丹参改善肾脏纤维化的实验研究

目的探讨中药丹参对慢性肾功能不全肾脏纤维化的治疗作用。方法以大鼠5／6肾切除作为慢性肾功能不全动物模型,术后1周随机分为未治疗（A）组、丹参（B）组、苯那普利（C）组及假手术（D）组。于手术后第12周处死大鼠,留取血浆及肾组织。检测血肌酐（Scr）、尿肌酐（Ucr）及尿素氮（BUN）。用半定量法评价肾小球硬化指数及肾小管间质损害积分。结果与假手术组相比,手术三组在术后12周Scr及BUN均显著升高,Ccr均显著降低（P〈0．01）。与未处理组相比,丹参组和苯那普利组肾功能改善,肾小球硬化及间质纤维化程度减轻。结论丹参可以改善慢性肾功能不全大鼠肾功能及减轻肾组织纤维化。     

阿魏酸哌嗪对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的保护作用

目的研究阿魏酸哌嗪对单侧榆尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化是否有抑制作用及其肾脏保护作用的机制。方法75只SD大鼠设对照组（A组），结扎左侧输尿管（B组），分别给予阿魏酸哌嗪（C组），依那普利（D组），两者合用（E组）灌胃。术后第3、7和第14天测肾组织中羟脯氨酸含量，免疫组化测肾组织血管内皮生长因子（VEGF）、骨形成蛋白-7（BMP-7）、CD34表达（计算肾小管周围毛细血管指数，PCI）。结果各治疗组胶原含量明显减少，E组起效最早。UUO术后BMP-7、VEGF表达和PCI：B组逐渐减少，3个治疗组则明显上调。BMP-7、VEGF阳性面积和PCI与肾组织中胶原含量呈负相关（r=-0．68，-0．49，-0．52P〈0．01），VEGF阳性面积与PCI呈正相关（r=0．53，P〈0．01）。结论阿魏酸哌嗪通过上调肾组织中BMP-7、VEGF及PCI，抑制UUO大鼠肾间质纤维化，其疗效与依那普利相似，两药联合应用优于单独用药。     

全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质TGF—β1和α-SMA表达的影响

目的探讨全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质转化生长因子α（TGF—β1）、d平滑肌肌动蛋白（α—SMA）表达的影响。方法24只链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠随机分为治疗组（T），模型组（D）各12只，12只正常组（N），T组给予全反式维甲酸20mg／（kg·d）油溶液灌胃，D组和N组分别灌等量的植物油。4、8周每组各处死大鼠6只，测量尿微量白蛋白排泄率、肾重／体重、血肌酐（Scr）、血糖。肾组织PAS、Masson染色。免疫组化方法检测肾小管-间质TGF—β1、α—SMA表达。结果全反式维甲酸可减轻肾小球系膜区基质、细胞的增生，明显缓解肾小管的损伤，肾间质的基质减少。4周尿微量白蛋白的排泄率实验组低于模型组[（3．08±0．48）μg／minVS（3．35±0．56）μg／min，P〈0．05]，8周时尿微量白蛋白的排泄率明显低于同期模型组[（2．49±0．40）μg／minVS（4．53±0．87）μg／min，P〈0．01]；肾小管-间质TGF-β1、α—SMA表达明显低于模型组（P〈0．01）。结论全反式维甲酸可减轻糖尿病大鼠肾小管-间质的损害，减少尿蛋白。可能通过下调肾小管-间质TGF—β1表达、减少肾小管-间质肌成纤维细胞的数量，防止肾间质的纤维化，保护肾功能。     

参麦注射液对肾间质纤维化大鼠氧化应激作用研究

目的探讨参麦注射液在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化进程中的可能作用。方法成年SD大鼠54只,随机分为假手术组、模型组和参麦治疗组。假手术组仅完成开腹过程,不结扎输尿管;模型组和参麦治疗组行左侧输尿管结扎术,术后参麦治疗组每天腹腔注射参麦注射液3ml/(kg.d),假手术组与模型组则每天腹腔注射等量生理盐水。各组分别于实验的d7、d14、d21处死动物6只,取左肾组织行HE染色和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组化检查,并测定梗阻侧肾组织中SOD和MDA含量。结果与模型组比较,参麦治疗组肾小管间质病理改变明显减轻,肾间质α-SMA表达减少;肾组织中SOD活性增加,MDA含量下降。结论参麦注射液可通过减少氧化应激,减少肾间质α-SMA表达而抑制肾间质纤维化进程。     

