促红细胞生成素对蛛网膜下腔出血后早期脑保护作用的实验研究

目的 研究全身使用促红细胞生成素（EPO）对蛛网膜下腔出血（SAH）后的早期脑保护作用。方法 将30只雄性新西兰白兔随机等分为5组：①空白组；②对照组；③SAn组；④SAH＋安慰剂组；④SAH＋重组人促红细胞生成素（rHuEPO）组。采用枕大池一次注血法建立兔SAH模型。注血后48h取脑脊液，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测其中S-100B的含量．原位细胞凋亡检测法（TUNEL）检测皮质神经元凋亡情况。通过测定基底动脉血管横截面积判断有无脑血管痉挛（CVS）。结果SAH＋rHuEPO组脑脊液S-100B蛋白含量较SAH组和SAH＋安慰剂组显著性减少（P〈0．05）；TUNEL染色显示SAH＋rHuEPO组皮质神经元凋亡程度较SAH组和SAH＋安慰剂组显著性减轻（P〈0．05）；SAH＋rHuEPO组基底动脉横截面积较SAH组和SAH＋安慰剂组显著性增大（P〈0．01），但小于空白组和对照组（P〈0．01）。结论 早期全身使用rHuEPO能减少兔SAH模型的皮质神经元凋亡,降低脑脊液中的S-100B蛋白含量。并部分缓解CVS,具有明显的脑保护作用。     

早期大剂量caspase-3抑制剂对兔蛛网膜下腔出血后脑皮层神经元凋亡的影响

目的观察早期使用大剂量特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)抑制剂对兔蛛网膜下腔出血(SAH)后脑皮层神经元的凋亡的影响。方法枕大池二次注血法建立兔SAH模型。一次注血后第5天灌流固定法处死动物。用免疫组化及凋亡细胞原位末端标记技术(TUNEL)分别检测颞叶皮层神经元caspase-3的表达及凋亡情况。结果免疫组化显示SAH Z-DEVD-FMK(一种特异性caspase-3抑制剂)组皮层神经元caspase-3表达较SAH组及SAH 二甲基亚砜(DMSO,有机溶剂)组明显降低(P＜0．05)；TUNEL染色结合凋亡指数(AI)显示SAH组及SAH DMSO组较对照组存在明显皮层神经元凋亡(P＜0．01),而SAH Z-DEVD-FMK组皮层神经元凋亡较SAH组及SAH DMSO组明显减轻(P＜0．01)。结论早期使用特异性大剂量caspase-3抑制剂能减轻兔SAH后脑皮层神经元的凋亡,起到脑保护的作用。     

半胱氨酸蛋白酶-3抑制剂对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的作用

目的观察早期使用大剂量特异性半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）抑制剂对蛛网膜下腔出血（SAH）后脑血管痉挛（CVS）的作用。方法将20只雄性新西兰白兔随机等分为4组：①对照组：枕大池注人生理盐水；②SAH组；③SAH＋二甲基亚砜（DMSO）组：④SAH＋Z—DEVD—FMK（特异性Caspase-3抑制剂）组。采用枕大池2次注血法建立兔SAH模型。2次注血后第5天采用灌流固定法处死动物，留取基底动脉标本。用免疫组化及原位细胞凋亡检测法（TUNEL）分别检测基底动脉内皮细胞Caspase-3的表达及凋亡情况，并通过测定基底动脉血管横截面积判断有无CVS。结果免疫组化显示SAH＋Z—DEVD—FMK组基底动脉内皮细胞Caspase-3表达较SAH组及SAH＋DMSO组显著性降低（P〈0．05）。TUNEL染色示SAH＋Z—DEVD—FMK组基底动脉内皮细胞凋亡程度较SAH组及SAH＋DMSO组显著性减轻（P〈0．01）。基底动脉横截面积测定结果提示SAH组及SAH＋DMSO组较对照组显著性缩小（P〈0．01），而SAH＋Z—DEVD—FMK组较SAH组及SAH＋DMSO组显著性增大（P〈0.01）。结论早期使用大剂量Z—DEVD—FMK能减少兔SAH模型基底动脉内皮细胞的凋亡并减轻CVS。     

