血瘀证与血栓形成病证结合动物模型的研究

目的:以细菌内毒素(LPS)与角叉菜胶(Ca)两种因素联合造模,制备一种方法简便、稳定的血瘀证和血栓形成病证结合动物模型。方法:将大鼠随机分成正常对照组,LPS/Ca造模组。造模组动物先每只给予Ca 5 mgip,16 h后给予LPS 50μg.kg^-1iv,以注射LPS时作为试验的0 h。于造模后24 h观察血栓形成,于造模后不同的时间点分批观察微循环变化、血液流变学指标、凝血指标和炎症反应指标。结果:LPS/Ca联合造模可建立稳定、重复性良好的血栓形成模型,不需剖杀动物在尾部即可肉眼观察和定量测量血栓。该模型还表现出微循环障碍以及全血黏度增高、血小板聚集率异常等血液流变学指标的改变,同时还由于血栓形成消耗了大量凝血因子和血小板,而表现出凝血指标延长。结果表明该模型具有明显的血瘀证客观指标的改变。模型早期动物血液中的炎性因子TNFα和IL-6明显增高,故该模型符合炎症诱导的热毒血瘀证特点。结论:LPS/Ca联合造模可建立一种操作简便、稳定的热毒血瘀证与血栓形成病证结合动物模型。     

心肌缺血型冠心病肾虚血瘀病证结合模型研究

目的探讨手术方法建立心肌缺血型冠心病与肾虚血瘀病证结合模型的可行性。方法采取惊吓、置于寒冷环境并皮下注射氢化可的松的方法制备非疾病肾虚血瘀证候模型,结扎冠状动脉前降支并注射氢化可的松建立心肌缺血型冠心病肾虚血瘀病证结合模型。实验大鼠分为肾虚血瘀组、病证结合组和正常组,每组5只。观察大鼠造模前后体温、体质量、呼吸频率、心率、全血黏度、卡松黏度。依据中医临床肾虚血瘀证诊断标准,对2种模型中医证候进行比较。结果与正常组和本组造模前比较,肾虚血瘀组、病证结合组大鼠造模后均出现体温下降、呼吸频率增快(P0.05);与正常组比较,病证结合组、肾虚血瘀组体质量减轻或者增长缓慢、全血黏度及卡松黏度升高(P0.05,P0.01);造模两组间全血黏度、心电图比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 2种模型在中医证候方面无明显差异,符合中医临床肾虚血瘀证的诊断标准。     

三种热病证候模型最佳造模方法的探索与评价

目的:完善和改进已有热病证候模型,探索最佳造模方法。方法:通过对同一证型不同造模方法的比较研究,考察造模剂与证候的定性定量关系,探索具有可控性、容易复制的造模方法。结果:通过对同一证型(热病证候)不同造模方法的比较研究,认为干酵母和2,4-二硝基苯酚诱导的热病证候模型具有可控性,是容易复制的造模方法;而脂多糖诱导的热病证候模型造模试剂容易导致肝损伤,故不宜作为复制热病证候模型的方法。结论:干酵母和2,4-二硝基苯酚诱导的热病证候模型为复制热病证候模型的可靠方法。     

脾虚湿盛肝郁证溃疡性结肠炎大鼠模型的建立与评价

目的:建立并评价符合中医证候特点的脾虚温盛肝郁证溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型.方法:45只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、葡聚糖硫酸钠(DSS)组、病证结合组、模型组.正常对照组正常饲养,DSS组定量灌胃10％DSS溶液,病证结合组采用环境、饮食、情绪干预造模,模型组采用DSS...     

