荧光检测技术在蛋白酪氨酸激酶抑制剂高通量筛选中的应用

介绍荧光共振能量转移技术、荧光偏振免疫分析技术、荧光素酶-激酶检测技术和毛细管电泳-激光诱导荧光技术在酪氨酸激酶抑制剂高通量筛选模型中的应用情况。蛋白酪氨酸激酶与多种疾病的发生和发展密切相关,通过高通量筛选寻找其抑制剂已成为新药研发的热点之一。荧光检测技术因具有灵敏、易于检测、适于微量化和安全性高等优势,在药物的高通量筛选中被广泛使用。     

荧光共振能量转移技术及其在医药学中的应用

综述了荧光共振能量转移的原理、测量仪器、及其应用。     

用于蛋白质间相互作用研究的分析技术

概述近年来用于蛋白质间相互作用研究的分析技术,如酵母双杂交系统、荧光共振能量转移技术、表面等离子体共振技术、蛋白质芯片技术和生物信息学方法等,分别介绍其应用原理和特点,为蛋白质间相互作用研究及构建蛋白质相互作用图谱提供理论依据。     

构建以荧光共振能量转移技术为基础的生物学活性前列腺特异抗原检测器

目的　构建可在体外应用荧光共振能量转移(FRET)技术检测具有酶活性的前列腺特异抗原(PSA)的生物检测器。方法　构建原核细胞表达质粒,从而在大肠杆菌中表达在供体和受体荧光蛋白之间以PSA特异性识别氨基酸序列SSYYSG连接的融合蛋白。将纯化的融合蛋白依次用糜蛋白酶、胰蛋白酶、商品化的纯品PSA及精液切割,检测其荧光共振能量转移现象的变化。结果　糜蛋白酶、商品化的纯品PSA及精液切割均可有效抑制融合蛋白的FRET现象,并表现出对时间和剂量的依赖关系。而胰蛋白酶在90min内未见FRET抑制现象。结论　本研究构建的FRET检测器可成功检测具有酶活性的PSA ,为活性PSA的检测提供一种可选择的途径。     

分子信标在活细胞研究中的应用新进展

了解分子在空间和时间的相互作用是理解程的关键.分子信标是根据荧光共振能量转移原理设计的一种高灵敏性、高特异性检测工具.分子信标在疾病的诊断及治疗、病原体基因组诊断、药物的研制、筛选方面有着广阔的发展前景.本文综述了分子信标的作用原理、作用机制以及在活细胞研究方面的最新进展.     

基于CdTe量子点和溴化乙锭-DNA共振能量转移的核酸检测

目的:基于CdTe量子点和溴化乙锭-DNA共振能量转移的核酸定量检测。方法:通过EDC交联法制备了量子点-核酸探针,该探针与溴化乙锭-DNA通过DNA的互补配对形成荧光共振能量转移模型,借助这个模型进行核酸的定量检测。结果:该法对核酸目标链检测的线性范围为0.025-0.188μmol/L,其相关系数为0.997,最低定量限为0.025μmol/L。结论:基于CdTe量子点和溴化乙锭-DNA共振能量转移模型可以用于DNA的定量检测。     

嘌呤信号转导研究的新方法

ATP(adenosine 5’-triphophate)是一种嘌呤类物质,参与神经传递和神经调节。随着嘌呤、嘧啶受体亚家族研究的深入,ATP及其受体可能是多种疾病防治的潜在药物靶点。体外研究应用共振能量转移技术,指数级富集的配体系统进化技术及在体小干扰RNA技术可拓宽嘌呤信号转导研究的视野,也将推动其在疾病防治及药物筛选方面的研究进展。     

基于荧光共振能量转移技术的STAT3二聚化抑制剂筛选模型的建立

目的%20构建STAT3二聚化抑制剂筛选模型,为STAT3抑制剂筛选提供实验方法。方法%20分别构建pECFP-N1-STAT3和pEYFP-N1-STAT3的荧光报告载体,利用脂质体转染技术将二者共转入HEK-293T细胞,利用ECFP和EYFP两种荧光蛋白之间能量共振转移,检测磷酸化STAT3分子的二聚化水平,并检测Stattic对二聚化的影响。结果%20成功构建了pECFP-N1-STAT3和pEYFP-N1-STAT3的荧光报告载体。将两种荧光报告载体共转染HEK-293T细胞后,Western%20Blot%20检测结果显示STAT3以及p-STAT3的表达水平明显增加。以458nm波长激发ECFP,其发射波长可激发EYFP。加入STAT3二聚化抑制剂Stattic后,荧光强度降低,且呈现一定的剂量依赖性。结论%20基于荧光共振能量转移技术的STAT3二聚化抑制剂筛选模型构建成功。     

表面等离子体共振技术在药物研究中的应用

表面等离子共振(SPR)技术在药物研究领域的应用较为广泛,通过研究和探讨表面等离子体共振技术的原理,综述表面等离子体共振技术在生物医药研究方面的主要作用,在各种疾病检测中的应用以及该技术在未来的发展趋势与前景。     

荧光法在药物分析中的应用

作者简述荧光测定法的基本方法与影响因素,着重讨论四个方面的应用.酶免疫分析应用酶免疫分析技术进行药物和违禁药品(柯卡因、海洛因、吗啡等)分析已日趋广泛.在酶免疫分析中,药物的特异性抗体与酶结合形成非活性的酶-抗体-抗原复合物.用放射分析法或荧光法可测定酶活力,后一技术近来已被普遍采用.能量转移技术kosha几十年前指出,如果分子中具有相互重迭的二个产生荧光的部分,分子中的能量     

