军团菌培养基的改进

嗜肺性军团病杆菌(LDB)是军因病的病原菌。自1983年南京军区总医院分离出我国第一株嗜肺性LDB后,各地陆续也有报道。鉴于军团病在我国广泛存在,因此,我们利用南京军区总医院提供的标准菌种也进行了LDB的实验研究。     

改进莱姆病螺旋体培养基的研究

用国产氨基酸、维生素、核苷和微量元素等代替进口 CMRL1066,用新生牛血清代替兔血清,对培养莱姆病螺旋体的 BSKⅡ培养基进行了改进。在改进的培养基中,B_(31)国际标准株和国内的6个不同地理株莱姆病螺旋体生长良好。与 BSKⅡ培养基比较,经改进的培养基培养的螺旋体其抗原性、特征蛋白组成以及毒力无明显变异。用改进的培养基成功地从全沟硬蜱和实验小鼠血液和脏器内分离到了伯氏疏螺旋体。这种改进的培养基适用于莱姆病螺旋体的传代培养和病原体分离。为在我国进行莱姆病的深入和普及研究提供了有利条件。     

嗜肺性军团病杆菌单克隆抗体特性鉴定及初步应用

本文报道了嗜肺性军团病杆菌(LDB)种特异McAb的特性鉴定及初步应用。分泌McAb的细胞系冻存8个月,在体外连续传至90代后,仍能稳定地分泌McAb,未见染色体丢失。此McAb经鉴定为鼠IgG_1 Kappa型。与1～6型LDB PHA效价为1:6400～1:204800,R-PHA为1:64～1:4096;琼脂双向扩散效价为1:128;DFA为2 ～3 ;IFA为1 ～3 强度荧光。而与其它革兰氏阳性、阴性15种134株细菌均不出现交叉反应。此McAb已用于国内2株LDB鉴定。因其具有多价性质,故在LDB快速诊断中是一种理想的试剂。     

改良Korthof培养基

使用Korthof培养基分离培养钩端螺旋体是钩端螺旋体病的实验诊断技术之一,已用多年,效果尚良好。为简化培养基的制备,我们据Babuidieri氏法对Korhof培养基作了改进,去掉了氯化钙,解决了制备干燥粉剂后因溶解而产生大量沉淀问题,使之较易制成干燥粉剂。增加微量的维生素、烟碱酸及少量酚红,现场分离可加适量5—氟脲嘧啶。减少兔血清用量,可简化操作程序。经与Korthof原方进行效果比较及三十余年的使用,效果尚好。改良Korthof培养基之优点:因无钙,可避免沉淀产生,较易制作浓缩培养基,也较容易干燥成功。节省兔血清。加入酚红,便于观察pH。现将改良Korthof培养基的成份及制备程序报告如下:(月示)胨(或蛋白陈、胰     

军团菌病3例报告

军团菌病(LD)是由嗜肺性军团杆菌所引起的以肺部感染为主,可并发肺外多脏器损害的一种急性感染性疾病。1998-06～08滇南边防某部先后发生3例类似病人,首例从治疗到死亡48h,后2例确诊为军团菌病,现报告如下。     

红杆菌YIM93620和台湾红杆菌BCRC17173培养基优化及~(12)C~(6+)重离子生物学效应研究

目的缩短红杆菌(Rubrobacter sp.)YIM93620和台湾红杆菌(Rubrobacter taiwanensis)BCRC17173培养时间,加快试验进度,更方便研究其耐辐射水平;确定这两株菌对重离子照射后的生物学效应,为航天辐射防护提供理论支持。方法比较这两株菌在TSB、CYC、Thermus、ISP2这四种培养基上的生长情况,并测定添加不同浓度的丙酮酸钠和甜菜碱对生长的促进情况;选E.coli K-12作为阴性对照,分别对这两株菌进行不同剂量的~(12)C~(6+)重离子照射,并绘制致死率曲线研究生物学效应。结果 YIM93620和BCRC17173在Thermus培养基中生长状态最好;分别在添加0.125%甜菜碱和0.1%丙酮酸钠的Thermus培养基中培养时间从10~15 d缩短到6 d;YIM93620在160 Gy时达到最高致死率93.3%,而BCRC17173在320 Gy时致死率仅35.7%,对~(12)C~(6+)重离子都具有强的抗性。结论筛选到这2株菌生长状态都较好的培养基Thermus,添加0.125%甜菜碱和0.1%丙酮酸钠分别可显著促进菌株YIM93620和BCRC17173的生长;这两株菌均有强的耐~(12)C~(6+)重离子辐射特性。     

双管培养基分离培养厌氧菌

本文介绍能常规应用的一套分离培养厌氧菌的方法。不需要特制的厌氧培养设备,具有简便快速等优点,适合于一般实验室使用。 材料及方法 (1)培养基:选用Lombard-Dowell(LD)培养基,制法如下:胰酪胨5.0g、     

