米非司酮对人早孕绒毛细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨米非司酮对人早孕绒毛滋养细胞增殖和凋亡的影响。方法对１５例正常早孕吸宫流产和１５例米非司酮流产病例的绒毛组织,应用免疫组织化学ＡＢＣ法检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在细胞中的染色（细胞增殖）情况,ＤＮＡ缺口原位末端标记法检测细胞凋亡。结果正常早孕绒毛细胞滋养细胞增殖指数为５３．７４％±１．３４％,且见细胞浆阳性染色,合体滋养细胞未见ＰＣＮＡ阳性染色;合体滋养细胞和细胞滋养细胞的凋亡指数分别为２．５２％±０．８６％和０．５２％±０．２６％;米非司酮流产绒毛细胞滋养细胞增殖指数降为５０．８６％±１．４４％,细胞浆阳性现象消失;细胞凋亡指数显著增加,合体滋养细胞和细胞滋养细胞分别达到２２．１６％±２．２６％和２０．１２％±１．７４％。结论米非司酮终止早孕可能是通过抑制滋养细胞增殖和促进滋养细胞凋亡来实现的     

正常与药物流产绒毛蜕膜组织细胞凋亡及相关基因的表达

目的：探讨米非司酮对早孕绒毛蜕膜细胞调亡、增殖及相关基因表达的影响。方法：对正常早孕绒毛与蜕膜、药物流产完全与不完全的绒毛、药物流产不完全蜕膜标本各10份（共50份标本）,应用原位末端标记法进行细胞凋亡的组织学检测,免疫组织化学方法测定bcl-2、bax、fas、增殖细胞核捩的（PCNA）5种蛋白在组织中的分布与含量,同时应用原位杂交法测定fas与fasL mRNA的分布与含量。结果：正常早孕绒毛中存在少量凋 细胞,主要分布于合体滋养细胞,蜕膜中凋亡细胞偶见;绒毛蜕膜中均可检测到上述5种蛋白。米非司酮药物流产的绒毛合体滋养细胞凋亡显著增,蜕膜凋亡细胞也增多,同时伴有促凋亡baz、fas、fasL蛋白及fas、fasL、mRNA含量的增加,而PCNA蛋白含量无减少。结论：米非司酮能促进早孕绒毛合体滋养细胞,蜕膜间质及腺上皮细胞的凋亡,且主要通过fas与fasL转录及翻译途径介导,bax表达增加也有一定相关性,此可能为其抗早孕机理之一。     

米非司酮对早孕绒毛及蜕膜细胞周期动力学的影响

目的 探讨米非司酮对早孕绒毛及蜕膜细胞周期动力学的影响,方法 应用流式细胞技术对２３例正常早孕和２４例口服米非司酮后吸宫流产物的绒毛及蜕膜组织,进行细胞周期动力学分析。结果 服用米非司酮后,绒毛滋养细胞Ｇ０,Ｇ１期细胞明显增加（Ｐ〈０．０１）,Ｇ２,Ｍ期明显降低（Ｐ〈０．０１）,细胞增殖指数明显降低（Ｐ〈０．０１）,蜕膜细胞除Ｇ２,Ｍ期细胞上升（Ｐ〈０．０５）外,其余各期无变化,结论米非司酮可阻断     

米非司酮药物流产后绒毛蜕膜细胞凋亡的相关研究

目的:探讨米非司酮对早孕绒毛蜕膜细胞凋亡、增殖的作用机制。方法:以20例药物流产患者为研究组,以20例非意愿妊娠要求行人工流产负压吸引刮宫术的患者为对照组,分别收集绒毛和蜕膜标本,应用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,并采用免疫组织化学方法检测bcl-2、bax、fas、fasL、增殖细胞核抗原(PCNA)5种蛋白在绒毛和蜕膜中的分布与表达强度,同时应用原位杂交法测定fas与fasLmRNA的分布与表达强度。结果:凋亡细胞在正常早孕绒毛合体滋养细胞中少量存在,蜕膜中偶见;绒毛、蜕膜中bcl-2、bax、fas、fasL、PCNA均有表达。采用米非司酮药物流产的绒毛合体滋养细胞及蜕膜间质及腺上皮细胞的凋亡显著增多,同时伴有促凋亡bax、fas、fasL蛋白及fasLmRNA含量的增加,而PCNA蛋白含量与C组比没有变化。结论:米非司酮不仅能促进早孕绒毛合体滋养细胞、蜕膜间质及腺上皮细胞的凋亡,而且主要通过Fas与FasL转录及翻译途径介导,bax表达增加也其也有一定的相关性,此可能为其抗早孕机制之一。     

