网状纤维染色关键染液的配制方法

网状纤维的染色方法较多,Gomori银染色法是最常用的方法之一。染色过程需用酸性高锰酸钾溶液、铁明矾溶液、草酸溶液、氨银溶液、甲醛溶液、氯化金溶液、硫代硫酸钠溶液7种[1],其中氨银溶液是提高网状纤维染色力的关键染液,其配制质量至关重要。本实验在配制方法上进行了改良,使网状纤维染色阳性强度增加,且使染液保存期延长,现介绍如下。1材料与方法1.1材料硝酸银、氢氧化钠、氨水。     

改良Masson染色法在肾穿刺活检组织染色中的应用

肾穿刺活检组织常规特殊染色有3种染色：过碘酸雪夫反应(PAS)、高碘酸-乌托品银(PASM)、Masson染色。其中Masson三色染色主要用来观察肾小球嗜复红蛋白沉积物(免疫复合物)及肾脏内胶原纤维增生等。但常规的Masson三色染色法对肾小球内免疫复合物显色颜色对比不鲜艳。我们采用改良的Masson三色染色法,通过组织切片的补充固定法、试剂浓度的改良组合、     

甲苯胺蓝染色法显示体外培养的神经突起

显示体外培养的神经突起的常用技术之一是经典Bodian蛋白银染色法.我室曾对此法进行过改良,不仅获得满意的染色效果,而且成功率高.但此法与其它银染技术一样,染色时间长,需要在37℃恒温箱内孵育24小时以上.本文介绍一种简便的甲苯胺蓝染色法,只需数小时就可达到类似上述的染色效果.在染色标本数量较多的情况下,此法尤为适用.1 材料和方法1.1 将盖片培养物(涂有胶原基质的盖片及附着在其基质上培养的鸡胚背根节神经突起生长晕)放入10%中性福尔马林溶液内固定1小时.1.2 自来水冲洗15分钟,用蒸馏水洗1次.1.3 把盖片培养物放入盛有1%甲苯胺蓝溶液的染色皿内,室温下染色2～4小时.染液的配方是:硼砂(Bo-rax),1克;甲苯胺蓝(Toluidine blue),1克;蒸馏水,     

一种用于宽场荧光显微镜下成像的皮肤厚片免疫荧光染色方法

目的通过改良免疫荧光染色方案,使皮肤厚切片能在宽场荧光显微镜下荧光成像。方法选择成年雄性SD大鼠5只,经Zamboni固定液灌注固定后取后肢足底皮肤,冷冻切片,片厚40μm,行神经纤维标志物PGP9.5免疫荧光染色。首先比较染色后用梯度甘油溶液透明与不经甘油透明对皮肤厚片成像深度的影响;继之在染色后甘油透明的基础上,检测染色前二甲基亚砜(DMSO)处理不同时间(10min、15min和30min)对皮肤背景信号的影响。此外,采用体视显微镜检测梯度甘油透明对切片形态的影响。最后,用上述DMSO-甘油改良染色法进一步对神经纤维其他标志物NF 200和外周蛋白分别进行染色。结果经染色后甘油透明的切片其成像深度显著大于常规染色的切片(P0.01);在甘油透明的基础上,先用DMSO处理能有效降低皮肤背景着色,时间以15min为佳;梯度甘油处理并不会造成皮肤厚片的形态改变;DMSO-甘油改良染色法也能有效显示皮肤NF200和外周蛋白免疫反应阳性的神经纤维。结论经本改良方法染色的皮肤厚片能在宽场荧光显微镜下良好成像。     

Gomori氏六胺银染色在病理切片方面的应用

Gomori氏六胺银染色(GMS)原为1946年Gomori氏为显示糖原及粘液而设计的一种组织染色。后经Grocott氏改良并推广应用到切片的霉菌染色也得到较好的效果。本文使用GMS法显示病理切片上的各种霉菌,并分别与其他霉菌染色作了比较。此外,我们还应用GMS法染抗酸杆菌并与Wade—Fite(W—F)抗酸染色作对比观察。现将观察结果及体会整理于后,供同道参考。材料与方法一、溶液配制: 1、六亚甲基四胺—硝酸银储备液5%硝酸银溶液5ml 3%六亚甲基四胺溶液100ml 配法—将3%六亚甲基四肢水溶液加入5%硝酸银溶液中即形成一种白色沉淀,在摇动时立即溶解。澄清液在4℃冰     