肺炎军团杆菌诱导NCI-H292细胞β-defensin-2表达的分子机制

目的探讨人β防御素2（human beta defensin 2,hBD-2）基因作用的分子机制,为临床抗感染治疗提供依据。方法肺炎军团杆菌感染NCI-H292细胞,采用菌落形成实验,Western blot实验和ELISA实验检测丝裂原活化蛋白激酶（mi-togen-activatived protein kinase,MAPK）途径内基因的变化。结果 hBD-2对肺炎军团杆菌有抑制作用,肺炎军团杆菌诱导分泌hBD-2主要是通过JNK和p38途径起作用。结论肺炎军团杆菌主要通过c-Jun氨基末端激酶（the c-Jun N-termi-nal kinase,JNK）和p38途径诱导NCI-H292细胞分泌hBD-2。     

RAPD用于结核暴发流行点传染源鉴别及其意义

作者就随机扩增ＤＮＡ多态性分析 (ＲＡＰＤ)技术用于结核暴发流行点传染源鉴别的价值进行了探讨 ,现报道如下。1　材料与方法1 1　痰菌分离培养　由全军结核病防疫队取自北京市某结核病暴发流行点共 13份痰标本 ,于次日用匡氏琼脂培养基做抗酸杆菌分离培养[1] 。1 2　菌型鉴定　采用多引物ＰＣＲ和传统生化、培养分型 2种技术对抗酸杆菌阳性分离物分型鉴定[2 ] 。1 3　药敏试验　采用匡氏琼脂培养基鉴定结核杆菌分离株对 8种抗痨药物的抗性[3 ] 。1 4　ＤＮＡ提取　用酚 氯仿法从受试结核菌提取ＤＮＡ。为确保操作安全 ,用作ＤＮＡ提取的菌…     

有血清和无血清培养基中BFU-E的比较研究

目的 :比较有血清和无血清培养基中BFU -E生长情况。方法 :分离脐血中单个核细胞 (MNC) ,接种于有血清和无血清甲基纤维素半固体培养基中生长 14～ 18d ,观察BFU -E ,并染色鉴定。结果 :有血清中约在培养 14～ 16d集落数达高峰 ,BFU-E为 ( 70 .3± 5 0 .5 ) /10 5MNC ,大部分BFU -E的细胞为 3 0 0～ 5 0 0个 ,小部分集落细胞超过 10 0 0个 ;无血清培养 16～ 18d集落数达高峰 ,BFU -E为 ( 3 6.5± 18.2 ) /10 5MNC ,集落形态与有血清基本相似 ,但集落体积普遍较小 ,细胞数约为 2 0 0～ 3 0 0左右。结论 :无血清培养基中生长时BFU -E数目及BFU -E平均细胞数均较有血清培养中少 ,血清中含有促进BFU -E生长与分化的因子     

模拟失重骨细胞条件培养基对成骨细胞活性的影响

目的 探讨三维随机回转模拟失重培养后的骨细胞条件培养基(RCM)对成骨细胞活性的调节作用.方法 采用三维随机回转模拟失重培养小鼠骨细胞系MLO-Y448 h后,收集回转条件培养基(RCM)和未回转对照组的条件培养基(CCM),用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、对硝基苯磷酸(pNPP)法和流式细胞术(FCM)检测RCM对小鼠成骨样细胞系MC3T3-E1增殖、周期及细胞分泌碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.结果 三维随机回转48 h后的MLO-Y4 RCM可促进 MC3T3-E1增殖,用100%的MLO-Y4RCM和CCM培养 MC3T3-E1 48 h和72 h后,RCM组比CCM组分别增加了1.21和1.27倍,差异性极显著(P<0.001);周期检测结果表明,RCM可以使MC3T3-E1越过周期阻滞点(S期);MC3T3-E1的ALP活性在RCM组和CCM组之间无差异.结论 三维随机回转模拟失重培养骨细胞48 h后的条件培养基促进了成骨细胞的增殖;并使成骨细胞的周期越过阻滞点,对成骨细胞的ALP活性无影响.     

人根尖牙乳头干细胞条件培养基体外诱导成牙分化的研究

目的 探讨人根尖牙乳头干细胞(conditional medium of stem cells from apical papilla,SCAP-CM)条件培养基诱导牙髓细胞成牙分化的作用.方法 从人新鲜拔除的离体牙中,分离培养根尖牙乳头干细胞,收集其在常氧和低氧环境下培养的条件培养基[SCAP-CM(N)和SCAP-...     

亲肺军团杆菌的遗传型和细胞脂肪酸组成分析

本文报告了亲肺军团杆菌的遗传型和细胞脂肪酸分析的结果.我国分离的第一株亲肺军团杆菌血清6型的DNA Mol%是37,与同型标准株芝加哥2号的杂交率是94.6%.含量最多的脂肪酸是饱和的含支链十六碳酸(i-16∶0),其次是不饱和的直链十六碳酸(16∶1),最少的是十八烷酸(18∶0).支链酸的含量为总脂肪酸含量的62～66%.     