难治性肾病肾小管功能损害及缬沙坦干预研究

目的探讨肾小管功能损害在难治性肾病（RNS）中的意义及缬沙坦干预治疗对其影响。方法RNS患者阳例及正常对照68例，79例RNS患者随机分为缬沙坦组和潘生丁组，在常规治疗的基础上，缬沙坦组加缬沙坦（80mg／d），潘生丁组加潘生丁（150mg／d）治疗12周。治疗前后采用ELISA法、生化方法及肾间质病理计量分析法分别检测全部患者肾小管功能（尿RBP、α1-MG、β2-MG、mAlb、NAG）和肾间质病理改变。结果所有RNS患者尿RBP、α1-MG、β2-MG、mAlb、NAG明显高于正常对照组（P〈0．01）。且与肾小管间质损害均呈正相关（r=0．436、0．626、0．499、0．668、0．657，P〈0．01）。干预结果显示缬沙坦组口服缬沙坦后尿系列蛋白均明显降低，而潘生丁组则无明显变化。结论RNS患者均有不同程度的肾间质损害及肾小管功能的损害，而肾小管功能损害与肾间质损害及肾小球损害程度呈正相关。及早对RNS进行ARB干预治疗可改善肾小管功能及延缓RNS的发展。     

吲哚美辛对5/6肾切除大鼠残余肾VEGF表达及MVD变化的影响

目的观察非甾体类抗炎药（NSAIDS）吲哚美辛对5／6肾切除大鼠残余肾血管内皮生长因子（VEGF）表达、微血管密度（MVD）变化的影响。方法以SD大鼠建立5／6肾切除肾衰模型,设假手术组、模型组、吲哚美辛组。灌药8周后观察残余肾肾组织病理病变,用免疫组化法检测肾组织VEGF表达及CD141阳性微血管密度并与肾小球硬化指数（GtS）、肾间质损伤指数（TtS）、血液尿素氮（BUN）及血清肌酐（cr）做相关分析。结果灌药8周后与模型组比较,吲哚关辛组TIS显著增高、肾间质VEGF、PTC密度显著减少（P〈0．05）,尿蛋白明显减轻（P〈0．05）,BUN、Cr、GIS、肾小球VEGF表达、GC密度较模型组无明显变化（P〉0．05）。灌药8周后肾脏VEGF表达与MVD呈正相关（P〈0．05）。结论吲哚美辛能降低5／6肾切除大鼠尿蛋白,但可明显降低残余肾肾间质VEGF表达及PTC密度并加重小管间质的损伤程度。     

己酮可可碱对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的保护作用及其机制

目的观察己酮可可碱(PTX)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾间质纤维化的作用及其机制。方法假手术组(A);模型组(B);依那普利组(C);PTX组(D);PTX和依那普利组(E)。术后第3、7和14天随机处死每组中的5只;测肾组织匀浆中羟脯氨酸浓度,计算胶原/肾重比;免疫组化技术测:CD34(计数肾小管周围毛细血管指数(PCI))、VEGF、BMP-7、TGF-β1、NF-κB、TIMP-1表达量并观察肾病理改变。结果B组胶原/肾重比高于另外4组。PCI B组第7天(D7)低于其他各组,VEGF表达D14 B组低于D和E组(P均<0.05)。B组D7 BMP-7表达低于3个治疗组;NF-κB:各时间点B组高于其他各组(P均<0.05),TGF-β1 D14 E组低于C组(P<0.05),TIMP-1表达D3和D7 B组高于3个治疗组(P均<0.05)。结论PTX通过维护肾间质微血管系统完整,改善肾间质血供;增加抗纤维化因子、抑制促纤维化因子的表达,减轻肾间质纤维化而保护肾脏,其疗效与依那普利相当。     

黄芪对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用研究

[目的]观察黄芪(AM)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致大鼠肾小管间质纤维化的影响,初步探讨其抗纤维化分子作用机制.[方法]48只SD大鼠随机分为假手术(Sham)、 UUO组和UUO 黄芪治疗组(AM)、 UUO 氯沙坦治疗组(ARB).在造模后7、14d处死动物,观察肾脏病理改变.采用免疫组化方法检测肾组织中纤连蛋白(FN)和胶原I (col I)表达.用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠FN mRNA和col I mRNA表达量.[结果]与假手术组相比,UUO术后大鼠肾脏病理损害进行性加重,FN和col I表达显著增高(P<0.05);AM治疗后可明显减轻UUO大鼠肾组织的肾小管损伤及肾间质纤维化,使UUO大鼠肾组织中高表达的FN和col I明显降低(P<0.05),与ARB作用相似(P>0.05).[结论]黄芪可能通过抑制肾小管间质细胞外基质积聚,减轻和改善UUO大鼠肾间质纤维化.     

