α—双炔失碳酯诱导人白血病K562细胞凋亡

目的：研究α－双炔先碳酯（Ａｎｏ）的抗肿瘤作用，方法：形态学研究分别应用光学显微镜和电子显微镜，细胞膜完整性检测用台盼蓝排除法，用流式细胞仪及琼脂糖凝电泳检测ＤＮＡ断裂，结果：Ａｎｏ２．５－５０μｍｏｌ．Ｌ＾－１处理Ｋ５６２细胞４８ｈ，细胞生长被明显抑制，５０μｍｏｌ．Ｌ＾－１时抑制率达６７％，细胞主要阻滞在Ｇ１期，处理后的细胞染色质凝缩，核断裂，体积缩小，呈典型的凋亡改变，Ｋ５６２细胞经Ａｎｏ５     

白藜芦醇诱导K562细胞凋亡过程中活性氧水平的改变

目的：探讨白藜芦醇对K562细胞的凋亡诱导效应和对K562细胞内活性氧水平的影响。方法：应用噻唑蓝(MTr)比色法、光镜、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡；FCM测定细胞内活性氧(ROS)水平。结果：白藜芦醇显著抑制K562细胞增殖，并呈现典型的凋亡形态学改变；DNA电泳可见梯状条带出现；FCM分析显示S期细胞数明显增多，出现S／G，期阻滞，ROS水平升高。结论：白藜芦醇诱导K562细胞凋亡与细胞内活性氧水平升高有关。     

东亚钳蝎毒诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的 研究东亚钳蝎毒（BMK）在体外诱导白血病细胞株K562凋亡的作用。方法 流式细胞仪检测细胞凋亡率，应用RT．PCR检测野生型p53基因的表达。结果 经BMK作用于细胞后，细胞的总凋亡率均有升高；RT—PCR检测提示经BMK作用后的K562细胞p53基因的表达上调。结论 BMK能诱导K562细胞凋亡，可能促进P53基因表达上调是其机制之一。     

一叶秋碱诱导K562细胞凋亡

目的研究一叶秋碱（ＳＥＣ）能否诱导Ｋ５６２细胞凋亡。方法细胞增殖抑制采用ＭＴＴ法;形态学研究采用电子和荧光显微镜;流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳检测ＤＮＡ断裂。结果ＳＥＣ１０～１６０ｍｇ·Ｌ－１呈剂量依赖性抑制Ｋ５６２细胞增殖（ｒ＝０９６１３,Ｐ＜００５）;ＳＥＣ作用４８ｈ后,电镜下可见细胞膜完整,核染色质边聚和凋亡小体;荧光显微镜下核染色质凝聚成点状结构;流式细胞仪出现凋亡峰;ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳可见“梯状”图谱。结论ＳＥＣ可诱导Ｋ５６２细胞调亡。     

去甲斑蝥素诱导细胞凋亡的研究进展

目的 综述了近年来去甲斑蝥素诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展。方法 以有代表性的论文为依据,进行分析、整理和归纳。结果与结论 去甲斑蝥素诱导细胞凋亡正在逐渐成为研究热点,其诱导细胞凋亡的具体机制还远未被研究透彻。随着研究的不断深入,去甲斑蝥素在治疗肿瘤的过程中,必将发挥更大的作用。     

榄香烯诱导人白血病K562细胞凋亡

目的研究榄香烯抗肿瘤的作用机制。方法用流式细胞仪和琼脂糖电泳检测DNA断裂,透射电镜观察超微结构变化。结果260μmol·L-1榄香烯孵育K562细胞6、12、24、48h后流式细胞仪检测到逐渐增强的凋亡峰,电泳发现明显的阶梯状条带,电镜观察到染色体聚集、凋亡小体。结论榄香烯能诱导K562细胞凋亡。     

