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1.
目的 探讨预诱导热休克蛋白90α(HSP90α)后,细胞热应激反应的变化,并探索诱导细胞热习服的策略。方法 将人肝细胞癌细胞系HepG2培养于42℃细胞培养箱制作热应激模型,用不损伤细胞活性浓度的HSP90抑制剂17-DMAG诱导HSP90α表达增多,通过流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)含量和凋亡,CCK-8检测细胞活性,Western blot检测蛋白变化。结果 热应激0.5~4 h后,细胞内ROS含量逐渐升高(F=332.22,P<0.01);在37℃恢复至24 h后,热应激1~4 h组细胞内γH2AX较0 h组显著增多,同时细胞活性也随热应激时间延长而降低(F=59.97,P<0.01),热应激4 h组活性只有0 h组的(71.39±2.55)%;使用5 nmol/L 17-DMAG预处理24 h诱导HSP90α表达增多后,能显著减少热应激后的γH2AX和细胞凋亡率(F=62.79,P<0.01),使热应激4 h组细胞凋亡率从(26.06±2.48)%降至(15.93±1.67)%。结论 通过诱导HSP90α表达增多能减少细胞热应激后的DNA损伤和凋亡,有利于...  相似文献   

2.
目的 观察人肝细胞(L02)氧化应激模型中热休克蛋白90α(heat shock protein 90α, Hsp90α)和相关底物蛋白细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)的蛋白水平变化,以及Hsp90α表达下调后对Cyclin B1表达的影响,明确Hsp90α对Cyclin B1功能的影响,为氧化应激相关的肝脏疾病防治提供新思路。方法 以200μM H2O2建立氧化应激L02细胞损伤模型;通过CCK-8法观察氧化应激对细胞存活的影响,比色法测定细胞内谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量,流式细胞术检测细胞周期,免疫印迹法检测氧化应激对细胞内Hsp90α及Cyclin B1蛋白水平的影响。结果 随着氧化应激刺激时间的延长,GSH含量逐渐减少,抗氧化能力不断降低。从6 h开始,胞内GSH水平较对照组明显下降(均P<0.05);H2O2对L02细胞增殖的抑制程度增强;氧化应激后细胞周期检测点G2/M期阻滞明显;氧化应激导致胞内Hsp90α蛋白水平先增加后降低,在刺激24 h时Hsp9...  相似文献   

3.
目的研究镉对卵巢子宫内膜雌激素受体(ER)及HSP 90α表达的影响,探讨其内分泌干扰作用机制。方法40只成年雌性Wistar大鼠按体重分层随机分为4组,每组10只,镉(Cd2+)染毒剂量分别为0、1.25、2.5、5.0 mg Cd2+/(kg.d),皮下注射,每周5 d连续4周。于动情间期将大鼠处死;用免疫组化染色法观察卵巢间质和子宫内膜ER表达以及子宫内膜HSP 90α表达。结果高剂量组卵巢间质ER表达显著降低于其他各剂量组(P<0.05);各染毒组子宫内膜ER表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05),其中高、中剂量组显著低于低剂量组(P<0.05);各染毒组子宫内膜HSP 90α表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验条件下,高剂量组染镉可使卵巢间质ER表达显著下降,而各染毒组子宫内膜ER表达与对照组比较差异无统计学意义,其在镉的内分泌干扰作用机制中镉对ER表达影响的意义值得进一步研究;镉不会通过增加子宫内膜HSP 90α的表达来干扰内分泌系统。  相似文献   

