20(S)-原人参二醇组皂苷的制备及其转化制取人参皂苷Rh2

目的：制取２０（Ｓ）原人参二醇组皂苷并将其转化制备抗癌活性单体２０（Ｓ）人参皂苷Ｒｈ２。方法：以国产西洋参茎叶总皂苷为原料，通过萃取法制备２０（Ｓ）原人参二醇组皂苷；将２０（Ｓ）原人参二醇组皂苷碱催化水解后，经柱层析分离纯化制备２０（Ｓ）人参皂苷Ｒｈ２。结果：２０（Ｓ）原人参二醇组皂苷收率为４１．５％，其转化成２０（Ｓ）人参皂苷Ｒｈ２的转化率为９．６４％。结论：制取方法简便，收率较高。     

西洋参叶中 20（s）-人参皂苷-Rh1，-Rh2和人参皂苷-Rh3的分离与鉴定

 目的:从西洋参叶中分离、鉴定20(s)-人参皂苷-Rh₁,-Rh₂和人参皂苷-Rh₃,为了深入研究它们的生理活性,方法:以水提取,用多孔树脂吸附,再以体积分数为95%的乙醇洗脱,最后以硅胶柱层析分离。通过理化性质及IR,NMR光谱等方法测定,鉴定其结构。结果:共分得3个化合物,经鉴定后分别证明为20(s)-人参皂苷-Rh₁,-Rh₂,和人参皂苷-Rh₃。结论:人参皂苷-Rh₃为首次从西洋参叶中分离获得。     

酒石酸催化转化原人参二醇组皂苷制备20(R)-人参皂苷Rg3

目的 选择性制备20(R)-人参皂苷Rg3,为其制备提供理论依据.方法 以酒石酸为催化剂,原人参二醇(PPD)组皂苷为原料,通过单因素试验和正交试验对20(R)-人参皂苷Rg3的制备工艺进行优化,反应产物用HPLC进行定量分析.结果 正交试验优化结果表明,PPD(10 mg/mL)和酒石酸(1.5 mol/L)于110℃反应2.5 h,人参皂苷Rb1、Re、Rb2、Rb3和Rd基本全部转化,20(R)-人参皂苷Rg3的产率为50.15％,其非对映体过量百分比为93.12％.结论 该方法操作简单,成本低廉,适宜工业化生产,对于推动20(R)-人参皂苷Rg3的药理活性研究具有重要意义.     

谷氨酸水解原人参二醇组皂苷制备人参皂苷Rg3工艺的优选

目的研究谷氨酸水解原人参二醇组皂苷制备人参皂苷Rg_3的最佳工艺。方法以谷氨酸为催化剂,原人参二醇(PPD)组皂苷为原料,通过单因素考察和正交试验对人参皂苷Rg_3的制备工艺进行优化,反应产物用HPLC进行定量分析。结果正交试验优化结果表明,原人参二醇组皂苷(10 g/L)和谷氨酸(10 g/L)于80℃反应2 h,原人参二醇组皂苷被全部降解,人参皂苷Rg_3的转化率可达65.12%。结论该法操作简单,成本低,对环境无污染,是一种快速制备20(S)-Rg_3和20(R)-Rg_3的可行方法。     

碱水解条件对4种稀有人参皂苷含量的影响

目的探讨不同碱水解条件对4种稀有人参皂苷20(S)-Rh_1、20(S)-Rh_2、20(S)-PPt、20(S)-PPd含量的影响。方法应用高效液相色谱-质谱联用方法(HPLC-MS)初步推断人参茎叶总皂苷碱水解生成的人参皂苷结构,用高效液相色谱法(HPLC)测定不同碱水解反应时间、反应温度、氢氧化钠(NaOH)加入量对人参皂苷20(S)-Rh_1、20(S)-Rh_2、20(S)-PPt、20(S)-PPd含量的影响。结果碱水解40 min、反应温度分别为200℃和220℃、加入NaOH 2.0 g,有利于获得人参皂苷20(S)-Rh1和20(S)-Rh2;碱水解6 h、反应温度设置为240℃、加入NaOH 2.0 g,有利于获得人参皂苷20(S)-PPt和20(S)-PPd。结论人参皂苷20(S)-Rh_1、20(S)-Rh_2和人参皂苷20(S)-PPt、20(S)-PPd的含量受碱水解反应温度、NaOH加入量的影响趋势基本相同,但受碱水解反应时间的影响趋势不同。     

