IFNα2b 诱导MxA蛋白的表达及其抗病毒活性研究

目的　研究MxA抗病毒蛋白的表达及其活性。方法　用IFNα2b处理WI - 38细胞或人外周血单核细胞 12h或 2 4h ,并用Western -blot法或FACS法分别进行MxA蛋白表达的检测及微量细胞病变抑制法对重组的MxA和IFNα2b进行抗病毒效应实验。结果　 (1)低浓度IFNα2b(>1IU/ml)可诱导WI- 38细胞表达MxA ;(2 ) 10ng/mlMxA可以抵抗 2 0TCID50 的HSV -I、Polio .V感染Vero细胞 ,抵抗 2 0 0TCID50 的VSV感染Wish细胞。结论　MxA是由I型干扰素特异诱导产生的 ,且具有广谱的直接抗病毒活性。     

HIV-lenv,gag与IFNα-2b融合蛋白的细胞免疫

目的　将编码艾滋病病毒 (HIV -1)外膜蛋白env、核心蛋白gag与编码干扰素 (IFNα -2b)基因分别插入pSFJ16与pSFJ3 8真核表达载体 ,观察表达产物诱导机体产生细胞免疫的变化规律。方法　利用分子克隆技术构建重组质粒 ,经脂质体转染与野生型痘病毒在Cos -7细胞内同源重组 ,筛选、纯化、获得重组痘苗病毒vJ16env/IFNα -2b和vJ3 8gag/IFNα -2b。免疫小鼠后 ,检测小鼠外周血与脾淋巴细胞对ConA及Lps的反应性 ,用流式细胞仪测定小鼠脾细胞CD4+ ,CD8+ 细胞计数。结果　外周血与脾淋巴细胞对ConA ,Lps的反应性 ,实验组与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。CD4+ 及T淋巴细胞与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。CD8+ T淋巴细胞与对照组比较差异无显著性 ,但呈增高趋势。结论　重组痘苗病毒能诱导小鼠产生较强的细胞免疫。重组痘苗病毒能在体外与HIV -1env和HIV -1gag阳性血清发生特异性反应 ,具有免疫原性和免疫反应性。     

紫杉醇联合IFNα-2b明显增强对K652细胞的诱导凋亡作用

紫杉醇是一种作用于微管的广谱天然抗癌药,目前主要用于治疗实体瘤,能缓解多种进展期实体瘤。但用于治疗髓系白血病效果较差。我们通过实验发现紫杉醇联合INFα-2b对K652细胞的诱导凋亡及杀伤作用均明显增强。实验的主要方法为:(1)将K562细胞浓度调为2×105/ml后接种于96孔板上,每孔100μl,分为4组,空白对照组不加药物,另设一组单独加入100u/ml INFα-2b作为干扰素INFα-2b对照组,均设4个复孔,A组加入浓度分别为20、50、100μmol/L的紫杉醇100μl,B组分别加入上述浓度的紫杉醇及1000u/ml的INFα-2b100μl,A组及B组每浓度均设4个复孔…     

CO2激光加IFNα-2b局部注射治疗复发性尖锐湿疣65例

1 临床资料收集2000-01/2001-12我院门诊尖锐湿疣(CA)患者65(男48,女17)例,年龄17～63(平均28.6)岁,病程1～3(平均2 ) mo,复发1～6(平均2.6)次.全部患者均经临床及组织病理确诊,且均有1次以上复发史,未使用过干扰素,无严重的心、肝、肾疾病及糖尿病.病变部位为男性包皮、冠状沟、龟头、尿道口和肛周,女性大小阴唇、阴道壁、子宫颈及肛周;形状呈乳头状、菜花状;病变部位平均4个,大小为直径0.1～0.2(平均0.5) cm.患者分为2组,治疗组35例,对照组30例.两组均先用20 g·L-1利多卡因局部浸润麻醉后,将CO2激光输出功率调至20 W,用光刀逐个进行切割与汽化,范围达疣体周围0.2 cm,深达真皮层. 治疗组在烧灼疣体后,将IFNα-2b(干扰能)100万IU溶于利多卡因1～2 mg中,在创面基底部作放射状注射,每周3次.连续3 wk.对照组单纯用CO2激光烧灼治疗.两组术后创面均外涂施美乐涂膜剂,2次·d-1,直到创面愈合.术后1,2及3 mo,观察皮损复发情况.复发者再次用CO2激光烧除新皮损.结果痊愈(术后3 mo无复发,24/35 vs 13/30),显效(术后2 mo无复发,16/35 vs 5/30),有效(术后1 mo无复发,4/35 vs 5/30),无效(术后1 mo复发,1/35 vs 7/30).治疗组总有效率优于对照组(86% vs 60%,P＜0.05).     