Ziehl-Neelsen改良染色法在痰涂片中的应用

针对结核杆菌菌体含有蜡质的特点和传统Ziehl Neelsen抗酸染色法存在的不足 ,笔者在以前工作的基础上对染色液的配方进行改良〔1,2〕,并结合微波辐射技术建立了一种快速、敏感、简便的痰涂片抗酸染色法。1　材料与方法1.1　材料　 5 3例结核杆菌痰培养阳性的痰液 ,每例涂片 2张 ,95 %乙醇固定 15～ 30min ,分别用Ziehl Neelsen改良染色法和传统的抗酸染色法染色 ,同时设阳性对照、阴性对照。1.2　染液配制　 (1)改良的Ziehl Neelsen染色液 :碱性复红无水乙醇饱和液 (相当 6 %浓度 ) 10ml,活性剂 5ml,蒸馏水85ml,先将碱性复红溶于无水乙醇…     

介绍一种改良的Von Kossa钙盐染色法

在牙齿及骨骼外出现的钙沉积均为病理性钙盐沉积。草酸钙结晶性肾损伤的发病机制及其治疗靶点的基础研究中,实验大鼠肾组织内沉积的草酸钙结晶在HE染色中不易观察,借助Von Kossa钙盐染色法对实验动物行钙盐特殊染色,以便半定量统计各肾脏组织内草酸钙结晶的量。Von Kossa钙盐染色法是一种金属置换法,硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙被银置换,银盐在光的作用下被还原为黑色金属银,钙盐沉积处染色为黑色。Von Kossa钙盐染色法中最关键的硝酸银溶液染色步骤需要阳光照射,传统方法是将其置于阳光下或60 W灯泡前,放置1 h或更长时间,整个染色步骤耗时长且不容易控制。     

介绍一种真菌的染色方法

真菌中含有醛基 ,能将银分子还原为黑色的金属银而显色。日常所用的Ｇｒｏｔｔ Ｇｏｍｏｒｉ六胺银染色法就是利用这一原理进行染色的。但是Ｇｒｏｔｔ Ｇｏｍｏｒｉ六胺银染色法步骤多、要求高、耗时长、银液的浪费也较大。笔者在日常染色中 ,用Ｇｏｍｏｒｉ氨银液代替六胺银液配合微波进行染色 ,两者染色效果差异不大 ,但Ｇｏｍｏｒｉ氨银 微波法省时、省料 ,也较易着色 ,取得了满意的工作效果。一、材料与方法1.试剂及其配制 :(1)Ｇｏｍｏｒｉ氨银液 :用小量杯取 3ｍｌ10 %硝酸银水溶液 ,逐滴加入 10 %ＫＯＨ水溶液 1ｍｌ,产生棕黑色沉…     

三种改良的阮森吡啶-硝酸银法显示大鼠脊髓组织的比较

目的 对3种改良的阮森吡啶-硝酸银法(Ranson)在显示大鼠脊髓组织中的应用进行比较. 方法 对照组采用传统的阮森吡啶-硝酸银法,即取大鼠的新鲜脊髓组织,在酒精中加纯氨水固定,经纯吡啶、硝酸银、还原液染色,常规石蜡切片并观察.实验组采用改良的阮森吡啶-硝酸银法,即分别采用NaOH溶液、Na2CO3溶液和95%酒精替换在对照组中使用的纯氨水,其他染色步骤同对照组. 结果 实验组的脊髓组织切片分别经3种改良的阮森吡啶-硝酸银法染色,神经元的胞体和突起均呈黄棕色,神经纤维呈棕褐色,切片染色结果与对照组比较无明显差异,尤以酒精替换组的染色效果为最佳. 结论 以改良的阮森吡啶-硝酸银法显示大鼠脊髓组织中神经元及神经纤维染色效果良好,方法更加简便易行,且避免了氨水的刺激气味,有利于改善教学和科研的局部工作环境.     