参附对单侧尿路梗阻大鼠肾脏白介素18表达的影响

目的研究单侧尿路梗阻后大鼠肾脏白介素18（IL-18）的表达及中药参附对其的影响。方法采用单侧输尿管结扎（UUO）制造梗阻性肾病模型,将56只大鼠随机分为对照组（假手术组）、手术组（UUO组）和治疗组（UUO＋参附）,术后7、14d观察肾组织病理改变,检测肾组织中IL—18的表达。结果与对照组相比,手术组肾间质出现了明显的纤维化,IL-18的表达在术后第7天明显增加,第14天表达更强,与手术组相比,治疗组肾间质纤维化明显减轻,而治疗组与手术组同一时闽点相比较,IL-18的表达均有所降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论参附可以下调肾组织IL-18的表达,减轻肾小管-间质纤维化,发挥肾保护作用。     

发酵虫草菌粉Cs-4对UUO大鼠肾间质P-Smad2/3表达的影响

目的通过发酵虫草菌粉Cs-4干预UUO大鼠模型,动态观察TGF-β1、p-Smad2/3在梗阻侧肾组织中的表达。方法54只雄性SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组和Cs-4治疗组。于术后第7、14、21 d每组分别处死6只大鼠。HE、PAS、Masson染色观察肾间质纤维化指数,免疫组织化学染色法检测肾间质中COL-IV、TGF-β1和p-Smad2/3蛋白的表达,RT-PCR法检测肾组织TGF-β1mRNA的表达。结果Cs-4治疗组肾小管间质纤维化指数、肾间质COL-IV、TGF-β1和p-Smad2/3的蛋白表达以及肾组织TGF-β1的mRNA表达均较模型组明显降低。结论Cs-4能通过抑制小管间质中的细胞内TGF-β依赖性Smad信号通路延缓肾间质纤维化的进展。     

氯化汞诱发的急性肾小管坏死和内皮素-1

目的：氯化汞（ＨｇＣｌ２）具有损害肾近曲小管上皮细胞导致以急性肾小管坏死（ＡＴＮ）为特征的肾功能不全。强烈血管收缩物质内皮素－１（ＥＴ－１）可以使肾小球毛细血管血流量及肾小球滤过率降低,使这种肾功能不全模式的病态进一步恶化。本文采用内皮素受体拮抗剂（ＴＴＡ－３８６）进一步探讨了内皮素－１与氯化汞导致急性肾小管坏死发病之间的关系。方法：１）用雌性大白鼠２０只（每只重２００ｇ）分为两组（每组１０只）,分别用生理盐水和被生理盐水溶解了的内皮素受体拮抗剂即ＴＴＡ－３８６（６７μｇ／ｋｇ）作腹腔注射,每１…     

健脾益肾方对5／6肾切除大鼠肾组织纤维连接蛋白表达的影响

目的探讨健脾益肾方治疗慢性肾衰竭（CRF）及其抗肾纤维化的作用机制。方法将Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组（N组）、模型组（M组）、低剂量治疗组（L组）、高剂量治疗组（H组）,除N组外均行5／6肾切除手术制作CRF动物模型。于造模后一周开始干预,干预8周后取血清及肾组织标本,检测血清尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）及肾组织纤维连接蛋白（FN）的表达。结果N组肾小管间质区、上皮细胞基底膜、血管平滑肌区轻微表达;M组肾小管间质及小管均有强表达,肾小球系膜区有表达,与N组相比差异有统计学意义（P〈0．01）;L组及H组肾小管间质及小管中等强度表达,与N组相比表达显著增多（P〈0．01）,与M组相比表达显著降低（P〈0．01）;H组与L组相比表达减少（P〈0．05）。结论健脾益肾方可以降低CRF大鼠血清BUN和Cr,抑制肾脏组织FN的表达,表明健脾益肾方是治疗CRF的有效方剂,其机制可能与抑制大鼠肾组织内FN表达,从而延缓肾纤维化有关。     

