大鼠血睾屏障形成初期细丝蛋白A对肌动蛋白丝排布的影响

目的根据肌动蛋白丝(F-actin)在血睾屏障(BTB)形成与变化过程中发挥的作用,初步探讨细丝蛋白A(FLNA)在大鼠血睾屏障形成初期对F-actin排布的影响。方法 Western印迹检测FLNA在大鼠睾丸、支持细胞及精子中的表达;免疫荧光染色观察FLNA与F-actin在20d龄大鼠生精上皮中的共定位;体外无血清体系分离培养大鼠睾丸支持细胞,待细胞连接形成后通过siRNA干扰沉默FLNA的表达,鬼笔环肽染色观察F-actin的分布定位;睾丸内siRNA注射,观察FLNA对血睾屏障形成时F-actin分布的影响。结果 FLNA在20d龄大鼠主要由支持细胞表达,体外siRNA沉默FLNA的效率可达70%以上,在体外支持细胞连接形成及体内屏障形成过程中,FLNA沉默组的F-actin与对照组相比排列紊乱、无序。结论 FLNA参与调节大鼠血睾屏障形成初期FLNA的排布。     

增龄对大鼠睾丸自噬水平和血睾屏障完整性的影响

目的探究增龄过程中大鼠睾丸自噬水平的变化及其对血睾屏障的影响。方法HE染色法观察6、12、18和24月龄SD♂大鼠睾丸组织形态学的变化。Western blot法检测各组大鼠睾丸自噬相关蛋白Beclin1、ATG5、ATG7和LC3Ⅱ,以及血睾屏障相关蛋白Occludin和β-catenin的表达水平变化。免疫荧光法检测睾丸自噬相关蛋白Beclin1和LC3,以及血睾屏障相关蛋白β-catenin的蛋白表达及定位。结果HE染色观察发现,增龄过程中大鼠睾丸组织形态结构发生明显变化,生精小管萎缩,生精细胞层数减少,细胞间间隙增大,且发生部分脱落现象;Western blot结果显示,增龄过程中大鼠睾丸自噬相关蛋白Beclin1、ATG5、ATG7和LC3Ⅱ,以及Occludin和β-catenin表达水平均逐渐下降;免疫荧光结果显示,增龄过程中大鼠睾丸生精小管上皮细胞中Beclin1和LC3蛋白表达逐渐下调,并且血睾屏障标志蛋白β-catenin表达也逐渐下降。结论增龄过程中大鼠睾丸生精功能减退,其机制与睾丸生精上皮细胞自噬水平下降,进而破坏血睾屏障的完整性有关。     

大鼠血胰屏障对加替沙星体内分布的影响

目的研究大鼠血胰屏障对加替沙星体内分布的影响。方法经大鼠尾静脉推注加替沙星20 mg·kg 1，在规定的时间点取样，用高效液相色谱法（HPLC）测定胰腺组织和血清中药物含量 。结果在大鼠血清中加替沙星浓度在5 min时最高，为6.03 μg·mL 1，胰腺组织在10 min时最高，为18.67 μg·g 1，然后持续下降；5 min时胰组织的药物浓度开始高于血清，240 min后两者浓度接近。血胰屏障对药物的通透率（PR）在5 min时为1.02，然后处于上升趋势，10 min时最高达到3.69，然后下降，240 min后接近1。结论静脉推注加替沙星后，血胰屏障对药物具有良好的通透性，值得向临床推荐预防和治疗胰腺感染。     

丙烯酰胺对大鼠小脑神经丝蛋白的影响

目的研究丙烯酰胺(ACR)亚慢性染毒对小脑神经丝(NF)蛋白的影响,探讨其中毒性神经病机制。方法以204、0 mg/kg ACR腹腔注射雄性Wistar大鼠2个月,Western Blot法测定小脑中NF-L、NF-M和NF-H相对含量。结果与对照组相比,高剂量组小脑上清液NF-L、NF-M、NF-H和沉淀NF-L分别增高348%、241%、32%和20%(P<0.01),而沉淀NF-H降低14%(P<0.05);低剂量组沉淀NF-L、上清NF-H分别增加16%、17%(P<0.05);低剂量组上清NF-L、NF-M及沉淀NF-M、NF-H均略为降低,但差异无显著性(P>0.05)。结论ACR亚慢性中毒可引起小脑组织中NF亚单位蛋白的明显改变,尤其以上清中NF-L、NF-M升幅最大(348%、241%)。ACR引起的中毒性神经病与小脑组织中NF亚单位的含量变化有关。     

