131I照射对分化型甲状腺癌细胞摄碘水平及NIS mRNA表达的影响

目的:探讨131I不同时间照射后分化型甲状腺癌细胞摄取放射性碘(125I)水平的变化以及检测是否影响NIS mRNA表达.方法:分化型乳头状甲状腺癌细胞株(GTHW3)培养在DMEM培养基中,应用同一活度(20μCi)的131I对培养癌细胞进行不同时间(6h、12h、24h、48h)的照射.γ计数仪测定放射性碘(125I)摄取率.采用RT-PCR法检测甲状腺癌细胞的NIS mRNA表达.结果:不同时间的放射性131I照射使甲状腺癌细胞摄取125I降低;凝胶电泳显示放射性131I照射24h后GTHW3细胞NIS mRNA表达降低;照射组各时间点的125I摄取率及24h和48h的NIS mRNA表达与未照射对照组比较均有显著性差异.结论:131I照射可使DTC细胞的NIS mRNA表达降低,提示131I照射致DTC细胞失分化及其摄碘能力降低可能与DTC细胞NIS mRNA表达降低有关.     

放射性^131I照射与分化型甲状腺癌细胞摄碘（^125I）率关系的实验研究

目的：探讨分化型甲状腺癌培养细胞接受放射性碘（^131I）照射剂量与摄取放射性碘间的相关性,为放射性碘去除治疗甲状腺癌提供新的思路.方法：设两个实验组,对分化型甲状腺癌细胞进行培养,其一应用同一活度（20μCi）的放射性^131I对培养细胞进行不同时间的照射,另组应用不同活度的放射性^131I对培养细胞进行相同时间（12h）的照射,分别测定两组甲状腺癌细胞摄取放射性^125I水平.结果：不同活度或不同时间的放射性^131I照射使甲状腺癌细胞摄取碘的水平降低,受照射组与未照射对照组细胞摄碘率比较有显著性差异（P＜0.01）.结论：放射性^131I照射可以使分化型甲状腺癌细胞摄碘率显著降低.     

放射性~(131)I照射与分化型甲状腺癌细胞摄碘(~(125)I)率关系的实验研究

目的:探讨分化型甲状腺癌培养细胞接受放射性碘(131I)照射剂量与摄取放射性碘间的相关性,为放射性碘去除治疗甲状腺癌提供新的思路。方法:设两个实验组,对分化型甲状腺癌细胞进行培养,其一应用同一活度(20μCi)的放射性131I对培养细胞进行不同时间的照射,另组应用不同活度的放射性131I对培养细胞进行相同时间(12h)的照射,分别测定两组甲状腺癌细胞摄取放射性125I水平。结果:不同活度或不同时间的放射性131I照射使甲状腺癌细胞摄取碘的水平降低,受照射组与未照射对照组细胞摄碘率比较有显著性差异(P<0.01)。结论:放射性131I照射可以使分化型甲状腺癌细胞摄碘率显著降低。     

放射性131Ⅰ照射与分化型甲状腺癌细胞摄碘(125Ⅰ)率关系的实验研究

目的:探讨分化型甲状腺癌培养细胞接受放射性碘(131I)照射剂量与摄取放射性碘间的相关性,为放射性碘去除治疗甲状腺癌提供新的思路.方法:设两个实验组,对分化型甲状腺癌细胞进行培养,其一应用同一活度(20μCi)的放射性131I对培养细胞进行不同时间的照射,另组应用不同活度的放射性131I对培养细胞进行相同时间(12h)的照射,分别测定两组甲状腺癌细胞摄取放射性125I水平.结果:不同活度或不同时间的放射性131I照射使甲状腺癌细胞摄取碘的水平降低,受照射组与未照射对照组细胞摄碘率比较有显著性差异(P＜0.01).结论:放射性131I照射可以使分化型甲状腺癌细胞摄碘率显著降低.     