监测反复自然流产者血清HCMV IgM抗体及其绒毛组织DN…

采用酶联免疫吸附测定法对８５例反复自然流产妇女及１０７例无流产史早孕妇女的血清进行ＨＣＭＶ ＩｇＭ、ＨＣＭＶ ＩｇＧ检测，应用ＰＣＲ技术检测部分绒毛组织ＤＮＡ，直接法制备绒毛细胞染色体，结果显示：ＲＳＡ组ＨＣＭＶ ＩｇＭ阳性率（５８．８２％），明显高于对照组（１５．８９％），（Ｐ〈０．０１）。说明孕妇原发性ＨＣＭＶ感染与ＲＳＡ有相关性；ＨＣＭＶ ＩｇＭ阳性与流产次数有密切关系。ＨＣＭＶ可以通过胎盘     

正常妊娠中细胞增殖细胞凋亡情况的研究

目的　研究细胞增殖和细胞凋亡在正常妊娠不同孕期胎盘绒毛、蜕膜生长发育中的作用。方法　对 40例正常早孕吸宫流产病例和 40例正常晚孕分娩病例的胎盘绒毛和蜕膜进行分析 :免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化物酶法 (S -P法 )检测细胞增殖 ;用DNA缺口原位末端标记技术 (TUNEL法 )检测细胞凋亡。结果　正常早孕绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜中的增殖指数 (PI)分别为 (70 74± 1 34 ) %、0、(89 32± 1 75 ) % ,凋亡指数 (AI)分别为 (10 2 7± 0 35 ) %、(15 2 8± 2 43) %、(5 2 3± 1 35 ) %。正常晚孕胎盘细胞滋养细胞、合体滋养细胞和蜕膜中增殖指数 (PI)分别为 (2 10± 1 2 8) %、0、(2 0 4± 1 31) % ;凋亡指数 (AI)分别是 (1 0 6± 0 94) %、(41 79±1 48) %、(6 0 81± 1 41) %。即 :正常早、晚孕绒毛和蜕膜组织中都有一定量的细胞增殖和细胞凋亡发生 ,但早孕时以细胞增殖为主 (P <0 0 1) ,晚孕时以细胞凋亡为主 (P <0 0 1)。结论　细胞增殖和细胞凋亡都是细胞生长代谢的形式 ,随着妊娠进展 ,胎盘细胞增殖下降、细胞凋亡增加。提示 :细胞增殖和凋亡对胎盘绒毛的正常发育和老化起重要作用     

早孕绒毛组织中HOXA7、9、10基因的表达及米非司酮对其的影响

目的:探讨米非司酮抗早孕的作用机理。方法:因非意愿妊娠要求终止妊娠的正常早孕妇女60例,分为3组,分别为常规负压吸宫对照组、负压吸引术前服用米非司酮100mg组和150mg,每组20例。运用RT-PCR及免疫组织化学方法检测各组绒毛组织中HOXA7、9、10mRNA和蛋白的表达。结果:①正常早孕绒毛组织在mRNA和蛋白水平均可见HOXA7、9、10基因的表达,表达主要在滋养细胞胞质,间质少量表达。②不同剂量的米非司酮均可以降低绒毛组织中HOXA7、9、10mRNA及蛋白的表达量,但对不同基因的降表达程度有所不同。150mg米非司酮对早孕绒毛组织中HOXA7、10基因的降表达作用明显大于100mg米非司酮(P<0.01)。服用不同剂量米非司酮后的早孕绒毛组织中HOXA7、9、10蛋白的表达位置仍以滋养细胞胞质为主,间质少量表达。结论:HOXA7、9、10基因表达于正常早孕绒毛组织中,服用米非司酮后可降低其表达,呈一定的剂量依赖性,但未改变蛋白的表达位置。米非司酮的抗早孕作用可能是通过对绒毛组织中HOXA7、9、10基因的调控来达到的,且以150mg的米非司酮作用明显。     