西洋参叶20 s-原人参二醇组皂苷抗实验性心肌缺血作用及其机制

目的 研究西洋参叶20s－原人参二醇组皂苷（Panax quinquefolium120s-protopanaxdiolsaponins,PQDS）的抗实验性心肌缺血作用及其机制。方法 通过大结扎左冠状动脉前降支（LAD）产生急性心肌梗死模型，观察PQDS对实验性心肌梗死的影响，并从生化学角度探讨其作用机制。结果 ivPQDS12．5－50mg.kg^-1，对急性心肌梗死24h大鼠可明显缩小心肌梗死面积，降低血清CK，LDH活性及LPO含量，提高SOD，CAT及GSH－Px活性，并能使血浆TXA2水平明显下降，PGI2／TXA2比值明显增高；25，50mg.kg^-1亦可使心肌梗死及非梗死区FFA及LA含量明显降低。结论 PDQS对急性心肌缺血具有保护,其增强抗氧化酶活性，减少自由基对心肌的氧化损伤，纠正心肌缺血时FFA代谢紊乱和LA堆积及PGI2／TXA2失衡等机制有关。     

人参茎叶中1个新皂苷20(S)-人参皂苷Rf_2

目的研究人参Panax ginseng茎叶总皂苷中的化学成分。方法采用硅胶柱色谱及半制备高效液相色谱等方法进行分离、纯化,通过NMR、MS等谱学方法进行化学结构鉴定。结果从人参茎叶的总皂苷中共分离鉴定了39个化合物,报道其中的1个新化合物和16个已知的化合物,分别为人参皂苷Re(1)、20(S)-人参皂苷Rh_1(2)、20(R)-人参皂苷Rh_1(3)、人参皂苷Rh_5(4)、20(E)-人参皂苷F_4(5)、人参皂苷F_2(6)、20(S)-人参皂苷Rg3(7)、20(R)-人参皂苷Rg_3(8)、20(S)-人参皂苷Rf_2(9)、20(R)-人参皂苷Rf_2(10)、20(S)-原人参二醇(11)、20(R)-原人参二醇(12)、20(S)-人参皂苷Rh2(13)、20(R)-人参皂苷Rh2(14)、20(S)-原人参三醇(15)、20(R)-原人参三醇(16)和人参皂苷Rd(17)。结论化合物9为1个新的化合物;2~10、13和14是稀有人参皂苷。     

原人参二醇类皂苷(PPD)在酶反应中转化动态及其产物稀有皂苷的制备

目的为了生物转化低成本制备人参稀有皂苷,利用Aspergillus g.848菌的粗酶与市售的原人参二醇类皂苷(PPD)混合皂苷反应,制备人参稀有皂苷C-K、C-Mc、F_2单体和4种异构体的Rh2组皂苷。方法酶与PPD皂苷反应,生成稀有皂苷;用HPLC法测定PPD皂苷原料和产物皂苷的组成,用硅胶柱法分离产物中的单体皂苷,用NMR法确认产物单体皂苷结构;用UPLC-MS法确认产物Rh2组。结果原料PPD中含有人参皂苷Rb_1、Rd、Rb_2、Rc和4种异构体的人参皂苷Rg3组;酶反应时,若生产以F_2为主的皂苷时,最佳反应时间为1.5~2.0h;若生产以C-K为主的皂苷时,反应时间为24.0~30.0h;若生产以Rh2组为主的皂苷时,反应6.0~12.0h时,Rg_3组产量低而Rh_2组产量高。以C-K为主的皂苷生产中,从30 g的PPD皂苷酶反应得到20 g产物,经硅胶柱分离,得到8.16 g的C-K、1.01 g的C-Mc、0.45 g的F_2单体和0.19 g的Rh_2组皂苷,并以NMR和UPLC-MS法核对了其结构。结论 PPD皂苷经酶转化成功地制备了高活性C-K、C-Mc、F_2和Rh_2组皂苷。     