rhIFNα2a、IFNα2b和IFNα1b、IFNα1b突变体的抗病毒效应的对比分析

目的 进一步研究不同亚型不同品牌基因工程干扰素的抗病毒效应。方法 采用微量细胞病毒（CPE）抑制法进行抗病毒试验。结果 不同品牌IFNα2a或IFNα2b500、50、5IU／ml在Vero细胞上分别可抗1000、100、10TCID50的I型和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染细胞;500、50、5IU／ml IFNα1b或IFNα1b突变体,在Vero细胞上分别也可抗8、4、2TCID50的I型和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染细胞。结论 进口和国产不同品牌的IFNα2a或IFNα2b对上述2种病毒具有同等抗病毒作用。IFNα1b突变体抗病毒效果和IFNα1b无明显差别。     

改造IFNα—2b基因3′端提高其在大肠杆菌中表达水平

目的：对人ＩＦＮα－２ｂ基因的５′端进行改造,从翻译水平上调控ＩＦＮα－２ｂ基因在大肠杆菌中的表达。方法：采用ＰＣＲ方法,人工合成寡核苷酸引物,对人ＩＦＮα－２ｂ基因进行了改造：去除３′端非编码区,并增加原核系统强终止密码子。将改造后的基因片段分别克隆入原核表达载体ｐＢＶＦ３２１,在大肠杆菌中进行表达。对表达产物进行活性效价测定。结果：３′端删除非编码区,表达水平比删除前提高４倍。结论：ＩＦＮα－     

两种剂量IFNα—1b治疗慢性丙型肝炎的效果观察

国内外研究证实 ,α干扰素 (ＩＦＮα)是治疗慢性丙型肝炎的有效药物 ,我们按临床试验规范 (ＧＣＰ)的准则[1] ,比较两种剂量治疗慢性丙型肝炎的效果 ,现将结果报告如下。1　临床资料1.1　病例选择根据 1995年第五次全国传染病与寄生虫学术会议修订的诊断分型标准 ,选择我院住院及门诊慢性丙型肝炎病人2 0例 ,男 13例 ,女 7例 ;年龄 18～ 2 7岁 ,平均 2 3岁。病人病程最短 15 0ｄ ,最长 2年。有输血史者 18例。ＡＬＴ ,胆红素在正常范围。治疗前均经肝组织活检确诊 ,ＨＣＶＤＮＡ均阳性[2 ] ,并排除甲、乙、戊型等肝炎病人。随机分为两组 ,…     

基因工程干扰素(IFNα2a)的抗疱疹病毒效应

采用微量细胞病变抑制法在Vero细胞上研究了IFNα2a抗HSV－Ⅰ型和HSV－Ⅱ型疱疹病毒的作用。结果表明，万兴IFNα2a和罗扰素IFNα2a在Vero细胞上500IU／ml可以抗1000TCID50，50IU／ml可以抗100TCID50，5IU／ml可以抗10TCID50的HSV－Ⅰ型和HSV－Ⅱ型疱疹病毒感染细胞。提示万兴IFNα2a和罗扰素均显示明显的抗病毒效应，且两者无明显差别。     

聚乙二醇IFNα-2a与普通IFNα-2a治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎疗效比较

2004年12月至2006年9月,作者采用聚乙二醇IFNα-2a(PEG-IFNα-2a)治疗HBeAg阳性的慢性乙型肝炎23例,并与普通IFNα-2a治疗的32例相比较,报道如下.     

IFN—α2b治疗慢性乙型肝炎30例临床分析

本人通过学习《慢性乙型肝炎治疗指南》临床应用干扰素对慢性乙型肝炎(慢乙肝)进行抗病毒治疗.我采用北京凯因生物技术有限公司生产的重组人干扰素(IFN-α2b凯因益生)治疗慢性乙肝患者30例,取得较好疗效.现报告如下:     

三氯乙酸联合IFN—α1b治疗尖锐湿疣46例临床分析

采用点涂50％三氯乙酸联合1FN—α1b治疗尖锐湿疣获得疗效。分析原因，局部点涂三氯乙酸能达到快速使疣体蛋白质变性，软化萎缩疣体，促进局部炎症反应，以达到清除疣体和病毒的目的，而且损伤小、不出血、方法简便易行、利于患者掌握；1FN-α1b不但可选择性抑制乳头瘤病毒DNA的合成，且能增强机体NK细胞的杀伤和MΦ的吞噬能力，抑制疣体组织细胞增殖，增强患者抗病毒免疫力，对防止疾病复发有较好疗效，值得推广。     