17β-雌二醇对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的影响及其机制

目的探讨17β-雌二醇（E₂）对蛛网膜下腔出血（SAH）引发的脑血管痉挛（CVS）的影响及其机制。方法雄性Wistar大鼠70只按随机数字表分为SAH组、SAH+E₂组、SAH+安慰剂组、空白组。采用枕大池二次注血法制作SAH模型。CVS的程度以第一次注血后7d的基底动脉平均横截面积评估。酶联免疫吸附法检测血清内皮型一氧化氮合酶（eNOS）及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）水平。原位细胞凋亡检测法检测颞叶神经元凋亡情况。结果与SAH组及SAH+安慰剂组相比,SAH+E₂组大鼠基底动脉横截面积明显增加,血清iNOS浓度明显降低,eNOS浓度明显升高,皮质神经元凋亡指数显著降低（P<0.01）。结论 E₂可有效缓解大鼠SAH后的CVS,并具有脑保护作用,其机制可能与E₂维持SAH后血管内皮功能的稳定有关。     

钾离子通道激动剂对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的作用

目的 观察早期使用不同剂量特异性钾离子通道激活剂对蛛网膜下腔出血（SAH）后脑血管痉挛（CVS）的作用。方法 将24只雄性新西兰白兔随机等分为4组：①对照组：枕大池注入生理盐水；②SAH组；③SAH＋小剂量钾离子通道激活剂Cromakalin组（0．1mg／kg）；④SAH＋大剂量Cromakalin组（0．3mg／kg）。采用枕大池注血法建立兔SAH模型，1h后开始静脉输注Cromakalin，每12h给药1次，共4次。注血后48h采用灌注固定法处死动物动物，留取基底动脉标本，通过测定基底动脉血管横截面积来评价CVS的程度。结果 基底动脉横截面积测定的结果提示SAH组较对照组明显缩小（P〈0．01），而SAH＋小剂量Cromakalin组及SAH＋大剂量Cromakalin组均较SAH组痉挛明显改善（P〈0．05）。结论 早期使用特异性钾离子通道激活剂Cromakalin能改善兔SAH模型的基底动脉血管痉挛。     

Guillain—Barre综合征患者脊液和血清S—100b蛋白含量的测定

目的 探讨脑脊液和血清S－100b蛋白含量对Guillain-Barre综合征（GBS）患者施万细胞损伤的评估价值。方法 采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法对50例GBS患者（重型组19例,轻型组31例）和22名正常人的脑脊液和血清S－100b蛋白含时量进行检测,同时行脑脊液细胞学检查。对GBS患者还进行了脑脊液和血清的动态检测。结果 （1）两组GBS患者脑脊液S－100b蛋白含量均高于对照组（均P＜0．01）,重型组与轻型组差异有显著意义（P＜0．01）;血清S－100b蛋白含量重型组患者高于轻型组和对照组（均P＜0．05）,轻型组与对照组差异无显著意义（P＞0．05）。（2）重型组患者脑脊液单核细胞比例明显高于轻型组和对照组（均P＜0．01）,轻型组与对照组间差异无显著意义（P＞0．05）。（3）GBS患者脑脊液S－100b蛋白含量随脑脊液单核细胞比例增减及病情的轻重而发生相应的变化。结论 脑脊液和血清S－100b蛋白含量与GBS患者病情严重程度相关。     

复方黄芪注射液对急性重型颅脑损伤患者血清NSE，MBP和S-100B含量的影响

目的观察复方黄芪注射液对急性重型颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶（NSE），髓鞘碱性蛋白（MBP）和S-100蛋白B（S-100B）含量的影响。方法按标准选取急性重型颅脑损伤患者196例，随机分成常规治疗组和黄芪治疗组两组。黄芪治疗组在常规治疗基础上加用复方黄芪注射液治疗。治疗前和治疗后不同时间点分别检测患者血清NES、MBP和S-100B浓度,并行GCS评分，3个月后行GOS评分；同时检测96例健康成人血清的NES、MBP和S-100B的浓度，然后对所得资料进行统计学分析。结果急性重型颅脑损伤患者血清的NES、MBP和S-100B的浓度均显著高于健康成年人（P〈0．05）。治疗后黄芪治疗组血清NSE、MBP和S-100B均低于常规治疗组，差异均有显著性意义（P〈0．05）。黄芪治疗组在入院时的GCS评分与常规治疗组比较无显著性差异（P〉0．05），但治疗后1周和2周其GCS评分显著高于常规治疗组（P〈0．05）。治疗3月后其GOS评分显著高于常规治疗组（P〉0．05）。结论黄芪能降低急性重型颅脑损伤患者血清NSE，MBP，S-100B含量，并能改善患者的预后。     

