大鼠坐骨神经损伤修复术后相应脊髓节段Bcl-2、Bax蛋白表达及神经细胞凋亡

目的探讨成年大鼠坐骨神经损伤修复术后相应脊髓节段Bcl-2、Bax蛋白表达及神经细胞凋亡为临床治疗周围神经损伤提供实验依据。方法选取健康成年大鼠68只,随机分为正常对照组、假手术组和实验组,分别于术后不同时间取相应脊髓节段做HE染色、TUNEL染色、免疫组化染色,进行脊髓切片形态观察、检测神经细胞的凋亡及脊髓Bcl-2、Bax蛋白表达。结果假手术组术后无阳性变化。实验组术后脊髓前角运动神经元胞体数目减少,1d后可见脊髓内TUNEL阳性细胞,14d后表达至高峰。1d后,凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达,14d后达高峰,28d后仍有表达。Bcl-2/Bax值越小,凋亡细胞数量越多。结论大鼠坐骨神经损伤修复术后相应脊髓节段存在神经细胞凋亡,Bcl-2/Bax比值的变化是神经凋亡的重要指标。     

成年大鼠坐骨神经切断后脊髓运动神经元死亡方式的研究

目的探索成年大鼠坐骨神经切断损伤后脊髓前角运动神经元的死亡方式.方法选择大鼠坐骨神经切断损伤模型,术后48 h、7 d、15 d、30 d动物经4%多聚甲醛常规灌注固定,取L4～L6脊髓节段,TUNEL染色和电镜观察.结果坐骨神经切断后TUNEL染色和电镜观察均检测到脊髓前角运动神经元典型的凋亡形态学改变.结论周围神经切断后脊髓前角运动神经元出现凋亡,表明神经元的凋亡可能为成年大鼠周围神经损伤引发神经元死亡的重要病理过程.     

嗅鞘细胞复合细胞外基质凝胶移植对周围神经损伤后运动神经元的保护作用

目的探索周围神经损伤后嗅鞘细胞(OECS)和细胞外基质(ECM)凝胶复合移植对周围神经运动元的保护作用。方法将Wistar大鼠20只随机分为实验组、对照组。每只大鼠均切断右侧坐骨神经,之后以硅胶管套接于坐骨神经切断部位,实验组囊内给予OECS制成1×106/ml的ECM凝胶,对照组囊内给予磷酸缓冲液(PBS)0.05ml。术后2周,应用酶组织学方法进行相应阶段脊髓前角α运动神经元一氧化氮合酶(NOS)和乙酰胆碱脂酶(AchE)染色,通过标准网格法进行神经元计数并应用计算机图像分析测定胞体的直径和面积。结果与正常侧相比,对照组损伤侧脊髓前角α运动神经元NOS活性明显增高,实验组差异无显著性(P>0.05),损伤侧实验组3.8±1.4,对照组11.4±2.6,差异非常显著性。对照组损伤神经元胞体直径(27.83±5.28)cm,面积(630.24±252.27)cm2,未损伤侧直径(23.31±3.87)cm,面积(438.47±142.14)cm2,损伤明显增加。结论周围神经损伤后,嗅鞘细胞复合细胞外基质凝胶对脊髓前角运动神经元具有保护作用。     

