流式细胞仪检测D阴性混合物中弱D与D(Ⅵ)红细胞

通过流式细胞仪法得到的胎母出血(FMH)量的精确性高于Kleihana-Bekrte试验得到的。胎儿细胞主要为R1r或R2r表型细胞,每个细胞的抗原位点数(SPC)在9 900与16 000个之间。如果胎儿是弱D或不完全D(Ⅵ)表型,SPC则更少。将20份成人弱D红细胞样品与1％rr红细胞混合,将混合物染色,用2种不同的单克隆试剂FC检测。用了带Scatchard图分析的SOL-ELSA法检测每份样品的SPC。18份样品不能被识别,SPC<1 000。有2份样品可被识别,其SPC在1350与3000之间。分析7份D(Ⅵ)样品的红细胞,均未被识别,SPC都<1000。虽     

二株人单克隆抗-D的制备和分析

作者建立了2株分泌人单克隆抗-D的异种杂交瘤细胞株。从一男性献血者采集淋巴细胞,之前他已经数次D阳性红细胞免疫,最后一次加强免疫是约4年前。该淋巴细胞经EB病毒转化为能分泌抗-D的淋巴母细胞样细胞,将其与鼠浆细胞瘤细胞系(X63-Ag-653)融台,用微孔凝集试验进行筛选。异种杂交瘤细胞和转化细胞均经有限稀释法克隆。 用于检测的红细胞为3例R_1r型,即rr,r′r′和r″r″,在37℃进行间接抗人球蛋白试骏(IAGT),以     

自身抗体致Rh(D)鉴定错误1例分析

对自身抗体致R h(D)鉴定错误1例分析如下。1病历摘要男,80岁。临床诊断为骨髓增生异常综合征(M DS),Hb 30g/L,常规血型鉴定中发现初筛为R h(D)阴性,确证试验结果为弱D,送我血液中心进行交叉配血试验。我们在进行R h(D)阴性确证试验时,患者表现为弱D,但在进行交叉配血试验时,发现患者存在自身抗体,且直接抗球蛋白试验阳性。经过患者自身细胞的放散试验后,患者最终被鉴定为R h(D)阴性。1.1试剂用于R h(D)阴性确证的5批抗-D,分别来自加拿大(D om in ion),英国(M illipore),法国(D iagast)和德国(B iotest)和上海市血液生物医药有限责任公司,除上海市血液生物医药有限责任公司的产品为单IgG型,其余均为IgM和IgG混合型。用于直接抗球蛋白试验的抗-IgG/C 3d、抗-IgG、抗-C 3d均为上海市血液生物医药有限责任公司产品。1.2方法1.2.1自身细胞放散试验将患者细胞以大量生理盐水洗涤3次,末次洗涤后,将盐水除尽,取压积红细胞1份,与1份生理盐水混合,置56℃水浴中10 m in,每隔15 s振摇1次,使吸附在红细胞上的抗体充分放散。然后立...     

四川地区汉族人群Rh(D)变异体分子机制研究

目的了解四川汉族人群中Rh血型系统中D变异体的分布特点和分子机制。方法采用血型血清学方法对102份四川汉族献血者,61份本实验室临床标本做C、c、E、e表型鉴定,并用间接抗球蛋白试验从非亲缘随机献血者中筛选弱表达的D变异体(包括弱D和部分D),用吸收放散试验检测Del型。同时采用序列特异性引物-聚合酶链反应方法对RHD等位基因进行分型,对Rh(D)变异体标本进行杂合性鉴定,并采用测序法对疑难标本进行测序分析。结果血清学试验检出D抗原变异型52例,经分子生物学方法检测分析,弱D15RHD(G282D)型4例,弱D12RHD(G277E)型1例,弱DRHD(L320L)1例(型别未定),弱DRHD(G263R)1例(型别未定),部分DDVItypeⅢ型2例,DELRHD(K409K)型41例,DELRHD(M1I)型1例,此外发现新等位基因RHD(A237D)1例(基因序列号:GU998825)。RHD杂合性检测结果显示1例弱D15和9例DELRHD(K409K)型标本为RHD+/RHD+纯合子,其他均为RHD+/RHD-杂合型。结论四川地区汉族人群Rh(D)变异体有丰富的类型和不同分子机制.     