不同染色方法对人脑垂体细胞显示效果的比较

目的改进人脑垂体的染色方法,更清晰地显示腺垂体内各种细胞的形态特点,提高实验课教学质量。方法应用苏木精-伊红染色法和改良染色液染色法显示脑垂体的组织结构。结果用传统的苏木精-伊红染色法不易区分各种细胞,而采用改良染色液显示脑垂体组织结构效果好,既能观察脑垂体的结构,又能区分嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞。结论改良染色液染色法能够很好地显示脑垂体组织结构,使3种细胞的形态特点清晰可辨,可为实验教学提供优质的切片标本。     

大鼠脑组织高尔基染色三种制备方法的比较

<正>1873年意大利著名的神经解剖学家卡米洛·高尔基发明硝酸银染色法,从此可以定性定量地观察神经元的形态~([1])。随后Cox等~([2-4])对高尔基染色法的固定液和染色液进行改良,提高结果的可视性,但初学者选择合适的染色方法仍较为困难。本实验采用相同的固定、染色和显色液,采用不同的制作方法(冷冻切片、石蜡切片、振动切片)进行大鼠脑组织高尔基染色,比较三种制作方法各自的优缺点,为科研实验和制作典型的教学示教切片提供可选方法 。     

介绍一种抗酸染色法

抗酸染色法有多种 ,根据本科近 10年来应用不同抗酸染色法的经验 ,对 8例已确诊为结核病的病理切片及细胞学涂片 ,从染色效果、操作难易程度及染色时间方面 ,用 6种不同抗酸染色法〔1～ 4〕反复染色对比实验结果 ,推荐一种经典的、简易的、快速实用性强的抗酸染色法———萋纳石炭酸染色法。1　材料与方法1.1　溶液配制　 (1)萋纳石炭酸复红溶液 :碱性复红乙醇饱和溶液 10ｍｌ,5 %石炭酸溶液 90ｍｌ。 (2 )脱色剂 :浓盐酸 3ｍｌ,95 %乙醇 97ｍｌ。 (3)复染液 (吕弗勒美蓝液 ) :美蓝乙醇饱和溶液 30ｍｌ,10 %氢氧化钾 0 1ｍｌ,蒸馏水 10 0ｍ…     

神经纤维快速染色改良法

神经纤维的染色方法很多 ,技术操作也比较复杂 ,特别是镀银法 ,若操作不当 ,不易成功。本染色法是在镀银法原理的基础上 ,加以改进而建立的神经纤维快速染色法。此方法快捷简便易行可靠 ,光镜下的神经纤维分布和形态改变清晰可见。本染色法目前尚无文献报导。1 .材料和方法　 1 .1　材料 :大白鼠周围神经、腓神经。主要试剂 :硝酸银。由北京化工厂提供。1 .2　方法 :1 )所需试剂 1 0 .5 %酸性高锰酸钾水溶液 5 0 ml,0 .5 %硫酸水溶液5 0 ml,临用前等量混合。 2 2 .5 %铁明矾水溶液 :硫酸铁胺 2 .5 g,蒸馏水 1 0 0 ml。 3胺银溶液 :以四张组…     

横纹肌快速染色法

目前 ,横纹肌染色多选用Ｍａｌｌｏｒｙ磷钨酸苏木精染色法(ＰＴＡＨ) ,但该方法存在着配置染液时间长 ,染色时间长等不足。虽有人加高锰酸钾氧化促其成熟 ,但还是需要几天时间 ,且染色效果也不是很满意。我们摸索出一种性能稳定的快速染色法 ,其试剂配制便捷 ,染色过程快速 ,组织色泽艳丽 ,对比度强 ,横纹显示清晰。一、材料与方法1 材料与试剂配置 :( 1)改良的磷钨酸苏木精染液 :苏木精 0 .1ｇ、磷钨酸 2ｇ、蒸馏水 10 0ｍｌ、黄色氧化汞 0 .1ｇ。Ａ液 :苏木精放入 3 0ｍｌ蒸馏水 ,加热使之溶解。Ｂ液 :取一 2 5 0ｍｌ烧杯 ,放入磷钨酸和…     

