅰ级、子宫颈鳞状上皮CIN Ⅲ级、子宫颈浸润性鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为:13.33%、90%、33.33%、0、0,其中尖锐湿疣组HPV6/11的阳性表达率显著高于其他各组(均P＜0.001);CIN Ⅰ组与CIN Ⅲ及癌比较差异有统计学意义(P=0.001,＜0.05);运用Spearman相关分析表明,HPV6/11在上述五种病变中的阳性表达率与恶性度呈负相关(rs=-0.370,P＜0.001).高危型HPV16/18在慢性子宫颈炎、尖锐湿疣、CIN Ⅰ级、CIN Ⅲ级、鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为0、6.67%、10%、56.67%、76.67%,CIN Ⅲ及鳞癌与其他各组间比较均有统计学意义(P＜0.001),但CIN Ⅲ与鳞癌之间无统计学意义(P=0.10);运用Spearman相关分析表明,HPV16/18在上述五种病变中的阳性表达率与恶性度呈正相关(rs=0.628,P＜0.001).结论 低危型HPV6/11主要引起子宫颈尖锐湿疣及CIN Ⅰ;高危型HPV16/18与CIN Ⅲ及子宫颈浸润性鳞癌关系密切,是引起子宫颈CIN Ⅲ及浸润性癌的主要因素.对HPV在子宫颈病变中检测及分型有助于对子宫颈病变的诊断和监测,尤其是对子宫颈癌的预防、早期诊断及早期治疗具有重要意义.     

HPV16型E6、E7变异与宫颈癌发生发展的研究进展

宫颈癌是全球15 ～44岁女性中第二常见的恶性肿瘤,每年的死亡人数约为265 653人,在中国,宫颈癌的发生率及死亡率仍较高.高危型人乳头状瘤病毒(HPV)持续感染是宫颈癌前病变及宫颈癌发生的必要条件,HPV16是最常见的高危人乳头瘤病毒.HPV16编码的E6和E7蛋白在HPV相关的肿瘤中起关键作用.近年来的研究揭示了HPV16 E6、E7基因的变异引起氨基酸变化可影响E6、E7蛋白与p53、pRb 的结合,进而与宿主细胞恶性转化相关.本文将对近年来HPV16 E6、E7变异在宫颈癌发生发展中的作用作一综述.     

Incidence and prognostic impact of high-risk HPV tumor infection in cervical esophageal carcinoma

Background

Cervical esophageal carcinoma (CEC) is an uncommon malignancy. Limited data supports the use of definitive chemoradiotherapy (CRT) as primary treatment. Furthermore, the role of human papillomavirus (HPV) tumor infection in CEC remains unknown. This study retrospectively analyzes both outcomes of CEC patients treated with CRT and the incidence and potential role of HPV tumor infection in CEC lesions.

Methods

A total of 37 CEC patients were treated with definitive CRT at our institution between 1987 and 2013. Of these, 19 had tumor samples available for high-risk HPV (types 16 and 18) pathological analysis.

Results

For all patients (n=37), 5-year overall survival (OS), disease-free survival (DFS), and loco-regional control (LRC) rates were 34.1%, 40.2%, and 65.6%, respectively. On pathological analysis, 1/19 (5.3%) patients had an HPV-positive lesion.

Conclusions

Definitive CRT provides disease-related outcomes comparable to surgery. Moreover, HPV tumor infection in CEC is uncommon and its prognostic role is unclear. Our data contribute to the construction of an anatomical map of HPV tumor infection in squamous cell carcinomas (SCC) of the upper aerodigestive tract, and suggest a steep drop in viral infection rates at sites distal to the oropharynx, including the cervical esophagus.     

Impact of an HPV6/11/16/18 L1 virus-like particle vaccine on progression to cervical intraepithelial neoplasia in seropositive women with HPV16/18 infection

The impact of a human papillomavirus (HPV) vaccine on development of cervical intraepithelial neoplasia grade 2-3 or adenocarcinoma in situ (CIN2-3/AIS) in women with ongoing HPV16 or 18 infections prevaccination is reported. Seventeen thousand six-hundred and twenty-two women aged 16-26 were enrolled in 1 of 2 randomized, placebo-controlled, efficacy trials (Protocols 013 and 015). Vaccine or placebo was given at day 1, month 2 and 6. Women were tested for HPV6/11/16/18 DNA and antibodies at day 1. We focus on the subset of women who were seropositive and DNA positive to HPV16 or HPV18 prevaccination. Incidence is expressed as the number of women with an endpoint per 100 person-years-at-risk. In total, 419 vaccine and 446 placebo recipients were both seropositive and DNA positive to HPV16 or HPV18 prevaccination and had at least one follow-up visit. In Protocol 013, the incidence of HPV16/18-related CIN2-3/AIS among these women was 10.9 in the vaccine arm and 7.0 in the placebo arm (vaccine efficacy = -54.9; 95% CI: -181.7, 13.0). In Protocol 015, the incidence of HPV16/18-related CIN2-3/AIS was 5.5 in the vaccine arm and 6.2 in the placebo arm (vaccine efficacy = 12.2%; 95% CI: -29.8, 40.9). These data suggest HPV vaccination neither reduces nor enhances progression to HPV16/18-related high grade cervical lesions, and cervical cytology screening and corresponding management should continue as per local recommendations. Ultimately, population-based surveillance of vaccinated individuals beyond these clinical trials will be required to further address questions regarding the impact of vaccination in women exposed to vaccine HPV types before vaccination.