经尿道电切加丝裂霉素C联合干扰素α—2b膀胱灌注治疗浅表性膀胱癌

本科自 1 994年至 1 999年对 5 2例浅表性膀胱癌患者采用经尿道膀胱肿瘤电切术(ＴｒａｎｓｕｒｅｔｈｒａｌｒｅｓｅｃｔｉｏｎｏｆｂｌａｄｄｅｒｔｕｍｏｒＴＵＲＢＴ) ,术后使用丝裂霉素Ｃ(ＭＭＣ)加重组人干扰素α- 2ｂ(ＩＦＮα - 2ｂ)膀胱内灌注预防肿瘤复发 ,取得满意疗效。现报告如下。1　临床资料本组 5 2例 ,男 49例 ,女 3例 ,年龄 2 8～81岁 ,平均 5 1 3岁。因无痛性肉眼血尿或镜下血尿就诊 ,Ｂ超检查 5 2例 ,ＣＴ检查 36例 ;所有病例术前均经膀胱镜检查及活检确诊。单个肿瘤 46例 ,多发肿瘤 6例 ,肿瘤直径0 5～ 2 7ｃｍ ,以 …     

基因工程IFNα2a对肿瘤细胞生长的抑制作用

采用α－干扰素抑制各种肿瘤细胞生长的ＭＴＴ法。结果：不同品牌的１００００,１０００,１００ＩＵ／ｍｌ的ＩＦＮα２ａ对人脑胶质瘤细胞（ＳＨＧ－４４）、人骨肉瘤细胞（ＨＯＳ－８６０３）、人白血病细胞（ＨＬ－６０）、红白血病细胞（Ｒ５６２）和淋巴瘤细胞的生长抑制率分别为２０％、１０％、５％左右。结论：进口和国产的不同品α２ａ对上述５种肿瘤细胞株均有较明显的生长抑制效应,且抑制率相近。     

rhIFNα_(2a)、IFNα_(2b)和IFNα_(1b)、IFNα_(1b)突变体的抗病毒效应的对比分析

目的　进一步研究不同亚型不同品牌基因工程干扰素的抗病毒效应。方法　采用微量细胞病变 (CPE)抑制法进行抗病毒试验。结果　不同品牌IFNα2a或IFNα2b5 0 0、5 0、5IU/ml在Vero细胞上分别可抗 10 0 0、10 0、10TCID50 的Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染细胞 ;5 0 0、5 0、5IU/mlIFNα1b或IFNα1b突变体 ,在Vero细胞上分别也可抗8、4、2TCID50 的Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染细胞。结论　进口和国产不同品牌的IFNα2a或IFNα2b对上述 2种病毒具有同等抗病毒作用。IFNα1b突变体抗病毒效果和IFNα1b无明显差别。     

基因工程干扰素（IFNα2a）的抗疱疹病毒效应

采用微量细胞病变抑制法在Ｖｅｒｏ细胞上研究了ＩＦＮα２ａ抗ＨＳＶ－１型和ＨＳＶ－Ⅱ型疱疹病毒的作用。结果表明：万兴ＩＦＮα２ａ和罗扰素ＩＦＮαａ在Ｖｅｒｏ细胞上５００ＩＵ／ｍｌ可以抗１０００ＴＣＩＤ５０，５０ＩＵ／ｍｌ可以抗１００ＴＣＩＤ５０，５ＩＵ／ｍｌ可以抗０１ＴＣＩＤ５０的ＨＳＶ－１型和ＨＳＶ－Ⅱ型疱疹病毒感染细胞，提示万兴ＩＦＮα２ａ和罗扰素均显示明显的抗病毒效应，且两者无明显差别。     

聚乙二醇修饰干扰素α2b的体内药代动力学研究

目的：运用同位素示踪法－^125I标记和SDS－PAGE研究聚乙二醇修饰干扰素2b的药代动力学。方法：以大鼠为研究对象,分别按1,3,5μg／kg的的剂量股静脉注射给药,颈动脉采血。利用SDS－PAGE测定血液中原形药物放射量与总放射量的百分比,以校正全血血药浓度。用小鼠测定^125I－干扰素α2b和^125I－单修饰干扰素α2b的组织分布和尿粪排泄,用大鼠测定其胆汁排泄。结果：^125I－干扰α2b和^125I－单修饰干扰素α2b静脉注射给药符合一级消除动力学的二房室模型,按低,中,高三个剂量组,^125I－干扰α2b的消除半衰期（t1/2β）分别为1．020,0．914,0．665h,^125I－单修饰干扰素α2b的消除半衰期（t1/2β）分别为2．72,3．17,2．69h,^125I－单修饰干扰素α2b在肾中的分布明显减少,在肝中的分布明显增加。结论：聚乙二醇修饰能够显著延长干扰素α2b的体内半衰期。