4.
目的 探讨低浓度职业性苯接触工人热休克蛋白90α(heat shock proteins 90α,Hsp90α)水平及其对人体的氧化应激效应。方法 2021年5—8月,采用整群抽样方法,以某加油站35名低浓度职业性苯接触工人为接触组,37名非苯作业人员为对照组,进行对照研究。通过问卷调查收集研究对象的基本情况;采集两组人群外周静脉血,检测血常规参数,测定细胞内总谷胱甘肽浓度、血浆中Hsp90α水平。采用气相色谱法测定工作场所空气中苯的浓度。结果 接触组工人接触苯的浓度低于检测限,其血白细胞计数、中性粒细胞绝对值高于对照组(P <0.05),但均在正常参考值范围内。接触组还原型谷胱甘肽(GSH)/氧化型谷胱甘肽(GSSG)值低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。多元线性回归分析结果显示:相比对照组,接触组的Hsp90α水平提高79.43 ng/mL(P <0.05)。结论 低浓度职业性苯接触对人体健康可能存在影响。Hsp90α可考虑作为潜在的低浓度苯接触的效应生物标志。联合运用血常规检查及血浆Hsp90α水平检测,对及时发现低浓度职业性苯接触造成的健康损害具有...  相似文献   

5.
热休克蛋白在应激环境中对胚胎生长发育的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
应激条件下热休克蛋白的表达与体内/体外胚胎、细胞生长发育关系极为密切。热休克蛋白70具有双相作用,其合成以转录水平调控为主,主要被热休克因子控制,亦与C-fos、C-myc、p53等基因及钙/钙调蛋白、甘油二酯磷酸肌醇-3激酶、c-AMP、PKC等在子有关。本文还介绍了热休克蛋白的5大家族及主要成员,同时纳了热休克蛋白研究中存在的问题。  相似文献   

6.
目的 探讨ATP导致共伴侣分子细胞分裂周期蛋白37(Cdc37)从人热休克蛋白90(HSP90)复合体解离的可能机制,为抗肿瘤新药研发提供理论依据。方法 用免疫共沉淀法(IP)捕获人组织淋巴瘤细胞(U937细胞)中HSP90复合体后,进行以下实验:(1)用流式细胞术(FCM)检测经过ADP、17-烯丙基胺格尔德霉素(17-AAG)、亚胺二磷酸腺苷(AMPPNP)、ATP处理后HSP90复合体中的Cdc37含量,并分别与经二甲基亚砜(DMSO)处理的对照组进行比较,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是单纯由ATP结合导致还是依赖ATP水解;(2)用FCM检测对照组及ATP处理后复合体中Cdc37和其他共伴侣分子中S期激酶关联蛋白1 G2等位基因抑制因子(Sgt1)、HSP70相互作用蛋白(HIP)、FK-506结合蛋白(FKBP5)、应激诱导蛋白1(STIP1)、热休克蛋白90腺苷三磷酸酶同系物1激活剂(AHSA1)的变化情况,并用IP-western blot(IP-WB)进行验证,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是否伴随其他共伴侣分子解离;(3)用IP-WB...  相似文献   

7.
目的:锌对热应激大鼠热休克蛋白70 m R N A 表达的影响。方法:分别以高、中、低锌饲料(锌含量分别为9220、4561、2170 m g/kg 饲料)喂养3 组大鼠,热暴露(干球415 ° C、湿球32 ° C)30 m in 时断头处死,应用 Northern 印迹杂交和斑点杂交检测热应激大鼠肝脏热休克蛋白70 m R N A 的表达情况。结果:不经受热暴露的3 组动物仅高锌组能检测到热休克蛋白70 m R N A,而热暴露30 m in 的3 组动物均有热休克蛋白70 m R N A 条带,且依锌水平不同,其表达强弱依次为高锌组强于中锌组,中锌组强于低锌组。结论:热应激时热休克蛋白70 基因的转录水平提高;锌通过活化热休克蛋白70 基因的转录而诱发热应激大鼠热休克蛋白70 的合成,从而使机体对热暴露产生更强的耐受力。  相似文献   

8.
沙漠干热环境徒手应激行军对人体热休克蛋白27的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
为探讨沙漠干热徒手应激行军人体内热休克蛋白27(HSP27)的变化规律,对在沙漠干热环境中以不同速度和时间徒手行军的59名战士和14名对照组的HSP27进行了研究。结果发现,不论是以3.5还是5.0km/h徒手应激行军,各不同行军时间组HSP27明显增高(P<0.01),相同行军时间不同行军速度组和同速度不同时间组之间的HSP27均无显著性差异(P>0.05)。随行军速度(应激强度)增加,同一行军时间者血浆HSP27均略增高,行军小时1小时HSP27最高,之后略下降,2小时后变化不大,行军3小时与行军2小时基本处于同一水平。  相似文献   

