miR-135a调节Treg/Th17免疫平衡参与变应性鼻炎模型小鼠发病及机制探讨北大核心CSCD

目的:探究微小RNA(miR)-135a调节Treg/Th17免疫平衡参与变应性鼻炎(AR)的作用机制。方法:利用0.5 mg/ml卵清蛋白和20 mg/ml氢氧化铝生理盐水溶液构建AR模型。32只AR小鼠分为AR组和AR+miR-135a mimic组(n=16),16只健康小鼠作为对照组。通过腹腔注射miR-135a mimic以提高miR-135a的水平。比较各组血清IgE和IgG、鼻黏膜损伤情况、外周血Th17/Treg、miR-135a和GATA3蛋白表达量。通过双荧光素酶报告实验验证miR-135a和GATA3的靶向关系。结果:与对照组比较,AR组IgE水平、鼻黏膜损伤程度、Th17比例和GATA3蛋白水平显著升高,而miR-135a、Treg比例、Treg/Th17显著降低(P<0.05)。AR+miR-135a mimic组IgE水平、鼻黏膜损伤程度、Th17比例和GATA3蛋白水平显著低于AR组,而miR-135a、Treg比例、Treg/Th17显著高于AR组(P<0.05)。miR-135a能够与GATA3靶向结合(P<0.05)。结论:miR-135a可能通过使AR模型小鼠Th17/Treg平衡从而缓解AR病情。     

Th17/Treg失衡在重症肺炎中的作用及其意义

目的：探讨Th17/Treg在评估重症肺炎病情和预后中作用。方法收集2011年6月至2013年6月我院确诊并住院治疗的重症肺炎患者400例,正常对照者200例。流式细胞术分析重症肺炎组和对照组外周血Th17细胞和Treg细胞的百分率,酶联免疫吸附实验( enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测各组外周血细胞因子IL-17和IL-10的表达水平。结果重症肺炎患者外周血Th17和Treg的百分率及细胞因子IL-17较对照组均明显升高,而IL-10表达水平明显低于对照组,差异均具有统计学意义( P<0．05)。进一步分析显示重症肺炎中继发多器官功能衰竭综合症( multiple organ dysfunction syndrome, MODS)组患者Th17和Treg的百分率,外周血IL-17表达水平均明显高于非MODS组,外周血IL-10表达水平明显低于非MODS组,差异均具有统计学意义( P<0．05)。死亡患者Th17和Treg的百分率,外周血IL-17表达水平均明显高于存活组,外周血IL-10表达水平明显低于存活组,差异均具有统计学意义( P<0．05)。结论 Th17/Treg失衡参与了重症肺炎的发生发展,检测外周血Th17和Treg的百分率及其相应细胞因子水平对评估重症肺炎的病情和预后有重要的临床意义。     

Th17细胞在小鼠变应性鼻炎鼻黏膜中的表达及意义

目的：探讨T辅助细胞17(Th17)在小鼠变应性鼻炎鼻黏膜中的表达及意义。方法：以卵清蛋白致敏的Balb/c小鼠变应性鼻炎模型作为实验组,同期以生理盐水替代作为对照组。取两组小鼠鼻黏膜,制成单细胞悬液,使用流式细胞仪检测两组小鼠鼻黏膜中Th17细胞比例。结果：两组小鼠鼻黏膜中均存在Th17细胞,并且实验组中Th17比例[(1.27±0.138)%与(0.771±0.088)%]高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：明确变应性鼻炎鼻黏膜中Th17细胞比例,为变应性鼻炎的治疗提供理论依据以及新思路。     