拉莫三嗪对慢性致痫大鼠海马细胞凋亡的影响

目的 通过观察拉莫三嗪对戊四氮慢性致痫大鼠海马Bcl-2和Bax表达的影响来探讨其抗凋亡作用. 方法 选取健康成年雄性Wistar大鼠80只,按体重随机分为:正常组;模型组;丙戊酸钠低、中、高剂量组;拉莫三嗪低、中、高剂量组;每组10只.模型组,丙戊酸钠和拉莫三嗪低、中、高剂量组,每日腹腔注射戊四氮35 mg/(kg·d)制作慢性点燃癫痫模型(大约2周).然后腹腔注射戊四氮35 mg/(kg·d),隔日一次;同时丙戊酸钠和拉莫三嗪各剂量组分别给予相应剂量的丙戊酸钠和拉莫三嗪灌胃,每天一次,共3周.然后取海马标本做免疫组化检测Bcl-2和Bax的表达. 结果 模型组Bcl-2和Bax表达显著高于正常组(P<0.001).与模型组比较,丙戊酸钠和拉莫三嗪各剂量组Bcl-2高表达,Bax低表达(P<0.001).其中拉莫三嗪低剂量组与丙戊酸钠低剂量组之间差异没有统计学意义(P>0.05);拉莫三嗪中剂量组与丙戊酸钠中、高剂量组之间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01). 结论 拉莫三嗪和丙戊酸钠对戊四氮慢性致痫大鼠海马细胞凋亡均具有抑制作用,但拉莫三嗪优于丙戊酸钠.     

阿魏酸钠对神经病理性疼痛大鼠脊髓Bcl-2和Bax的影响

目的观察阿魏酸钠对神经病理性疼痛大鼠脊髓中Bcl-2和Bax表达的影响,探讨阿魏酸钠对脊髓的保护作用。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为两组:A组(n=30)为生理盐水组,结扎左侧坐骨神经后每天腹腔注入2ml生理盐水;B组(n=30)为阿魏酸钠组,结扎坐骨神经后向腹腔注入2ml阿魏酸钠,100mg.kg.-1d-1,连续7 d。分别在术前及术后6 h、1 d、3 d、7 d进行行为学测定,记录缩足阈值,检测脊髓中Bcl-2和Bax的表达,采用TUNEL法观察脊髓神经元凋亡。结果两组大鼠坐骨神经结扎后均可诱发出神经病理性疼痛;凋亡神经元和Bcl-2和Bax阳性细胞均于术后6 h开始出现,并于术后1 d开始迅速增加,术后3 d达峰值。与生理盐水组相比较,阿魏酸钠组大鼠脊髓组织中神经细胞凋亡指数和Bax表达水平显著降低,而Bcl-2的表达水平却显著增加(P<0.05)。结论阿魏酸钠可能通过促进Bcl-2表达,抑制Bax表达,从而抑制了大鼠脊髓神经元凋亡,对脊髓有保护作用。     

不同时间窗吻合大鼠坐骨神经后应用CNTF对脊髓运动神经元内Ca^2＋的作用

目的：研究睫状神经营养因子（CNTF）对坐骨神经损伤延期手术后对相应脊髓Ca2＋作用和脊髓神经损伤的再生修复作用.方法：大鼠双侧坐骨神经切断后延期即刻、3,7,14,21d后行神经外膜端-端吻合术,给予CNTF治疗.吻合术后饲养3d后处死检测脊髓Ca2＋浓度,饲养28d后处死行Tunel染色凋亡细胞计数、HE染色观察L4～6脊髓神经元形态、神经吻合口部位神经纤维镀银染色形态学观.结果：用药组TUNEL阳性细胞数目比未用药组、盐水组少,用药组在3个大组中凋亡数目少且均与其他3组有统计学差异（P〈0.05）,用药组7d凋亡数目较盐水组、非用药组低; Ca2＋质量浓度较未用药组、盐水组增幅减低; 用药组即刻、3d、14d、21d亚组28d处死时可见部分神经纤维通过吻口,7d通过吻合口更多,但排列不整齐,而未治疗组和对照组的神经纤维通过吻口数量较治疗组不明显.结论：坐骨神经在不同时间切断吻合后均可诱导脊髓前角运动运动神经元的凋亡; 大鼠坐骨神经离断吻合后,不同时间窗吻合术后应用CNTF可以降低急性期脊髓组织Ca2＋离子水平,可能起到减少脊髓运动神经元凋亡的发生、保证周围神经轴索再生数量的作用.     