左旋氧氟沙星对大鼠血胰屏障的通透性

目的 :研究左旋氧氟沙星对大鼠血胰屏障的通透性。方法 :经尾静脉推注左旋氧氟沙星 (2 0mg·kg 1体重 ) ,在规定的时间点取样 ,用高效液相色谱法 (HPLC)测定胰腺、肝脏组织和血清中药物的含量。结果 :在大鼠血清中的左旋氧氟沙星浓度在5min时最高 ,为 2 0 .2 47μg·mL 1,胰腺、肝脏组织都在 10min时最高分别 2 1.85 0 μg·g 1、30 .5 90 μg·g 1,然后持续下降 ;10min时胰组织的药物浓度开始高于血清 ,90min后两者浓度接近。药物对血胰屏障的通透率 (PR)在 5min时 0 .85 ,然后处于上升趋势 ,2 0min时最高达到 3 .82 ,然后下降 ,90min后接近 1。结论 :静脉推注左旋氧氟沙星后 ,药物对血胰屏障具有良好的通透性 ,值得向临床推荐预防和治疗胰腺感染。     

洛美沙星对大鼠血胰屏障通透性的研究

目的 :研究洛美沙星对大鼠血胰屏障的通透性。方法 :经尾静脉推注洛美沙星 (20mg/kg) ,在规定的时间点取样 ,用高效液相色谱法 (HPLC)测定胰腺、肝脏组织和血清中药物的含量。结果 :洛美沙星在大鼠体内过程符合二室模型 ;血清、胰腺、肝脏组织药物浓度在5min时最高 ,分别为65 551μg/ml、48 801μg/g、84 121μg/g ,然后持续下降 ;10min时胰组织的药物浓度已高于血清 ,480min胰组织中仍维持较高浓度 ;药物对血胰屏障的通透率 (PR)在5min时最低 (0 744) ,然后上升 ,480min时达到3 817。结论 :静脉推注洛美沙星后 ,药物对血胰屏障具有良好的通透性 ,值得向临床推荐用于预防和治疗胰腺感染     

替硝唑对大鼠血胰屏障通透性的研究

目的：研究替硝唑对大鼠血胰屏障的通透性，为选择合适的抗微生物药物治疗继发性胰腺组织感染提供理论依据。方法：给予大鼠替硝唑20 mg·kg 1，sc，在规定时间点取样，用高效液相色谱法(HPLC)测定胰腺组织和血清中药物的浓度。结果：血清、胰腺组织中替硝唑浓度在20 min时最高，分别为19.73 μg·mL 1，55.17 μg·g 1；药物对血胰屏障的通透率(PR)＞1。结论：皮下注射替硝唑后，药物在胰腺中有较高的分布，对血胰屏障具有良好的通透性，值得向临床推荐用于预防和治疗胰腺感染。     

奥硝唑对大鼠血胰屏障通透性的研究

目的研究奥硝唑对大鼠血胰屏障的通透性,为选择合适的抗微生物药物预防和治疗胰腺组织感染提供理论依据。方法给予大鼠口服奥硝唑20mg/kg,在规定时间点取样,用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定胰腺组织和血清中药物的浓度。结果血清、胰腺组织中奥硝唑浓度在20m in时最高,分别为(13.24±2.01)mg/L,(18.34±3.26)mg/L。药物对血胰屏障的通透率(PR)在20m in以后一直>1。结论口服奥硝唑后,药物在胰腺中有良好的分布,对血胰屏障具有良好的通透性,值得向临床推荐用于预防和治疗胰腺感染。     