Th17 / Treg 比率在慢性乙型肝炎患者外周血的动态变化及意义

目的: 通过比较不同治疗方法对慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B ,CHB) 患者外周血Th17(T helper lymphocyte 17)、Treg(regular T cell)细胞频率及Th17/ Treg 比率的变化,探讨其在CHB 患者疾病转归中的意义。方法:CHB 患者40 例,根据保肝治疗基础上是否加用核苷酸抗病毒药物分为未抗病毒治疗组(Chronic hepatitis B without antiviral,CHBWA)20 例、抗病毒治疗组(Chronic hepatitis B antiviral,CHBA)20 例、乙肝病毒携带者(Asymptomatic hepatitis B carriers ,AsC)10 例、健康对照组(Health control,HC)10 例;采用流式细胞术检测CHBWA 组0 月、1 月及CHBA 组0 月、1 月、3 月,AsC 患者和HC外周血Th17、Treg 细胞频率,计算Th17/ Treg 比率,观察其在疾病不同阶段的动态变化。结果:CHBWA 组保肝治疗1 月后,Th17/ Treg 比率(0.39±0.11)比0 月(1.20±0.26)明显降低(P<0.01),已接近AsC 组(0.39±0.14)及HC 组(0.42±0.20)Th17/Treg 比率水平(P>0.05),且Th17/ Treg 比率与ALT 有良好的正相关关系(r =0.709,P =0.000);在CHBA 组,Th17/ Treg 比率在1 月(0.73依0.32)、3 月(0.76±0.44)均较0 月(1.18±0.27)明显下降,与0 月比较差异有统计学意义(P<0.01),但继续治疗到3 月时Th17/ Treg 比率较1 月时变化不明显,Th17/ Treg 比率在0、1、3 月均高于AsC 组及HC 组(P<0.01,0.05);Th17/ Treg 比率与ALT、HBV DNA 有良好的正相关关系(r =0.500,P =0.000;r =0.345,P =0.007);两组间比较,0 月时两组间Th17/ Treg 比率差异无统计学意义(P>0.05),但经治疗1 月后CHBA 组Th17/ Treg 比率高于CHBWA (t=4.471,P<0.01)。结论:CHB 患者中,抗病毒治疗将迅速影响Th17、Treg 细胞频率,导致Th17/ Treg 比率的变化,其变化可能与清除病毒有关。     

扩张型心肌病患者Th17/Treg的变化及意义

目的:探讨Th17/Treg的变化及其与扩张型心肌病(DCM)发生发展的关系。方法:收集急性病毒性心肌炎(AVMC)患者及DCM患者和健康体检者的外周血,ELISA法检测血清中IL-17及TGF-β1浓度;经PE-CD4、FITC-CD25及FITC-IL-17单抗染色后,双色流式细胞术检测Th17细胞及Treg细胞的比例。结果:AVMC组Th17和IL-17高于DCM组和对照组;DCM组Treg和TGF-β1低于AVMC组与对照组;AVMC组与DCM组Th17/Treg无显著差异,但均高于对照组。结论:Thl7/Treg的升高打破了免疫平衡,促进了AVMC的发病及其向DCM的发展。     

Th17细胞与Th1、Treg细胞关系的研究进展

CD4~+T细胞在不同细胞因子环境中可分化为Th1、Th2、Treg、Th17四种亚群,在一定条件下,各Th细胞亚群之间可以互相转化,从而使机体的免疫效应和免疫抑制处于精细而复杂的平衡状态。Th17细胞与自身免疫性疾病和肿瘤的发生发展关系密切,研究Th17细胞与Th1细胞、Treg细胞之间的相互关系,对于预防和治疗自身免疫性疾病和肿瘤等临床难题意义重大。     

不同类型HBV感染者外周血Treg/Th17细胞的变化及意义

目的:探讨不同类型HBV感染者外周血中CD4+ Foxp3+ Treg/Th17细胞的变化及意义.方法:选取15例急性乙型肝炎(Acute Hepatitis B,AHB)患者、40例慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者、40例无症状携带者(Asymptomatic HBV carriers,AsC)及30例健康对照者,分别采用流式细胞术、RT-PCR和ELISA检测外周血CD4+ Foxp3+ Treg/Th17细胞百分率、核转录因子foxhead winged-helix box protein 3 (Foxp3)/retinoid-related orphan receptor gamma-t (RORγt) mRNA的表达以及血浆转化生长因子-β1(Transforming growth factor-31,TGF-β1)/IL-17的水平.结果:AHB组患者CD4+ Foxp3+ Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3 mRNA及TGF-β1水平与正常对照组相比无明显差异(P＞0.05);而CD4+ IL-17 +/CD4+T细胞百分率、RORγtmRNA及IL-17水平与正常对照组相比明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).CHB组患者CD4+ Foxp3+ Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3 mRNA、TGF-31水平及CD4+ IL-17 +/CD4+T细胞百分率、RORγt mRNA、IL-17水平与正常对照组相比均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与正常对照组相比,AsC组患者CD4+ Foxp3+ Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3 mR-NA、TGF-β1水平及CD4+ IL-17 +/CD4+T细胞百分率、RORγt mRNA、IL-17水平无明显差异(P＞0.05).结论:在不同类型HBV感染者外周血中Treg/Th17细胞失衡,Treg/Th17细胞可能与HBV感染的状态有关.     

