生命早期补充维生素D对哮喘大鼠白细胞介素10和细胞间黏附分子1表达的影响

目的 研究生命早期补充维生素D对大鼠哮喘模型的影响与机制.方法选用性成熟的雌性Wistar大鼠32只.随机分为4组:对照组、低、中、高剂量组各8只.于受孕第7天起隔天以灌胃的方式给予各组大鼠不同剂量的1,25(OH)_2D_3,对照组以DMSO-PBS代替.子代大鼠离乳后,从每组中随机取出8只制备哮喘模型.HE染色肺组织切片;ELISA法检测血清及肺泡灌洗液(BALF)中IL-10浓度;免疫组化法检测细胞间黏附分子I(ICAM-1)在肺组织中的表达.结果 (1)肺组织病理变化:低剂量组和中剂量组气道炎症和嗜酸性细胞浸润均低于对照组,高剂量组则明显高于对照组.(2)血清及BALF中IL-10浓度:血清中,低剂量组[(30.2±2.8)pg/ml]和中剂量组[(51.5±6.6)pg/ml]IL-10浓度均高于对照组[(18.7±4.7)pg/ml](P<0.05),且中剂量组高于低剂量组(P<0.05),而高剂量组[(15.4±3.5)pg/ml]无明显变化(P>0.05);BALF中,与对照组[(59.1±14.4)pg/ml]相比,低剂量组[(58.1±3.4)pg/ml]无显著性变化(P>0.05),中剂量组[(90.0±14.3)pg/ml]IL-10浓度高于对照组(P<0.05),高剂量组[(45.3±6.5)pg/ml]低于对照组(P<0.05).(3)ICAM-1在支气管上皮细胞中的表达:低剂量组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);中剂量组低于对照组(P<0.05);高剂量组高于对照组(P<0.05).结论 生命早期适量的1,25(OH)_2D_3干预可改善大鼠肺部炎症,减少嗜酸性细胞浸润,而过量则加重气道炎症.其机制可能与1,25(OH)_2D_3对IL-10及支气管上皮ICAM-1表达的影响有关.     

孕期哺乳期大鼠补充维生素D3对子代大鼠哮喘模型肺组织维生素D受体表达的影响

目的探讨给予孕期及哺乳期大鼠不同剂量1,25-二羟维生素D3,对其子代大鼠哮喘模型肺组织维生素D受体(VDR)表达的影响。方法雌性Wistar大鼠32只,随机分配到维生素D低、中、高剂量组,在孕期及哺乳期给予不同剂量的1,25-二羟维生素D3,并设对照组。子代大鼠断乳后,各组随机取8只,用卵清蛋白致敏并激发,建立哮喘模型。采用real-time PCR和免疫组织化学方法分别从mRNA和蛋白水平检测子代大鼠VDR的表达。结果与对照组相比,中剂量组子代大鼠支气管痉挛收缩、管壁增厚、管腔内黏液分泌增加、肺部炎症浸润等变化最轻,低剂量组其次,高剂量组反而较对照组严重。免疫组织化学染色显示,与对照组相比,低剂量组和中剂量组子代大鼠的VDR表达明显减少,且中剂量组较低剂量组更明显,差异有统计学意义(P均<0.01);高剂量组的VDR表达则较对照组增多,差异亦有统计学意义(P<0.01)。real-time PCR结果显示,与对照组比较,低剂量组和中剂量组子代大鼠肺组织中VDR mRNA水平降低,而高剂量组的VDR mRNA水平增高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论孕期及哺乳期补充适量维生素D可减少子代大鼠哮喘模型VDR的表达,减轻气道炎症反应,而过量补充维生素D则增加VDR表达,可能加重气道炎症反应。     