摄碘阳性的分化型甲状腺癌淋巴结转移灶131I疗效分析

背景与目的：淋巴结转移（lymph node metastasis,LNM）是分化型甲状腺癌（differentiated thyroid carcinoma,DTC）最常见的转移,而¹³¹I对LNM的疗效存在争议,本研究旨在明确¹³¹I对摄碘良好的LNM的疗效及影响因素。方法：纳入2015年1月—2019年6月在上海交通大学医学院附属新华医院接受¹³¹I治疗的90例DTC患者,共计161个摄碘阳性的转移淋巴结。分析患者的临床及影像学资料,应用SPSS 24.0软件进行统计分析。计量资料按照正态分布,进行独立样本t检验比较,计数资料的比较采用χ²检验,用logistic回归进行多因素分析,建立多个定量指标与结局为¹³¹I治疗无效的关系间的受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线,并得到最佳诊断阈值。结果：161个摄碘阳性的转移淋巴结中,有效组为71个（44.10%）,无效组为90个（55.90%）。单因素分析提示,两组患者在年龄、性别、病理学类型、原发病灶数量、原发病灶位置、有无远处转移及血清甲状腺球蛋白（thyroglobulin,Tg）水平等方面差异均有统计学意义（P <0.05）。多变量logistic回归分析显示,病理学类型（OR = 11.827,95% CI：1.128 ~ 123.978,P = 0.039）、有无远处转移（OR = 0.220,95% CI：0.093 ~ 0.522,P = 0.001）和原发病灶数量（OR = 0.421,95% CI：0.212 ~ 0.837,P = 0.014）与治疗后的转归密切相关。结论：原发病灶多灶、病理学类型为甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）、远处转移、血清Tg高于43.51 ng/mL及转移淋巴结的最大径大于16.8 mm是摄碘阳性淋巴结¹³¹I治疗无效的危险因素,建议对此类患者加大治疗剂量或尽早选择手术切除。     

hTPO和hNIS共转染胶质瘤细胞碘摄取和^131I治疗的实验研究

目的构建含有人甲状腺过氧化物酶基因（hTPO）的重组腺病毒,并与人钠-碘转运体基因（hNIS）共转染至神经胶质瘤细胞中,研究其摄碘能力及对肿瘤细胞的杀伤能力,探讨131I治疗胶质瘤的可能性。方法应用AdEasy系统构建重组腺病毒AdTPO,利用重组质粒将hNIS基因转染入神经胶质瘤细胞系U251中获得hNIS—U251细胞系作为阴性对照组,再利用重组腺病毒AdTPO将TPO基因转染入hNIS—U251细胞系中获得AdTPO—hNIS—U251作为实验组,未转入hTPO和hNIS的细胞U251作为空白对照组。研究三组细胞的摄碘实验、过氯酸盐抑制实验、有机化测定实验检测其摄碘功能,细胞克隆形成实验评价131I对转染肿瘤的杀伤作用。结果成功构建出重组腺病毒AdTPO,并在稳定表达hNIS的U251细胞中实现了hTPO的共转染。hNIS—U251组（每分钟放射性计数55769．96±4353．26）比空白对照组（每分钟放射性计数507．67±57．69）摄碘能力增高约110倍,有效半衰期7分钟,有机化程度约为0．1％,细胞克隆形成率（9．08±2．86）％,较对照组减低约10倍。AdTPO—hNIS—U251组（每分钟放射性计数74647．53±3605．88）比空白对照组摄碘能力增高约147倍,有效半衰期延长至13分钟,有机化程度增高至10％,细胞克隆形成率（6．80±2．09）％,较对照组减低约13倍。结论将hTPO和hNIS共转染至神经胶质瘤细胞后,可有效提高细胞的摄碘能力,hTPO延长了放射性碘在细胞中的停留时间,131I对瘤细胞有较强的杀伤作用。     

131I难治性分化型甲状腺癌分子靶向治疗进展

放射性碘难治性分化型甲状腺癌患者因病灶摄碘功能不佳而无法从131I等传统治疗方法中获益。近年来,甲状腺癌分子病理学研究新成果为甲状腺癌的分子诊断和靶向治疗提供了新的契机,相关分子靶向治疗的临床试验和荟萃分析均取得了可喜的结果。本文从临床角度对放射性碘难治性分化型甲状腺癌分子靶向治疗的最新进展进行综述。     

全反式维甲酸对甲状腺癌细胞NIS基因表达及吸碘能力影响的实验研究

目的：探讨全反式维甲酸（ATRA）对甲状腺癌细胞株钠/碘同向转运体（NIS）基因表达、吸碘能力的影响,为ATRA用于放射性碘治疗甲状腺癌提供理论依据。方法：分别以不同浓度（10^-7mol/L、10^-6mol/L、10^-5mol/L、10^-4mol/L）的ATRA处理体外培养的甲状腺癌细胞株（FTC-133）,48h后利用半定量RT-PCR检测细胞NISmRNA表达,γ-计数仪检测细胞吸碘能力。结果：ARTA浓度在（0～10%-5）mol/L范围内,细胞NIS基因表达及吸碘能力随ARTA剂量的增加而增加（P〈0.05）。当ARTA浓度达10%-4mol/L时,增加与前一浓度相比无统计学意义（P〉0.05）。结论：ATRA可上调甲状腺癌FTC-133细胞NIS基因表达,增强其吸碘能力,而且这种作用在一定浓度范围内具有剂量依赖性。     