Rh(D)阴性血型血源的管理

编后语为了更好地维护医、患双方的权益,新的<医疗事故处理条例>已经颁布,并将于2002年9月1日正式实施.条例第十七条中"疑似输血引起不良后果,需要对血液进行封存保留的,医疗机构应当通知提供该血液的采供血机构派员到场";第三十三条(四)"无过错输血或感染造成不良后果的",不属医疗故事.鉴于目前司法实践中对输血感染病毒引发的损害赔偿案件一般适用举证责任倒置原则,本刊提请医疗机构和血液中心及各级血站,务必依照相关法律、法规,完善自己工作相应的规章制度,加强管理、有章可循,严格执行,并保存原始记录,以便为可能发生的医疗事故鉴定和司法举证提供依据. 青岛市红十字会中心血站于1998年开始对无偿献血者进行Rh(D)血型普查,至2000年底,在92546名无偿献血者中,查出Rh(D)阴性血型305人,占总普查人数的0.33%.其中男196人、女109人;A型103人,占33.77%;B型116人,占38.03%;O型50人,占16.39%;AB型36人,占11.80%.对于这支特殊的献血队伍,笔者实行了有效的合理化管理,为保障临床Rh(D)阴性血源的充足供应奠定了基础,其有效的管理措施如下.     

罕见Rh系统RzRz(CCDEE)表型献血者1例

我们近期在筛选献血者稀有血型时发现罕见Rh系统O型RzRz表型1例,现报道如下. 1标本来源 本中心2012年8月于街头接待的初次无偿献血者,男,30岁,汉族,辽宁人,采集其EDTA抗凝血5 mL进行检测. 2血型血清学试验 2.1试剂与仪器抗-D(德国Biotest,批号:2135070),抗-C(批号:934004)、抗-c(批号:945050)、抗-E(批号:953004)、抗-e(批号:963004)、抗-IgG(批号:704022-2)(美国Immucor),Rh分型卡(批号:50110.89.05)、筛选细胞(批号:06320.64.1)(瑞士达亚美),氯仿由北京化工厂提供,人源抗-c、抗-e、LISS液由本室自制.Galileo全自动血型仪(美国Immucor),KA-2200型离心机(日本久保田),孵育器、离心机(瑞士达亚美).     

Rh(D)阴性患者自身输血3例

Rh(D)阴性血型在我国属稀有血型 ,阴性率 0 .4 % [1] ,故Rh(D)阴性人在临床输血中不多见。本院自 2 0 0 0年 4月～ 2 0 0 1年 5月 ,对 3名Rh(D)阴性需手术的病人进行了自身输血 ,效果颇佳 ,现报告如下。1　病例资料患者 1,女 ,2 7岁 ,未婚 ,诊断为垂体腺瘤 ,住脑外科 ,待择期手术。需要备血 6 0 0ml手术中用 ,术前常规采血样定血型、交叉配血 ,确定为O型Rh(D)阴性后 ,建议其自身输血。首次采血 2 0 0ml,3d后先回输 2 0 0ml,再采血 4 0 0ml,如此循环 ,手术时备齐自体血 6 0 0ml。每袋血标明患者姓名、病房、床号、采血日期及血型 ,存放于…     

DEL型受血者输Rh(D)阳性血的可行性探讨

中国人群中98.4%的DEL型为1 227G>A突变,笔者总结DEL型的研究进展,对其接受Rh(D)阳性血液的可行性进行探讨。     

Rh(D)阴性血型15例家系调查分析

近几年来 ,我院对 3 665例患者进行常规性Rh(D )检测 ,对其中发现的 15例Rh(D)阴性者进行家系调查 ,旨在保障临床输血安全。一、对象与方法1.对象 :我院临床住院和门诊患者 3 665例 ,进行Rh(D)常规性检测 ,其中发现 15例阴性者。2 .方法及试剂 :抗 D采用盐水法 ,如盐水抗 D阴性者再采用凝聚胺法和抗球蛋白试验进行确证。抗C ,c ,E ,e采用抗球蛋白法。盐水抗 D和凝聚胺试剂均由Baso公司生产 ;抗C ,c ,E ,e由上海血液中心生产。广谱抗球蛋白由亚利生物工程有限公司生产。二、结果1.所有 3 665例患者常规检测Rh(D)血型 ,其中 15例为R…     

哈密地区Rh(D)阴性血供者的筛选与管理

输血是临床治疗疾病的重要手段之一，随着输血事业的不断发展，Rh(D)阴性血源的筛选与管理显得尤为重要。哈密是一个有51万人口的多民族聚居的地区，Rh(D)阴性者的输血管理工作有其特殊意义，现将本地区Rh(D)阴性血供者的筛选与管理做法报告如下。     