20(S)-原人参二醇的药理作用研究进展

目的:对20(S)-原人参二醇的药理作用方面的研究进行文献整理和分析。方法:查阅中国知网,万方数据,维普,Springer,Pubmed,Ovid等数据库中近15年来国内外有关中药活性化合物20(S)-原人参二醇的近30篇文献资料,对其药理活性按研究的热门程度进行统计概括。结果:20(S)-原人参二醇具有抗癌、抗抑郁、激活氯离子通道和抑制钠离子通道去极化的作用、抑制人胚肾HEK-293细胞和幽门螺旋杆菌生长等诸多药理活性。结论:首次对20(S)-原人参二醇的药理活性进行较为全面的整理,为医药学科研人员今后开展有关20(S)-原人参二醇的药理研究提供参考和借鉴,今后应加强其药理作用机制及毒性的研究,为开发新药打下基础。     

不同构型拟人参皂苷Rg_2、拟人参皂苷Rh_1和拟原人参三醇合成方法的研究

目的探索一种高效制备拟人参皂苷Rg_2、拟人参皂苷Rh_1和拟原人参三醇(PPT)的新方法,为制备拟人参皂苷和PPT提供理论依据。方法依次以人参皂苷Re、人参皂苷Rh_1和PPT为原料,通过简单的3步反应(乙酰化反应、一步消去-加成反应、还原反应)进行制备,然后再利用色谱分离纯化,通过NMR、HR-ESI-MS、IR进行结构鉴定。结果拟人参皂苷Rg_2(E/Z)、拟人参皂苷Rh_1(E/Z)和拟PPT(E/Z)产率分别是41%/13%、43%/11%、56%/15%。其中20(Z)-拟PPT为新化合物。结论通过价格相对低廉且原料易得的人参皂苷Re、人参皂苷Rh_1和PPT制备出活性较好的拟人参皂苷Rg_2、拟人参皂苷Rh_1和拟PPT,为制备其他类型的拟人参皂苷提供了一种新的思路。同时此方法操作简单,产率较高。     

20(S)-原人参二醇干混悬剂的处方及初步质量研究

目的制备20(S)-原人参二醇干混悬剂,建立该制剂定量测定方法。方法以20(S)-原人参二醇为主药,泊洛沙姆(Poloxamer)188,Avicel CL 611,尼泊金甲酯,尼泊金丁酯和甜菊素为辅料制备20(S)-原人参二醇干混悬剂,并制定产品的检测方法。结果以Avicel CL 611作为助悬剂制备的20(S)-原人参二醇干混悬剂稳定性良好,且形成的混悬液符合干混悬剂的各项质量指标。高效液相色谱法测定干混悬剂中20(S)-原人参二醇的量,标准曲线回归方程为A=11.412 6C+174.39(r=0.999 8)。结论处方合理,制备工艺可靠。采用高效液相色谱法测定时,专属性强、准确度好、灵敏度高、辅料无干扰。     

RP-HPLC法测定20(S)-原人参二醇药质体含量及包封率

目的:建立20(S)-原人参二醇药质体含量及包封率的测定方法.方法:采用RP-HPLC法.色谱条件:COSMO-SIL 5C18-MS-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-水(95:5);流速1.0 mL·min(- 1);检测波长203 nm;柱温25℃;进样量50μL;采用低温超速离心法分离PPD药质体中的游离药物.结果:在上述色谱条件下豆磷脂和试剂对药物的测定无干扰,20(S)-原人参二醇在0.1～0.5 g·L(- 1) 与峰面积的线性关系良好(r=0.999 9),回收率在101.44%～103.11%,日内及日间RSD均小于2%(n=3).结论:RP-HPLC法可用于20(S)-原人参二醇药质体含量及包封率的测定.     