霉酚酸酯对UUO大鼠肾间质MCP-1和TGF-β1表达的影响

目的通过霉酚酸酯（MMF）干预UUO大鼠模型，动态观察单核细胞趋化因子（MCP-1）、TGF-β1在梗阻侧肾组织中的表达。方法54只雄性SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组和MMF治疗组。于术后第7天、14天、21天每组分别处死6只大鼠。免疫组织化学染色观察MCP-1和TGF-β1在肾间质中的表达。结果在正常肾间质中，MCP-1和TGF-β1均只有少量表达，两者在UUO模型组中的表达均显著增高，MMF治疗组各时间点与相应UUO模型组比均有不同程度降低。结论MMF能部分延缓UUO模型肾间质纤维化的进展，可能与其早期下调MCP-1在肾间质中的表达抑制炎症反应，进而抑制致纤维化的关键因子TGF-β1表达有关。     

急性间质性肾炎14例临床分析

急性间质性肾炎（AIN）是肾小管及肾间质的急性炎性疾病，是由多种病因所致的一组临床病理综合征，表现为急性肾功能衰竭（ARF）、肾间质肿胀和炎性细胞浸润，无明显的肾小球和肾血管病变。现将14例AIN的临床、病理及转归分析如下。     

桂枝茯苓胶囊对肾小管间质纤维化大鼠骨调素和CD44表达的影响

目的观察桂枝茯苓胶囊对小管间质纤维化（TIF）大鼠OPN和CD44表达的影响。方法利用SD大鼠行单侧输尿管梗阻（UUO）诱导建立TIF动物模型，72只SD大鼠随机分为假手术组（24只）、模型组（24只）和预防组（24只）。预防组接受桂枝茯苓胶囊管理（500mg·k^-1·d^-1），模型组、假手术组则以等体积生理盐水。3组分别于实验第7、14和21天3个时间点收获动物各8只。检测上述时间点各组动物肾脏小管损伤、间质炎症细胞浸润和纤维化等肾脏组织病理学变化特点。采用免疫组化观察和评价OPN／CD44在梗阻肾中表达以及桂枝茯苓胶囊对OPN／CD44表达的影响。结果梗阻肾在上述三个时间点小管间质损伤呈进行性加重。免疫组化结果显示OPN／CD44在TIF中呈高表达，且随着TIF的进展不断上升。桂枝茯苓胶囊可以降低OPN／CD44在TIF中的表达，与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。OPN／CD44在TIF中的表达同小管间质损伤程度呈正相关（r=0．78，0．77．P〈0．01）。结论桂枝茯苓胶囊部分通过下调OPN／CD44在梗阻肾中的表达，起到延缓小管间质纤维化进展的作用。     

超大剂量氯沙坦对肾间质纤维化中TGF-β1表达的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦对大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾间质纤维化中TGF-β1的影响,探讨超大剂量能否优于常规剂量起到更多的肾脏保护作用。方法建立大鼠UUO模型术后3d常规剂量治疗组、超大剂量治疗组、手术组和假手术组。药物干预组分别每天给予氯沙坦50mg.kg-1、氯沙坦500mg·kg-1灌胃,假手术组及手术组每天给予同体积生理盐水灌胃。观察模型第7、14和21d鼠尾袖带血压(TCP)、肾小管损害百分比、肾间质纤维化程度(%INT)和转化生长因子(TGF)-β1mRNA的表达。结果随着梗阻时间延长,UUO组TCP逐渐增高、%INT、肾小管损害程度显著增加,TGF-β1 mRNA含量明显增加,与其余各组相比有显著差异(p<0.05)。结论超大剂量氯沙坦组相对与常规剂量,能更有效的控制血压,减轻肾小管损害和肾间质纤维化,显著抑制TGF-β1 mRNA表达,表明超大剂量氯沙坦能更充分地通过抑制TGF-β1的表达,减轻肾间质纤维化。     

自发性高血压大鼠CD2相关蛋白与肾脏纤维化的关系

目的 观察自发性高血压大鼠(SHR)肾小球及肾小管间质CD2相关蛋白(CD2AP)水平和肾脏纤维化之间的关系.方法 22只16周龄雄性SHR随机分成干预组和对照组,每组各11只.干预组给予依普利酮(每日100mg/kg).观察10周,检测血压、血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、肾组织CD2AP和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白水平.行肾组织HE和Masson染色,检测病理切片并进行评分.结果 对照组血压高于干预组(P<0.01),干预组.肾小球胶原纤维含量和肾小管间质评分低于对照组(P<0.05),干预组TGF-β1和CD2AP蛋白水平低于对照组(P<0.01).大鼠肾小球与肾小管间质CD2AP蛋白水平和BUN、Cr、uA无相关性(P>0.05),和相应的TGF-β1蛋白水平、肾小球胶原纤维含量与肾小管间质评分呈负相关(r值分别为-0.894,-0.921,-0.798和-0.532,P<0.01).结论 16周龄SHR肾小球和肾小管间质CD2AP蛋白水平降低,可能导致肾脏纤维化.     

