姜黄素改变端粒酶活性对肝癌细胞体外增殖的影响

目的 观察姜黄素对人肝癌细胞株HepG2体外增殖和端粒酶活性的影响，为彰明其抗肝癌机制提供依据。方法 四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验检测细胞生长抑制率；流式细胞法检测细胞周期的分布；端粒片断重复扩增-酶联免疫吸附法（TRAP-ELISA）测定细胞端粒活性的变化；并用RT—PCR法检测细胞端粒酶hTERT—mRNA的表达。结果 姜黄素对HepG2细胞生长有显著的抑制作用，并呈明显的量效依赖性；不同浓度的姜黄素使G2／M期细胞比例明显增加，G1期／细胞比例明显降低；随姜黄素浓度的增加，HepG2细胞端粒酶活性依次下降；不同浓度提取物对HepG2细胞的hTERT—mRNA表达均有明显抑制作用，具有显著的量效关系。结论 姜黄素对HepG2细胞有明显的生长抑制作用，可能作用机制为诱导细胞周期G2／M期阻滞并抑制HepG2细胞端粒酶hTERT-mILNA的转录，从而降低端粒酶的活性。     

平阳霉素对人舌癌Tca8113细胞凋亡和端粒酶活性的影响

目的 探讨平阳霉素(PYM)处理人舌癌Tca8113细胞前后细胞增殖活性和凋亡以及人类端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白表达和端粒酶活性的改变，进一步揭示平阳霉素的抗癌机理并初步探讨端粒酶作为化疗敏感性指标的可行性。方法 以1／2血药峰值浓度的平阳霉素处理人舌癌Tca8113细胞12～72h，应用MTT法检测细胞增殖活性，光镜观察细胞凋亡变化特征并计算凋亡指数，用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白含量，同时行TRAP-PCR-ELIsA端粒酶活性检测。结果 Tca8113细胞在平阳霉素作用后，细胞增殖活性明显下降；出现明显的凋亡；hTERT蛋白表达下降的同时端粒酶活性也相应下降，而且四者都有一定的时间依赖性。结论 平阳霉素可使细胞增殖活性明显下降，诱导凋亡产生，下调hTERT蛋白表达及抑制端粒酶活性，且这四者有一定的相关性。     

转录因子Sp1和Sp3对JurkatT细胞端粒酶活性的调节作用

目的：探讨转录因子Sp1、Sp3对Jurkat T细胞端粒酶活性和粒酶逆转录酶（hTERT）的调节作用。方法：用脂质体将Sp1、Sp3表达载体转入JurkatT细胞，用Western blotting方法检测蛋白表达水平，用端粒酶PCR－ELISA法检测细胞端粒酶活性并用银染显示端粒酶活性梯度；用RT－PCR方法检测hTERT mRNA水平。结果：Sp1、Sp3载体转化36h的细胞Sp1、Sp3蛋白水平分别升高59．6％（P＜0．01）和36．8％（P＜0．05）；随着Sp1表达水平的增加，端粒酶活性和hTERT mRNA水平明显增加，增加率分别为38．5％（P＜0．05）和25．4％（P＜0．05）。而Sp3表达载体对端粒酶活性和hTERT mRNA水平无明显影响。结论：转录因子Sp1通过调节hTERT mRNA转录水平而调节Jurkat T细胞端粒酶活性，Sp3无此作用。     

人胰腺癌端粒酶亚单位的表达及其意义

目的：探讨端粒酶亚单位表达水平与人胰腺癌发生的关系，以及表达与端粒酶活性高低的相关性。方法：应用RT－PCR，DNA测序等技术研究端粒酶亚单位在胰腺癌中的表达情况，用ELISA法检测端粒酶活性。结果：24例胰腺癌标本中hTERT mRNA表达阳性率为83．3％，而癌旁组织为8．3％，两者有显著性差异。hTERT mRNA的表达是人端粒酶活性表达的关键性因素。hTR入TP1 mRNA在癌组织及癌旁组织中的表达无统计学差异，与端粒酶活性的表达无相关性。结论：端粒酶参与了胰腺癌的发生；hTERT mRNA表达水平的上调可能在胰腺癌形成过程中起重要作用。     

三氧化二砷和顺铂对大肠癌细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响(英文)