蛛网膜下隙局部应用GDNF对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的 研究周围神经损伤后经蛛网膜下隙置管局部应用外源性胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neu-rotrophic factor,GDNF)对脊髓前角运动神经元的保护作用. 方法 成年SD大鼠随机分为2组:GDNF组(坐骨神经切断术后给予GDNF)和NS组(术后给予生理盐水).切断两组大鼠左侧坐骨神经致相应脊髓前角运动神经元部分损伤,行蛛网膜下隙置管,实验组注入外源性GDNF(10 μg/ml),对照组注入同等剂量的生理盐水,于2,4,8周行坐骨神经功能指数检测;取L4-6节段脊髓标本冰冻切片,行胆碱酯酶(ChE)和酸性磷酸酶(ACP)染色并进行图像分析. 结果 GDNF组脊髓前角运动神经元ChE阳性颗粒面积比NS组有明显提高(P<0.05),ACP阳性颗粒面积低于NS组(P<0.05);GDNF组坐骨神经功能指数亦优于NS组. 结论 周围神经损伤后通过蛛网膜下隙注入外源性GDNF对相应的脊髓运动神经元有保护作用.     

丙戊酸钠联合紫杉醇协同促进肺癌A549细胞凋亡

目的研究丙戊酸钠(VPA)单药及联合紫杉醇(PTX)对肺癌A549细胞凋亡的影响,探讨其可能的分子机制。方法设立空白对照组、紫杉醇组、丙戊酸钠组、紫杉醇与丙戊酸钠联合用药组,采用流式细胞仪检测各组A549细胞凋亡的情况,荧光定量PCR及Western blot法测定各组细胞Bcl-2、Bax、Caspase3 m RNA及蛋白表达的变化。结果空白对照组、紫杉醇组、丙戊酸钠组、联合用药组使用药物作用24 h后,流式细胞仪检测证实丙戊酸钠与紫杉醇有联合促肺癌细胞凋亡的作用,差异有统计学意义(P0.05)。药物作用24 h后,与空白对照组相比较,各用药组A549细胞中Bcl-2基因及蛋白的表达均降低,且联合用药组的表达最低,各用药组A549细胞中Bax及Caspase3基因及蛋白的表达均升高,且联合用药组的表达最高(P0.05)。结论丙戊酸钠协同紫杉醇能促进肺癌A549细胞凋亡,其机制可能与其能够上调A549细胞中凋亡因子Bax及Caspase3的表达,下调Bcl-2的表达有关。     

乳腺癌根治术后采血模式与采血异常现象之间的相关性分析

目的探讨丙戊酸钠对精神分裂大鼠环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）/脑源性神经营养因子（BDNF）/酪氨酸激酶受体B（TrkB）通路及神经元损伤的影响。方法将50只雄性Wistar大鼠按随机数表法分为对照组、模型组、丙戊酸钠低剂量组、丙戊酸钠高剂量组和氯氮平组,每组10只。模型组、丙戊酸钠低剂量组、丙戊酸钠高剂量组和氯氮平组腹腔注射地卓西平（MK-801）制备精神分裂症模型。造模结束后24 h,丙戊酸钠低剂量组和丙戊酸钠高剂量组同时分别灌胃150 mg/kg和300 mg/kg的丙戊酸钠;氯氮平组灌胃20 mg/kg的氯氮平;对照组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给予14 d。采用Morris水迷宫实验检测大鼠的学习和记忆能力,观察大鼠海马组织病理学情况,检测海马组织细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法检测海马组织中CREB、磷酸化-CREB（p-CREB）、BDNF、TrkB和磷酸化-TrkB（p-TrkB）蛋白表达水平。结果对照组大鼠海马组织细胞多且排列紧密,层次清晰;模型组和丙戊酸钠低剂量组大鼠海马组织排列紊乱,细胞明显肿胀、细胞核固缩、核碎裂;丙戊酸钠高剂量组和氯氮平组大鼠海马组织趋于正常,但见少量核固缩和核碎裂的细胞。与对照组比较,其余各组大鼠目标象限游泳时间、穿越平台次数、海马组织中CREB、p-CREB、BDNF、TrkB和p-TrkB蛋白表达水平降低,海马组织细胞凋亡率增加（P<0.05）;与模型组相比,各丙戊酸钠剂量组和氯氮平组大鼠目标象限游泳时间、穿越平台次数、海马组织中CREB、p-CREB、BDNF、TrkB和p-TrkB蛋白表达水平增加,海马组织细胞凋亡率降低（P<0.05）;且丙戊酸钠高剂量组大鼠目标象限游泳时间、穿越平台次数、海马组织中CREB、p-CREB、BDNF、TrkB和p-TrkB蛋白表达水平高于丙戊酸钠低剂量组,海马组织细胞凋亡率低于丙戊酸钠低剂量组（P<0.05）;但作用没有氯氮平组显著（P<0.05）。结论丙戊酸钠可以缓解精神分裂症大鼠神经元损伤,抑制海马细胞凋亡,其作用机制可能与CREB/BDNF/TrkB通路激活有关。     