碘难治性分化型甲状腺癌诱导再分化治疗研究进展

分化型甲状腺癌（DTC）大多进展缓慢,经手术、促甲状腺素抑制治疗和（或）放射性碘（RAI）等规范化治疗后总体预后好,但仍有部分患者治疗后出现复发或远处转移,并可能在自然病程或治疗过程中丧失摄碘能力,不能从后续RAI治疗中获益,成为碘难治性分化型甲状腺癌（RAIRDTC）。RAIR-DTC患者可选择的治疗方法有限,且效果欠佳。近年来,随着对RAIR-DTC分子机制研究的不断深入,诱导再分化联合RAI治疗在RAIR-DTC中展现出一定的应用前景。本文综述了信号通路抑制剂、组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）、DNA甲基化酶抑制剂、维甲酸类药物及过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）激动剂在RAIR-DTC诱导再分化治疗中的进展。     

甲状腺癌131I治疗对肝肾功能及白细胞影响

目的:观察分化型甲状腺癌患者131I治疗后6个月肝肾功能及白细胞变化.方法:分析分化型甲状腺癌患者131I治疗前及治疗后6个月的肝肾功能及白细胞计数的资料变化.肝功能以ALT、AST水平进行评价,两者均正常则认为肝功能正常,两者任一异常认为肝功能受损,将治疗前后进行配对两组二分类资料McNemar检验.肾功能取血尿素氮、血肌酐水平,进行配对两组二分类资料McNemar检验.结果:40例患者行72次131I治疗,平均累计接受(7.86±5.67)GBq剂量.治疗前后6个月,患者治疗1次或多次白细胞计数比较差异无统计学意义;肝功能出现受损的几率无统计学差异,ALT及AST均无明显差异;所有患者治疗前肾功能均正常,经过单次或多次治疗均无一例肾功能异常.结论:甲状腺癌患者大剂量131I治疗后6个月未发现骨髓抑制及肝肾功能不良.     

甲状腺乳头状癌NIS蛋白表达对131^I疗效的预测及与BRAF基因突变的关系

目的：探讨甲状腺乳头状癌钠碘转运体（sodium／iodide symporter,NIS）蛋白表达对131^I疗效的预测及与BRAF基因突变的关系。方法：收集甲状腺乳头状癌根治术后行131^I治疗的患者60例,临床随访131^I疗效分为完全缓解和不完全缓解,不完全缓解组再分为摄碘和不摄碘。免疫组化法对患者肿瘤原发灶NIS蛋白表达进行分析,根据表达强弱分为0,1,2,3分。应用Pyrosequencing焦磷酸测序技术对肿瘤原发灶BRAF基因突变进行分析。对131^I疗效各组和BRAF突变两组的NIS蛋白表达水平进行统计分析。结果：甲状腺乳头状癌NIS蛋白染色阳性颗粒主要定位于细胞浆,阳性评分为1．45±0．77。131^I治疗完全缓解患者29例,其NIS蛋白水平（1．62±0．86）与不完全缓解组（1．29±0．64）无统计学差异（P=0．100）。但对不完全缓解组进一步研究发现,不摄碘组NIS蛋白水平（1．00±0．60）显著低于摄碘组（1．47±0．61）,P=0．043。伴BRAF基因突变患者检出47例（78．3％）,其NIS蛋白评分（1．34±0．73）与携带野生型基因患者（1．85±0．80）比较差异仃统计学意义,P：0．035。结论：131^I疗效与肿瘤原发灶NIS蛋白表达水平没有明显关系,但不摄碘的持续不缓解患者常伴有肿瘤NIS蛋白表达降低和缺失;伴BRAF基因突变患者其NIS蛋白表达降低,分化程度更差。     