白血病骨髓间充质干细胞对K562细胞凋亡的影响

目的采用血清饥饿法诱导K562细胞凋亡,比较K562细胞与人白血病骨髓间充质干细胞(LMSC)共培养前后,K562细胞凋亡的变化,并进一步探讨其可能涉及到的信号转导通路(PI3K/Akt/Bad),为临床靶向治疗白血病提供依据。方法采用膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)荧光标记法检测血清饥饿后和与LMSC共培养后K562细胞凋亡的变化。蛋白印迹法检测与LMSC共培养后及加入磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性阻断剂LY294002后,K562细胞中Akt、p-Akt、Bad、p-Bad蛋白的变化。结果 10%胎牛血清(FBS)培养时,K562细胞凋亡率为(4.87±0.09)%,FBS饥饿培养24h后,K562细胞凋亡率为(10.14±0.50)%,较10%FBS培养明显升高(P<0.05)。与LMSC共培养后,K562细胞凋亡率为(7.15±0.06)%,细胞凋亡率较FBS饥饿培养下降(P<0.05)。进一步蛋白印迹法检测发现,K562细胞在单独悬浮培养条件下,即有Akt、p-Akt、Bad、p-Bad蛋白的表达;与LMSC共培养后,p-Akt、p-Bad的表达量显著升高(P<0.05),在共培养体系中加入PI3K特异性抑制剂LY294002后,p-Akt、p-Bad的表达量明显下降(P<0.05);而3组间Akt、Bad蛋白的表达量未见明显变化(P>0.05)。结论①LMSC能够抑制血清饥饿诱导的K562细胞凋亡。②其涉及到的信号转导通路可能为PI3K/Akt/Bad。③PI3K/Akt/Bad可作为白血病靶向治疗的新的作用靶点。     

分枝石蕊多糖诱导人白血病K562细胞凋亡

目的：研究分枝石蕊多糖（CFP-1）是否能诱导K562细胞凋亡。方法：抑制细胞增殖的测定采用MTT法;用荧光显微镜和透射电镜观察细胞的形态学变化;采用琼脂糖凝胶电泳法观测DNA碎片;用流式细胞仪检测凋亡细胞数。结果：CFP-1（50-800mg/L）明显抑制K562细胞增殖,并且呈浓度依赖性,K562细胞与CFP-1300mg/L共同培养5d后,观察到典型的凋亡形态变化,电泳呈现梯形条带。结论：CFP-1诱导人白血病K562细胞凋亡。     

环孢菌素A诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的：本实验旨在观察环孢菌素A对K562细胞株凋亡的影响。方法：采用瑞氏染色、DNA电泳、流式细胞仪、TUNEL法观察环孢菌素A对K562细胞株凋亡的影响。结果：20μmol/L环孢菌素A作用24小时可诱导K562细胞凋亡，瑞氏染色呈瑞典型的凋亡形态学改变，DNA电泳呈“阶梯状”条带，流式细胞仪显示凋亡峰，细胞周期分析环孢菌素A可使K562细胞生长阻滞于G0－G1期，环孢菌素A处理组的凋亡率高于对照组（P＜0．01）。结论：环孢菌素A可诱导K562细胞株凋亡。     

葛根提取物诱导K562细胞凋亡

目的 探讨葛根提取物(PL)对慢性粒细胞自血病(CML)细胞株K562的凋亡诱导作用及其可能的分子机制.方法 以不同浓度(0、2.5、5、10和20 mg/ml)PL处理K562细胞,24 h后光镜下观察形态学改变,MTT法测定细胞增殖抑制,Hoechest 33258荧光染色及FITC-Annexin V/PI双染法检测凋亡率变化,半定量RT-PCR及Western blot方法检测Bcr/abl、Bcl-2、p53、Fas/FasL蛋白表达.结果 PL对K562细胞有明显的增殖抑制作用,并观察到典型的细胞凋亡形态变化,细胞凋亡率与浓度呈正相关;不同浓度PL干预后Bcr/abl基因在mRNA和蛋白水平呈浓度依赖性下调,而 Bcl-2基因则无明显变化;p53表达呈浓度依赖性上调;Fas/FasL表达无明显变化.结论 不同浓度PL能有效诱导K562细胞凋亡;其机制可能通过在mRNA和蛋白水平下调Bcr/abl基因,上调p53基因表达而实现.     

桂皮酸诱导K562细胞凋亡及其机制的初步研究

目的探讨桂皮酸对K562细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法应用MTT测出 IC50,应用免疫荧光显微镜,DNA Ladder,流式细胞仪,检测凋亡的发生,应用RT-PCR琼脂糖凝胶电泳检测bcl-2基因表达的差异。结果经MTT检测发现IC50为1 mmol／L,24 h后药物基本达到了较佳的效果,且免疫荧光显微镜、DNA Ladder、流式细胞仪检测均有凋亡的发生,RT-PCR结果显示,经桂皮酸处理24h后,bcl-2基因表达明显降低。结论1 mmol／L的桂皮酸作用24 h后可以引起K562 细胞发生凋亡,并且bcl-2基因表达下调是引起凋亡的原因之一。     