9.
[目的]探讨在乏氧条件下,应用RNA干扰技术沉默HIF-1α基因表达对人宫颈癌细胞株U14辐射敏感性的影响。[方法]构建针对HIF-1α基因的siRNA,将其结合到pSilencer2.1-U6-neo质粒表达载体上,脂质体转染法转入宫颈癌细胞U14,低氧培养后RT-PCR检测HIF-1αmRNA的表达;成克隆实验检测HIF-1α沉默后对细胞辐射敏感性的影响。[结果]成功构建HIF-1α的siRNA真核表达载体,转染宫颈癌细胞后低氧条件下RT-PCR显示HIF-1αmRNA表达明显下调,同时细胞形成的克隆数明显减少。[结论]HIF-1α的siRNA真核表达载体能够抑制低氧条件下HIF-1α基因的表达并提高宫颈癌细胞对γ射线的辐射敏感性。  相似文献   

10.
目的探讨热休克反应(HSR)对人HMG1诱导内皮细胞分泌TNF-α的影响及其意义。方法分别用含有HMGB10、0.1、1.0、10、20、50μg/ml的培养基处理热休克或未热休克的人脐静脉内皮细胞株ECV-304共10h,分别收取细胞和培养上清,用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF-α含量,采用流式细胞技术观察内皮细胞的凋亡情况。结果将HMG1加入到血管内皮细胞培养液中能明显刺激其TNF-α的分泌。在0.1~50ug/ml范围内,HMG1诱导EVC-304的TNF-α分泌增加,呈明显的剂量依赖关系;50ug/ml HMG1能明显的诱导EVC-304细胞的凋亡;热休克反应能明显的降低HMG1诱导EVC-304的TNF-α分泌和EVC-304细胞的凋亡。结论热休克反应抑制了人HMG1诱导的血管内皮细胞的凋亡和TNF-α的分泌。  相似文献   

11.
刘佃辛  张符光 《营养学报》1999,21(2):153-158
观察重组人胸腺素α原对衰老和缺锌所致的免疫功能低下的调节作用,并初步了解胸腺素α原在神经内分泌免疫网络中的作用和地位。方法:以自然衰老至15月龄昆明小鼠为模型,随机分为两组,实验组每只鼠日腹腔注射胸腺素α原300ng,对照组注射等量生理盐水,连续3周。取血测定溶血素和甲状腺激素水平,取胸腺和脾脏称重计算相应指数。另选48只80~90gWistar大鼠,随机分为:正常对喂、缺锌、缺锌补锌、缺锌补锌补α原四组。缺锌组饲以缺锌饲料,三周后,补锌组换饲正常对喂组饲料,两周后,取血测定血浆锌和皮质醇含量,取胸腺和脾脏称重,并制备脾脏细胞,测定CD4+和CD8+的比率。结果:胸腺素α原可以明显提高衰老小鼠胸腺的重量和指数,也可提高脾脏的重量和指数。同时显著升高特异性抗体溶血素的水平。胸腺素α原可明显提高血浆甲状腺激素T3和T4的水平。缺锌大鼠,食欲减退,生长发育迟缓。胸腺明显萎缩,同时血浆皮质醇的水平明显升高。缺锌后补充锌,与缺锌对照比较,胸腺重量和指数明显增加,但仍明显低于正常对喂组;锌补充不能降低血皮质醇水平。腹腔注射胸腺素α原后,不仅明显升高胸腺重量和指数,降低脾脏细胞中CD8+的比例,而且也可调节因缺锌而升高的?  相似文献   