RU486对人早孕绒毛中纤维蛋白溶酶原激活与抑制系统的影响

目的：探讨ＲＵ４８６对离体培养人早孕绒毛滋养细胞分泌ＰＡｓ及ＰＡＩ┐１、ＰＡＩ┐２的影响，比较药物流产与正常绒毛中ｔＰＡ、ｕＰＡ、ＰＡＩ┐１及ｕＰＡ┐Ｒ表达的差异。方法：应用纤维蛋白琼脂糖铺盖及反向铺盖技术分别检测细胞培养液中ＰＡ与ＰＡＩ┐１的活性，采用琼脂糖指示胶直接点样法测定ＰＡＩ┐２活性。分别应用免疫组织化学与原位杂交技术检测绒毛组织细胞中ｔＰＡ、ｕＰＡ、ＰＡＩ┐１与ｕＰＡ┐Ｒ的抗原及ｍＲＮＡ的存在与分布。结果：受ＲＵ４８６刺激，离体培养绒毛滋养细胞分泌的ＰＡ┐ＰＡＩ复合物的水解活性增加，而ＰＡＩ┐１与ＰＡＩ┐２的活性则受抑制。口服米非司酮药流绒毛滋养细胞中ＰＡＩ┐１及ｕＰＡ抗原含量低，而ｕＰＡ┐Ｒ的ｍＲＮＡ含量显著增加。结论：ＲＵ４８６增加早孕绒毛中纤溶活性，从而使细胞外基质蛋白水解作用加强，绒毛的固着性可能因此松动。     

三苯氧胺联合米非司酮药物流产对早孕绒毛细胞凋亡及调控基因的影响

目的:探讨三苯氧胺联合米非司酮对早孕绒毛细胞凋亡及凋亡调控基因bcl-2和bax表达的影响。方法:将妊娠49d内的早孕妇女50例随机分成两组,试验组和对照组分别给予三苯氧胺120mg或安慰剂联合米非司酮150mg配伍米索前列醇600μg的药物流产方案,收集两组服用米索前列醇后6h内自然排出的绒毛组织,应用脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测绒毛组织的细胞凋亡指数,免疫组化方法检测绒毛组织中bcl-2、bax的表达,并用Imageproplus4.10版本的专业图像分析软件测定bcl-2、bax蛋白表达积分光密度值。结果:①绒毛细胞凋亡主要发生于细胞滋养细胞和合体滋养细胞,且试验组指数明显高于对照组(14.40%±7.05%vs9.06%±5.04%,P<0.01;9.89%±3.95%vs5.85%±2.15%,P<0.01)。②Bcl-2蛋白表达于合体滋养细胞浆中,试验组其表达积分光密度值低于对照组(328.24±194.20vs682.41±237.41,P<0.01);Bax蛋白主要表达于细胞滋养细胞和合体滋养细胞胞浆中,且试验组的表达积分光密度值均高于对照组(1036.18±369.47vs658.78±200.76,P<0.01;1554.28±554.20vs988.18±301.14,P<0.01)。结论:三苯氧胺配伍米非司酮较单独使用米非司酮促进绒毛滋养细胞凋亡更强,这一作用与bcl-2蛋白表达下降、bax蛋白表达上升有关。     