急性冠脉综合征患者Th17和Treg细胞的检测及意义

目的:探讨急性冠脉综合征患者Th17细胞和Treg细胞的变化及意义。方法:选取51例急性冠脉综合征患者,25例稳定性心绞痛(SA)患者,27例同期住院的健康对照者,分别采用流式细胞术、实时定量PCR和ELISA法检测外周血Th17细胞和Treg细胞百分率、关键核转录因子RORγt、STAT3和Foxp3 mRNA的表达以及血浆IL-17A和TGF-β1的浓度。结果:①ACS患者外周血中Th17细胞百分率、RORγt和STAT3 mRNA显著高于SA患者和对照组(P<0.01);②与SA组和对照组相比,ACS患者CD4+CD25+Foxp3+Treg和CD4+Foxp3+Treg细胞百分率,Foxp3 mRNA的表达以及血浆TGF-β1的浓度显著降低(P<0.01)。结论:ACS患者外周血中Th17/Treg失衡,Th17/Treg失衡可能与斑块的不稳定密切相关。     

Th17细胞和Treg细胞比例失衡在AS发展中作用的研究进展

在强制性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)发病机制的诸多假设中,免疫细胞格局失调被认为是一个重要机制。Th17细胞和Treg细胞是CD4+T细胞的两个亚群,对炎症分别起着促进和抑制的作用。诸多研究提示,Th17细胞和Treg细胞数量及相关细胞因子在AS患者外周血中与健康者有差别,其比例失衡在AS的发展中有重要作用,具体机制仍不清楚。本文介绍了近年来Th17和Treg细胞及其比例失衡在AS发展中作用的研究进展。     

Th17和 Treg 细胞及其相关细胞因子在结核性胸膜炎患者中的变化及意义

目的检测健康人和结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞和调节性T细胞（ Treg细胞）（ CD4＋CD25＋Foxp3＋）在CD4＋T细胞中的表达率以及IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β血清水平和患者胸水中的IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β水平,研究Th17细胞和调节性T细胞以及IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β在结核性胸膜炎发病机制中的作用。方法使用流式细胞术检测患者以及健康对照人群外周血Th17细胞和调节性T细胞表达率,ELSIA方法定量检测血清以及胸水中IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β水平,使用SPSS17．0统计学软件,分析健康人和结核性胸膜炎患者上述指标之间的差异以及各指标间的相关性。结果结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞表达率（1．02％±0．20％）明显高于健康人外周血Th17细胞表达率（0．89％±0．13％,P＝0．002＜0．05）;结核性胸膜炎患者外周血调节性T细胞表达率（4．64％±0．77％）明显低于健康人外周血调节性T细胞表达率（5．10％±0．90％,P＝0．000＜0．05）;结核性胸膜炎患者Th17/Treg细胞的比率（0．25±0．07）明显高于健康人（0．17±0．05,P＝0．000＜0．05）;结核性胸膜炎患者外周血IL-17（17．49 ng/L±3．94 ng/L）和IL-23（90．42 ng/L±23．06 ng/L）水平和胸水中IL-17（26．13 ng/L±5．98 ng/L）和IL-23（122．26 ng/L±31．71 ng/L）水平显著高于对照组外周血IL-17（14．45 ng/L±3．81 ng/L）和IL-23（77．55 ng/L±20．26 ng/L）的水平,P值分别为0．022、0．039、0．000、0．000;患者胸水中IL-17和IL-23浓度也显著高于本人血液中的IL-17和IL-23浓度,P值为0．000和0．000;患者胸水中IL-6的浓度（5．31 ng/L±0．74 ng/L）显著高于患者血液中IL-6的浓度（4．54 ng/L±1．02 ng/L）和对照组血液中IL-6的浓度（4．26 ng/L±0．91 ng/L）,P值分别为0．003和0．000,患者血液与对照组血液中IL-6的浓度没有显著差别（P＝0．274）;对照组外周血液TGF-β浓度（3．95 ng/L±0．79 ng/L）显著高于患者外周血液TGF-β浓度（3．32 ng/L±0．80 ng/L）及胸水中TGF-β浓度（3．12±0．77）,P值分别为0．005和0．000,患者血液及胸水中TGF-β水平之间没有显著差别（P＝0．365）;结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞的表达率与其Treg细胞在外周血的表达率呈显著负相关（r＝-0．684, P＝0．000＜0．05）,结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞的表达率与其外周血中的IL-17、IL-23、IL-6水平呈明显的正相关（r＝0．479,0．441,0．326,P＝0．013,0．015,0．017）;患者血液中TGF-β水平与Treg细胞在外周血的表达率呈明显的正相关（r＝0．297,P＝0．024）,与Th17细胞表达率没有明显相关性（r＝0．091,P＝0．659）。结论 Th17和Treg细胞可能参与了结核性胸膜炎的免疫病理机制,有关细胞因子的变化可能参与了Th17和Treg细胞变化的调控以及炎症反应, Th17和Treg细胞以及有关细胞因子的变化可能是结核性胸膜炎重要的免疫病理机制。     