12.
摘要:目的 探索广西白裤瑶族地区人群心理应激状况及其对人热休克蛋白70(Heat Shock Protein 70,HSP70)的影响。方法 采用随机整群抽样法,应用生活事件量表(LES)、简化症状自评量表(SCL-90)、和社会支持评定量表(SSRS)对广西南丹县白裤瑶和壮族人群324人进行问卷调查,同时应用ELISA法测量血样中HSP70的含量。结果 (1)调查对象的生活事件总分≥20分占32.41%,心理问题阳性检出率为26.12%;社会支持总均分为(8.55±1.69)分。壮族人群的焦虑水平为(1.66±0.69)分,高于白裤瑶族(1.43±0.42)分(P<0.05)。(2)被试者HSP70表达水平在(1.43±0.15)Lg/ml范围,不同民族之间差异有统计学差异。(3)全体调查对象HSP70表达水平与年龄(r=-0.211,P<0.05)和焦虑呈负相关(r=-0.216,P<0.05);与文化程度(r=0.318,P<0.001)和社会支持呈正相关(r=0.181,P<0.05);采取分层回归分析对文化程度和年龄进行变量控制,壮族人群的社会支持对HSP70表达呈正相关影响(β=0.263)。结论 广西白裤瑶人群的心理应激和心理卫生状况不容乐观,HSP70表达与焦虑和社会支持等心理因素有相关性。  相似文献   

13.
目的:观察静脉补充谷氨酰胺(Gln)对急性脑梗死病人热休克蛋白70(Hsp70)的表达及免疫功能影响.方法:采用随机法将60例急性脑梗死病人分为对照组和Gln组,每组30例.Gln组入院24 h内开始给予静脉输注Gln,其他治疗同对照组.记录两组病人14 d观察期间血浆Hsp70浓度、免疫指标和感染发生率.结果:Gln组与对照组病人相比,血浆Hsp70浓度明显增高,免疫球蛋白浓度、CD4 细胞及CD4 /CD8 比值明显增加,肺部及泌尿系统感染发生率明显降低.结论:Gln可促进急性脑梗死病人Hsp70的表达,改善免疫功能,降低感染发生率.  相似文献   

14.
目的观察束缚应激后大鼠血脂和肝脏过氧化酶体增殖物激活型受体(PPARα)、肝型肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(L-CPT-Ⅰ)mRNA和蛋白的变化,初步探讨应激与血脂的关系。方法健康雄性Wistar大鼠,分为正常对照组(C)、束缚1周组(R1)、束缚2周组(R2)和束缚4周组(R4),每组8只。全自动生化仪测定血脂水平,铜显色法测定血清中游离脂肪酸(FFA)水平。分别用RT-PCR和Western Blot方法检测肝脏PPARα及其靶基因L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达水平。结果束缚应激组皮质醇和去甲基肾上腺素水平均明显高于对照组(P0.01)。R1、R2、R4组大鼠血清FFA分别为(836.33±90.32)、(795.01±62.12)、(829.56±72.64)μmol/L,均明显高于C组〔(620.83±52.21)μmol/L,P0.01〕。同样,R1、R2、R4组大鼠血清TG和HDL-C均明显高于C组(P0.05,P0.01)。与C组相比,R1、R2、R4组大鼠肝脏中PPARα和L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达均增加(P0.01)。各应激组间这些指标变化差异均无显著性(P0.05)。结论束缚应激后大鼠血清FFA、TG和HDL-C水平升高,这可能与其肝脏PPARα及L-CPT-Ⅰ表达增加有关。  相似文献   