肾阳虚血瘀证子宫内膜异位症大鼠造模方法的建立与评价

目的:研制肾阳虚血瘀证子宫内膜异位症(EMT)病证结合大鼠模型,以供EMT中医药实验研究应用。方法:模拟妇科"冒雨涉水,感受寒邪"的病因,依据"寒邪伤阳"的中医理论,与传统的"自体移植"EMT动物模型相结合,建立病证结合的肾阳虚血瘀证EMT动物模型。依据冷冻时间长短及前后顺序行3种不同的造模模式。冷冻1个月,行EMT造模,再冷冻1个月设为"冷冻+造模+冷冻"组;冷冻1个月,行EMT造模后不冷冻为"冷冻+模型"组;先不冷冻,行EMT造模后,再冷冻1个月,设为"造模+冷冻"组,另设假手术组。用理化检验指标评价该模型的临床符合度。结果:与冷冻+模型组、造模+冷冻组、假手术组比较,冷冻+造模+冷冻组EMT的大鼠模型能反映肾阳虚血瘀证的中医基本证候特征,与EMT的疾病特点相符合。结论:冷冻+造模+冷冻方法是理想的肾阳虚血瘀证EMT实验模型。     

帕金森病“肾虚证”病证结合动物模型的制备及验证

目的:制做帕金森病"肾虚证"病证结合动物模型,通过行为学、组织病理学、生物化学指标对其进行验证,为中西医研究帕金森病在动物实验研究方面提供新的造模方法。方法:通过大鼠背部皮下长期低剂量注射鱼藤酮制造疾病模型,腹腔注射D-半乳糖造成亚急性衰老模拟肾虚证。从动物行为学、组织病理学判定疾病模型;抗氧化能力验证衰老和HPA轴功能检验肾虚证模型;补肾名方地黄饮子的干预作用,反向验证病证结合动物模型。结果:造模后大鼠的平衡、协调能力显著下降,黑质部位出现了神经细胞凋亡,与正常组比较具有统计学意义,说明帕金森疾病模型造模成功;模型组出现抗氧化能力下降显著,HPA轴功能虚性亢进明显,说明通过衰老已造成"肾虚证"证候模型;地黄饮子干预后,以上指标均有一定程度的改善,且有统计学意义。结论:帕金森病"肾虚证"病证结合动物模型造模成功。     

阿尔茨海默病-血瘀证病证结合树鼩模型稳定性研究

目的:以三七总皂苷进行药物干预,反证阿尔茨海默病-血瘀证病证结合树鼩模型的稳定性。方法:采用高效液相色谱法检测各组树鼩大脑去甲肾上腺素(NE)含量。结果:与空白组相比,阿尔茨海默病组树鼩大脑中NE含量降低,病证结合造模使这一降低现象加重,而三七总皂苷给药缓解了这一变化。结论:阿尔茨海默病-血瘀证病证结合树鼩模型具有稳定性。     

免疫性血小板减少症病证结合动物模型研究

目的:探讨非附加条件建立免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenic purpura,ITP)病证结合动物模型的可行性。方法:对3批ITP模型小鼠相关数据进行了综合分析,并按照病证结合模型辨识标准,评估注射APS的被动性免疫造模法复制的小鼠模型是否能够模拟人类ITP发病过程与临床特征。结果:注射APS复制的ITP模型小鼠特征如下:1)模型小鼠外周血小板计数下降、凝血时间延长,与正常组比较,有统计学意义(P0.01)。2)骨髓产板巨核细胞减少,与正常组比较,有统计学意义(P0.05、0.01、0.001)。3)模型小鼠注射APS部位或其他部位有自发性出血。4)造模1周后模型小鼠即有活动减少,行动迟缓,不思饮食,进食(水)量明显减少,大便溏稀,皮肤瘀斑、瘀点,皮肤或注射部位自发性出血,并随造模时间延长,上述表征日趋加重。结论:在非附加任何条件下,注射APS的被动免疫造模法复制的ITP动物模型符合病证结合模型特征,从而为开展中药药理学实验提供了理想的研究工具。     

猕猴模拟经前期综合征肝气逆证病变的可行性探索

目的探索利用非人灵长类动物模拟经前期综合征肝气逆证病证结合猕猴模型的可行性，为复制国内外迄今尚未有的该病证猕猴模型摸索技术条件和必备经验。方法移植复制肝气逆证大鼠模型的“情志刺激为主多因素造模”的方法，进一步改进为“择时、对照情志刺激造模”方法。模拟评价采用表情行为定性与血清性激素水平放免检测。结果受试猕猴月经前呈现近似该病证临床特点的表情、行为及体征变化，血清雌激素、孕激素、泌乳素含量发生变化，体现该病证病理生理变化特征。结论借助肝气逆证造模技术方法，用猕猴模拟经前期综合征肝气逆证显示初步的可行性，严谨求实的开展系统实验研究，将能够复制出再现人类该病证特征的猕猴动物模型     