大鼠坐骨神经损伤后脊髓运动神经元凋亡及其机制研究

目的探讨大鼠坐骨神经损伤后雪旺细胞（schwann cells，SCs）中核因子-κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）的表达及其对脊髓运动神经元凋亡的调控作用。方法健康成年雄性SD大鼠36只，体重200～250g，随机分为正常对照组（n=-6）和坐骨神经钳夹损伤组（n=30）。采用免疫组化、计算机图像分析技术，对正常和损伤后不同时间1、3、7、14及21d的坐骨神经SCs中NF—κB的表达进行检测。同时取与坐骨神经相连的L4～L6段脊髓作原位末端标记技术（TUNEL）检测脊髓运动神经元的凋亡。结果与正常对照组相比较，损伤组坐骨神经SCs中NF—κB的表达显著改变，其变化趋势为先升高后降低，伤后3d达高峰。随后逐渐下降，21d接近正常值；损伤组脊髓运动神经元凋亡数在损伤后表现出相同的变化趋势。相关分析表明两者呈显著正相关。结论坐骨神经损伤后脊髓运动神经元发生不同程度的凋亡，SCs中NF—κB可能参与这种凋亡的调控过程。     

bcl-2基因修饰神经干细胞移植修复大鼠脊髓损伤

目的探讨bcl-2基因修饰神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠损伤神经功能恢复的影响。方法体外培养大鼠神经干细胞,经Ad-EGFP为载体介导端B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)基因转染神经干细胞,分为3组:对照组、阴性转染组、bcl-2转染组。Western-blot检测神经干细胞在转染前后bcl-2蛋白的表达。成年雌性SD大鼠85只,造模成功72只,随机分为对照组,NSCs组,bcl-2-NSCs组,24只/组,按照改良的Allen打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型。通过BBB评分、斜板试验进行运动功能评定。造模后7 d通过RT-PCR及Western-blot检测检测脊髓损伤区周围HSP27、c-fos基因的表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况。造模后4周取材行病理切片HE染色及荧光显微镜观测EGFP标记的NSC存活及分布情况,通过SEP和MEP观察大鼠神经电生理恢复情况。结果 bcl-2基因转染大鼠神经干细胞后,bcl-2转染组与对照组、阴性转染组相比bcl-2基因和蛋白水平均有表达(P0.05);大鼠下肢运动功能评价bcl-2-NSCs组优于NSCs组,NSCs组优于对照组。造模后72 h,bcl-2-NSCs组细胞凋亡数均明显低于对照组和NSCs组(P0.05)。造模后7 d,与对照组和NSCs组相比,bcl-2-NSCs组HSP27基因和蛋白的表达均较显著升高(P0.05),bcl-2-NSCs组c-fos基因和蛋白的表达较显著降低(P0.05)。造模后4周,HE染色对照组可见脊髓组织缺失及脊髓空洞形成,无神经轴索通过。NSCs组损伤区可见少量神经轴索样结构,脊髓空洞较小,bcl-2-NSCs组可见较多神经轴索样结构,未见脊髓空洞。EGFP标记的阳性细胞数:bcl-2-NSCs组最多,NSCs组次之,对照组未见,且各组之间差异有显著性(P0.05)。造模后4周,SEP和MEP的潜伏期:bcl-2-NSCs组NSCs组对照组,且各组之间差异有显著性(P0.05);波幅:bcl-2-NSCs组NSCs组对照组,且各组之间差异有显著性意义(P0.05)。结论通过Ad-EGFP为载体介导端B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)基因转染使神经干细胞能够促进体外培养的大鼠神经干细胞增殖。bcl-2基因修饰神经干细胞移植可促进脊髓损伤大鼠神经突触的再生,升高脊髓损伤区HSP27表达,降低脊髓损伤区bcl-2基因的表达和神经细胞凋亡,改善大鼠的肢体运动功能和电生理功能。     