淋球菌增菌培养基的研制与临床应用

利用1640作基础培养液,加入淋球菌生长因子及多种抗生素等物质,配制了淋球菌增菌培养基。与革兰染色和巧克力(色)培养基对照进行淋球菌检测。结果,临床诊断急性淋病24例,革兰染色、巧克力(色)培养基、增菌培养基阳性检出率分别为91.67％、98.53和100％临床诊断慢性淋病15例,阳性检出率分别为40％、53.33％,和80％。淋球菌增菌培养基对淋球菌的阳性检出率高于革兰染色和巧克力(色)培养基。     

某型潜艇舱室微生物气溶胶污染状况与艇员卫生健康的相关性分析

目的评价某型潜艇长航后舱室微生物气溶胶污染状况对艇员身体健康造成的影响。方法 (1)富集长航前后舱室空气样本, 分析其气载微生物构成变化。(2)采用随机抽样法对长航后31名艇员进行9种病原菌IgM抗体和曲霉菌IgG抗体检测;对30名艇员长航前后血清IgG、IgA、IgM及白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-8、炎症蛋白-10(IP-10)进行配对检测。结果 (1)潜艇长航前可培养微生物分类为21个属56个种, 长航后为37个属80个种;长航后丝状真菌和革兰氏阴性杆菌占比明显增加;长航前后均未检测到呼吸道病毒、支原体、衣原体、嗜肺军团菌核酸。(2)长航后艇员血清IgG和IgA水平较长航前显著升高(P<0.01);血清IL-2和IL-8水平降低, IL-4和IP-10水平升高, 各组分变化均有统计学意义(P<0.05);长航后肺炎支原体IgM抗体阳性率为21.62%, 乙型流感病毒IgM抗体阳性率为5.41%, 副流感病毒IgM抗体阳性率为2.70%, 曲霉菌IgG抗体阳性率为16.67%。结论某型潜艇长航后舱室气载微生物种群的生物多样性增加, 以真菌和革兰氏阴性杆菌增加为...     

不同血清浓度培养基对HIV产量的影响

免疫印迹试验是确认ＨＩＶ感染的标准。免疫印迹试剂的研制需要用天然全ＨＩＶ裂解产物,这就需要培养ＨＩＶ赖以生存的宿主细胞以大量生产ＨＩＶ。传统体外培养细胞多用含10%～20%的动物血清的培养基[1]。但异种动物血清给试剂研制末期病毒抗原的分离纯化带来困难,并增加试剂的非特异性。无血清化学培养基价格居高不下。在不降低ＨＩＶ感染毒力和病毒产量的前提下,减少培养基中血清用量,既可降低成本,又可给后续工作带来方便。我们根据长期积累的经验对不同血清含量的培养基对ＨＩＶ产量的影响进行了系统研究。　　[收稿日期]　1999-03-26[…     

不同培养基对脑包虫细胞系的培养观察

1991年以来,我们先后采用了1640、199和改良伊格加水解蛋白对脑包虫原代细胞进行了培养观察,但用改良伊格加水解乳蛋白先后培养成功了三批细胞;而用1640和199培养基对脑包虫原代细胞培养均未获得成功。1993年7月,我们用以上三种培养液对脑包虫传代细胞系进行了对比培养观察实验,现报     

科玛嘉念珠菌显色培养基的临床应用评价

目的评价科玛嘉(CHROMagar)念珠菌显色培养基在临床念珠菌鉴定中的应用价值。方法将标本同时接种沙氏基和CHROMagar念珠菌显色培养基,沙氏基上生长的酵母菌经ATB鉴定,CHROMagar念珠菌显色培养基根据菌落颜色直接判读。结果94份标本中CHROMagar念珠菌显色培养基鉴定出白色念珠菌35株,热带念珠菌8株,光滑念珠菌6株,克柔念珠菌2株,其他念珠菌6株,与ATB鉴定结果对比,白色念珠菌符合率为100%,热带念珠菌为100%,光滑念珠菌为85.7%,克柔念珠菌为100%。结论CHROMagar念珠菌显色培养基能快速、简便、准确鉴定临床常见念珠菌,明显提高对混合感染的识别。     

肺炎型军团杆菌病X线诊断和追访4例

肺炎型军团杆菌病Ｘ线诊断和追访４例吴承良１陈彦１李松年２肺炎型军团杆菌病是以肺炎为主要表现伴多系统损害的疾病。现将我院确诊４例报道如下。１临床资料４例中男女各２，年龄３９～６０岁，平均４８岁，体温３９～４０℃，均有呼吸道症状。１例入院后出现精神异常，...     

军团杆菌病X线、CT诊断及追访观察(附12例报告)

目的：结合临床表现认识军团杆菌病（ＬＤ）Ｘ线和ＣＴ特点。方法：对１２例临床证实的军团杆菌病进行Ｘ线和ＣＴ分析,并同时追访观察了临床症状消失后胸部影像表现。结果：１２例均有肺部影像改变,６例伴有胸膜改变,２例伴混合感染性肺脓肿。另有２例伴发浸润性肺结核。结论：细胞分离和免疫荧光检测是军团杆菌病确诊的依据,肺部改变多样化同时伴有胸水与典型临床症状相结合,对军团杆菌病的早期诊断提供了一定帮助,肺部影像病变吸收滞后于临床症状消失是本病的又一特点。