氯化锰对大鼠血-脑脊液屏障的损伤作用

目的探讨氯化锰对大鼠脑脉络丛组织的毒性损伤作用。方法 大鼠ip给予氯化锰6mg(Mn).kg-1建立不同暴露时长(30d,90d及90d后无处理观察30d)的氯化锰中毒动物模型,各时间点染毒结束后采集血清与脑脊液(CSF)样本,提取侧脑室的脉络丛组织。溴甲酚绿法和ELISA法检测血清白蛋白(SALB)与CSF白蛋白(CALB)水平,并计算CSF白蛋白指数。光镜与透射电镜下检测大鼠脉络丛组织、细胞及亚细胞结构的病理形态学改变。结果氯化锰30d组、氯化锰90d组及氯化锰90d+30d恢复组CSF白蛋白、CSF白蛋白指数均明显高于其相应的对照组(P<0.05),并且氯化锰30d组CSF白蛋白、CSF白蛋白指数低于氯化锰90d组与氯化锰90d+30d恢复组(P<0.05),氯化锰90d组CSF白蛋白、CSF白蛋白指数低于氯化锰90d+30d恢复组,但无统计学意义。光镜和电镜观察发现,氯化锰导致脉络丛上皮细胞形状不规则,微绒毛结构紊乱、缩短;胞浆内出现空泡、核质凝聚,线粒体结构破坏,细胞间连接部分断裂或消失等,随染氯化锰时间的延长有加重的趋势,并且脱离氯化锰接触30d后仍表现为进行性加重。结论氯化锰可以引起脉络丛组织病理形态学改变,具有时效性与不可逆性的特征;CSF白蛋白及CSF白蛋白指数与脉络丛的损伤程度呈正相关,可以作为判断血-脑脊液屏障损伤程度的参考指标。     

氯丙烯对大鼠神经组织神经丝亚单位蛋白含量的影响

目的　为了进一步探讨氯丙烯引起的周围神经病的发病机理。方法　用Western印迹方法测定了亚慢性中毒大鼠大脑、脊髓、坐骨神经组织低分子量神经丝 (NF L)、中分子量神经丝 (NF M)和高分子量神经丝 (NF H) 3个亚单位相对含量的变化。结果　氯丙烯使脑组织沉淀和上清液中神经丝 3个亚单位的相对含量明显降低 ;在脊髓组织沉淀和上清液中 ,NF M均降低。NF H在沉淀增加 ,在上清液中降低。NF L在沉淀增加 ;在坐骨神经组织沉淀和上清液中 ,氯丙烯使NF M含量降低 ,而使NF H含量增加。NF L在沉淀中降低、在上清液中明显增加。结论　氯丙烯引起的中毒性周围神经病与神经丝亚单位紊乱有关。     

氯化锰亚急性染毒对大鼠血脑脊液屏障功能及神经行为的影响

目的在前期构建锰中毒动物模型并证实锰损害血脑脊液屏障和多巴胺神经元的研究基础上,本研究进一步评价亚急性染锰后大鼠锰内暴露情况及锰对大鼠血脑脊液屏障功能和神经行为的影响。方法 50只SD大鼠,雌雄各半,随机分为对照组(生理盐水)与染毒组[氯化锰,MnCl_2,6 mg (Mn)/kg·bw,1次/d],腹腔注射染毒30 d。染毒期间每周记录大鼠体重和平衡木评分,末次染毒后立即进行Y迷宫和新物体识别实验,24 h后采集血清和脑脊液、分离黑质和纹状体。应用生化分析仪和ELISA法分别测定血清、脑脊液中的白蛋白含量,电感耦合等离子体质谱仪测定血清、脑脊液以及黑质与纹状体中的金属离子含量。结果大鼠经腹腔注射6 mg (Mn)/kg·bw 30 d后,血清和脑脊液的锰内暴露量为3.1～4.2(μg/L),比对照组高310%～740%。黑质、纹状体中锰的含量比对照组升高400%～640%,无明显性别差异。染锰大鼠血清中铜离子升高,雄性染锰大鼠纹状体铁离子升高,雌性纹状体锌、铜、镁和钙离子升高(P0.05)。染锰组大鼠脑脊液中白蛋白指数升高,提示锰对血脑脊液屏障功能有不良影响。染锰组大鼠平衡木行走评分降低,Y迷宫中认知安全臂的错误数增加(P0.05),但新物体学习记忆探索次数无明显变化(P0.05)。雌性染锰大鼠Y迷宫主动回避次数降低(P0.05)。结论本研究对大鼠进行6 mg(Mn)/kg·bw的亚急性腹腔注射染毒,发现大鼠血清、脑脊液中锰增高,血脑脊液屏障功能受损,黑质和纹状体锰蓄积,大鼠出现神经行为改变。     