Expression of NF-kB in Schwann apoptosis in spinal cord following cells and its effect on motor neuron sciatic nerves injury in rats

Objective：To explore the expression of nuclear factor-kappa B （NF-kB） in Schwann cells （SCs） and its effect on motor neuron apoptosis in spinal cord following sciatic nerves injury in adult rats. Methods： Thirty-six adult Sprague-Dawley （SD） rats were divided randomly into normal control group （n=6）, and sciatic nerves crushing group （n= 30）, and the later was further equally randomized into 5 subgroups： 1, 3, 7, 14, and 21 d post-injury groups. The expression of NF-kB of normal and injured nerves were examined by immunohistochemistry staining, and the apoptosis of motor neurons in spinal cord of lumbar 4 to lumbar 6 （L4-L6） was investigated by terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP-biotin nick end labeling （TUNEL） assay. Both were qua.ntitated by image analysis. Results： In crushing group, except 21 d post-injury group, the expression of NF-kB was markedly higher than that in the normal control group （P〈0.05, P〈0. 01）. At 1 d after sciatic nerves crushing, the expression of NF-kB was obviously up-regulated, reached peak at 3 d, and recovered at 21 d. The same trend was observed in the time-course on motor neuron apoptosis after sciatic nerves injury. Correlation analyses revealed that motor neuron apoptosis was significantly and positively correlated with the expression of NF-kB following sciatic nerves injury （r= 0. 976 0, P〈0. 01）. Conclusion： After injury of sciatic nerves, the presence and up-regulation of NF-kB in SCs may be involved in motor neuron apoptosis in L4-L6 spinal cord.     

MP与GM1对脊髓损伤后神经元凋亡及bcl-2基因的影响

目的:探讨甲基强的松龙(MP)与神经节苷脂(GM1)对脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和bcl-2基因的影响及保护机制。方法:将85只同龄Wistar大鼠,采用Allens的weight dropping(WD)法挫伤大鼠T11节段脊髓,于术后即刻、15 min,4 h、8 h、12 h、24 h、72 h经蛛网膜下腔导管各注入MP与GM1,并与NaCl溶液组和正常对照组进行比较。结果:正常组脊髓前角中未发现凋亡细胞,NS组于伤后4 h始出现凋亡神经元。MP与GM1组与NS组相比较,凋亡神经元明显减少(P<0.01)。bcl-2基因在正常脊髓组织中表达很弱,在NS组中表达随时间不同,MP与GM1组bcl-2基因表达较NS组明显增加(P<0.01)。结论:脊髓损伤后脊髓神经元凋亡增多和bcl-2基因表达显著增多,MP与GM1能抑制脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和上调bcl-2基因表达,从而保护损伤的神经组织。     