监测反复自然流产者血清HCMVIgM抗体及其绒毛组织DNA的研究

采用酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）对８５例反复自然流产（ＲＳＡ）妇女及１０７例无流产史早孕妇女的血清进行ＨＣＭＶＩｇＭ、ＨＣＭＶＩｇＧ检测，应用ＰＣＲ技术检测部分绒毛组织ＤＮＡ，直接法制备绒毛细胞染色体。结果显示：ＲＳＡ组ＨＣＭＶＩｇＭ阳性率（５８．８２％），明显高于对照组（１５．８９％）（Ｐ＜０．０１）。说明孕妇原发性ＨＣＭＶ感染与ＲＳＡ有相关性；ＨＣＭＶＩｇＭ阳性与流产次数有密切关系；ＨＣＭＶ可以通过胎盘屏障感染胎儿，导致流产     

KiSS-1基因在孕早期绒毛组织中表达的初步研究

目的 研究早孕绒毛中KiSS—1基因mRNA的表达及定位，探讨其与滋养细胞浸润的关系。方法 采用半定量RT—PCR对100例(分为8个孕周组)正常早孕绒毛组织中KiSS—1mRNA的表达水平进行检测，并采用原位杂交方法进行其组织学定位。结果 在整个孕早期绒毛组织中均有KiSS—1基因表达，孕5周时表达最低，至9-12周达高峰。KiSS—1mRNA表达与妊娠天数呈直线正相关。原位杂交法检测结果提示孕早期KiSS—1mRNA在滋养细胞胞浆中的表达随孕周增加而增强。结论以KiSS—1基因在滋养细胞表达随孕周增长而增加，提示该基因在调控早孕滋养细胞的浸润行为中起重要的作用。     

细胞凋亡和PCNA在早孕绒毛滋养细胞及蜕膜中的表达与自然流产的关系

目的 :研究细胞凋亡与细胞增殖在早孕绒毛滋养细胞和蜕膜中的表达及与自然流产的关系。方法 :对孕 3月内 2 0例正常妊娠、2 0例第 1次自然流产 (SA)和 15例反复自然流产 (RSA)的绒毛和蜕膜组织应用TdT介导的dUTP缺口原位末端标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡 ,应用免疫组织化学SP法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)。结果 :正常早孕绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞和蜕膜中的凋亡指数分别为 7.2 1± 1.2 4、8.89±2 .5 2和 7.70± 0 .82 ;SA组为 15 .4 0± 6 .5 9、2 5 .83± 6 .83和 32 .0 3± 3.2 7;RSA组为 18.77±8.2 2、34.0 2± 13.4 9和 34.96± 5 .4 6。增殖指数在正常早孕绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞和蜕膜中为 6 4 .13± 5 .90、0和 6 2 .0 8± 4 .76 ;SA组为 6 7.0 2± 6 .79、36 .13± 3.5 6和 6 4 .94± 4 .6 0 ;RSA组为 6 8.6 7± 8.4 5、33.6 7± 4 .0 8和 6 3.99± 5 .5 4。即孕 3月内正常妊娠的绒毛和蜕膜组织中均有一定量的细胞凋亡与细胞增殖存在。SA与正常早孕相比绒毛和蜕膜中的细胞凋亡均明显增加 (P <0 .0 1) ,RSA合体滋养细胞凋亡也较SA明显增加 (P <0 .0 5 ) ;细胞滋养细胞和蜕膜中的细胞增殖在自然流产与正常妊娠间无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :细胞凋亡和增殖的平衡与妊娠维持?     

肝素结合性表皮生长因子在早孕绒毛及蜕膜组织中的表达

目的　探讨肝素结合性表皮生长因子 (HB- EGF)在早孕绒毛及蜕膜组织中的表达 ;评估 HB- EGF在人类胚泡着床和早期胎盘组织发育中的作用。　方法　采用免疫组化法检测 18例早孕绒毛及蜕膜组织中的 HB- EGF的表达及定位。　结果　全部早孕绒毛及蜕膜组织标本均有 HB-EGF表达 ,早孕绒毛滋养细胞表达高于蜕膜组织 ,HB- EGF阳性产物定位于早孕绒毛及蜕膜组织中的细胞膜上和细胞浆内 ,呈棕黄色。　结论　人类早孕绒毛及蜕膜组织表达 HB- EGF可能与胚泡着床、胎盘形成和维持胎盘功能有关。     