目的探讨三氧化二砷（As2O3）和顺铂（DDP）对人大肠癌细胞株CCL-187端粒酶活性及细胞凋亡的影响。方法大肠癌细胞株CCL-187与空白培养液，含1．0μmol／L As2O3、0．2μg／mL,DDP、1．0μmol／L As2O3，合用0．2μg/ml DDP的培养液共同孵育1～6d。MTT法计算细胞生长抑制率，电镜下观察细胞形态学变化，RT-PCR法检测细胞端粒酶hTERT-mRNA的表达，TRAP-PCR-ELISA法检测细胞端粒酶活性。结果1．0μmol／L As2O3能促进细胞分化，0．2μg/mL DDP和合用组均能诱导细胞凋亡，同时都下调端粒酶hTERT-mRNA的表达，降低端粒酶的活性，且具有时间依赖性。用药组与对照组相比差异有极显著性（P〈0．01）；合用组与单药组相比差异有极显著性（P〈0．01）。细胞生长抑制率与细胞端粒酶hTERT-mRNA的表达、端粒酶活性的下调呈负相关。细胞端粒酶hTERT-mRNA的表达与细胞端粒酶活性呈正相关。结论1．0μmol／LAs2O3对人大肠癌CCL-187细胞有促进分化的作用，0．2μg／mL DDP和合用组有诱导凋亡的作用，其机制可能是下调细胞端粒酶hTERT-mRNA的基因表达，从而抑制端粒酶的活性。     

化疗药物诱导肝癌细胞凋亡过程中端粒酶、端粒酶逆转录酶活性的变化

目的:探讨hTERT和端粒酶在化疗药物诱导凋亡过程中的作用及其意义。方法选择IC50剂量的三尖杉酯碱、长春新碱和足叶已甙处理肝癌细胞,采用TRAP法检测药物处理前后肝癌细胞端粒酶活性;应用流式细胞学检测细胞周期和细胞凋亡率;并利用Western Blotting检测药物作用后hTERT蛋白水平变化。结果三尖杉酯碱、长春新碱作用于肝癌细胞,明显降低hTERT蛋白表达水平,下调胞内端粒酶活性,并诱导细胞凋亡及周期阻滞;足叶已甙对肝癌细胞端粒酶活性及hTERT蛋白水平无明显抑制作用;化疗前后胞内hTERT水平和细胞凋亡率的变化呈明显负相关。结论化疗药物可能通过降低hTERT蛋白水平而下调了端粒酶活性,并诱导凋亡;hTERT蛋白水平可作为化疗敏感性指标。     

端粒酶与端粒酶催化亚单位在乳腺肿瘤组织中的表达及其意义

目的探讨端粒酶活性与端粒酶催化亚单位（hTERT）在乳腺肿瘤组织中的表达及其意义。方法采用银染-聚合酶链反应-酶免法（TRAP-PCR—ELISA）法检测48例乳腺癌组织标本、48例相应癌旁组织标本、19例良性乳腺肿瘤组织标本、21例正常乳腺组织标本的端粒酶活性，应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测hTERT的基因表达。结果端粒酶活性表达率和端粒酶催化亚单位hTERT基因表达率分别为：乳腺癌组为85．42％和89．58％；良性乳腺肿瘤组为42．11％和31．58％；相应癌旁组为14．58％和16．67％；正常乳腺组为0．00％，0．48％。乳腺癌组、良性乳腺肿瘤组、相应癌旁组及正常乳腺组之间均有非常显著性差异（P均〈0．001）；乳腺癌组端粒酶和端粒酶催化亚单位hTERT基因表达率与良性乳腺肿瘤组呈正相关（r分别为0．7982、0．6875，P均〈0．01）。结论端粒酶活性及其催化亚单位hTERT基因表达与乳腺肿瘤的形成和发展过程有关；端粒酶活性和端粒酶催化亚单位基因表达的检测，可作为乳腺肿瘤诊断、治疗、监测、预后的重要指标，具有较重要的价值。     

高三尖杉酯碱诱导HL60细胞端粒酶活性的变化

目的研究高三尖杉酯碱(Homohrringtonine,HHT)对HL60细胞端粒酶活性的影响.方法不同浓度HHT作用于HL60细胞12 h及0.02 mg/L HHT作用HL60细胞不同时间后,采用TRAP-PCR-ELISA检测HL60细胞端粒酶活性.结果HHT浓度增加至0.04 mg/L和0.05 mg/L时,HL60细胞端粒酶活性与0 mg/L组相比明显下降(P均＜0.05).0.02 mg/L HHT作用HL60细胞18 h、24 h、30 h后,HL60细胞端粒酶活性明显低于0 h组(P均＜0.05),且低于空白对照(P均＜0.05).结论HHT是一种有效的端粒酶活性抑制剂,其对端粒酶活性的抑制呈时间和浓度依赖性.     