脉冲多普勒超声心动图评价冠心病左室舒张功能与核素心血池显像对比研究

本文应用脉冲式多普勒和核素心血池显像法对20例正常人和35例冠心病的左室舒张功能进行检测,尉其中的38例受检者进行了两项检查的对比研究,结果是:(一)多普勒超声心动图参数:1.E、E/A冠心病组显著低于对照组;2.冠心病组DC显著减慢,A_2—D和A_2—E′显著延长;3.TPE两组间无显著差。(二)核素心血池显像参数:1.PFR显著降低;2.RFF/AFF显著下降;3.EF明显降低;4.TPFR.ES—ERF两组间无显著差异。(三)两种方法相应参数对比分析:1.E,DC与PFR相关较好,前者r=0.75,P<0.0005,后者r=0.69,P<0.0005;2.E/A与RFF/AFF相关性良好,r=0.88,P<0.0005;3.TPE与ES—ERF相关性良好,r=0.64.P<0.0005;4.A_2—D,A_2E与TPRF呈低度相关(分别为r=0.36,r=0.35)。     

Rh(D)变异体的分子生物学研究

目的应用分子生物学方法鉴定3例患者Rh(D)变异体的基因型。方法 Rh血型血清学试验采用标准血清学实验方法;采用PCR-SSP法扩增RHD基因的启动子、外显子、内含子及RHCE基因;采用PCR-RFLP法鉴定RHD基因的杂合性。结果这3例患者血清学检测结果均为Rh(D)变异体。PCR-SSP结果表明3例均具有融合等位基因RHD*D-CE(3-6)-D,为RHD*DVI.3;RHD基因合子型为RHD+/RHD-杂合型;RHCE基因检测结果显示为RHCE*Ccee。3例患者RH基因型为CDVI IIIe/cde。结论基因分型对于Rh(D)变异体的鉴定是一种有效方法。     

石家庄地区初筛Rh(D)阴性献血者D变异体表型分析

目的研究石家庄地区初筛为Rh(D)阴性献血者中D变异体表型的分布。方法263份初筛为Rh(D)阴性的血样用间接抗球蛋白试验筛选并确认弱D/部分D表型,然后用吸收放散试验从间接抗球蛋白试验阴性的血样中筛选并确认Del表型,Rh因子用常规血清学试验检测。结果间接抗球蛋白试验共筛出弱D/部分D表型16份,其中RhCcee3份(18.75%)、RhCcEe1份(6.25%)和RhccEe12份(75.00%);吸收放散试验共筛出Del表型59份,其中RhCCee5份(8.47%)、RhCcee51份(86.44%)和RhCcEe3份(5.08%)。结论石家庄地区初筛为Rh(D)阴性献血者中,6.08%为弱D/部分D表型,22.43%为Del表型,且与RhCE表型有关。     

Rh(D)阴性无偿献血者Rh表型及Del检测结果与分析

目的明确Rh(D)阴性无偿献血者Rh表型及Del型的分布情况,充分掌握Rh(D)阴性献血者资料,为临床需求提供保障。方法采用盐水介质试管凝集法进行Rh(D)初筛,初筛阴性标本再用抗球蛋白法进行Rh(D)阴性确证试验。用生理盐水介质试管凝集法将Rh(D)确证实验阴性无偿献血者标本进行ABO血型和Rh表型检测。采用吸收放散试验对Rh(D)确证阴性无偿献血者标本进行Del型检测。结果筛检并确证1451份Rh(D)阴性无偿献血者,ABO血型分类结果包括A型449份、B型384份、AB型146份、O型472份。性别分类结果包括男性842份、女性609份。Rh(D)检测结果中40份弱D、395份Del阳性、1016份Del阴性。Rh表型中29份CcdEe型、439份Ccdee型、93份CCdee型、778份ccdee型、99份ccdEe型、5份ccdEE型、1份CcdEE型、2份CCdEE型、1份CCd--型、3份--dee型、1份--dEe型。结论本血站具有丰富的Rh(D)阴性无偿献血者,基本满足临床需求;对Rh(D)阴性献血者标本进一步开展Rh表型和Del检测,掌握Rh(D)阴性供血者信息资料,有助于保障Rh(D)阴性受血者的输血安全。     

谈谈抗体筛选在Rh(D)阴性供血者的重要性

不规则抗体是致迟发性溶血性输血反应的主要原因 ,因此 ,输血前应采用polybrene及抗人球方法配血 ,以检测不完全抗体。作者在对 -位供血者进行Rho(D)阴性确认实验时发现其血清中含有IgG性质的抗 -D抗体 ,现报告如下 :1　材料与方法1.1　试剂　三批不同批号的人源性抗 -D、IgM抗-D、IgM抗 -C、IgM抗 -c、IgM抗 -E、IgM抗 -e、筛选细胞、谱细胞均由上海血液中心提供。1.2　Rho(D)阴性确认实验及分型　将供血者红细胞三洗后配成 2 %红细胞盐水悬液 ,分别与IgM抗-D、IgM抗 -C、IgM抗 -c、IgM抗 -E、IgM抗 -e及三批人源性不同批号I…     

Rh(D)阴性不规则抗体阳性行盆腔包块切除1例分析

对Rh(D)阴性不规则抗体阳性行盆腔包块切除1例分析如下.1 病历摘要女,33岁.因间断下腹隐痛1个月余入院.体检:T36.6℃,BP 101/66 mm Hg,心、肺、腹检查无明显异常.妇检:阴道畅;宫颈轻度靡烂,无肥大;子宫平位,饱满,无明显压痛,子宫右后方可及一直径约4 cm囊性包块,活动度差,双侧附件区增厚,无明显压痛.阴道彩超示:右侧附件区囊性无回声区,输卵管积液可能.凝血功能正常,RBC 3.47×1012/L,Hb 104 g/L,PLT 135×109/L,血型:B型,Rh(D)阴性,不规则抗体阳性.     