药物流产后子宫刮出物的组织学观察

应用口服米非司酮分别配伍前列腺素类似物ｄｌ－１５甲基ＰＧＦ２ａ栓剂，针剂和米索前列醇片剂，对４５０例早孕妇女施行药物流产。对排出绒毛组织后，阴道出血量多或出血时间持续３周以上，尿ｈＣＧ下降缓慢的８４例进行诊断性刮宫，对刮出物进行组织学检查，结果：７７例为变性坏死的绒毛和（或）滋养细胞，占９１．７％，其中伴炎症细胞浸润６８例，伴蜕膜组织残留１４例，单纯绒毛或滋养细胞３例；６例为单纯蜕膜组织，占７．１     

人类白细胞抗原G、E在人胎盘组织中的表达及其意义

目的:探讨人类白细胞抗原G、E(HLA-G、E)在人胎盘组织中的表达及意义。方法:用原位杂交及免疫组化法分别检测HLA-G、E mRNA及蛋白质在人正常早孕绒毛组织、晚孕胎盘组织中的表达。结果:在人正常早孕绒毛组织中的绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞及绒毛外滋养细胞(EVCT)内均有HLA-G、E mRNA及HLA-E蛋白质表达,而HLA-G蛋白质仅在EVCT内表达;晚孕胎盘组织中HLA-G、E mRNA及蛋白质表达于蜕膜板内的EVCT及羊膜上皮细胞。结论:HLA-E表达于人正常早孕绒毛组织中所有类型的滋养细胞及晚孕胎盘组织中的EVCT和羊膜上皮细胞。抗人HLA-G单克隆抗体4H84仅能检测出人胎盘组织中EVCT及羊膜上皮细胞内的HLA-G蛋白。     

稽留流产绒毛中HIF-1α、VEGF和PLGF的表达及意义

目的:检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及胎盘生长因子(PLGF)在稽留流产(MA)绒毛组织中的表达,探讨3种因子在维持正常妊娠中的作用.方法:选取昆明市第一人民医院产科收治的MA患者36例(研究组)及行人工流产的正常早孕妇女28例(对照组).应用免疫组化法检测两组绒毛组织中HIF-1α、VEGF和PLGF的表达.结果:研究组绒毛水肿,细胞滋养细胞增生、数量增加,合体滋养细胞明显减少,甚至断裂消失.HIF-1 α、VEGF、PLGF在两组妇女绒毛滋养细胞的胞浆均有表达,但研究组HIF-1α、VEGF、PLGF的阳性表达率均低于对照组(16.67 vs 57.14％,66.67％ vs 100.00％,77.78％ vs 100.00％,P＜0.05).结论:HIF-1a、VEGF和PLGF与正常妊娠的维持有关,其表达异常可能导致MA.     

血管生成素在妊娠滋养细胞疾病中表达的临床意义探讨

目的:通过检测血管生成素(ANG)在人正常早孕绒毛组织、葡萄胎及妊娠滋养细胞肿瘤中表达的差异性,探讨ANG在妊娠滋养细胞疾病(GTD)表达的意义。方法:采用免疫组化(En Vision)法检测人正常早孕绒毛组织28例、葡萄胎组织26例、妊娠滋养细胞肿瘤组织14例(其中侵蚀性葡萄胎1例、绒毛膜癌12例、胎盘部位滋养细胞肿瘤1例)中ANG蛋白的表达以及定位情况。结果:ANG蛋白在人正常早孕绒毛组织、葡萄胎及妊娠滋养细胞肿瘤组织中均有表达且主要定位于细胞质和细胞膜、少量表达于细胞核;ANG阳性表达率葡萄胎组(100.0%)高于正常早孕绒毛组(60.7%)(P0.05)和妊娠滋养细胞肿瘤组(85.7%)(P0.05),妊娠滋养细胞肿瘤组高于正常早孕绒毛组(P0.05)。在妊娠滋养细胞肿瘤中,ANG阳性表达率在年龄≥40岁组(83.3%)高于年龄40岁组(75.0%)(P0.05);临床分期晚期组(Ⅲ、Ⅳ期)(88.9%)高于早期组(Ⅰ期、Ⅱ期)(80.0%)(P0.05);FIGO预后评分高危组(87.5%)高于低危组(83.3%)(P0.05)。结论:ANG在GTD组织中的表达明显高于在正常早孕绒毛组织,且在妊娠滋养细胞肿瘤晚期、高危患者表达增高,表明ANG的过表达可能参与了GTD的发生过程。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在绒毛和胎盘组织中的表达