尖锐湿疣组织中survivin mRNA和人端粒酶逆转录酶mRNA的表达及意义

survivin是近年发现的一种凋亡抑制基因，具有抑制细胞凋亡的作用，人端粒酶逆转录酶（hTERT）是端粒酶（telomerase）活性的限制性组分。尖锐湿疣（CA）增生快，治疗后常易复发，部分病例有恶变可能，这与CA存在细胞凋亡和端粒酶活性异常可能有关。而survivin在CA中表达情况未见报道，为研究CA组织中survivin mRNA和hTERT mRNA表达情况，我们应用逆转录-PCR（RT—PCR）和原位杂交法分别检测CA组织中survivin和hTERT mRNA的表达，并探讨他们在CA发病中的可能机制。     

胃癌组织端粒酶活性与催化亚基hTERT表达的关系

研究胃癌、胃黏膜肠化生及正常黏膜组织端粒酶活性与人端粒酶催化亚基(hTERT)表达的相关性及端粒酶激活在胃癌发生中的作用.方法:通过端粒重复序列扩增(TRAP)和逆转录聚合酶链反应(RT -PCR)方法测定3种胃癌细胞株、26例胃癌、10例胃黏膜肠化生和36例正常胃黏膜组织标本端粒酶活性和hTERT表达.结果:3种胃癌细胞株、24例胃癌组织有端粒酶活性;4例肠化生端粒酶活性较弱;36例正常胃黏膜标本未测到端粒酶活性.hTERT在26例胃癌组织、5例肠化胃黏膜中表达;正常胃黏膜无表达.端粒酶活性、hTERT表达与肿瘤的分期和病理分级无关.结论:hTERT在肿瘤形成的早期阶段表达,端粒酶的激活是胃癌形成的关键步骤.     

Expression of telomerase activity， telomerase RNA component and telomerase catalytic subunit gene in lung cancer

目的：探讨hTR、hTERT与端粒酶活性的表达是否与肺癌的发生发展有关,深入了解端粒酶基因对端粒酶活性的调控是在基因水平还是在转录水平。方法：采用TRAP-PCR和RT-PCR方法分别检测68例肺癌组织、68例癌旁组织端粒酶活性、端粒酶基因hTR和hTERT的表达。结果：68例肺癌组织中端粒酶阳性率79%,HTR阳性率为98.5％,HTERT阳性率为91.2%。68例癌旁组织中,无一例表达端粒酶阳性,且大多数癌旁组织均表达HTR(91.2%),而HTERT在68例癌旁组织中仅7例为阳性。结论：肺癌组织中表达高频率的端粒酶活性而癌旁组织无一例表达端粒酶阳性说明了端粒酶的活性是肺癌发生发展所必须的。与HTR相比,HTERT同端粒酶具有更市制一致性,其一致率为88.9％。HTR与HTERT可能是在转录后或翻译水平对端粒酶进行调控的。     

宫颈病变与端粒酶及端粒酶基因

宫颈癌是妇产科常见的恶性肿瘤之一,在宫颈癌的发生过程中,人乳头瘤病毒（HPV）感染是重要的环境致瘤因素,但由于HPV并不能单独致瘤,细胞内遗传性因素的改变可能具有更重要的意义。端粒酶基因是近年提出的遗传易感因素之一,本文就端粒酶基因相关研究进展进行综述。     

端粒酶在乳腺癌中的表达研究

目的探讨端粒酶活性检测在乳腺癌临床诊治中的意义。方法采用TRAP-assay法检测了人乳腺癌及癌旁正常组织中端粒酶活性。结果细胞株HeLa细胞、K562细胞端粒酶活性均为阳性表达，26例乳腺癌组织端粒酶活性均阳性表达(其中4例呈弱阳性)，24例癌旁组织中5例呈弱阳性，19例呈阴性，而lysis buffer及阴性对照均呈阴性反应。结论端粒酶在人乳腺癌的发生与发展中可能起着重要作用，提示端粒酶活性测定可用于乳腺癌的早期诊断。     

鼻咽癌端粒酶各组分基因表达与端粒酶活性的关系

目的明确鼻咽癌组织端粒酶各组分(hTR、TP1、hTERT)基因表达及其与端粒酶活性关系.方法采用RT-PCR和PCR-ELISA方法分别检测同一标本,包括鼻咽癌(NPC)组织、慢性鼻咽炎(CINE)组织端粒酶各组分基因表达和端粒酶活性.结果(1)43例NPC组织中,38例(88%)可检测到hTERTmRNA表达;16例CINE组织中均未能检测到hTERTmRNA表达,hTETRmRNA在NPC组织中表达显著高于CINE组织中hTERTmRNA的表达(P<0.05).(2)43例NPC组织中,39例(90.7%)表达hTR,38例(88%)表达TP1mRNA;16例CINE组织中,14例(87.5%)分别表达hTR和TP1mRNA.hTR或TP1mRNA在NPC和CINE组织中表达比较差异无显著意义(P>0.05).(3)NPC组织端粒酶活性(86%)显著高于CINE组织端粒酶的活性(0%)(P<0.05).(4)hTERTmRNA表达与端粒酶活性显著相关(P<0.05);而hTR或TP1mRNA的表达与端粒酶活性无关(P>0.05).(5)端粒酶各组分基因表达均与NPC临床分期和有无颈淋巴结转移无关(P>0.05).结论hTR和TP1mRNA在NPC和CINE组织中均高阳性率表达,并与端粒酶活性无关,hTERTmRNA仅在NPC组织中表达,与端粒酶活性呈高度一致性,提示hTERT在端粒酶活性调节中可能起决定性作用,对hTERTmRNA检测可以作为NPC临床诊断指标之一.     