小鼠肝炎病毒温病湿热证模型的探讨

目的:研究拟以MHV-A59和大肠杆菌作为生物致病因子,建立两种小鼠温病湿热证动物模型,通过对比探讨小鼠肝炎病毒温病湿热证模型可行性。方法:动物随机分为3组:正常组、模型组(肥甘饮食+湿热外环境+MHV-A59造模)、肠菌组(肥甘饮食+湿热外环境+大肠杆菌造模),检测小鼠血清TG、TNF-α水平及肝组织病理切片,观察动物症状及体征。结果:与正常组比较,两种温病湿热证模型组小鼠血清TG及TNF-α水平明显升高(P<0.01),两组造模动物均不同程度出现了发热、疲倦、纳呆、腹泻、体重减少、毛发无泽等症状。结论:以MHV-A59作为生物致病因子,结合肥甘饮食及湿热外环境因素构建的动物模型,可以作为温病湿热证动物模型之一,也是一种新的病证结合模型。     

成人特发性血小板减少性紫癜患者糖皮质激素抵抗辨证分型与临床指标相关性分析

目的 :探讨成人初治特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者中医辨证分型特点,及其与糖皮质激素抵抗、血小板计数、P-糖蛋白表达水平的关系。方法 :收集成人初治ITP患者58例,流式细胞仪法测定糖皮质激素治疗前后P-糖蛋白表达水平。按血热妄行、阴虚火旺、气不摄血、脾肾阳虚、瘀血内阻辨证分型,4周后分成激素敏感组和激素抵抗组,对两组患者进行辨证分型,分析不同证型与性别、血小板计数、P-糖蛋白表达水平的关系。结果:(1)不同性别的ITP患者同一证型分布差异无统计学意义(P0.05)。(2)成人初治ITP患者中医证型以气不摄血型最多见,其次为阴虚火旺型。(3)糖皮质激素治疗后,症状及证型有明显变化,激素敏感组以气不摄血最多见,激素抵抗组以阴虚火旺最多见。(4)血小板计数及P-糖蛋白表达水平在激素敏感组与对照组比较差异有统计学意义(P0.05),激素抵抗组与激素敏感组比较差异有统计学意义(P0.05);激素抵抗组不同证型患者血小板计数及P-糖蛋白表达差异有统计学意义(P0.05)。结论:成人ITP中医辨证分型及糖皮质激素抵抗与多项临床指标间存在相关性,对ITP治疗具有参考价值。     

原发免疫性血小板减少症动物模型研究进展

原发免疫性血小板减少症(ITP)是一种以血小板减少、伴或不伴皮肤黏膜瘀紫、鼻衄、内脏出血等为特征的自身免疫性疾病,ITP动物模型是深入研究ITP发病机制与治疗方法的主要手段,在ITP的研究中一直发挥着重要作用。因此,如何制备与临床接近的动物模型是ITP研究领域的关键问题。目前原发免疫性血小板减少症动物模型的研究方法众多,主要有免疫造模、自发免疫模型、转基因造模以及其他造模方法。免疫造模是最常用的方法,实验用动物主要是小鼠,常用的注射途径是腹腔注射,常用的免疫原有抗血小板血清、单克隆/多克隆抗体、血小板等,自发模型与转基因模型比较少用。此外也有结合中医理论开展病证结合模型的研究,主要有ITP热盛证模型,ITP肾阴虚证模型,ITP气不摄血证模型等,为该病的证候研究提供了基础。本文对近些年来ITP疾病、病证结合动物模型的研究进展进行了比较系统的分析与总结,希望对该疾病的动物模型的进一步研究提供参考。     