放线菌素D抑制沙尔威辛诱导K562细胞凋亡但不减弱其细胞毒性

目的：研究放线菌素D对沙尔威辛诱导K562细胞凋亡和细胞毒性的影响．方法：采用四氮唑盐(MTT)还原法测定药物对K562细胞的生长抑制作用;凋亡诱导作用采用荧光显微镜术、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术进行评价．结果：药物处理K562细胞24h后检测发现,放线菌素D能在一定程度上增强沙尔威辛6．25μmol/L的细胞毒性作用,平均生长抑制率由沙尔威辛单独应用时8％上升到联合应用放线菌素D0．04、0．4和4 μmol/L时的69％、71％和70％．在沙尔威辛浓度大于6．25μmol/L时,未见同样的增强作用,却也不减弱其抑制细胞生长的作用．这显示放线菌素D可以增强或至少不减弱沙尔威辛的细胞毒性作用．但荧光显微镜术、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术却表明,在同等条件下,放线菌素D抑制沙尔威辛诱导K562细胞凋亡．结论：放线菌素D可增强沙尔威辛适当浓度范围内的细胞毒性作用,但却抑制其诱导的白血病细胞凋亡,提示该过程中存在着除凋亡以外的其它细胞死亡方式。     

BCR-ABL酪氨酸激酶抑制剂STI571选择性诱导K562细胞凋亡

目的 探讨STI571抑制慢性髓性白血病（CML）细胞株增殖的机理及特异性。方法 选用非特异性的凋亡诱导剂阿霉素和BCR－ABL阴性的白血病细胞株MO7E作为对照，观察两种抑制剂作用下两种细胞形态学的改变和胞浆DNA电泳图的改变。结果 STI571可诱导K562细胞凋亡，而对MO7E细胞无致凋亡作用；阿霉素可诱导MO7E细胞凋亡，而对K562细胞无诱导凋亡作用。结论 STI571通过阻断BCR－ABL酪氨酸激酶活力，促进K562细胞凋亡达到抑制细胞增殖的目的，而对不表达BCR－ABL的细胞株无诱导凋亡的作用，提示STI571的作用具有一定的特异性。     

辛伐他汀诱导K562细胞凋亡过程中对线粒体膜电位的影响

目的:观察辛伐他汀诱导人红白血病K562细胞凋亡时线粒体膜电位(Δψm)的变化及其与时间的关系。方法:常规培养细胞24h,辛伐他汀(20μmol.L-1)处理K562细胞12、24、48、72h,观测细胞形态学改变;MTT法检测细胞增殖抑制情况;流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位改变,并与溶剂对照组比较。结果:与对照组比较,辛伐他汀作用K562细胞48h后细胞出现核固缩、核碎裂和凋亡小体等形态学改变;作用12、24、48、72h后细胞凋亡率分别增加(2.55±0.35)%、(6.1±0.35)%、(14.15±0.42)%、(30.70±0.65)%,K562细胞凋亡率随着药物作用时间延长而增加;细胞膜电位降低百分率分别为(0.7±0.24)%、(39.6±4.80)%、(24.4±2.45)%、(6.0±1.62)%,24h时膜电位降低百分率最大。结论:线粒体跨膜电位降低是凋亡发生的早期事件,辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的可能机制是通过使线粒体跨膜电位崩溃,从而导致细胞凋亡。     

去甲泽拉木醛通过调控细胞周期和自噬诱导的细胞凋亡抑制K562细胞生长的机制

目的研究去甲泽拉木醛(demethylzeylasteral,ZST93)在体外抑制慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞的增殖作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法以K562细胞为研究对象,采用CCK-8、细胞生长曲线和倒置显微镜检测ZST93对K562细胞增殖抑制作用;细胞转染和Western blot分析细胞自噬;PI染色、Annexin V-FITC/PI和流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果ZST93对K562细胞株的生长呈剂量和时间依赖性的抑制作用,IC₅₀值为2.59μmol·L^-1,使细胞周期阻滞于G₁期。自噬检测中发现ZST93可诱导GFP-LC3积累、LC3-Ⅰ转化为LC3-Ⅱ以及p62表达水平降低。ZST93通过调控自噬激活caspase-8,诱导外部凋亡信号通路,促使caspase-9、caspase-3和PARP剪切而被激活,针对caspase-3的抑制剂Z-DEVD-FMK能够降低ZST93诱导的K562细胞凋亡。结论ZST93可有效抑制K562细胞增殖,促进细胞周期阻滞、细胞凋亡和自噬激活,可能与自噬激活/caspase-8/caspase-3凋亡信号通路有关。     