氯丙烯对大鼠神经组织中β-肌动蛋白含量的影响

目的　进一步探讨氯丙烯所致中毒性周围神经病的发病机制。方法　Wistar雄性大鼠sc氯丙烯3个月后 ,用Western印迹方法分别测定了氯丙烯亚慢性中毒后大鼠大脑、脊髓、坐骨神经沉淀和上清中骨架蛋白 β 肌动蛋白含量的变化。 结果　①在大脑沉淀中 ,β 肌动蛋白含量在氯丙烯 85 mg·kg- 1组降低 10 % (P >0 .0 5 ) ,170mg·kg- 1组降低 13% (P <0 .0 5 ) ;在大脑上清中 ,β 肌动蛋白含量在 85mg·kg- 1组降低 2 0 % (P <0 .0 1) ,170mg·kg- 1组无明显变化。②在脊髓沉淀中 ,氯丙烯 85mg·kg- 1组 β 肌动蛋白含量降低 13% ,170mg·kg- 1组降低 12 % ,但均无显著性差异 ;上清中无显著变化。③坐骨神经沉淀中 ,在氯丙烯 85和 170mg·kg- 1组分别下降33%和 39% (P <0 .0 1) ;上清中 ,β 肌动蛋白没有显著性变化。结论　首次发现氯丙烯可导致神经组织中β 肌动蛋白含量显著降低 ,β 肌动蛋白的改变可能与氯丙烯引起的中毒性外周神经病有关     

骨形成蛋白4对大鼠牙乳头细胞生物学行为的影响

目的观察骨形成蛋白4(BMP4)对体外培养的大鼠牙乳头细胞增殖及分化的影响,为探讨BMP4在牙胚发生发育中的调控作用奠定基础。方法体外培养胚胎13d的大鼠牙乳头细胞,利用MTT法和测定细胞内碱性磷酸酶含量检测BMP4对大鼠牙乳头细胞增殖及分化的影响。结果BMP4能抑制牙乳头细胞的增殖,并能促进细胞分泌碱性磷酸酶(P<0.01)。结论BMP4具有抑制大鼠牙乳头细胞增殖,并促进牙乳头细胞成熟分化的调控作用。     

2，5-HD对大鼠DRG神经元神经丝蛋白表达的影响

目的 比较2,5-己二酮(2,5-HD)和3,3'-亚氨基二丙腈(3,3'-IDPN)对大鼠DRG神经元神经丝蛋白(NF-M)的损伤作用.方法 用出生后2 d的大鼠背根神经节(DRG)神经元,在培养皿中加不同浓度的2,5-HD和3,3'-IDPN进行培养,用荧光染料测定细胞毒性,计算细胞死亡率.用蛋白免疫荧光方法测定NF-M,计算DRG神经元细胞体的神经丝表达.结果 DRG神经元24 h接触2,5-HD和3,3'-IDPN的LD50约为32和102 mmol/L.DRG细胞体内的NF-M蛋白含量在接触2,5-HD(0、4、8和16 mmo/L浓度)24和48 h后结果显示,各个剂量组均有明显降低(P＜0.05.P＜0.01);而在接触3,3'-IDPN 24 h后,各个剂量组之间没有发生明显改变,但在接触48 h后,仅有64,128 mmol/L组与对照相比,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).在DRG神经元具有相同死亡率时,2,5-HD和3,3'-IDPN 24 h后对NF-M蛋白表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 2,5-HD与3,3'-IDPN对NF-M的损伤不同.2,5-HD减少NF-M蛋白表达要早于细胞死亡.NF-M对2,5-HD比对3,3'-IDPN敏感.     

铅暴露对体外血脑脊液屏障功能及ZO-1和闭合蛋白表达的影响

目的通过建立体外血脑脊液屏障(BCB)模型,研究铅诱导BCB损伤的可能机制。方法使用Z310细胞建立BCB体外细胞模型,分别加入Pb(AC)22.5,5.0和10.0 mmol·L-1,暴露24,48和72 h。采用跨内皮电阻(TEER)检测法及葡聚糖法检测BCB模型通透性;Western蛋白印迹法和免疫荧光法检测BCB中紧密连接蛋白ZO-1和闭合蛋白表达及分布。结果与细胞对照组相比,Pb(AC)22.5,5.0和10.0 mmol·L-1暴露48 h对Z310细胞存活率和密度均无明显影响。暴露后第12天,与细胞对照组比较,Pb(AC)25.0和10.0 mmol·L-1组TEER值明显降低(P<0.05),葡聚糖通过率显著增高(P<0.05)。Western蛋白印迹法和免疫荧光法检测结果显示,与细胞对照组相比,Pb(AC)2各浓度暴露48 h后,ZO-1和闭合蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论铅暴露能够破坏BCB模型的通透性,其机制可能与抑制紧密连接蛋白的表达有关。     