益气通阳汤对血小板减少性紫癜小鼠模型的作用

目的:观察益气通阳汤对特发性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠外周血血小板(PLT)数、骨髓巨核细胞数和巨核细胞数分类、外周血T,B淋巴细胞亚群变化的影响。方法:设计用豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)连续注射小鼠,造成ITP小鼠模型,分别给益气通阳汤(150,75,37.5 g.kg-1.d-1)组,正常对照组、模型对照组给予生理盐水,连续给药14 d。应用血细胞分析仪测定PLT、显微镜观察巨核细胞形态分类、塑料包埋法计数小鼠股骨巨核细胞数、流式细胞仪检测T,B淋巴细胞亚群。结果:模型小鼠外周血PLT数持续明显减低、骨髓巨核细胞数增多、其中原幼巨核细胞比例明显增高,产板巨核细胞比例明显减低,外周血CD3+CD4+T细胞减低,CD3+CD8+T细胞明显增高,CD4+/CD8+明显降低。给予益气通阳汤治疗小鼠的PLT明显增高、巨核细胞数减少、产板巨核细胞比例明显增高,CD3+CD4+T细胞增高,CD3+CD8+T细胞比例降低,CD4+/CD8+升高。结论:益气通阳汤能提升ITP模型小鼠PLT数,提高产板巨核细胞比例,改善T淋巴细胞的失衡,达到治疗ITP的作用。     

愈宁散对CITP模型小鼠外周血共刺激分子CD86影响的实验研究

[目的]通过观察应用愈宁散后CITP模型小鼠外周血中血小板计数及共刺激分子CD86水平的变化,初步探讨愈宁散对CITP模型小鼠的作用机理。[方法]采用注射豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)的免疫造模方法,建立BALB/c小鼠CITP模型;应用愈宁散对模型小鼠进行实验研究,全自动血细胞计数仪检测CITP模型小鼠血小板计数;流式细胞仪测定CITP模型小鼠外周血CD86的水平。[结论]愈宁散能升高模型小鼠外周血小板数,降低CITP模型小鼠外周血中CD86水平,对BALB/c小鼠CITP动物模型具有较好的治疗效果。     

填精生血法治疗特发性血小板减少性紫癜疗效分析

目的探讨中医药治疗特发性血小板减少性紫癜(ITP)的有效方法.方法选择诊断明确的慢性ITP患者42例,观察以健脾填精、益气养血为主的归蓉补血片对不同证型ITP的疗效,以及对大、小鼠环磷酰胺血虚及失血性贫血模型的影响.结果归蓉补血片对ITP的总有效率为85.7%,临床可有效改善ITP的出血症状,升高血小板数量,抑制血小板抗体的形成,似可促进骨髓巨核细胞的分化;可提高模型动物的血小板、骨髓有核细胞、红细胞数及血红蛋白含量,缩短电泳时间.结论填精生血法对ITP有较好的疗效.     

中西医结合治疗慢性原发性血小板减少性紫癜气阴两虚证临床观察

目的:观察运用中西医结合方法治疗慢性原发性血小板减少性紫癜(ITP)气阴两虚证患者的疗效。方法:选择符合ITP中西医诊断标准的80例患者,随机分为中西医结合治疗组40例,单纯西药泼尼松对照组40例,3个月为1个疗程,治疗1个疗程,观察两组治疗前后的临床疗效、血小板计数、巨核细胞计数等。结果:中西医结合治疗组总有效率90%,高于单纯西药泼尼松对照组的67.5%,具有显著性差异(P<0.05);治疗后,与对照组比较,治疗组血小板计数变化差异具有统计学意义(P<0.05),巨核细胞计数变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论:中西医结合方法在治疗慢性ITP气阴两虚证方面优于单纯西医疗法,不仅能改善慢性ITP气阴两虚证患者的临床症状,而且可切实升高血小板计数,有助于病情的稳定。     

中医药治疗免疫性血小板减少症的机制

免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)是一种免疫介导的血小板破坏增多、血小板生成不足,以皮肤黏膜出血为特征的自身免疫性疾病。现代中西医血液病专家共识将ITP的中医病名命名为"紫癜病"。ITP的中医病因复杂,外感内伤均可致病,病机主要为外感邪热,血热妄行;脾气虚损,气不摄血;肝肾阴虚,虚火上炎;瘀血内阻,血不循经。近年来研究表明,从中医临床实践到实验研究,中医药在治疗ITP的作用机制上取得了一些进展,包括抑制血小板相关抗体的产生,减少血小板的破坏及改善血小板功能;促进巨核细胞成熟及血小板生成增多;调节细胞免疫及体液免疫,使其紊乱的免疫功能恢复平衡。本文就中医药干预ITP的临床及实验研究进行总结分析,为评价中医药治疗ITP的作用机制及新药研发提供参考。     