去甲斑蝥素诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展

目的:综述近年来去甲斑蝥素诱导肿瘤细胞凋亡的研究状况。方法:查阅近几年的文献资料,分析研究情况。结果:细胞凋亡的发生机制非常复杂,有关肿瘤细胞凋亡疗法的探索还在继续,多数为动物实验及以体外培养的细胞系试验,将其安全应用于临床,还存在许多问题。结论:去甲斑蝥素在体内诱导肿瘤细胞凋亡的相关研究正在进一步深入进行。     

辛伐他汀通过内质网应激途径诱导K562细胞凋亡

探讨内质网应激在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡中的作用。采用荧光显微镜观察凋亡细胞的形态变化，AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率，激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ｃa²⁺浓度，RT-PCR检测葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78，GRP78)、钙蛋白酶(calpain)基因mRNA表达水平，Western blotting检测GRP78、 calpain、 caspase-3， -6， -7， -9， -12蛋白水平。结果显示，10、 20、 30 μmol·L^-1辛伐他汀(simvastatin，Sim)作用K562细胞72 h后，细胞出现典型的凋亡形态，凋亡率分别为12.41%、 19.08%和23.41%；细胞内Ca²⁺浓度增加，荧光强度分别为43、54和64；GRP78、calpain基因mRNA表达上调；calpain、 caspase-3， -6， -7， -9， -12蛋白剪切活化、GRP78蛋白表达增强。以上结果表明，内质网作为细胞凋亡的重要途径参与了辛伐他汀诱导K562细胞的凋亡。辛伐他汀将可能被用于临床治疗白血病。     

灯盏花素促进阿霉素诱导的K562细胞凋亡

目的观察灯盏花素对淋巴细胞增殖和阿霉素致肿瘤细胞死亡的影响。方法MTT法检测细胞增殖,Western blot检测p53/bcl-2表达,Histone/DNA ELISA和流式细胞仪检测细胞凋亡,ELISA检测细胞色素C释放,分光光度法检测caspase-8和caspase-3激活。结果灯盏花素能增强小鼠淋巴细胞对阿霉素的抵抗,但促进阿霉素引起的K562细胞生长抑制、细胞色素C释放、caspase-8和caspase-3激活,上调其p53/bcl-2表达比率,增加细胞凋亡。结论灯盏花素有增强阿霉素抗肿瘤作用,激活肿瘤细胞凋亡通路可能是其化疗增敏的主要机制。     

榄香烯诱导人白血病K562细胞凋亡及调控bcl—2蛋白的表达

目的：研究榄香烯的抗肿瘤作用机制。方法：抑制细胞增殖采用ＭＴＴ法,用荧光显微镜观察细胞的形态学变化,ＤＮＡ电泳,流式细胞仪技术检测ＤＮＡ断裂,用流式细胞仪检测ｂｃｌ－２蛋白的表达,结果：榄香烯６５－５２０μｍｏｌ．Ｌ＾－１明显抑制Ｋ５６２细胞增殖,ＩＣ５０（９５％可信区间）为２２０（１５２－３１９）μｍｏｌ．Ｌ＾－１电泳可见ＤＮＡ断裂形成的阶梯状条带,形态学上表现为染色体聚集,核固缩,断裂,而ｂｃ     

柔红霉素对K562细胞凋亡及FAKmRNA影响的研究

目的 研究柔红霉素诱导K562细胞增殖和凋亡情况,以及调节细胞周期和FAKmRNA基因,进一步探讨通过调控FAK表达,研究抗白血病的作用机制.方法 应用CCK8细胞增殖法,结合流式细胞仪检测法检测不同浓度柔红霉素在不同时间对K562细胞增殖和凋亡的影响,应用RT-PCR和Western blot技术检测不同浓度柔红霉素作用对K562细胞FAKmRNA以及蛋白表达水平的变化.结果 K562细胞的增殖抑制率随着柔红霉素浓度增加及作用时间延长逐渐升高,同一浓度不同时间组之间,或者同一时间不同浓度组之间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);柔红霉素能引起K562细胞凋亡,且随着药物浓度增加,凋亡率也逐渐增加,差异均有统计学意义(P<0.05);柔红霉素能引起K562细胞周期阻滞,多停留在S期;柔红霉素能引起K562细胞FAKmRNA表达和FAK蛋白表达水平的降低.结论 一定浓度的柔红霉素在体外可诱导细胞凋亡增加并抑制分裂期细胞的增殖,对细胞FAK基因和蛋白水平都有显著下调,发生凋亡的机制可能是通过抑制FAK基因表达.