MiR-155-5p介导Treg/Th17免疫失衡致变应性鼻炎机制研究

为探讨miR-155-5p异常表达对变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响及机制,将6周龄BALB/c小鼠随机平均分成6组:A.对照组(Control)、B.模型组(AR)、C.miR-155-5p空载对照组(AR+Vector)、D.miR-155-5p过表达组(AR+miR-155-5p)、E.miR-155-5p阴性对照组(AR+NC)、F.miR-155-5p沉默组(AR+抗miR-155-5p抗体)。采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)诱导建立AR小鼠模型,鼻腔内给予miR-155-5p过表达或沉默慢病毒进行干预。实验末对各组小鼠过敏症状进行评分,HE染色观察鼻黏膜组织病理学变化,real-time PCR、Western blotting检测鼻黏膜组织中miR-155-5p、Foxp3、RORγt的表达水平,ELISA检测血清中IgE及炎性因子TGF-β1、IL-10、IL-17A、IL-6表达,流式细胞术检测外周血Treg和Th17百分比。结果发现,与对照组比较,模型组小鼠鼻炎症状评分明显增加,Foxp3、RORγt mRNA及蛋白表达水平明显升高,血清IgE、IL-17A、IL-6及Th17百分比显著上升,TGF-β1、IL-10及Treg百分比明显降低。MiR-155-5p过表达加重模型组小鼠鼻炎症状,同时促进IgE及Th17相关细胞因子的表达,抑制Treg相关细胞因子的表达,而miR-155-5p沉默后Treg/Th17免疫失衡得到缓解,小鼠鼻炎症状评分显著下降。MiR-155-5p可以显著加重AR小鼠的鼻炎症状,可能与影响Foxp3、RORγt表达,调节Treg/Th17免疫平衡有关。     

类风湿性关节炎患者外周血Th17/Treg细胞比率失衡的研究

目的:观察类风湿性关节炎(RA)患者外周血Th17细胞与Foxp3+CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的平衡状态与疾病状态的关系,初步阐明Th17/Treg细胞比率失衡在RA发病机制中的作用和意义。方法:流式细胞术(FCM)检测RA患者和健康人外周血中Th17细胞和Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞的比率。结果:活动期RA患者外周血CD3+CD4+T细胞和Th17细胞的比率均明显高于健康对照组(P均0.05);而Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞的比率明显低于健康对照组(P0.05)。随疾病活动性的增加,Th17细胞表达增高(P0.05);而Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞表达降低,但无统计学意义(P0.05)。结论:RA患者外周血T细胞紊乱以CD4+T细胞的增加为主,Th17细胞比率的增加和Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞比率的降低所致的Th17/Treg细胞比率失衡,可能在RA的发生发展中起重要作用。     