白藜芦醇对戊四氮致痫大鼠脑脊液、血清S100B蛋白的影响

目的研究白藜芦醇（Res）对戊四氮致痫大鼠脑脊液、血清S100B蛋白的影响。方法采用戊四氮（PTZ）腹腔注射建立慢性癫痫模型,造模成功后予以Res（15mg／kg·d）灌胃干预10d;采用酶联免疫吸附法测定脑脊液、血清S100B蛋白含量,海马标本行Nissl染色。结果经28d连续给药,18只大鼠符合Racine点燃标准,Res干预组大鼠痫性发作潜伏期明显延长,且发作时间明显低于癫痫模型组、二甲基亚砜组（P〈0．05）。海马Nissl染色提示Res干预对大鼠海马CAl、CA3区神经元有保护作用（P〈0．05）,而对齿状回保护作用不明显（P〉0．05）。Res干预组大鼠脑脊液、血清S100B蛋白含量低于癫痫模型组、二甲基亚砜组（P〈0．05）。结论Res降低PTZ致痫大鼠脑脊液、血清SIOOB蛋白含量,或许减缓癫痫发作脑损伤发挥神经保护作用。     

脑室系统出血纤溶治疗后脑脊液S-100B蛋白含量的变化及其意义

目的研究大鼠脑室系统出血纤溶治疗后脑脊液S-100B蛋白含量的变化及其意义。方法借助脑立体定向仪向大鼠脑室内注射30μl自身动脉血建立脑室出血动物模型;并分别行鞘内与脑室内注射尿激酶纤溶治疗,24h后通过解剖脑室观察脑室系统血凝块的变化,并通过酶联免疫吸附分析测定各组中脑脊液S-100B蛋白的含量。结果两治疗组脑室系统内血凝块较对照组明显减少,脑脊液S-100B含量较对照组明显降低(P0.05),但较正常组明显升高(P0.01)。脑脊液中S-100B含量鞘内治疗组明显低于脑室治疗组(P0.05)。结论大鼠脑室出血后经鞘内和脑室内注射尿激酶纤溶治疗均能加快血块溶解,降低脑脊液中S-100B蛋白含量。本结果提示脑脊液S-100B蛋白含量可能作为脑室内出血后判断脑损伤程度及疗效的一种标志物。     

Guillain-Barré综合征患者脑脊液和血清S-100b蛋白含量的测定

目的探讨脑脊液和血清S-100b蛋白含量对Guillain-Barre综合征(GBS)患者施万细胞损伤的评估价值.方法采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法对50例GBS患者(重型组19例,轻型组31例)和22名正常人的脑脊液和血清S-100 b蛋白含量进行检测,同时行脑脊液细胞学检查.对GBS患者还进行了脑脊液和血清的动态检测.结果 (1) 两组GBS患者脑脊液 S-100b蛋白含量均高于对照组(均P<0.01),重型组与轻型组差异亦有显著意义(P<0.01);血清S-100b蛋白含量重型组患者高于轻型组和对照组(均P<0.05),轻型组与对照组差异无显著意义(P＞0.05).(2)重型组患者脑脊液单核细胞比例明显高于轻型组和对照组(均P<0.01),轻型组与对照组间差异无显著意义(P＞0.05).(3)GBS患者脑脊液 S-100b蛋白含量随脑脊液单核细胞比例增减及病情的轻重而发生相应的变化.结论脑脊液和血清 S-100b蛋白含量与GBS患者病情严重程度相关.     

上胸段硬膜外阻滞对兔蛛网膜下腔出血后急性期脑血管痉挛的预防作用

目的建立兔的上胸段硬膜外阻滞（HTEB）模型和蛛网膜下腔出血（SAH）模型，探讨HTEB对SAH后脑血管痉挛（CVS）的预防作用。方法用切开置管法制备HTEB模型的新西兰兔30只，随机分为3组（n=10）：正常组、对照组（单纯SAH）和实验组（HTEB＋SAH）。采用枕大池穿刺一次注血法（0．5ml／kg）制成兔SAH模型。1d后用经颅多普勒检测兔基底动脉血流速度（Vm）。处死后取基底动脉，光镜下观察其形态学变化。结果与正常组相比，对照组和实验组的基底动脉Vm均明显升高（P〈0．05或〈0．01）；但实验组的基底动脉Vm则明显低于对照组（P〈0．05）。在光镜下，对照组基底动脉管壁收缩、管腔变窄，实验组变化程度轻于对照组。结论HTEB可以减轻兔SAH后急性CVS的程度。     

