短暂性缺氧对鼠脑神经源性分化因子表达的影响

目的观察短暂性缺氧后鼠脑神经源性分化因子(NeuroD)表达量的变化,初步探讨其在神经系统再生中的可能作用。方法"延迟剖宫产术"建立胎鼠宫内窘迫模型,通过RT-PCR检测窘迫不同时间后NeuroD mRNA表达量的变化,通过免疫荧光对NeuroD蛋白的表达进行定性分析。结果宫内窘迫5min,NeuroD mRNA表达量未见明显变化(P>0.05),窘迫10、15、20min后其表达量随窘迫时间的延长而不断增高。免疫荧光示在尾壳核区域NeuroD表达量明显增加。结论短暂性缺氧后NeuroD表达量增高,可能参与了神经系统的再生过程。     

新生大鼠缺氧缺血脑白质损伤模型学习记忆能力的变化

目的通过缺氧、缺血法建立新生大鼠脑白质损伤(WMI)模型,评价大鼠各个生长时期的学习记忆能力及髓鞘碱性蛋白(MBP)表达变化。方法新生4日龄SD大鼠100只随机分为对照组和缺氧、缺血WMI组,应用HE染色法观察脑组织病理学改变。于术后4周、8周与12周分别观察大鼠神经行为学和学习记忆能力改变,并应用免疫荧光染色法和Western blotting法观察MBP在大鼠脑内的定位定量表达变化。结果 HE染色显示,WMI组大鼠出现缺氧、缺血脑白质损伤病理改变。WMI组大鼠神经行为学及学习记忆能力较对照组减弱,差异具有统计学意义(P0.01)。WMI组各时间点的MBP表达量较对照组降低,差异具有统计学意义(P0.01)。结论新生4日龄SD大鼠发生缺氧、缺血脑白质损伤后,各个生长时期的学习记忆能力均减弱,MBP蛋白表达均减少,推测学习记忆能力减弱可能与MBP蛋白表达减少有关。     

天麻素对缺血缺氧脑损伤新生大鼠小胶质细胞Sirt3表达的影响

目的:研究天麻素对缺血缺氧脑损伤(HIBD)新生大鼠脑内激活的小胶质细胞Sirt3表达的影响。方法:选取39只3 d龄SD幼年大鼠随机分为对照组(control)、缺血缺氧脑损伤组(HIBD)、天麻素组(HIBD+gastrodin)。采用左侧颈总动脉结扎结合缺氧法建立新生大鼠缺血缺氧性脑损伤(HIBD)模型,使用免疫荧光染色观察HIBD模型后新生大鼠大脑胼胝体区小胶质细胞的分布情况;使用免疫荧光双标染色及Western Blot检测大鼠大脑左侧胼胝体区小胶质细胞Sirt3的表达变化。结果:免疫荧光染色结果显示HIBD后新生大鼠大脑左侧胼胝体区小胶质细胞出现明显激活,确定模型建立成功。免疫荧光双标染色及Western Blot结果均显示,与对照组相比,HIBD模型组Sirt3的表达水平明显升高(P<0.05);与HIBD模型组相比,天麻素组Sirt3的表达进一步增强(P<0.05)。结论:天麻素可能通过促进新生大鼠脑内小胶质细胞Sirt3的表达,发挥其神经保护作用。     

短暂缺氧对3日龄SD大鼠海马胰岛素受体和β-catenin及NeuroD1表达的影响

目的:探讨短暂缺氧对3日龄SD大鼠海马胰岛素受体和β-catenin及NeuroD1表达的影响.方法:将3日龄SD大鼠置于8％O2+92％N2混合气体中2 h,建立缺氧性脑损伤模型(模型组),对照组为将3日龄SD大鼠置于缺氧箱2 h,不通入混合气体.2组大鼠分别于缺氧后2、4、24?h断头取脑,采用免疫印迹和免疫荧光法...     

Influence of perinatal transient hypoxia on mRNA expression of neurogenic differentiation in rats

目的:观察短暂性缺氧后鼠脑神经源性分化因子(NeuroD)表达量的变化,探讨其在神经系统再生中的可能作用.方法:通过延迟剖宫产术建立胎鼠宫内窘迫模型,原位杂交技术检测不同时间海马结构NeuroD mRNA表达量的变化.结果:原位杂交结果显示,模型组无论在齿状回颗粒下层(SGZ)还是CA1区,NeuroD在P13、P20、P27 d的表达量与对照组相比均增高.结论:短暂性缺氧后诱导NeuroD mRNA增高,可能参与了神经系统的再生.     