益气解毒颗粒对大鼠鼻咽癌变中端粒酶和端粒酶RNA表达的影响

目的 :探讨中药复方益气解毒颗粒防治鼻咽癌的作用机制。方法 :用二亚硝基哌嗪 (DNP)诱导大鼠鼻咽癌动物模型 ,观察益气解毒颗粒对大鼠鼻咽癌变中病理形态改变以及端粒酶和端粒酶RNA表达的影响。定期分批处死大鼠 ,取鼻咽组织作病理学检测 ,用PCR -ELISA和NestedRT -PCR法检测大鼠鼻咽组织端粒酶的活性和端粒酶RNA的表达。结果 :灌服益气解毒颗粒大鼠鼻咽癌发癌率 0 (0 /5 ) ,明显低于盐水对照组 80 % (4/5 ) (包括原位癌和浸润癌 ) ;其端粒酶活性为 0 2 4± 0 11,也明显低于对照组 0 93± 0 2 3(P <0 .0 5 ) ;维甲酸组发病率为 0 (0 /5 ) ,端粒酶活性为 0 2 7± 0 13;各组端粒酶RNA均为阳性。维甲酸组大鼠于 2 15～ 30 8d间逐步死亡。结论 :益气解毒颗粒能阻断DNP诱导大鼠鼻咽癌变 ,且抑制鼻咽上皮癌变细胞端粒酶的激活     

不同肿瘤细胞株人端粒酶逆转录酶及端粒酶活性的检测及其意义

目的：检测5种肿瘤细胞株人端粒酶逆转录酶（hTERT）表达及端粒酶活性状态，为端粒酶抑制剂在肿瘤治疗学方面的应用研究提供理论基础。方法：分别用免疫细胞化学S-P法和TRAP-ELISA方法检测人宫颈癌细胞株HeLa、人乳腺癌细胞株MCF-7、人肝癌细胞株SMMC7721、人前列腺癌细胞株PC-3m和人骨肉瘤细胞株U2OS hTERT表达及端粒酶活性状态。 结果：HeLa细胞hTERT表达阳性率最高，为 (93.75±3.10) %；而U2OS阳性表达率最低,仅为(2.75±0.96) %，近于不表达；其他3种细胞MCF-7、SMMC7721和PC-3m的hTERT表达阳性率分别为(92.50±2.65)%、(53.75%±2.22)%和(23.50±2.89)%。与hTERT表达阳性率相似，HeLa细胞端粒酶活性最强，为(94.58±3.49)%；而U2OS 端粒酶活性近于阴性，为(3.02±0.43)%；其他3种细胞MCF-7、SMMC7721和PC-3m的端粒酶活性分别为 (73.90±4.50) %、(66.67±3.35) %和(50.62±1.96) %。结论：5种细胞系中hTERT表达及端粒酶活性状态差别很大，提示端粒酶抑制剂可适用于多数但并非所有恶性肿瘤的治疗学研究。     

益气解毒颗粒对大鼠鼻咽癌变中端粒酶和端粒酶RNA表达的影响

OBJECTIVE: Telomerase activation is a common event in malignant transformation, and is associated with tumorigenesis. This has been clarified in nasopharyngeal carcinoma. YIQIJIEDU powder (Chinese traditional medicine) is used to treated the patients with nasopharyngeal carcinoma (NPC) after radio-therapy and patients with precancerous lesion of NPC. We investigated whether YIQIJIEDU powder inhibits the telomerase activity in nasopharyngeal carcinogenesis. METHODS: Nasopharyngeal carcinomas in rats were induced by N, N' Dinitrosopiperazine (DNP), and some of them were treated with YIQIJIEDU powder. Telomerase and telomerase RNA in the rats' nasopharyngeal tissue were assayed by using PCR-ELISSA and Nested-PCR, and were pathologically diagnosed. RESULTS: YIQIJIEDU powder could inhibit telomerase activity and nasopharyngeal carcinogenesis in the nasopharyngeal tissue of the rats treated, but no telomerase RNA. CONCLUSION: The findings suggest that the anticancer effect of YIQIJIEDU powder links with their inhibitory effects on telomerase.