尼莫地平对大鼠蛛网膜下腔出血后认知障碍及海马Tau蛋白的影响

目的探讨尼莫地平（ND）对大鼠蛛网膜下腔出血（SAH）后认知功能障碍及海马Tau蛋白的影响。方法将40只SD大鼠随机分成正常组、假手术组、SAH组、ND组,每组10只;采用枕大池单次注血法建立SAH模型;造模后30 d进行Morris水迷宫试验评估大鼠认知功能,TUNEL法检测海马细胞凋亡,免疫组化染色法检测海马Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白表达。结果 1认知功能：SAH组和ND组潜伏期较正常组和假手术组明显延长（P〈0.05）,而ND组较SAH组明显缩短（P〈0.05）;SAH组和ND组平台象限游泳时间百分比较正常组和假手术组明显缩小（P〈0.05）,而ND组较SAH组明显增大（P〈0.05）。2海马病理改变：SAH组和ND组细胞凋亡较正常组和假手术组明显升高（P〈0.05）,而ND组较较SAH组明显减少（P〈0.05）;SAH组和ND组海马Tau蛋白及磷酸化Tau蛋白表达水平均明显高于正常组和假手术组（P〈0.05）,而ND组明显低于SAH组（P〈0.05）。结论 ND可改善大鼠SAH后认知功能障碍,可能与抑制细胞凋亡及降低海马Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白的表达有关。     

上胸段硬膜外阻滞与尼莫地平减轻兔脑血管痉挛作用的比较

目的比较上胸段硬膜外阻滞（HTEB）减轻兔蛛网膜下腔出血（SAH）后脑血管痉挛（CVS）的作用是否优于尼莫地平。方法切开置管法制备HTEB模型的新西兰兔60只,按随机数字表法随机分成4组（n=15）：假手术组、对照组）、HTEB治疗组和尼莫地平治疗组。＂枕大池二次注血法＂（0.5ml/kg）制成兔SAH模型,1、7和14d后用经颅多普勒检测基底动脉平均血流速度（Vm）。处死后取基底动脉,光镜下观察其形态学变化。结果与假手术组相比,对照组、HTEB治疗组和尼莫地平组的基底动脉Vm均明显升高（P〈0.01）;但HTEB治疗组和尼莫地平组的基底动脉Vm明显低于对照组（P〈0.05）,而两治疗组差异无统计学意义（P〉0.05）。光镜下,对照组基底动脉管壁增厚、管腔变窄;两治疗组管壁增厚不明显,管腔仍有狭小,较对照组明显改善;两治疗组之间血管壁变化无明显差异。结论 HTEB减轻兔SAH后CVS的程度与尼莫地平相当。     

基底动脉中Caspase3、8的表达与蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的关系

目的探讨天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3、8(Caspase3、8)在蛛网膜下腔出血(SAH)后在基底动脉中的表达及其与脑血管痉挛的关系。方法新西兰大白兔36只,随机分成对照组(n=6)和实验组(n=30),后者再随机分为SAH后1、3、5、7、10d等5个亚组,每亚组各6只。采用枕大池二次注血法建立SAH模型,应用免疫组化和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记法分别检测基底动脉内皮细胞Caspase3、8表达和凋亡。结果凋亡细胞在实验组SAH后第1天出现,第7天凋亡水平达到最高。实验组Caspase3、8表达水平明显高于与对照组(P<0.05)。Caspase3、8的表达在SAH后第1天就可观察致到,第5天和第7天出现强烈表达,第l0天表达明显减弱。结论本结果提示在兔脑血管痉挛的基底动脉中存在细胞凋亡;Caspase3、8可能参与了SAH后脑血管痉挛的发生和发展。     

大鼠蛛网膜下腔出血后基底动脉病理结构的变化

目的观察大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后基底动脉病理结构的变化。方法采用枕大池二次注血的方法建立SAH大鼠模型,对照组同法注等量的生理盐水。观察两组大鼠基底动脉血管腔内周长、血管壁厚及其超微结构的改变。结果对照组大鼠基底动脉腔内周长、血管壁厚及其超微结构正常,SAH组大鼠血管腔内周长明显缩短,血管壁增厚,内皮细胞变性、内弹力膜增生变性、平滑肌细胞变性。结论大鼠SAH后脑血管痉挛的病理基础是血管内皮细胞通透性增高,内弹力膜增厚,平滑肌细胞变性。     