脑室周围白质软化大鼠膜铁转运蛋白1的表达变化及意义

目的:探讨缺氧缺血脑室周围白质软化(PVL)大鼠膜铁转运蛋白1(FPN1)的表达变化及意义.方法:新生4日龄SD大鼠随机分为对照组和缺氧缺血PVL组,于术后1d、3d、1周和4周取脑,分离大脑皮质、海马和脑室周围白质,以石墨炉原子吸收分光光度法检测各脑区铁含量,应用免疫荧光组织化学显色观察FPN1蛋白定位,应用实时荧光定量PCR和免疫印迹分别检测FPN1 mRNA与蛋白表达水平.结果:与对照组相比,PVL组各脑区铁含量于术后1d与3d无增加；术后1周均较对照组增高,其中以脑室周围白质铁含量增加最显著,皮质次之,海马最少；术后4周皮质铁含量略有降低,海马铁含量已降至对照组水平,而脑室周围白质铁含量仍处于高水平.PVL组各脑区FPN1 mRNA和蛋白于术后1d与3d未见明显变化；术后1周均较对照组明显降低；术后4周皮质FPN1表达量有所恢复,海马FPN1已恢复至对照组水平,但脑室周围白质FPN1仍较对照组降低.结论:缺氧缺血PVL大鼠皮质、海马与脑室周围白质铁含量升高,而FPN1的表达减少,两者均呈时空依赖性.提示新生4日龄SD大鼠缺氧缺血后FPN1表达减少可能引起脑铁升高,促进PVL的发生.     

N-乙酰-L-色氨酸具有对新生鼠脑缺血/缺氧损伤的保护作用 

目的 探讨N-乙酰-L-色氨酸(L-NAT)对新生鼠脑缺血/缺氧损伤的保护作用.方法 出生第7天的沙土鼠90只,随机分为正常对照组、缺血/缺氧组和L-NAT组.制备脑缺血/缺氧损伤模型,L-NAT组在造模前30min腹腔注射L-NAT(5mg/kg).用Fluoro-Jade B(FJB)染色法观察细胞的死亡情况;用免疫荧光染色、Western blotting观察活化的Caspase-3和Caspase-9在各组的表达.结果 L-NAT可使缺血/缺氧损伤后FJB阳性细胞数量减少,并抑制缺血/缺氧后Caspase-3和Caspase-9的活化.结论 L-NAT对新生鼠脑缺血/缺氧损伤动物模型具有保护作用.     

石菖蒲挥发油对炎症痛大鼠基底外侧杏仁核中胶质纤维酸性蛋白和即刻早期基因表达的影响

目的 通过注射完全弗氏佐剂(CFA)构建炎症痛大鼠模型,探讨石菖蒲挥发油对炎症痛大鼠基底外侧杏仁核(BLA)中神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和即刻早期基因(c-fos)表达的影响。方法 成年SD雄性大鼠36只,随机分为6组: 对照（control）组、假手术（sham）组、CFA组、CFA+5 g/(kg ·d)石菖蒲挥发油组、CFA+10 g/(kg ·d)石菖蒲挥发油组、CFA+20 g/(kg ·d)石菖蒲挥发油组,每组各6只动物,于灌胃21 d后取材。采用免疫荧光及Western blotting技术检测各组大鼠BLA中GFAP和c-fos表达量的变化。结果 免疫荧光及Western blotting结果均显示,与control组相比,CFA组大鼠BLA中GFAP及c-fos阳性表达均显著增多(P<0.01);与CFA组相比,石菖蒲挥发油处理组GFAP和c-fos阳性表达均降低,且表达量呈剂量依赖性递减(P<0.01);其中,高剂量组GFAP和c-fos阳性表达的下降趋势较低剂量组相比更为显著(P<0.01)。结论 石菖蒲挥发油可减少CFA诱导的炎症性疼痛大鼠BLA中星形胶质细胞表达,并进一步抑制c-fos的表达。     