选择性COX-2抑制剂对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响相关性实验研究

目的:在建立大鼠脊髓损伤模型基础上,不同时间点观察选择性COX-2抑制剂对脊髓胶质细胞,神经元凋亡的影响,以期为临床急性脊髓损伤的治疗提供理论依据。方法:健康成年大鼠72只,随机分为两组,其中单纯损伤组(单纯打击损伤)36只,COX-2组(手术加COX-2)36只。脊髓损伤动物模型的制备:用自制A1len打击器2 5gcm致伤力撞击脊髓,制成脊髓损伤动物模型。COX-2组每天肌注帕瑞昔布(5 mg/Kg)直至处死,单纯损伤组仍每天肌注生理盐水0.5 ml直至处死。常规制成脊髓切片,给于Bcl-2检测,TUNEL原位末端标记,检测大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的情况。结果:Bcl-2蛋白检测:在脊髓损伤后的第1天,脊髓组织即开始较高表达Bcl-2蛋白。单纯损伤组Bcl-2高峰发生在损伤后3天,而COX-2组伤后l天达到高峰,此时Bcl-2蛋白不仅表达在神经细胞中,更多的在胶质细胞中大量表达,且此状态一直维持到伤后14天才开始下降,伤后2l天仅少量表达;(P<0.05)。TUNEL原位标记检测:单纯损伤组24小时已山现不少阳性细胞,以胶质细胞为主,3～8天达到高峰,此后逐渐回落,但2l天时仍有阳性细胞,应用帕瑞昔布治疗后,凋亡细胞明显减少(P<0.05)。结论:本研究证明,选择性COX-2抑制剂在脊髓损伤中通过改善微循环,促进Bcl-2蛋白的表达,清除氧自由基,抗氧化作用能够抑制脊髓损伤早期神经细胞和胶质细胞的凋亡,从而减轻脊髓继发性损伤,促进脊髓神经功能的恢复。所以SCI后早期应用选择性COX-2抑制剂配合其它药物阻止神经细胞和胶质细胞的凋亡可能有助于减轻SCI的损害程度,促进脊髓神经功能的恢复,为SCI的治疗提供一个新的途径。     

EPO对大鼠急性脊髓损伤后Bcl-2及Bax表达与运动神经元凋亡的影响

目的:探讨促红细胞生成素对脊髓损伤后脊髓后角Bcl-2、Bax表达及神经元凋亡的影响。方法:120只SD大鼠随机分成4组:空白组、单损组、生理盐水组、EPO组;以T10为中心横断损伤脊髓,EPO组术后即刻给予EPO每日3000U/kg腹腔注射,盐水组腹腔注射等量生理盐水。采用免疫组织化学染色和Tunel法检测损伤后基因Bcl-2、Bax的表达水平和神经元凋亡变化。结果:Bcl-2在1天达高峰,单损组58.32±2.37;EPO组176.68±11.21;3天后开始下降,14天仍有微量表达;EPO组较单损组Bcl-2表达明显增加,EPO组Bcl-2表达比损伤组在相同时间点有明显差异(P<0.05),组内24h时间点较其它点Bcl-2表达均有明显差异(P<0.01)。Bax8h开始增多,24h达峰值,3天开始下降,7天达正常水平。结论:EPO能在SCI后促进Bcl-2、抑制Bax表达,调高Bcl-2/Bax比值,减少继发神经元细胞凋亡,促进神经再生与修复。     

神经营养素3对坐骨神经损伤大鼠肌萎缩的修复作用

目的探讨神经营养素3(NT-3)对坐骨神经损伤大鼠肌萎缩的修复作用及其机制。方法 50只SD大鼠制成坐骨神经损伤模型,分为对照组和NT-3组,每组25只。显微镜下NT-3组右侧腓肠肌内注射NT-3质粒10μL(1 g.L-1),对照组注射生理盐水10μL。于注射后不同时间点观察2组大鼠caspase-3基因的表达情况、运动终板和肌细胞凋亡数目。结果坐骨神经损伤后大鼠caspase-3基因转录水平升高;NT-3组caspase-3基因转录水平和肌细胞凋亡率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);坐骨神经损伤后14、21 d NT-3组大鼠运动终板多于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NT-3抑制caspase-3基因的表达、肌细胞凋亡并提高运动终板数量,可能是促进神经纤维损伤后再生和减缓失神经肌萎缩的重要因素。     