罂粟碱明胶微球治疗脑血管痉挛的实验研究

目的 研制罂粟碱明胶微球，探索微球药物控释系统治疗脑血管痉挛的可行性。方法 采用改良的双相乳化冷凝聚合法制备明胶微球。并将其与盐酸罂粟碱复合。观察微球分散度、粒径及外观形态；计算微球包封率、载药率及体外释药特性。将自体动脉血分二次注入枕大池制备兔蛛网膜下腔出血（SAH）模型，随后将罂粟碱明胶微球注入该模型兔的枕大池；第7天时，观察并计算基底动脉血管横截面积。结果 微球大小均匀，平均直径（18．36±3．56）μm，载药量为28．0％，包封率为93-3％，体外14d内药物缓释91．0％。兔的基底动脉横截面积：正常组为（0．91±0．19）mm^2，SAH模型组为（0.3l±0．44）mm^2，明胶微球（不含罂粟碱）组为（0．21±0．05）mm^2，罂粟碱明胶微球组为（0．71±0．11）mm^2；罂粟碱明胶微球与SAH模型组和明胶微球组间有明显差异（P〈0．05）。结论 在蛛网膜下腔早期注入罂粟碱缓释明胶微球对实验性脑血管痉挛有防治作用。     

急性颅脑损伤后脑脊液抑制性氨基酸的变化及意义

目的探讨脑脊液中抑制性氨基酸的水平与颅脑损伤严重程度的关系。方法将71例急性颅脑损伤患者按入院时GCS评分分为9~15分组（37例）和3~8分组（34例）,伤后1、3、7 d采集脑脊液标本;以28例正常脑脊液标本作对照组。采用柱前衍生反相高效液相色谱紫外吸收检测法定量分析脑脊液标本中γ-氨基丁酸（GABA）、牛磺酸（Tau）和丙氨酸（Ala）浓度。结果颅脑损伤后脑脊液GABA、Tau浓度均高于对照组,GCS 3~8分组Tau浓度均明显高于GCS 9~15分组（P〈0.05）。颅脑损伤后1、7d,GCS 3~8分组GABA浓度高于GCS 9~15分组（P〈0.05）,伤后3 d时两组浓度无显著性差异（P〉0.05）。颅脑损伤后Ala浓度较对照组明显下降（P〈0.05）。结论脑脊液GABA、Tau在颅脑损伤后反应性增高提示其可能与颅脑损伤的严重程度相关。脑脊液Ala浓度在颅脑损伤后下降提示颅脑损伤后部分脑保护机制受到损害。     

实验性脑积水幼鼠脑脊液中一氧化氮及谷氨酸浓度的变化

目的探讨实验性脑积水幼鼠脑脊液中一氧化氮（NO）和谷氨酸（Glu）浓度的动态变化。方法SD幼鼠40只,随机平分为A、B、C实验组和对照组共4组,用显微外科技术向枕大池内注入25%白陶土混悬液,分别在注射后第2（A组）、3（B组）、4周（C组）后行MRI检测,鉴定脑积水形成情况;之后24h内取脑脊液,用硝酸还原酶法测NO浓度、高效液相色谱仪检测Glu浓度。对照组幼鼠于枕大池内注入生理盐水,用同样方法检测。结果实验组21只幼鼠成功诱发脑积水。与对照组相比,实验组脑脊液中NO和Glu浓度显著增加（P〈0.01）。结论脑脊液中高水平的NO和Glu可能参与了实验性脑积水幼鼠的病理损伤过程。     

大鼠颅脑损伤后损伤脑组织Nogo-A及其受体的表达变化

目的探讨Nogo—A及其受体（NgR）在大鼠颅脑损伤后损伤脑组织的表达变化。方法将136只SD大鼠按随机数字表法分成对照组、假损伤组、轻型颅脑损伤组、中型颅脑损伤组、重型颅脑损伤组,采用自制改良的Feeney’s自由落体装置制作大鼠颅脑损伤模型;伤后12h、24h、3d、7d和14d采用免疫组化染色法检测损伤脑组织中Nogo—A和NgR蛋白的表达。结果伤后各时间点,各型颅脑损伤组Nogo—A表达水平均明显高于假损伤组（P〈0.05）;重型、中型、轻型颅脑损伤组之间Nogo—A表达均有显著差异（P〈0．05）。而NgR的表达水平则在伤后3、7、14d各型颅脑损伤组才明显高于假损伤组（P〈0．05）,各损伤组之间也有统计学差异（P〈0．05）。结论Nogo—A和NgR在不同程度的损伤脑组织中表达差异显著,且有各自的表达规律。