GnIH对卵巢摘除术后补充雌激素大鼠下丘脑POMC阳性神经元的影响

目的:探讨促性腺激素抑制激素(Gn IH/RFRP-3)对卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠下丘脑阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)阳性神经元的影响。方法:65只成年雌性SD大鼠,随机选取2只用于免疫荧光多重染色,观察Gn IH/RFRP-3与POMC在大鼠下丘脑神经元的表达;随机选取3只用于免疫共沉淀(Co-IP)实验,检测Gn IH/RFRP-3与POMC的相互作用;余下60只建立卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠模型,模型组随机分成注射Gn IH实验组和生理盐水对照组,每组30只,每组根据注射时间不同分为20、40、60、120、240、360min等共6个亚组,每组5只,采用Western Blot法检测Gn IH/RFRP-3处理对下丘脑POMC表达的影响。结果:免疫荧光多重标记结果显示,Gn IH/RFRP-3与POMC共表达于大鼠下丘脑神经元; Co-IP结果证明,Gn IH/RFRP-3与POMC存在相互作用; Western Blot结果表明,注射Gn IH/RFRP-3后20 min组大鼠下丘脑POMC蛋白表达量显著高于对照组(P 0. 05),注射60、120、240、360 min实验组大鼠POMC蛋白表达量明显低于对照组(P 0. 05)。与20 min实验组相比,60、120、240 min组蛋白表达量依次呈下降趋势,360 min组蛋白表达量有升高趋势但是仍然低于20 min组(P 0. 05)。结论:Gn IH/RFRP-3可直接作用于POMC神经元。     

大鼠急性脊髓损伤后NeuroD的时空表达

目的:探讨神经源性分化因子NeuroD在大鼠急性脊髓损伤过程中的表达及意义。方法:以改良Allen's法建立急性脊髓损伤(SCI)大鼠模型,以假手术组为对照,应用免疫组织化学、半定量RT-PCR、免疫印迹分别检测脊髓损伤后不同时间点NeuroD的表达变化。结果:NeuroD特异性表达于脊髓灰质,与对照组相比,急性脊髓损伤后3 d,NeuroD mRNA的相对表达量明显增加,5 d达到峰值,7 d后回落;Neurod的蛋白相对表达量则在急性脊髓损伤5 d后明显升高,持续至第7天,14 d明显回落。结论:急性脊髓损伤可上调NeuroD表达水平,提示NeuroD参与了急性脊髓损伤后的病理过程。     

短暂缺氧对新生鼠脑细胞凋亡和神经再生的影响

Objective To investigate effects of transient hypoxia on the expression level of neurogenic differentiation factor (NeuroD), apoptosis and neurogenesis in the rat brain.Methods The model was established as previously described by Grojean, newborn rats were transiently exposed to 100% N2. Ninety-six animals were randomly divided into normal control group and 20min hypoxia-treated group. Rats were sacrificed at day 13, 20 and 27 post-hypoxia, and the expression levels of NeuroD and BrdU in the brain were analyzed by immunofluorescence staining and immunohistochemistry. Alternatively, the rats were sacrificed at day 6 and 20 post-hypoxia, and apoptosis in the brain was analysed with TUNEL staining. Results Immunofluorescence/immunohistochemisty analysis showed that the expression of NeuroD and BrdU significantly increased at day 13 and 27 in the 20min hypoxia-treaded group compared to that in the control group (P0.05), with the highest expression level at day 20 (P0.01). TUNEL positive cells also significantly increased at day 6 in the 20min hypoxia-treaded group, while no difference was seen between the hypoxia-treated and the control group at day 20. Conclusion The transient neuronal loss induced by birth hypoxia may lead to cell proliferation, neuron differentiation and also may trigger neurogenesis, which may in turn participate in brain repai     