华北地区汉族人群Rh(D)抗原弱表现型个体的分子遗传机制研究

目的探讨汉族人群非血缘关系Rh(D)抗原弱阳性个体的血清学表型及分子遗传机制。方法采用常规血清学技术从非血缘关系随机献血者中筛检Rh(D)抗原弱阳性个体(包括弱D型、部分D型),对其进行Rh D、C、c、E、e抗原表型的检测;采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法同时检测其RHD基因和RHCE基因;测序分析RHD基因全长编码区序列;同时通过特异性PCR技术测定其RHD合子型。结果血清学试验证实为D抗原弱阳性表型的有32例个体,占无关供者人群比率为0.015%,其中18例个体为弱D15型(845G>A),1例为弱D12型(830G>A),1例为携带DEL等位基因(1227G>A)的弱D型,8例为部分D表型中的DⅥⅢ型(RHD-CE(3-6)-D),1例为部分D表型中的DⅤa(Hus)(RHD-CE(5)-D),3例标本10个外显子检测均未见异常。Rh小因子检测有3种表型CcEe(4例)、Ccee(10例)、ccEe(18例),其血清学与分子生物学检测一致。RHD杂合性试验鉴定显示仅4例标本为纯合型RHD+/RHD+,其余为杂合型RHD+/RHD-。结论汉族人群D抗原弱阳性比率明显少于高加索人,汉族人群D弱表现型中,弱D15型频率最高;部分D的弱表现型中,DⅥⅢ型占主要比例。     

病例报告:抗E-抗体引起新生儿溶血(HDN)

一名例产前妇女,血型为OR1R1型,16周时血清中出现抗-E抗体。前两次怀孕的婴儿直接抗球蛋白试验(DAT)阳性,但不需输血,其配偶表型为R2r。在23周,病人的血清化学发光测试,为119％,表明有活性抗体。26周时对羊水进行分光光度测量分析,在预测新生儿溶血病(HDN)lileychart图的中间区,从羊水细胞提取的胎儿DNA表明胎儿为R1R2型,超声监测表明29周时胎儿发生了贫血,于是进行宫内输血(IUT)。输血前后     

Rh(D)阴性个体被Rh(D)抗原免疫后的淋巴细胞转化

本文研究了Rh(D)阴性个体被Rh(D)阳性红细胞免疫后的免疫回忆反应。研究对象为11例Rh(D)阴性妇女,既往妊娠至少有一次患新生儿溶血病的历史及分娩前后间接抗人球蛋白试验阳性。对照组为11例Rh(D)阴性但未被Rh(D)阳性红细胞免疫的男性,以及11例Rh(D)阳性而未被任何血型系统抗原免疫者。方法:静脉采血20ml,肝素抗凝,分离单个核细胞(主要为淋巴细胞),以RPMI 1640洗涤后作细胞培养,随后加入Rh(D)阳性或Rh(D)阴性的O型红细胞基质,再培养5天后加入~3H胸腺嘧啶核甙,继续培养18小时后,先以4℃生理盐水洗涤,再以10%冷三氯醋酸(TCA)处理,然后收集TCA,测定所培养细胞结合的~3H胸腺嘧啶核甙量,结果按Gold     

Rh(D)阴性孕产妇IgG抗体检测分析

目的了解Rh(D)阴性血型的孕妇和产妇Rh和ABO血型免疫抗体检出率以及导致新生儿溶血病情况。方法对51名Rh(D)阴性血型的孕妇和产妇进行Rh和ABO血型系统免疫抗体检测。结果总抗体检出率为37.26%,抗体效价为2～1024,发生新生儿溶血病7例。孕妇和产妇血中血型抗体效价和检出率与妊娠胎次、胎龄、输血史具有正相关性。孕妇IgG抗D效价>64时,发生新生儿黄疸及新生儿溶血病的危险增高,孕妇和产妇ABO血型与丈夫相合者Rh系统抗体产生率较不相和者高。结论Rh(D)阴性孕产妇定期进行抗体检测,有助于HDN的预防、诊断和治疗。