枸杞多糖对大鼠坐骨神经离断后神经生长因子表达的影响

目的研究枸杞多糖对大鼠坐骨神经离断后神经生长因子（NGF）表达的影响。方法雌性SD大鼠72只,随机分成空白对照组、模型组与枸杞多糖（LBP）组,每组24只,后两组切除右侧坐骨神经2cm,LBP组腹腔注射枸杞多糖10mg/（kg.d）,模型组给予相同剂量生理盐水,分别于给药后第7、14、21和28d取坐骨神经离断的近端神经及相连背根神经节和相对应的脊髓（每组6只）,应用免疫组织化学方法分析神经生长因子表达的变化。利用Image-proplus6.0图像分析系统进行半定量分析。结果模型组和LBP组的坐骨神经及相连背根神经节和相应的脊髓NGF免疫组化平均光密度高于空白对照组,LBP组坐骨神经、脊神经节及脊髓中的NGF免疫组化平均光密度在术后第7、14、21、28d均低于模型组组（P〈0.05）。结论枸杞多糖可抑制大鼠坐骨神经离断后近端及相应的节段神经节和脊髓组织中的神经生长因子量的表达。     

血管内皮生长因子防止脊髓运动神经元凋亡的研究

目的研究成年大鼠脊髓损伤后血管内皮生长因子对运动神经元的神经保护作用以及Caspase-3 mRNA表达与运动神经元凋亡的关系。方法用72只SD大鼠制作成脊髓损伤模型,随机分为对照组、应用VEGF组和VEGF拮抗组。伤后6、12、24h和3、7、14d取材。应用原位杂交、TUNEL技术研究运动神经元的凋亡。结果Caspase-3 mRNA在VEGF组脊髓组织中的表达下调,在VEGF拮抗组中表达增高。TUNEL阳性细胞计数显示脊髓损伤后VEGF拮抗组有多量神经元丢失,而VEGF组神经元丢失数量明显减少。结论VEGF可以防止成年大鼠脊髓损伤后运动神经元的凋亡,其作用可能是由Caspase-3介导的。     

Influence of neurotrophin-3 on Bcl-2 and Bax expressions in spinal cord injury of rats

Objective： To study the protective mechanisms of neurotrophin-3 （NT-3） on the spinal cord injury. Methods：Totally 105 SD rats were randomly divided into 3 groups： control group, experimental group and sham operation group. Rats from the former 2 groups were inflicted to animal model of acute spinal cord injury according to Allen＇s （WD） by situating a thin plastic tube in the subarachnoid space below the injury level for perfusion. Rats in experimental group received 20 ul NT-3 （200 ng） from the tube at 0, 4, 8, 12, 24 h and 3, 7 d after injury, and those in control group got an equal volume of normal saline at the same time. The animals in sham operation group only received opening vertebral plate and tube was put in subarachnoid space. The rats were sacrificed at 4, 8, 12, 24 h and 3, 7, 14 d post injury （n=5）. The expression levels of Bcl-2 and Bax proteins in spinal cord of rats were detected by immunohistochemistry assay. Results： The level of Bax protein in control group significantly increased as compared with those in sham operation group, and the peak reached at 8 h after spinal cord injury. The Bcl-2 proteins were always weakly positive. The Bax proteins in NT-3 group significantly decreased but the Bcl-2 proteins obviously increased as compared with those in control group. Conclusion： NT-3 can protect spinal cord from injury in vivo. One of the mechanisms is that NT-3 can inhibit abnormal expression of Pax protein, and increase the expression of Bcl-2 protein, then inhibit apoptosis after spinal cord injury.