目的 探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在绒毛及胎盘组织中的表达以及表达部位。方法 分别取36例妊娠6～9周妇女的早孕绒毛组织、7例因病理指征行中期引产妇女的胎盘组织和11例足月妊娠妇女的胎盘组织,免疫组化方法检测绒毛组织和胎盘组织中EMMPRIN的表达部位变化特点。结果 (1)表达部位：EMMPRIN在早孕绒毛组织、中期和足月妊娠的胎盘组织中均有高度表达。在早孕绒毛组织中的表达部位主要集中在绒毛内细胞滋养细胞、合体滋养细胞及细胞滋养层柱细胞;在中期和足月妊娠的胎盘组织中,主要表达于底蜕膜的绒毛外细胞滋养细胞。(2)表达特点：在早孕绒毛组织中细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的。EMMPRIN阳性率随妊娠进展逐渐下降。在妊娠中期的胎盘组织中,细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的EMMPRIN阳性率分别为5／7、3／7、5／7;在足月妊娠的胎盘组织中,细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的EMMPRIN阳性率分别为73％、18％和82％。在中期和足月妊娠的底蜕膜中的EMMPRIN阳性率较弱,且趋于稳定。而早期妊娠阶段,侵入到底蜕膜的绒毛外细胞滋养细胞中。EMMPRIN阳性表达则随孕周进展逐渐增强。结论 EMMPRIN在妊娠早期与胚胎植入有关,在妊娠的中晚期则可能参与妊娠维持。     

米非司酮对人早孕蜕膜和绒毛超微结构的影响

从超微结构水平，研究早孕妇女口服米非司酮（２５ｍｇ，Ｂｉｄ×２天）４８ｈ后，蜕膜和绒毛的超微结构改变，结果表明：蜕膜中大蜕膜细胞皱缩，粗面内质网和线粒体肿胀，蜕膜颗粒细胞中高电子密度颗粒减少或消失，同时伴随着周围网状纤维的溶解；而绒毛功能活跃的合体滋养细胞则表现不同程度的退行性改变。表明米非司酮阻断孕激素作用，对蜕膜的影响是直接的，而绒毛则主要是受继发性血供不足的影响。蜕膜中颗粒细胞及基质中网状纤维是米非司酮抗早孕重要的作用部位。     

乙型肝炎表面抗原阳性孕妇妊娠早期绒毛细胞乙型肝炎病毒感染状况的研究

目的观察早期妊娠(孕40～90d)HBsAg阳性孕妇绒毛细胞乙型肝炎病毒(HBV)感染状况。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法,复查血清HBsAg阳性的25例早期妊娠妇女血清HBsAg、乙型肝炎e抗原(HBeAg),对其绒毛细胞用免疫组化链霉亲和素-生物素过氧化物酶复合物(SABC)法和原位杂交法检测HBsAg、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)和：HBVDNA,并通过透射电镜观察绒毛细胞超微结构变化。结果25例HBsAg阳性孕妇中,HBV感染率为32％(8／25);蜕膜细胞、滋养细胞和绒毛间质细胞均出现HBsAg或HBcAg的阳性染色,出现HBsAg或HBcAg阳性蜕膜细胞、滋养细胞和绒毛问质细胞的标本百分率分别为28％(7／25)、32％(8／25)和16％(4／25);滋养细胞间桥粒连接完整,并在滋养细胞的粗面内质网内可见HBsAg蛋白丝样结构和HBV样结构。结论HBV可感染早期妊娠绒毛细胞;HBV直接穿透滋养细胞问桥粒连接的可能性不大。