孕期和哺乳期1，25-（OH）2D3干预对子代哮喘大鼠肺组织TGF-β1和Smad3表达的影响

目的：探讨孕期和哺乳期1,25-二羟维生素D3［1,25-（OH）2D3］干预对子代哮喘大鼠肺组织中转化生长因子β1（TGF-β1）及Smad3表达的影响。方法：雌性Wistar大鼠32只,随机分为4组（n=8）：低剂量、中剂量及高剂量1,25-（OH）2D3干预组和对照组。受孕第7天起,以隔天灌胃的方式分别给予低、中剂量及高剂量组2、10、20 μg/mL 1,25-（OH）2D3,对照组以生理盐水代替,直到子代大鼠生后21 d断乳为止。制备子代大鼠哮喘模型。采用RT-PCR和免疫组织化学方法分别从mRNA和蛋白水平检测TGF-β1和Smad3的表达变化。结果：(1)各组仔鼠哮喘模型支气管炎症程度不同,与对照组相比,低、中剂量组炎症反应减轻,而高剂量组则加重。(2)免疫组织化学结果显示,与对照组相比,TGF-β1及pSmad3在低、中剂量组表达明显降低（P<0.05）,而在高剂量组则表达明显增高（P<0.05）。(3) 荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,低、中剂量组TGF-β1和Smad3 mRNA表达降低（P<0.05）,而高剂量组两者的mRNA表达增高（P<0.05）。结论：在大鼠哮喘模型中,1,25-（OH）2D3可能通过维生素D受体信号通路,进而调节TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的表达而发挥免疫调节作用。     

不同剂量1,25-(OH)_2D_3对哮喘小鼠肺内高迁移率族蛋白B1及IL-17表达的影响

目的观察不同剂量1,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)2D3]对哮喘小鼠肺内高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及IL-17表达的影响。方法将50只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只。卵清蛋白混合液致敏并雾化吸入建立哮喘小鼠模型,低、中、高剂量组在每次激发前分别按1、4、10μg/kg给予腹腔注射1,25-(OH)2D3混合液,对照组和哮喘组以生理盐水替代。采用苏木精-伊红染色观察小鼠气道结构变化;免疫组化染色观察HMGB1、IL-17蛋白表达的变化,RT-PCR检测HMGB1及IL-17m RNA水平的表达变化。结果哮喘组气道壁厚度、HMGB1和IL-17的m RNA及蛋白表达水平均明显高于对照组(P0.05);低、中剂量组气道壁厚度、HMGB1和IL-17的m RNA及蛋白表达水平均明显低于哮喘组,且上述指标在中剂量组均明显低于低剂量组(P0.05);但高剂量组中气道壁厚度、HMGB1和IL-17的m RNA及蛋白表达水平均高于哮喘组(P0.05)。结论 HMGB1及IL-17可能参与哮喘气道重塑过程;适量1,25-(OH)2D3能改善哮喘小鼠气道重塑,大剂量1,25-(OH)2D3可加重气道重塑。     

1,25-(OH)2D3对哮喘小鼠肺内TIM-4表达的影响

目的：建立小鼠哮喘气道重塑模型,观察1,25-(OH)2D3对哮喘小鼠气道结构及T细胞免疫球蛋白域粘蛋白域蛋白-4（T cell immunoglobulin mucin protein-4, TIM-4）表达的影响。方法：30只BALB/c雌性小鼠随机分为对照组、哮喘组和1,25-(OH)2D3干预组,采用卵清蛋白致敏、激发建立哮喘模型。取小鼠肺组织,采用苏木精-伊红染色观察气道重塑情况,并应用RT-PCR法和免疫组化法检测肺内TIM-4 mRNA和蛋白的表达。结果：哮喘组发生典型的气道重塑改变,与对照组比较,TIM-4表达水平升高（105±9 vs 42±5,P<0.05）;1,25-(OH)2D3干预组较哮喘组气道重塑有所改善,TIM-4表达降低（78±6）,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：TIM-4可能参与小鼠气道重塑过程;新型免疫调节剂1,25-(OH)2D3可下调哮喘小鼠肺内TIM 4的表达,改善气道重塑。     