BRAF基因突变及其对分化型甲状腺癌钠碘同向转运体功能影响的研究进展

目的:总结分化型甲状腺癌中鼠类肉瘤滤过性毒菌(V-raf)致癌同源体B1(BRAF)基因突变与钠碘同向转运体(NIS)国内外研究进展,阐述BRAF和NIS基因结构表达与调控及BRAF基因突变对NIS功能的影响。方法:应用PubMed、Sciencedirect和万方检索系统,以"分化型甲状腺癌、钠碘同向转运体、BRAF、131I"为关键词,检索1998-2010年相关文献95篇。纳入标准:1)NIS结构与功能;2)NIS与分化型甲状腺癌的关系;3)BRAF结构与功能;4)BRAF突变与分化型甲状腺癌的关系;5)BRAF突变与NIS表达在分化型甲状腺癌中的关系。根据纳入标准分析文献23篇。结果:甲状腺癌131I治疗通过NIS介导。NIS的表达可以预测复发DTC131I的聚集和131I疗效评价。BRAF突变在PTC中可作为不良影响因子,影响PTC的发生、侵袭及预后。BRAF基因突变能引起NIS表达下降(20%～80%),病灶摄碘能力降低。NIS的表达水平在含有BRAF V600E突变的PTC中明显降低。结论:BRAF基因突变能引起NIS表达下降,降低病灶碘治疗疗效。因此,BRAF基因突变有望成为预测甲状腺癌放射性碘治疗疗效的指标。     

高临床分期甲状腺乳头状癌组织中ITGB4与NIS表达的相关性及其对肿瘤细胞摄碘功能的影响

目的:探讨高临床分期甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中整合素 β4(inte-grinβ4,ITGB4)与钠碘同向转运体(sodium iodide symporter,NIS)表达的相关性,评价ITGB4对乳头状癌细胞NIS表达及摄碘功能的影响.方法:收集55例高临...     

Molecular basis and targeted therapies for radioiodine refractory thyroid cancer

Patients diagnosed with radioiodine refractory thyroid cancer (RAIR-TC) are not amenable to novel ¹³¹I therapy due to the reduced expression of sodium iodide symporter (Na+/I- symporter, NIS) and/or the impairment of NIS trafficking to the plasma membrane. RAIR-TC patients have a relatively poor prognosis with a mean life expectancy of 3–5 years, contributing to the majority of TC-associated mortality. Identifying RAIR-TC patients and selecting proper treatment strategies remain challenging for clinicians. In this review, we demonstrate the updated clinical scenarios or the so-called “definitions” of RAIR-TC suggested by several associations based on ¹³¹I uptake ability and tumor response post-¹³¹I therapy. We also discuss current knowledge of the molecular alterations involved in membrane-localized NIS loss, which provides a preclinical basis for the development of targeted therapies, in particular, tyrosine kinase inhibitors (TKIs), redifferentiation approaches, and immune checkpoint inhibitors.     

131I治疗对分化型甲状腺癌患者临床效果的研究

目的 探讨131I治疗对分化型甲状腺癌的疗效及对机体血细胞、肝肾功能、唾液腺的分泌与排泄功能的影响.方法 回顾性分析73例手术后接受131I治疗的分化型甲状腺癌患者的临床资料.患者单次口服131I剂量为3.96～8.20 GBq,治疗后3个月评估疗效.采用发光免疫分析方法和唾液腺ECT显像检测治疗前后的血细胞[白细胞(WBC)、血小板(PLT)、淋巴细胞(LC)、红细胞(RBC)]、肝肾功能指标[血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清天冬氨酶氨基转移酶(AST)、血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)、血清碱性磷酸酶(ALP)]以及唾液腺功能指标[15 min摄锝率(UR15)和最大排泄量(MS)].分析131I对血细胞、肝肾功能、唾液腺的分泌与排泄功能的影响.结果治愈率为23.29％,有效率为80.82％,无效率为19.18％.治疗前后患者的RBC水平比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);治疗后患者的WBC、PLT和LC水平均较治疗前明显降低(P﹤0.01).治疗前后患者的ALT、AST、Cr、BUN及ALP水平比较,差异无统计意义(P﹥0.05).治疗后患者双侧腮腺的UR15和MS均明显降低(P﹤0.01),双侧颌下腺的UR15和MS无明显变化(P﹥0.05).结论131I对分化型甲状腺癌有较好的疗效,对血细胞、肝肾功能、唾液腺的分泌与排泄功能有不同程度的轻微损伤,可为临床最佳剂量的选择提供一定的参考.     