脊髓脂质运载蛋白-2对大鼠吗啡耐受形成的影响

目的探索用RNA干扰(RNAi)法沉默脊髓脂质运载蛋白-2(lipocalin-2,LCN2)的表达及其对正常大鼠吗啡耐受形成的影响。方法鞘内置管成功的♂SD大鼠48只,体质量180~220 g,随机均分为4组,每组12只:Ⅰ组对照组、Ⅱ组吗啡耐受组、Ⅲ组错义小干扰RNA(mismatch siRNA,MM siRNA)组、Ⅳ组LCN2小干扰RNA(LCN2 siRNA)组。所有大鼠鞘内置管术后d 6确定导管位置,记为d 0。d 2~8连续7 d,每天2次进行皮下注射,每次注射剂量10μg·g-1,Ⅰ组大鼠皮下注射生理盐水(normal saline,NS),Ⅱ-Ⅳ组大鼠皮下注射吗啡建立吗啡耐受模型。各组大鼠每天皮下给药前分别鞘内注射10μL DEPC溶液、10μL DEPC溶液、10μL含4μg MM siRNA的DEPC溶液和10μL含4μg LCN2 siRNA的DEPC溶液。d 1、d 9,测定所有大鼠的基础热缩足反应潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL)及皮下注射吗啡后45 min的PWTL,并计算吗啡的最大可能镇痛效应百分比值(%maximal possible effect,%MPE)。d 9行为学测试结束后,取脊髓腰膨大,用Western blot法检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)及LCN2蛋白表达水平,用免疫组织荧光染色法检测小胶质细胞标记物Iba1的表达。结果 d 9,与Ⅰ组比,Ⅱ、Ⅲ组大鼠%MPE值明显下降(P<0.05),腰段脊髓LCN2、p-p38 MAPK、Iba1表达明显增加(P<0.05)。与Ⅱ组比,Ⅳ组大鼠的%MPE值明显增加(P<0.05),脊髓LCN2、p-p38MAPK、Iba1表达明显下降(P<0.05)。结论鞘内注射LCN2 siRNA沉默脊髓LCN2的表达能够部分抑制吗啡耐受的形成,该现象可能与其抑制脊髓背角小胶质细胞的活化及脊髓p-p38 MAPK的表达有关。     

丝素蛋白支架对大鼠脊髓损伤后胶质瘢痕形成的影响

目的研究丝素蛋白(SF)支架移植对大鼠脊髓损伤后胶质瘢痕形成的影响。方法64只SD大鼠随机均分为脊髓全横断术后SF支架移植组(A组)和空白对照组(B组);术后取出脊髓组织,显微镜下观察组织病理学变化,免疫组化染色和Western blot分别检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、生长相关蛋白43(GAP-43)的阳性细胞染色和蛋白表达。结果与B组相比,A组可见支架内少量神经纤维,胶质细胞增生不明显,GFAP阳性细胞染色和蛋白表达减少(P<0.05),而GAP-43阳性细胞染色和蛋白表达增加(P<0.05)。结论 SF支架移植可减少大鼠脊髓损伤后胶质瘢痕形成,并可能会间接促进神经再生。     

葡萄球菌A蛋白对大鼠乳腺癌生长的抑制作用

作者采用A蛋白纯品直接注射于二甲基苯蒽(DMBA)诱发的乳腺癌的病鼠,以观察其抗肿瘤作用。作者给50日龄Sprague-Dawley大鼠喂     

重组人生长激素对大鼠肠道屏障功能的影响

目的 探讨重组人生长激素(rhGH)对大鼠肠道屏障功能的影响.方法 45只SD大鼠随机均分为3组:A组不予处理;B组肌注生理盐水;C组用肌注rhGH 1.25 U· kg-1·d-1治疗.1周后测量各组大鼠小肠绒毛高度、肠腺隐窝深度、黏膜厚度以及绒毛表面积和小肠黏膜CD3+、CD4+、CD8+和IgA+细胞数.结果 C组的小肠绒毛高度、肠腺隐窝深度、黏膜厚度以及绒毛表面积等形态学相关参数明显好于A组和B组(P＜0.05);C组小肠黏膜CD3+、CD4+、CD8+和IgA+细胞数高于A组和B组(P＜0.05);A组与B组上述指标的差异无统计学意义.结论 rhGH可以增强小肠黏膜屏障功能及免疫屏障功能.