柴油废气颗粒的吸入对哮喘大鼠速发相反应的影响

目的 探讨柴油废气颗粒的吸入对哮喘大鼠速发相反应的影响.方法 选择Wistar雄性大鼠60只,随机分为6组,每组各10只.A组用生理盐水攻击,B组用卵清蛋白攻击,C、D、E、F组用卵清蛋白攻击以后继续吸入柴油废气颗粒(DEP)各1周、2周、3周和4周.所有抗原攻击结束1周以后,除A组用生理盐水激发30 min以外其他组均用卵清蛋白激发30 min,之后测定并比较气道阻力,观察支气管肺泡灌洗液中炎症细胞的变化和肺组织病理学的改变,肺组织中自细胞介素5和γ干扰素的浓度,血清IgE变化等.结果 (1)A、B、C、D、E、F组在卵清蛋白激发后30 min时的气道阻力[cm H2O/(ml·s)]分别为(3.56±0.21)、(7.06±0.63)、(6.46±0.38)、(7.47±0.33)、(8.87±0.61)、(11.00±0.69).A组未发生气道高反应,B、C、D、E、F组的气道阻力均高于A组,E、F组高于B组,差异均有统计学意义.而各组在各时间点内的气道阻力比较同样有统计学意义(F=160.646,148.901,162.204,156.186,P均<0.01).DEP吸入的时间和气道阻力之间呈正相关(r=0.948,P<0.01).(2)血清IgE浓度在B、C、D、E、F组之间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于A组(F=2.639,P<0.01).(3)支气管肺泡灌洗液中的炎症细胞有中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞等,以前者为主.中性粒细胞百分比(%)依次为(4.3±2.0)、(9.7±5.2)、(10.3±5.6)、(13.0±5.2)、(42.6±18.3)、(55.3±6.9),E、F组高于A组和B组,组间差异有统计学意义(F=114.226,P<0.01).(4)肺组织病理切片中可以看到A组上皮细胞完整,气道周围未见炎症细胞的浸润,以纤毛柱状上皮细胞为主,仅有少量的杯状细胞,基底膜未见纤维化.随着DEP吸入,逐渐出现上皮细胞的坏死、中断、脱落,杯状细胞增生,气道周围的炎症细胞浸润等改变.(5)肺组织中自细胞介素浓度(pg/mg)在B组(12.8±2.8)和C组(17.1±5.2)、E组(18.6±4.2)间差异有统计学意义(F=4.236,P<0.01),各组大鼠肺组织中γ干扰素的浓度之间比较差异无统计学意义(F=1.185,P>0.05).结论 DEP的吸入加重了哮喘大鼠的速发相反应.     

1,25-(OH)2D3对局灶节段性肾小球硬化大鼠尿足细胞排泄及肾小球WT-1分布的影响

目的 探讨1,25-(OH)2D3对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠尿足细胞(UPC)排泄及肾小球WT-1蛋白分布的影响.方法 24只SD大鼠分为3组:对照组、FSGS组、1,25-(OH)2D3组.采用左肾摘除,阿霉素重复注射诱导FSGS大鼠模型.1,25-(OH)2D3组在第1次给予阿霉素后1周埋植渗透性微量泵按0.03 ng/(g·d)皮下给予1,25-(OH)2D3.实验10周末检测尿白蛋白排泄率(UAER)、尿转化生长因子-β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF).免疫荧光法检测尿沉渣足细胞特异性标志蛋白Wflm's tumor-1(WT-1),观察肾小球WT-1的分布.尿WT-1荧光细胞即为尿液足细胞.结果 FSGS组UPC、UAER、TGF-β1、CTGF、肾小球细胞数及细胞外基质(ECM)/肾小球毛细血管襻面积均较对照组明显升高(P<0.01).与FSGS组相比,1,25-(OH)2D3组UAER、ECM/肾小球毛细血管襻面积显著降低(P<0.01),UPC、TGF-β1、肾小球细胞数亦降低(P<0.05),CTGF无统计学意义(P>0.05).肾小球荧光染色示WT-1在对照组正常,FSGS组呈节段性缺失,1,25-(OH)2D3组缺失较轻.UPC与UAER呈正相关(r.=0.42,P<0.05),TGF-β1与CTGF亦呈正相关(r.=0.47,P<0.05).结论 尿液中脱落足细胞检测可作为判断.FSGS病情活动性的标志之一.1,25-(OH)2D3可减轻FSGS大鼠UPC、UAER、TGF-β1的排泄,抑制肾小球细胞数及ECM增殖,恢复肾组织WT1-表达而有肾保护作用.     

1,25-(OH)2D3对糖尿病大鼠肾脏Nephrin蛋白表达的影响

目的探讨1,25-(OH)2D3对糖尿病(DM)大鼠肾脏Nephrin蛋白表达的影响。方法Wistar大鼠分为对照组、DM组、1,25-(OH)2D3组。建立糖尿病大鼠模型,实验12周末观察各组血尿、蛋白尿、肾组织光镜电镜、免疫组织化学,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其肾皮质NephrinmRNA及蛋白的表达。结果与对照组及1,25-(OH)2D3组相比,DM组大鼠尿红细胞及尿蛋白排泄明显增多,肾小球细胞数亦增加(P<0.01,0.05),NephrinmRNA及蛋白质表达明显下调(Pa<0.01)。1,25-(OH)2D3组肾小球细胞数、NephrinmRNA及蛋白质表达与对照组相比无统计学差异(Pa>0.05)。结论1,25-(OH)2D3可减轻血尿、蛋白尿,上调NephrinmRNA及蛋白质的表达而有肾保护作用。     