阿尔茨海默病患者脑组织病理形态学及β-淀粉样蛋白免疫组织化学观察

目的　探讨中国人阿尔茨海默病（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓ ｄｉｓｅａｓｅ,ＡＤ） 的发病情况、神经病理学特征,比较银浸染色法和β淀粉样蛋白免疫组化染色法在ＡＤ 病理诊断中的意义。方法　北京医院病理科１９８２～１９９８ 年间共有４４５ 例６０ 岁以上老年人尸检,其中２９ 例符合Ｋｈａｃｈａｔｕｒｉａｎ 和Ｍｉｒｒａ 的ＡＤ 病理诊断标准,占６．５％ 。参照Ｍｉｒｒａ 等的建议,对这２９ 例ＡＤ 患者脑组织于６ 个标准部位取材,行银浸染色（Ｂｏｄｉａｎ,Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ） 及β淀粉样蛋白免疫组化染色,并对老年斑及神经原纤维缠结进行计数分析。结果　老年斑有４ 种类型;β淀粉样蛋白免疫组化染色比银浸染色更敏感,能清晰地显示４ 型老年斑,而银浸染色仅能显示初级斑和神经突斑,显示小的弥漫斑和终末斑却不如免疫组化法;老年斑主要分布于海马、颞叶和额叶。神经原纤维缠结主要分布于海马、颞叶和杏仁核,其数量明显比老年斑少。本组２９ 例ＡＤ 中２５ 例有淀粉样变性脑血管病。结论　ＡＤ可能是中国人老年人痴呆的重要原因。蚁酸处理的β淀粉样蛋白免疫组化染色在ＡＤ的病理诊断中有重要作用。     

改良Bodian旦白银染色法显示体外培养的神经纤维

<正> Bodian旦白银染色法是一种显示神经纤维的经典银浸镀技术,早期是应用在神经组织的石腊切片上(Bodian 1936,1937),后来Murray和Stout(1947)将之应用在神经组织的体外培养标本,用以显示神经突起(neurite)。我们按经典的Bodian旦白银方法对培养的神经组织(交感神经节)标本进行染色,虽然有时亦可以清楚地显示神经     

五种染色方法对小鼠圆形精子染色效果的比较

比较五种染色方法对小鼠圆形精子(round spermatid,ROS)染色的效果,寻找一种鉴定圆形精子简单、有效的染色方法.以性成熟的昆明白鼠为实验材料,制备睾丸细胞悬液,分别用瑞氏、瑞氏-姬姆萨、姬姆萨、改良品红、苏木精五种方法对小鼠生精细胞进行染色,比较不同染色方法下圆形精子的形态.相比于其它四种染色方法,瑞氏-姬姆萨染色后能清晰地观察到圆形精子细胞膜和核膜的边缘,核质分明,与其它时期生精细胞区别明显.瑞-姬染色法是一种简单、有效的鉴定圆形精子形态的染色方法.     

神经纤维和髓鞘的双重染色法

神经纤维和髓鞘的染色方法很多,一般习惯于单一染色。为满足科研及病理诊断的需要,我们将神经纤维及髓鞘在同一张切片上进行多染色性染色,根据神经纤维和髓鞘呈现颜色的不同可将其区分开,取得理想的效果。1 材料与方法1.1 材料中枢神经及周围神经组织。1.2 试剂的配制1.2.1 氨银液:20% AgNO_330 ml;无水酒精20ml。混合,滴加浓NH_4OH,刚好溶解后再     

新生大鼠脊神经节与心肌细胞联合培养的光镜观察

将新生大鼠的脊神经节与心肌细胞进行联合培养，用相差显微镜和Ｈｏｌｍｅｓ还原银染色观察了神经元的生长以及神经纤维与心肌细胞之间的关系。脊神经节与心肌细胞联合培养７２￣９６小时可观察到神经纤维终止于搏动的心肌细胞表面。神经节组织块周围有许多神经纤维在心肌细胞表面相互交织成网状。交叉的神经纤维相互粘连在一起，终止于搏动的心肌细胞表面的一条神经纤维移动将会牵动邻近的交叉神经纤维网。Ｈｏｌｍｅｓ还原银染色结     

应用改变的Golgi-Cox染色方法检测纹状体内神经元的结构与形态(英文)

为了改变传统的Golgi-Cox染色方法,使其在纹状体神经元形态与结构的研究中更加稳定和有效,本实验将昆明小鼠随机分为两组,一组采用传统的Golgi-Cox染色法,另一组采用改良的Golgi-Cox染色法。改良方法在传统方法的基础上,改变了几个关键环节,包括溶液的配制、固定、包埋、切片和定影等,然后对两种方法进行统计学比较和分析。在所有的数据采集工作完成之前,切片上的标记是封闭的。通过统计学分析比较,发现改良方法能够稳定地显示更多的树突分支(增加50%)、树突棘(增加63%)和胞体(增加一倍)。改良的Golgi-Cox染色方法比传统的Golgi-Cox染色方法更加稳定和敏感,在纹状体神经元树突和树突棘形态与结构研究中是一种可靠的技术方法。