乙醇对大鼠脑内5-HT能神经体系的影响

目的 观察乙醇处理大鼠脑内色氨酸羟化酶(TPH)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟色胺转运体(SERT)的表达改变,判断乙醇对脑内5-HT能神经体系的影响.方法 以20%乙醇代替饮水饲养30只Wistar大鼠6个月;利用免疫组织化学、免疫印迹及流式细胞术等方法,分析乙醇处理大鼠有关脑区5-HT能神经体系相关指标的改变.结果 1.免疫组织化学法可见,乙醇处理组大鼠脑内中缝背核TPH、5-HT免疫反应阳性神经元数量少于对照组(P＜0.01);TPH免疫阳性神经元直径小于对照组(P＜0.01);相关脑区TPH、5-HT和SERT免疫反应灰度值比对照组增高(P<0.05).2.流式细胞术检测可见,乙醇处理组大鼠TPH、5-HT和SERT的表达量低于对照组(P<0.05).3.免疫印迹法检测可见,乙醇处理组大鼠SERT和TPH与β-actin相对吸光度比值均小于相应对照组(P<0.05).结论 乙醇降低脑内TPH、5-HT和SERT的表达,可能改变脑内5-HT能神经体系的功能活动.     

天麻素对老年痴呆动物模型的抗氧化作用及其机制

目的构建β-淀粉样肽(1-40)(Aβ1-40)联合D-半乳糖(D-gal)致痴呆模型,探讨天麻素抗氧化的分子机制。方法成年雄性SD大鼠36只,侧脑室注射Aβ1-40联合腹腔注射D-gal构建SD大鼠痴呆模型,并同时给予天麻素预防性治疗,采用Morris水迷宫实验(MWM)进行行为学检测,用化学比色法检测大脑皮质过氧化氢(H2O2)及还原型谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽还原酶(GR)的含量。用免疫印迹法检测大脑皮质中p38和P-p38的含量。结果痴呆模型组与对照组比较:逃避潜伏期明显延长(P0.05),在第Ⅲ象限逗留的时间明显减少(P0.05),跨越平台次数明显减少(P0.05),皮质H2O2的含量增加,皮质GSH和GR的含量降低(P0.05),P-p38表达增加(P0.05);而天麻素治疗后:与痴呆模型组相比,大鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.05),在第Ⅲ象限逗留的时间明显增加(P0.05),跨越平台次数明显增加(P0.05),皮质H2O2的含量减少,皮质GR和GSH的含量升高(P0.05),P-p38表达减少(P0.05)。p38的表达在3组之间无差异(P0.05)。结论天麻素影响了痴呆模型大鼠皮质部分内源性巯醇抗氧化物(酶)如GSH和GR的含量,抑制了H2O2的产生,影响了P-p38的表达,对改善学习记忆能力,对抗大鼠神经系统的退行性变有一定的作用。     

创伤后应激障碍模型大鼠内侧前额皮质磷酸化细胞外信号调节激酶1/2及EM>c-fos/EM>的变化

目的 探讨创伤后应激障碍（PTSD）模型大鼠内侧前额皮质（mPFC）磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（pERK1/2）和c-fos的表达变化。 方法 将30只成年健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组（15只）和PTSD模型组（15只）,采用无连续单一应激（SPS）方法制备PTSD模型。用免疫组织化学和免疫印迹法检测mPFC pERK1/2的表达变化,RT-PCR检测c-fos mRNA表达变化。 结果 免疫组织化学分析显示,对照组和模型组pERK1/2阳性细胞数分别为10.4±2.07、48.8±10.08,阳性信号吸光度值分别为24.955±3.691、110.810±10.643,差异有统计学意义（P<0.01）;免疫印迹分析显示,对照组和模型组pERK/2相对表达量分别为0.510±0.052和1.109±0.106,差异有统计学意义（P<0.01）;RT-PCR分析结果显示,对照组和模型组c-fos mRNA相对表达分别为0.267±0.067和1.049±0.131,差异有统计学意义（P<0.01）。 结论 mPFC pERK1/2和c-fos表达增高,可能参与了PTSD模型大鼠的病理生理过程。     

雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病模型大鼠海马补体C1q表达的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇(TP)对阿尔茨海默病模型大鼠海马组织补体C1q表达的影响.方法 30只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组及用药组,每组10只.模型组大鼠双侧海马一次性注射凝聚态Aβ1-40,Morris水迷宫检测判断模型成功与否;对照组大鼠海马注射等量生理盐水;用药组大鼠在模型制作成功后每日腹腔注射雷公藤内酯醇0.4mg/kg,共15d.采用免疫组织化学染色和RT-PCR分别检测C1q蛋白和C1q mRNA在大鼠海马组织的表达.结果 免疫组织化学染色显示,模型组大鼠海马C1q阳性细胞数(67.89±9.22)较对照组(36.27±5.09)明显增多(P＜0.01),平均吸光度(0.2918±0.0347)较对照组(0.1980±0.0183)明显增加(P＜0.01);用药组大鼠海马C1q阳性细胞平均吸光度(0.2514±0.0170)较模型组明显减少(P<0.05).RT-PCR结果显示,模型组大鼠海马C1q mRNA水平(0.722±0.048)明显高于对照组(0.583±0.072)(P＜0.01);用药组大鼠海马C1q mRNA水平(0.656±0.053)较模型组明显下降(P＜0.01).结论 雷公藤内酯醇可抑制阿尔茨海默病模型大鼠海马组织C1q的表达.     

盐酸吉西他滨对乳腺癌小鼠EM>Tusc/EM>2、EM>Lats/EM>2基因表达的影响

Objective To explore gemcitabine’s effect on tumor suppressor candidate 2(EM>Tusc/EM>2), large tumor suppressor2(EM>Lats/EM>2) gene expression in breast cancer of mice, both in mRNA and protein level. Methods Mice models of breast cancer were established and the samples were selected at 0 day, 5 days and 10 days after gemcitabine hydrochloride treatments as well as control. RT-PCR and Western blotting were used to detect the variation of the EM>Tusc /EM>2 and EM>Lats/EM>2 gene expression both for blank control, negative control and test groups. Results The results were similar both in RT-PCR and Western blotting. Compared with blank control, relative amounts of EM>Tusc/EM> 2 and EM>Lats/EM>2 RNA in test group increased around 4-5 and 8 times 10 days after treated with gemcitabine in breast cancer mice respectively (P<0.05). However, no differences were showed with Tusc2 and EM>Lats/EM>2 RNA level 5 days after treated with gemcitabine in breast cancer mice. As to protein expression level, TUSC2 and LATS2 protein relative amounts were raised around 5 and 10 times (P<0.05) compared with blank control. Significant statistical difference was fou     

丝胶对2型糖尿病大鼠睾丸生长激素/胰岛素样生长因子-1轴的作用

目的 探讨丝胶对2型糖尿病大鼠睾丸生长激素（GH）/胰岛素样生长因子-1（IGF-1）轴的作用。 方法 40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组均为10只。链脲佐菌素连续腹腔注射制作2型糖尿病大鼠模型,1周后以血糖≥16.7mmol/L作为成模标准。待模型成功建立后,模型组大鼠不做任何处理,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃［2.4g/(kg&#8226;d)］,阳性对照组大鼠给予二甲双胍［55.33mg/(kg&#8226;d)］灌胃,均为35d。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测大鼠血清睾酮、GH和IGF-1水平;分别采用免疫组织化学染色、免疫印迹法和RT-PCR法检测睾丸GH、GH受体（GHR）和IGF-1的表达。 结果 丝胶可明显降低糖尿病大鼠血GH水平、下调睾丸GH的表达,升高血IGF-1和睾酮水平,上调睾丸IGF-1和GHR的表达（P＜0.05,P＜0.01）。并且丝胶治疗组各项指标与阳性对照组比较无明显差别（P＞0.05）。 结论 丝胶可通过调节糖尿病时GH/IGF-1轴紊乱改善生精功能,发挥对糖尿病生殖功能损害的保护作用,其作用与二甲双胍相当。     

糖尿病大鼠阴茎的氧化应激与阴茎勃起功能障碍的关系

目的 探讨氧化应激在糖尿病性阴茎勃起功能障碍（ED）中的作用。 方法 注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,分别在注射8周和12周后观察阴茎勃起次数;取大鼠阴茎,测定阴茎丙二醛水平、总抗氧化能力,免疫印迹法检测阴茎核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白量的变化。 结果 糖尿病大鼠的阴茎勃起次数明显低于对照组,并随病程延长降低;糖尿病大鼠阴茎丙二醛水平明显高于对照组,总抗氧化能力水平明显低于对照组;与对照组比较,糖尿病组大鼠阴茎内Nrf2蛋白量随病程延长而降低。 结论 糖尿病性阴茎勃起功能障碍与阴茎氧化应激水平升高相关。