加味麻杏石甘汤对哮喘大鼠外周血嗜酸性粒细胞和细胞黏附分子1调节作用的实验研究

目的观察加味麻杏石甘汤(MG)对卵清蛋白所致实验大鼠支气管哮喘外周血中嗜酸性粒细胞(EOS)及肺组织中细胞黏附分子1(ICAM-1)的调节作用。方法将48只SD大鼠按完全随机法分成正常对照组、哮喘模型组、MG小剂量组、MG大剂量组、地塞米松组、MG地塞米松联合组6组,每组10只。采用腹腔注射卵清蛋白和灭活百日咳杆菌,制成大鼠哮喘模型。MG小剂量组灌胃MG21.2g/(kg·d),MG大剂量组给予灌胃MG42.4g/(kg·d),地塞米松组给予灌胃地塞米松0.75mg/(kg·d),MG地塞米松联合组给予灌胃地塞米松0.375mg/(kg·d)和MG21.2g/(kg·d),以上各组大鼠给药容量均为10mL/kg,正常对照组和哮喘模型组灌胃等量生理盐水,均每日1次,共8d。2周后麻醉处死。常规计数法检测外周血嗜酸性粒细胞计数;免疫组织化学法检测大鼠肺组织中ICAM-1蛋白的表达。结果 (1)模型组外周血EOS数与正常对照组相比升高,差异有统计学意义(P<0.001)。MG小剂量组、MG大剂量组、地塞米松组、MG地塞米松联合组均能减少哮喘大鼠外周血EOS数,差异均有统计学意义(P<0.01);各用药组间相比差异无...     

神经肽P物质对哮喘大鼠气道阻力的影响

目的 探讨神经肽P物质对哮喘大鼠气道阻力的影响.方法 按照随机分组的原则将60只Wistar大鼠分为正常对照组、哮喘组及P物质干预组,每组各20只.制作哮喘大鼠模型.应用动物肺功能分析仪检测各组大鼠在浓度为0.0625、0.1250、0.250 0、0.5000 mg/ml乙酰甲胆碱(methacholine,MCh)干预下的气道吸气阻力及呼气阻力,其中P物质干预组大鼠在测定气道阻力时于气道内滴入0.2ml浓度为10-7 mol/L的P物质.结果 随着MCh浓度增加,大鼠气道阻力增加,大鼠气道吸气阻力及呼气阻力均与MCh浓度呈正相关(r=0.947,P＜0.05;r=0.965,P＜0.05).在0.0625、0.125 0、0.2500、0.5000 mg/ml浓度梯度的MCh作用下,3组间大鼠气道吸气阻力比较差异具有统计学意义(F值分别为73.4、89.3、91.2、106.4,P＜0.05);呼气阻力比较差异具有统计学意义(F值分别为67.3、77.5、83.4、126.5,P＜0.05).哮喘组大鼠气道阻力对MCh的浓度反应曲线较正常对照组明显上移,其吸气阻力和呼气阻力在不同浓度MCh作用下均高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);P物质干预组大鼠对MCh的浓度反应曲线较哮喘组明显上移,在不同浓度MCh刺激下吸气阻力和呼气阻力均高于哮喘组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 神经肽P物质可增加哮喘大鼠的气道阻力,并随着MCh浓度增加气道阻力增加.     

Protective effects of vitamin E and omeprazole on the hypoxia/reoxygenation induced intestinal injury in newborn rats