骨髓间充质干细胞对重症哮喘患儿外周血Th17/Treg的免疫调节作用

 目的：探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）在体外对重度哮喘患儿外周血辅助性T细胞17（Th17）和CD4+ CD25+ 调节性T细胞（Treg）的免疫调节作用。方法：体外分离、培养和鉴定MSCs。MSCs经丝裂霉素处理后按不同比例（1∶1、1∶2、1∶10和1∶20）与哮喘患儿外周血T淋巴细胞（TLC）直接接触共培养,检测各组MSCs 对TLC的增殖调节作用。选取上述1∶2比例共培养体系和单独TLC培养体系,ELISA法分别检测Th17的效应分子白细胞介素17（IL-17）和Treg效应分子转化生长因子β（TGF-β）水平,qRT-PCR法检测转录因子维甲酸相关孤儿核受体（RORC）及叉头框蛋白3（Foxp3）mRNA表达水平。结果：MSCs可显著抑制重度哮喘患儿TLC增殖,且随着MSCs数量的增加,抑制作用增强。MSCs+TLC共培养组Th17转录因子RORC mRNA和效应因子IL-17表达较TLC组下降,同时TGF-β表达增高,而Treg细胞调控基因Foxp3 mRNA表达无明显改变。结论：MSCs在体外可能通过抑制Th17分化及IL-17的分泌,同时上调TGF-β的表达,进而有效改善哮喘患儿的Th17/Treg失衡状态。     

Metabolic control of the Treg/Th17 axis

The interplay of the immune system with other aspects of physiology is continually being revealed and in some cases studied in considerable mechanistic detail. A prime example is the influence of metabolic cues on immune responses. It is well appreciated that upon activation, T cells take on a metabolic profile profoundly distinct from that of their quiescent and anergic counterparts; however, a number of recent breakthroughs have greatly expanded our knowledge of how aspects of cellular metabolism can shape a T-cell response. Particularly important are findings that certain environmental cues can tilt the delicate balance between inflammation and immune tolerance by skewing T-cell fate decisions toward either the T-helper 17 (Th17) or T-regulatory (Treg) cell lineage. Recognizing the unappreciated immune-modifying potential of metabolic factors and particularly those involved in the generation of these functionally opposing T-cell subsets will likely add new and potent therapies to our repertoire for treating immune mediated pathologies. In this review, we summarize and discuss recent findings linking certain metabolic pathways, enzymes, and by-products to shifts in the balance between Th17 and Treg cell populations. These advances highlight numerous opportunities for immune modulation.     

DAPT 调节Treg / Th17 细胞免疫平衡抑制动脉粥样硬化

目的:观察Notch 信号抑制剂分泌酶抑制剂( DAPT)对动脉粥样硬化小鼠病理改变及Treg/ Th17 细胞免疫平衡的影响。方法:将24 只ApoE 基因敲除C57BL 小鼠随机分为空白组、模型组和DAPT 组。空白组用普通饲料饲养,模型组和DAPT 组用高脂饲料饲养。饲养5 周后,DAPT 组小鼠以100 mg/ (kg•d)皮下注射DAPT(溶于DMSO 中),其余两组皮下注射等量DMSO。5 周后,采用病理染色分析各组小鼠动脉病理改变,ELISA 检测血浆中IL-17 水平,采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏Treg/ Th17 细胞比例。结果:HE 染色结果显示,模型组有明显粥样斑块形成和泡沫细胞形成,DAPT 组动脉病变程度比粥样动脉硬化模型组明显减轻。正常组、模型组和DAPT 组各组血浆中IL-17 水平分别为(293.94±28.59)、(454.05±172.68)和(335.40±89.57)pg/ ml;DAPT 降低AS 小鼠血浆IL-17 水平(P<0.05)。空白组、模型组和DAPT 组各组小鼠Treg 细胞百分比分别为(3.0±0.56)%、(2.54±0.38)%和(4.73±0.64)%;DAPT 降低AS 小鼠血浆IL-17 水平(P<0.05)。空白组、模型组和DAPT 组各组小鼠Th17 细胞亚群分别为(3.46±0.23)%、(4.52±0.85)% 和(1.38±0.37)%。结论:DAPT 降低AS小鼠血浆IL-17 的水平,抑制Th17 细胞亚群分化,而促进Treg 细胞分化,通过改变Treg/ Th17 细胞疫平衡从而减轻动脉粥样硬化。