RP-HPLC测定西洋参叶皂苷碱降解物中20(S)-人参皂苷Rh2的含量

目的:对西洋参叶皂苷碱降解物中20(S)-人参皂苷Rh2进行含量测定。方法:采用RP-HPLC,ZORBAXEXTEND C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水(85∶15),流速1.2 mL.min^-1,检测波长203 nm,柱温25℃。结果:20(S)-人参皂苷Rh₂的进样量在0.5～25μg有良好的线性关系,r=0.999 9;平均加样回收率为99.7%,RSD1.0%。结论:该方法测定20(S)-人参皂苷Rh2简便快捷,准确度高,测定结果证实该降解方法20(S)-人参皂苷Rh2的转化率高。     

20(S)-原人参二醇药质体的制备及体外评价

目的:研制20(S)-原人参二醇(Ppd)药质体和Brij78修饰的Ppd药质体并对其进行体外评价。方法:采用薄膜超声法制备Ppd药质体和Brij78修饰的Ppd药质体,用超速离心法测包封率,用动态光散射(DLS)考察粒径分布,以粒径和包封率为指标,分别考察温度、乙醇、酸碱和人工胃肠液等对药质体的影响。结果:薄膜超声法制备的Ppd药质体的包封率为(80.84±0.53)%,粒径100.1 nm;Brij78修饰的Ppd药质体的包封率为(72.76±0.63)%,粒径为117.3 nm。结论:该药质体制备工艺简单可行,制剂学性质较稳定。     

超临界CO2-分子蒸馏制备大蒜注射液

 目的：在低温（60℃以下）条件下制备大蒜注射液。方法：超临界CO₂对大蒜有效成分进行萃取,用分子蒸馏进行分离纯化,用超滤法过滤除菌。结果：注射液的各项指标符合中国药典2000年版附录IB注射剂项下的各项规定。结论：超临界CO₂与分子蒸馏制备大蒜注射液是一种较为先进合理的方法。     

20(S)-原人参二醇对肺癌A549细胞增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用

目的研究20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤生长抑制作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法观察20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞凋亡及周期的影响,并在裸小鼠人肺癌模型上观察20(S)-原人参二醇对荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用。结果20(S)-原人参二醇对A549细胞具有明显的抑制作用并有剂量时间依赖关系,并且流式细胞仪检测时均出现典型凋亡峰,24小时凋亡率分别为32.47%、32.75%、33.51%。荷瘤裸小鼠动物实验表明,20(S)-原人参二醇对裸小鼠的肿瘤生长也具有明显的抑制作用,抑瘤率分别为18.78%、34.37%、50.02%。结论20(S)-原人参二醇对A549细胞的增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用。     

Total saponins of Panax ginseng (TSPG) promote erythroid differentiation of human CD34 cells via EpoR-mediated JAK2/STAT5 signaling pathway

Ethnopharmacological relevance

Total saponins of Panax ginseng (TSPG), main constituents extracted from Panax ginseng, a highly valued traditional Chinese medicine, have been shown to be an effective agent on hematopoiesis.

Objective

To investigate the effect and mechanism underlying in which TSPG promote human CD34⁺ hematopoietic stem and progenitor cells to differentiate into erythroid-lineage cells.

Materials and methods

The effect of TSPG on erythroid differentiation of purified CD34⁺ cells derived from umbilical cord blood (UCB) was determined by methylcellulose assay system and colorimetry for hemoglobin content. The changes of EpoR expression in umbilical cord blood mononuclear cells (UCB-MNCs) and purified CD34⁺ cells were detected with Western blotting and flow cytometry, respectively, and observed under laser scanning confocal microscope (LSCM). RT-PCR was performed to examine EpoR mRNA expression in CD34⁺ cells. The effects of TSPG-pretreatment on Epo-induced JAK₂ and STAT₅ tyrosine phosphorylation were analyzed by immunoprecipitation.

Results

The addition of TSPG (20–70 mg/L) increased the colony formation rate of BFU-E. TSPG (50 mg/L) alone used significantly increased the hemoglobin content, the addition of AG490 evidently reduced TSPG-induced elevation of hemoglobin content. TSPG increased the expression of EpoR on the surface membrane of CD34⁺ cells but did not change the expression of EpoR in total UCB-MNCs. TSPG also increased the expression of EpoR mRNA in CD34⁺ cells. TSPG markedly enhanced Epo-induced tyrosine phosphorylation of JAK₂ and STAT₅ in UCB-MNCs.

Conclusion

These findings suggest that TSPG may enhance the erythroid differentiation of hematopoietic stem and progenitor cells via Epo/EpoR-mediated JAK₂/STAT₅ signaling pathway.     

低压反相柱层析法分离人参皂甙-Rg2 C20差向异构体

用反相低压柱层析成功地分离了人参皂甙-Rg₂ C₂₀差向异构体,方法简便,快速。