Evaluation of prophylactic effects of omeprazole and/or vitamin E on the formation of free oxygen radicals (FOR) and bowel histopathology in the newborn rat model of hypoxia/reoxygenation (H/R) that resembles human necrotizing enterocolitis (NEC). Eighty newborn rats were randomly divided into eight groups. H/R was done using airtight chamber. Rats were exposed to 100% CO(2) for 15 min followed by a reoxygenation for the next 15 min with 100% O(2). Group 1 (n = 10) was the control group. Group 2 (n = 10) rats received vitamin E. In Group 3 (n = 10) omeprazole was administrated. Group 4 (n = 10) rats received omeprazole and vitamin E. Group 5 (n = 10) rats were subjected to H/R two times for 2 days and one time for 3 days. Group 6 (n = 10) received vitamin E in addition to H/R for 5 days and in Group 7 (n = 10) omeprazole in addition to H/R for 5 days. In Group 8 (n = 10), vitamin E and omeprazole and H/R were applied for 5 days. Rats were killed at the end of the each process and bowel specimens were harvested for histopathological and biochemical investigations. We administrated vitamin E intramuscularly 300 unit/kg per day and omeprazole orally 20 mg/kg per day. Malondialdehyde (MDA), xanthine oxidase (XO), xanthine dehydogenase (XDH) and XO/(XO + XDH) were measured. Vitamin E and/or omeprazole treated rats had significantly less XO% levels than H/R only group (0.36, 0.38 and 0.57, respectively). Similarly, the MDA levels were significantly lower in vitamin E and/or omeprazole received rats than H/R only rats (88.8, 97.9 and 122.6, respectively). All rats treated with omeprazole and/or vitamin E had better biochemical and histopathological levels compared to H/R rats (p < 0.05). Histopathological results show that Group 5 (H/R only) had significantly more intestinal damage when compared with Group 6 (vitamin E + H/R), Group 7 (omeprazole + R/H) and Group 8 (vitamin E + omeprazole + H/R) (p < 0.001). Grade 2 and 3 intestinal damages were only in Group 5 and there were no statistical difference between in Groups 6, 7 and 8 (p > 0.001). Omeprazole and/or vitamin E may protect the biochemical and histopathological intestinal damage of H/R injury in rats. These drugs may be beneficial in the prophylaxis of NEC in humans as well.     

轻度维生素A缺乏对大鼠肺发育中肺组织血小板源性生长因子A表达的影响

目的 观察轻度维生素A缺乏(MVAD)对大鼠肺发育中血小板源性生长因子A(PDGF-A)表达的影响.方法 32只清洁级SD大鼠,雌雄各半.雌鼠随机分为MVAD组(n＝10)和对照组(n＝6).MVAD组喂养维生索A(VitA)缺乏饲料,对照组喂养正常饲料.3周后雌雄鼠交配,建立MVAD孕鼠模型.高效液相色谱法检测2组雌鼠血清VitA水平和孕20d胎鼠肝脏VitA水平;测量出生1d乳鼠身长、尾长、体质量;取MVAD组和对照组出生1d乳鼠肺组织,反转录(RT)-PCR方法检测出生1d乳鼠肺脏PDGF-A mRNA的表达,免疫组织化学方法检测其PDGF-A蛋白的表达水平.应用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 MVAD组雌鼠毛色干枯,少食少动,孕鼠部分流产不孕.MVAD组雌鼠血清VitA水平显著低于对照组(P＜0.05).MVAD组孕20d胎鼠肝脏VitA水平亦显低于对照组(P＜0.05).MVAD组出生1d乳鼠身高、尾长及体质量数值均低于对照组(P,＜0.05).MVAD组出生1d乳鼠肺组织PDGF-A mRNA表达量显著低于对照组(P＜0.05);免疫组织化学检测出生1d乳鼠肺组织支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞、血管内皮细胞内均可见PDGF-A蛋白表达,MVAD组PDGF-A蛋白表达量较对照组少(P＜0.05).结论 VitA在肺发育中起重要作用,MVAD引起PDGF-A的表达减少,可能是大鼠肺发育障碍的原因之一.     

电针对缺氧缺血性脑损伤幼鼠大脑皮质血流的影响

目的 通过建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型,并检测电针干预治疗前后大鼠局部脑血流量(rCBF)的变化,开展针刺治疗神经系统疾病机制的研究.方法新生SD大鼠32只,随机分为假手术对照组、假手术+电针组、HIBD对照组和HIBD+电针组,每组8只.HIBD组予左侧颈总动脉结扎,休息2 h后置于温暖湿润的低氧环境处理2 h;假手术组不予结扎动脉及低氧处理.假手术+电针组和HIBD+电针组大鼠于造模次日开始予电针百会、大椎穴,30 min·d-1,14 d为1个疗程.假手术对照组、HIBD对照组仅固定四肢,不予针刺.分别在针刺疗程的第1天、第7天、第14天对假手术+电针组、HIBD+电针组幼鼠进行皮质脑血流监测(n=4),并于疗程结束后次日(日龄22 d)进行运动功能评价.结果疗程的早、中、晚期,电针假手术组或脑损伤组大鼠均可致rCBF增强;与假手术对照组比较,HIBD对照组的运动功能(悬吊试验和斜坡试验)受损严重;HIBD+电针组大鼠的运动功能较HIBD对照组明显恢复.结论电针可促进脑损伤大鼠皮质的rCBF,有助于脑损伤和运动功能的恢复.     