氨基酸分析新技术在药学研究中的应用

氨基酸分析技术是药物研究领域的重要课题,广泛应用于蛋白多肽类药物、中草药和生物样品中氨基酸的研究。液相色谱法、毛细管电泳法等以其独特的优势在氨基酸分析领域有着重要的作用,近红外光谱法也已被成功应用于氨基酸分析。综述近年来国内外氨基酸分析新技术在药学研究中的应用。     

激光诱导击穿光谱技术及其在药学中的应用

激光诱导击穿光谱技术(LIBS )基于原子发射光谱和激光等离子体发射光谱,是一种正在发展中的对样品中元素成分进行快速、现场定性定量检测的分析技术.本文介绍了LIBS的由来、基本原理、实验装置和实验方法特点,并结合典型示例,综述了LIBS在药学方面的应用.分析得出LIBS技术应用方便快捷,能快速辨识药品真伪且应用前景广泛...     

Raman spectroscopy for quantitative analysis of pharmaceutical solids

Raman spectroscopy is experiencing a surge in interest in solid-state pharmaceutical applications. It is rapid, non-destructive, no sample preparation is required and measurements can be made in aqueous environments. It can be used for not only qualitative, but also quantitative, analysis. In this paper, the use of Raman spectroscopy for quantitative analysis of pharmaceutical solids is reviewed. The technique has been used for chemical and physical form analysis. Physical form analysis has involved quantification of polymorphism, hydrates, the amorphous form and, recently, protein conformation. Initially, simple powder systems were quantified, although this has since extended to complex pharmaceutical formulations, including tablets, capsules, microspheres and suspensions. Formulations have also been analysed through packaging. The characteristics of the technique make it ideal for process monitoring and it has been used to quantify changes in-situ during processes such as wet granulation and batch crystallisation. The theoretical basis of quantitative Raman spectroscopy, common data analysis approaches, including multivariate analysis, and sources of error in quantitative analysis are also discussed.     

Recent advances in the application of transmission Raman spectroscopy to pharmaceutical analysis

This article reviews recent advances in transmission Raman spectroscopy and its applications, from the perspective of pharmaceutical analysis. The emerging concepts enable rapid non-invasive volumetric analysis of pharmaceutical formulations and could lead to many important applications in pharmaceutical settings, including quantitative bulk analysis of intact pharmaceutical tablets and capsules in quality and process control.     

定量核磁共振技术及其在药学领域中的应用进展

综述定量核磁共振技术的基本原理以及在新药研发中的应用进展。定量核磁共振作为一种定量分析方法,专属性强、准确快捷,可与其他定量方法相互补充,用于新药研发的诸多环节,如药品质量控制、候选药物纯度测定及药物代谢研究等,在药学领域有很好的应用前景。     

化学模式识别技术在药物分析中的应用与研究进展

介绍化学模式识别技术的一些基本概念和原理,以及在药物分析中的应用与研究进展。化学模式识别技术在色谱和光谱数据处理、药物成分分析、定性定量、药物质量评价和控制,中药材真伪优劣评价等方面有独特的优势。常见的化学模式识别技术,如主成分分析法、因子分析、聚类分析和判别法等越来越成为药物分析中不可或缺的工具之一。     

光纤传感联用技术在药物分析中的应用

以光纤传感常用的两大方法(紫外-可见吸收法和荧光法)为基础,介绍其原理,探讨与其联用技术的特点和在药物分析中国内外的新应用。综述了近年来国内外光纤传感联用溶出装置、流动注射、阀上实验室、芯片技术的特点及应用,为药物分析者提供实际工作的需求,展望了光纤传感在药物分析中,未来发展1+n的联用模式。     

超高效液相色谱在药物分析中的应用

超高效液相色谱（UPLC）是近年来发展的以超高速度、超高分离度、超高灵敏度为特点的新型液相色谱技术。其应用于复杂体系快速分析所表现出的优势,已引起了药物分析工作者的重视。本文对近年来超高效液相色谱在药物分析中的应用进行了综述。     

A new trend to determine biochemical parameters by quantitative FRET assays

Förster resonance energy transfer (FRET) has been widely used in biological and biomedical research because it can determine molecule or particle interactions within a range of 1–10 nm. The sensitivity and efficiency of FRET strongly depend on the distance between the FRET donor and acceptor. Historically, FRET assays have been used to quantitatively deduce molecular distances. However, another major potential application of the FRET assay has not been fully exploited, that is, the use of FRET signals to quantitatively describe molecular interactive events. In this review, we discuss the use of quantitative FRET assays for the determination of biochemical parameters, such as the protein interaction dissociation constant (K_d), enzymatic velocity (kcat) and Km. We also describe fluorescent microscopy-based quantitative FRET assays for protein interaction affinity determination in cells as well as fluorimeter-based quantitative FRET assays for protein interaction and enzymatic parameter determination in solution.     

Flow injection analysis: a new approach to pharmaceutical determinations

A review is presented in which the fundamental principles, instrumentation and practical aspects of flow injection analysis (FIA) are discussed. A particular focus is put on applications in pharmaceutical chemistry, which offers a wide scope to the new technique.