泻火凉血法为主治疗原发性血小板减少性紫癜45例

为探讨泻火凉血为主治疗原发性血小板减少性紫癜（简称ITP）的疗效。将45例患者经分型后应用泻火凉血为主，配合健脾滋肾法，治疗3个月。观察治疗前后出血程度、血小板计数、血小板相关抗体的变化。结果：总有效率93．33％，血热络伤型（I型）有效率92．86％，脾（气）肾阴虚型（Ⅱ型）有效率93．55％，两型比较差异无显著性意义（P＞0．01）。治疗后两型出血程度均显著改善（P＜0．05），血小板计数升高（P＜0．01），血小板相关抗体降低（P＜0．05）。提示泻火凉血中药对火热实证为主或气阴虚证为主的ITP均有显著疗效。     

小柴胡汤对原发性血小板减少性紫癜小鼠的干预作用

目的：通过观察小柴胡汤对原发性血小板减少性紫癜（ITP）模型小鼠的体重增长率、外周血血小板计数、出血时间和骨髓巨核细胞数量的影响来探讨小柴胡汤的药效。方法：建立ITP模型小鼠，将之分为正常组、模型组、激素组和小柴胡汤组，于造模后第14天开始分组给药，共14d，分别于给药前后称重、测出血时间；给药前、给药后4d、7d及14d测外周血血小板计数；造模21d处死，剥离股骨取骨髓测巨核细胞计数和分类。结果：ITP模型小鼠体重增长率下降，血小板计数持续降低，出血时间延长，骨髓巨核细胞增多，产板巨核细胞减少，与正常组相比有明显差异（P〈0．05）；小柴胡汤组体重增长率明显提高，与模型组、激素组相比有显著差异（P〈0．05），给药组均使血小板计数上升、出血时间缩短、骨髓巨核细胞减少，产板巨核细胞增多，与模型组比较有显著差异（P〈0．05）。结论：小柴胡汤能提高ITP模型小鼠体重增长率，提升血小板计数，促进骨髓巨核细胞成熟。     

加味小柴胡颗粒及其组方对ITP模型小鼠造血系统的影响

目的:观察加味小柴胡颗粒及其组方对免疫性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠血小板计数及骨髓巨核细胞的影响。方法:建立ITP模型小鼠,将之分为7组:正常组、模型组、维血宁组、强的松组、加味小柴胡颗粒组、小柴胡颗粒组、丹参三七颗粒组,于造模后第14天开始分组给药,给药体积为30mL/kg体重,每日给药1次,共14天,分别于给药前后称重;给药前、给药后4天、7天及14天检测血小板计数;实验结束剥离股骨取骨髓测巨核细胞计数和分类。结果:ITP模型小鼠体重增长率下降,血小板计数持续下降,骨髓巨核细胞增加,产板巨减少、成熟度下降,有统计学意义(P<0.05)。加味小柴胡颗粒组能提高ITP模型小鼠体重增长率(P<0.05);各给药组均使血小板计数上增,其中加味小柴胡颗粒组对血小板提升作用高于维血宁组及其组方小柴胡颗粒组和丹参三七组,有统计学意义(P<0.05),与强的松组无差别(P>0.05);强的松组、加味小柴胡颗粒、小柴胡颗粒组使巨核细胞数减少,产板巨增高,其中加味小柴胡颗粒组优于小柴胡颗粒组,有统计学意义(P<0.05),与强的松组无差别(P>0.05)。结论:加味小柴胡颗粒能提高ITP模型小鼠体重增长率,并明显提升血小板计数,促使骨髓巨核成熟,效果优于维血宁组,且优于其组方小柴胡颗粒和丹参三七颗粒,与强的松组疗效相似。