PI3K/Akt 信号通路对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后学习记忆能力的影响

目的：研究PI3K/Akt 信号通路抑制剂 wortmannin 对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后远期学习记忆及认知功能的影响。方法：于制备新生大鼠左脑 HIBD 模型前 30 min,应用脑立体定位仪定位大鼠左侧海马区,注射wortmannin 2 μL,同时建立 HIBD+DMSO 组、HIBD模型组、假手术组及空白对照组。于大鼠 28 日龄时用 Morris水迷宫试验检测各组大鼠的学习记忆能力。结果：随游泳次数增加各组大鼠逃避潜伏期（EL）时间均有不同程度缩短;从第 2 天开始,HIBD+wortmannin 组EL明显长于假手术组和空白对照组 (t=2.637,P=0.023;t=3.585,P=0.003),且随着时间的延长差距逐渐扩大。到第 4 天和第8天时,HIBD+wortmannin 组EL值明显长于其他4组(P<0.05; P<0.01)。而在空间探索试验撤去平台后 120 s 内,HIBD+DMSO组和 HIBD 组的穿越平台次数低于假手术组和空白对照组（P<0.05）,HIBD+wortmannin组的穿越平台次数低于 DMSO+HIBD 组和 HIBD组（P<0.05）, 同时亦明显低于假手术组和空白对照组（P<0.01）。结论：抑制PI3K/Akt信号通路可加重大鼠认知功能障碍,从而影响远期的学习记忆及认知功能。     

电针可下调缺氧缺血性脑损伤幼鼠大脑皮层硫化氢含量

目的 建立缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠模型,研究电针干预后大鼠大脑皮层硫化氢(H2S)含量及相关酶的表达变化,探讨电针治疗神经系统疾病的气体生物学机制.方法 SD大鼠32只,日龄7 d,随机分为4组,假手术(sham)对照组,sham+电针(EA)组,HIBD对照组和HIBD+EA组,每组8只.Sham+EA组、HIBD+EA组大鼠于造模次日开始予以电针刺激百会、大椎穴,30min/d,14 d为1疗程.对照组仅固定四肢,不予针刺.疗程结束次日将大鼠处死、取材.应用敏感硫电极法测定大脑皮层H2S含量;应用免疫组织化学法定位和半定量检测胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)表达;应用蛋白质免疫印迹技术定量分析大脑皮层组织CBS表达.结果 HIBD对照组幼鼠脑皮层H2S含量为(26.83±4.31)nmol/mg蛋白,较sham对照组[(22.78±1.54)nmol/mg蛋白]明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01);HIBD+EA组幼鼠脑皮层H2S含量为(18.08±2.71)amol/mg蛋白,sham+EA组为(18.91±2.78)amol/mg蛋白,较相应对照组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);EA组大鼠脑皮层CBS表达较相应对照组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 电针可下调大脑皮层H2S/CBS体系,这可能是电针发挥对脑损伤修复作用的机制之一.

Abstract：

Objective To establish hypoxic-ischemic brain damaged (HIBD) rat model,investigate whether H2S and cystathionine-β-synthase (CBS), the key enzyme for its generation, may be a mediator of electro-acupuncture(EA) stimulation treatment for HIBD. Methods Thirty-two healthy Sprague-Dawley neonatal rats were divided into four groups randomly: sham control group ( n = 8 ); sham + EA group ( n =8); HIBD control group ( n = 8); and HIBD + EA group ( n = 8 ). HIBD rat models were established on their 7-day-old. From the next day ,rats of sham + EA group and HIBD + EA group were electric stimulated 30 min daily for 14 d,BAIHUI and DAZHUI as the acupoints. Control ones were just fixed at the same time,without acupuncture. The rats were sacrificed on the 22 nd day, one day after the treatment course. Cortical H2S concentration was measured by sensitive sulphur electrode assay. The CBS protein expression was measured by western blot analysis and immunohistochemistry for localization. Results The concentration of cortical H2S in HIBD control group was (26. 83 ± 4. 31 ) nmol/mg protein, which was significantly higher than that of sham control group[(22. 78 ± 1.54) nmol/mg protein]( P ＜ 0. 01 ). The H2 S levels in HIBD + EA group and sham + EA group were ( 18.08 ± 2.71 ) nmol/mg protein and ( 18.91 ± 2. 78 ) nmol/mg protein, respectively. Compared with corresponding control group, they were much lower( P ＜ 0. 01 ). The expression of CBS protein in rats with EA stimulation decreased in cortex compared to corresponding control group( P ＜0. 05 ).Conclusion EA can down-resulate H2S/CBS pathway. This may be one of the mechanisms of how EA contributes to the recovery of brain damage.     