PAX2和α-SMA在肾小管间质纤维化大鼠肾脏中的表达及意义

[目的]通过检测全长配对金基因2(aired box 2,PAX2)和平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,SMA)在单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾脏组织中的表达,初步探讨PAX2在肾小管间质纤维化中的作用机制.[方法]24只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为模型组和对照组,每组12只.模型组在无菌条件下左侧背部肋下切口行左侧输尿管结扎术,对照组只探及肾包膜,不结扎输尿管.于造模后d 21处死大鼠,检测血清肌酐(serum creatinine,Scr)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平.取左侧肾脏组织做HE和Masson染色检测肾脏病理改变,计算肾小管闻质纤维化指数.采用实时荧光定量PCR方法检测肾组织中PAX2 mRNA表达,免疫组织化学方法检测肾脏组织PAX2及α-SMA蛋白的表达.[结果]与假手术组比较,模型组大鼠BUN、Scr水平显著增高(P<0.01);肾小管间质纤维化指数显著增高(P<0.01).模型组大鼠肾小管上皮细胞PAX2的蛋白以及肾间质α-SMA的蛋白表达均较对照组显著增高(P<0.01).对照组大鼠肾组织中仅有少量PAX2mRNA表达,模型组PAX2的mRNA表达显著增高(P<0.01).直线相关分析显示:模型组大鼠肾小管上皮细胞PAX2蛋白表达与肾间质α-SMA表达呈显著正相关(r=0.882,P<0.05);与肾小管间质纤维化指数BUN、Scr分别均呈显著正相关(r=0.899,0.731,0.933均P<0.05).[结论]在UUO大鼠模型中,肾脏组织PAX2和α-SMA表达均显著增加.PAX2可能参与肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化,使间质中肌成纤维细胞的数量增多,引起细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM)积聚增加,导致了小管肾间质纤维化的发生发展.     

他克莫司预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤中Bcl2蛋白表达的影响

目的探讨他克莫司预处理后对大鼠肾缺血再灌注损伤中Bcl₂蛋白表达的影响。方法选用Wistar大鼠60只,随机分为三组:假手术组、对照组、实验组,每组20只。假手术组仅开腹、分离肾动脉,不阻断血流;对照组于缺血前6h经尾静脉注射生理盐水1ml;实验组于缺血前6h经尾静脉注射他克莫司（0.5mg/kg）。到达设定的不同灌注时间点取血及肾脏标本,全自动生化分析仪测定血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）;免疫组化检测肾组织B细胞淋巴瘤（Bcl-2）;HE染色分析肾组织病理损伤程度。结果在再灌注2h、6h和24h时,实验组的Cr、BUN水平显著低于对照组（p<0.05）,而Bcl-2免疫反应强度显著高于对照组（p<0.05）。HE染色光镜下对照组的肾小管及肾小管上皮细胞病变程度重;实验组的肾小管及肾小管上皮细胞病变程度明显减轻;假手术组肾小管及肾小管上皮细胞未见明显改变。结论小剂量他克莫司预处理可以减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,可能是通过增加肾脏bcl-2蛋白的表达,达到改善大鼠肾缺血再灌注损伤。     

黄芪对单侧输尿管梗阻大鼠肝细胞生长因子和转化生长因子β1的调控

目的动态观察黄芪(AM)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致肾小管间质纤维化大鼠肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和模型+黄芪治疗组。在造模后第3、7和14天处死动物,观察肾脏病理改变。采用免疫组化方法检测肾组织中TGF-β1、HGF表达。用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠HGF mRNA和TGF-β1mRNA表达量。用Western blot检测大鼠HGF和TGF-β1蛋白表达量。结果与假手术组相比,各时间点的模型组大鼠肾脏病理损害进行性加重,黄芪治疗后可明显减轻模型组大鼠的肾小管损伤及肾间质纤维化程度(P<0.05)。随着梗阻时间的延长,模型组大鼠肾组织TGF-β1表达逐渐增加;HGF表达呈现先升高后下降的表达规律,在UUO术后第7天达高峰,此后大幅回落;与模型组各对应时间点比较,黄芪治疗后可使肾组织中的HGF表达显著增高,TGF-β1表达明显降低(P<0.05)。结论黄芪可能通过诱导HGF表达上调及抑制TGF-β1表达,减轻肾间质纤维化。