NIS和TSHR在分化型甲状腺癌中的表达及其与BRAF V600E突变的关系研究

目的探讨钠碘同向转运体(NIS)和促甲状腺激素受体(TSHR)在分化型甲状腺癌(DTC)组织中的表达及其与BRAF V600E突变的关系。方法采用免疫组织化SP法检测229例DTC、52例结节性甲状腺肿及31例正常甲状腺组织的NIS、TSHR表达情况,PCR直接测序法检测BRAF V600E突变,分析DTC组织NIS、TSHR表达情况与临床病理参数(性别、年龄、肿块大小、淋巴结转移、TNM分期及复发危险度分层)和BRAF V600E突变的关系。结果 NIS在DTC中的阳性率为55.5%(127/229),低于结节性甲状腺肿的78.9%(41/52)及正常甲状腺组织的77.4%(24/31),差异有统计学意义(P<0.05),且NIS表达与DTC的性别、年龄、肿块大小、淋巴结转移、TNM分期及复发危险度分层均无关。TSHR在DTC、结节性甲状腺肿及正常甲状腺组织的阳性率分别为41.0%(94/229)、48.1%(25/52)和45.2%(14/31),差异无统计学意义(P>0.05);TSHR表达与DTC的性别、年龄、淋巴结转移、TNM分期及复发危险度分层均无关,仅与肿块大小有关(P=0.029);NIS阳性率与BRAF V600E突变无关,但NIS细胞浆阳性表达中,BRAF V600E突变型比例(48.2%)高于BRAF V600E野生型比例(29.5%);NIS细胞膜阳性表达中,BRAF V600E突变型比例(51.8%)低于BRAF V600E野生型比例(70.5%),差异有统计学意义(P<0.05)。TSHR阳性率在BRAF V600E突变型中为47.9%,高于BRAF V600E野生型的28.7%,差异有统计学意义(P<0.05),而TSHR细胞浆和膜阳性表达与BRAF V600E突变无关。结论 DTC中NIS表达降低且定位与BRAF V600E突变有关,但BRAF V600E突变并不会影响TSHR定位;BRAF V600E突变型中TSHR表达增加,其具体机制还需进一步研究。     

Endogenous expression of the sodium iodide symporter mediates uptake of iodide in murine models of colorectal carcinoma

The sodium iodide symporter (NIS) mediates iodide uptake into the thyroid. Because of this mechanism, differentiated thyroid cancer is susceptible for radioiodine therapy. Functional NIS expression in extrathyroidal tumors has been reported mainly in breast cancer. We screened colorectal tumors for NIS expression and investigated the mechanisms regulating NIS activity. Cell lines were screened for iodide uptake in vitro and NIS expression was evaluated by real‐time RT‐PCR, immunocytochemistry and immunoblotting. Iodide and pertechnetate uptake were evaluated in allograft tumors by biodistribution studies and scintigraphy. Tumors of transgenic mouse models for colorectal cancer harboring mutations in the oncogenes KRAS, β‐catenin or the tumor‐suppressor gene adenomatous‐polyposis coli (APC) were screened for NIS expression by RT‐PCR. In vitro, functional NIS activity was detected in murine CMT93 rectal carcinoma cells and NIS expression was verified on mRNA and protein level. Inhibition of tyrosine kinases increased iodide uptake. Inhibition of tyrosine phosphatases decreased iodide uptake. In vivo, functional NIS expression was preserved in CMT93 tumors and tumor uptake could be enhanced by treatment of mice with tyrosine kinase inhibitors. In transgenic murine models of colorectal cancer, 14% of endogenous tumors expressed elevated levels of NIS mRNA. We conclude that NIS is functionally expressed in a subset of murine colorectal tumors and its activity is regulated by tyrosine phosphorylation. Therefore, with specific tyrosine kinase inhibition, these tumors might be susceptible for radioiodine treatment. Further studies are justified to identify the specific pathways regulating NIS activity and to transfer these findings to human cell lines and tissues. © 2009 UICC     

Transfection of the Human Sodium/Iodide Symporter （NIS） Gene with Liposomes and the Expression of the NIS Protein in Human Lung A549 Cancer Cells

OBJECTIVE To examine the possibility of human sodium iodide symporter （hNIS） protein expression in lung cancer cells. METHODS Human lung A549 cancer cells were thawed and cultured in vitro. The cells were divided into an experimental group transfected with a recombinant pcDNA3-hNIS plasmid and a control group transfected only with a pcDNA3 plasmid. The recombinant plasmid vector encoding the hNIS gene （pcDNA3-hNIS） was amplified, purified and identified. The hNIS gene was followed by DNA sequencing. A Western blot and an immunohistochemical assay were applied to detect the hNIS protein expression in the transfected human lung A549 cancer cells. RESULTS Restriction enzyme digestion and DNA sequencing results showed the size and direction of the inserted gene in the recombinant pcD- NA3-hNIS plasmid was correct. The Western blot method and immunohistochemical analysis showed a positive NIS protein expression in the experimental group. The NIS protein was detected mainly in the cell membranes showing a positive rate up to 70.6% with no expression of the NIS protein in the control group. There was a significant difference between two groups （P=0.000）. CONCLUSION The hNIS gene was transfected effectively into human lung A549 cancer cells mediated by Lipofectamine 2000, and was expressed with its protein in vitro.