Effect of different doses of vitamin D on osteocalcin and deoxypyridinoline in preterm infants

Background: Metabolic bone disease of prematurity is a common problem in preterm infants. The aim of the present paper was to measure the effect of vitamin D, in order to see the relation between vitamin D and urinary excretion of deoxypyridinoline (DPD), serum osteocalcin (OC), calcium (Ca), inorganic phosphorus (P), and alkaline phosphatase (ALP). Methods: Three different doses of vitamin D, 200 IU/kg (group 1, 11 infants), 400 IU/kg (group 2, 15 infants) and 800 IU/kg bodyweight/day (group 3, 11 infants), were administered to a total of 37 preterm infants between 15th day of birth until the 30th day of birth. Results: There were no significant differences in levels of serum Ca and P before and after vitamin D supplementation in all groups. Serum ALP levels were increased in all but significantly only in groups 1 and 3. Serum OC levels were also increased in each group by the treatment. Urinary DPD excretion was increased gradually by the increase in vitamin D intake, but it was significant only in group 3. Conclusion: High dose of vitamin D supplementation might accelerate bone turnover and increased urinary DPD levels might reflect increased bone resorption. To the best of the authors’ knowledge this is the first study comparing the effects of different vitamin D dose, by the means of urinary collagen cross‐links, on bone turnover in preterm infants.     

糖皮质激素对肺炎支原体肺炎大鼠肺组织的病理观察

目的:观察地塞米松对肺炎支原体肺炎(MPP)大鼠肺组织病理学的影响,为临床合理应用糖皮质激素治疗MPP提供理论依据。方法:95只SD大鼠随机分为4组：阿奇霉素组(n=25)、地塞米松组(n=25)、阿奇霉素＋地塞米松组(n=25)和对照组(n=20)。各组大鼠均予肺炎支原体（MP）菌液(1×106 CFU·mL-1）缓慢滴入大鼠鼻腔,100 μL·d-1,共4 d。各组均在MP最后1次接种后第2天开始给予干预,阿奇霉素组皮下注射阿奇霉素10 mg·kg-1·d-1,地塞米松组腹腔注射地塞米松磷酸钠0.5 mg·kg-1·d-1,阿奇霉素＋地塞米松组给予阿奇霉素10 mg·kg-1·d-1和地塞米松磷酸钠0.5 mg·kg-1·d-1,对照组给予相同体积生理盐水。治疗后第1、3、5、8和10天后处死大鼠取肺组织行病理学检查,并对肺组织炎症浸润程度进行评分。 结果:①治疗后第1天,各组均可见不同程度的肺实质及血管周围淋巴细胞浸润。第5天,对照组和地塞米松组仍可见细支气管及血管周围较多淋巴细胞浸润;阿奇霉素组和阿奇霉素+地塞米松组支气管周围淋巴细胞浸润减轻。第10天,对照组和地塞米松组可见肺组织及血管周围较多淋巴细胞浸润;阿奇霉素组和阿奇霉素+地塞米松组可见终末支气管周围少许淋巴细胞浸润。②各组肺组织病理学评分显示,对照组治疗后不同时点,肺组织病理学评分均维持在较高水平,显著高于阿奇霉素组和阿奇霉素+地塞米松组;地塞米松组治疗后不同时点,肺组织病理学评分呈显著增高趋势,提示炎症浸润程度的加重;阿奇霉素组和阿奇霉素+地塞米松组在治疗后第5、8和10天均呈下降趋势,其中阿奇霉素+地塞米松组低于阿奇霉素组。结论:在阿奇霉素基础上加用地塞米松可明显减轻MPP大鼠肺组织炎症。