15.
为了观察职业铅接触人群血清热应激蛋白70的变化.探讨热应激蛋白作为职业铅接触敏感生物标志物的可能性.对铅作业工人进行血清中热应激蛋白70水平的调查。以其蓄电池厂铅接触工人72人为铅暴露组,不接触铅及其他职业有害因素工人41人作为对照组。用ELISA方法检测工人血清中热应激蛋白70的水平,血铅水平用原子吸收光谱法进行检测,尿铅水平用微分电位溶出法检测。结果显示.暴露组工人中血清热应激蛋白70及血铅的水平均明显高于对照组.差异均具有非常显著性(P〈0.01),两组人群尿铅水平差异无显著性(P〉O.05);血清中热应激蛋白的水平与血铅水平有相关性(r=0.501,P〈O.01),而与尿铅无明显的相关性(r=0.181,P〉0.05)。提示,血清中热应激蛋白70的水平可反映职业铅接触的情况。作为生物标志物在铅作业工人健康监护中有一定的价值。  相似文献   

16.
目的研究重组人干扰素α-2b喷雾剂对手足口病患儿免疫功能影响。方法选择2017年10月-2018年5月医院诊治的轻症手足口病患儿82例为研究对象,随机数字表法分为试验组52例和对照组30例。所有患儿完善检查,明确诊断,给予对症支持治疗,试验组在对照组基础上采用重组人干扰素α-2b喷雾剂治疗。比较两组患儿治疗前及治疗5~7d后T淋巴细胞CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+水平及免疫球蛋白IgA、IgM、IgG水平。结果治疗后,两组患儿CD_4~+水平和CD_4~+/CD_8~+水平均高于治疗前,CD_8~+水平低于治疗前,差异有统计学意义(P <0.05);且试验组CD_4~+水平和CD_4~+/CD_8~+水平高于对照组,CD_8~+水平低于对照组(P <0.05)。治疗后患儿IgM、IgA和IgG水平均高于治疗前(P<0.05);且试验组患儿IgM、IgA和IgG水平均高于对照组(P<0.05)。试验组皮疹持续时间、发热持续时间以及住院时间相比对照组均缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义。结论重组人干扰素α-2b喷雾剂能够改善手足口病患儿免疫功能紊乱、提高免疫蛋白水平。  相似文献   

17.
神艳 《中国妇幼保健》2023,(16):2960-2963
目的探讨热休克蛋白70(HSP70)、整合素β1(ITGβ-1)及Salusin-α对妊娠期高血压疾病(HDCP)不良妊娠结局的预测价值。方法选取2020年2月—2021年2月在滕州市妇幼保健院治疗的60例HDCP患者为观察组,同期55例健康孕妇作为对照组。采用酶联免疫吸附法检测两组HSP70、ITGβ-1及Salusin-α水平。受试者特征曲线(ROC)分析HSP70、ITGβ-1及Salusin-α对HDCP患者不良妊娠结局的预测价值。结果观察组HSP70、ITGβ-1水平高于对照组,Salusin-α水平低于对照组(P<0.05);观察组不良妊娠结局总发生率高于对照组(P<0.05);logistic回归分析血清HSP70、ITGβ-1水平升高,Salusin-α水平降低与HDCP患者不良妊娠结局独立相关(P<0.05)。ROC分析HSP70、ITGβ-1及Salusin-α预测HDCP患者不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)低于3项联合,3项联合检测灵敏度、准确度高于HSP70、ITGβ-1及Salusin-α表达单一检测(P<0.05)。结论HDCP患者血清HSP70、ITGβ-1表达明显升高,血清Salusin-α表达水平降低,高水平HSP70、ITGβ-1与低水平Salusin-α是HDCP患者不良妊娠结局的风险预测因子。  相似文献   

18.
目的探讨大面积脑梗塞超早期开始使用盐酸法舒地尔的效果,动态监测血清S100β蛋白,初步评价其药效,探讨其作用机制,为更好地指导临床用药提供实验学证据。方法运用介入技术及自体血栓栓塞建立家兔大脑中动脉梗塞模型,术后随机分成生理盐水组和盐酸法舒地尔组。盐酸法舒地尔组每日静脉给予盐酸法舒地尔9mg/kg,并每隔24h检测一次血清S100β蛋白及神经功能缺损评分,7d后处死家兔后行脑组织切片,TTC染色后计算梗塞体积大小。结果造模后7d,两组家兔均存活;盐酸法舒地尔组家兔半球梗塞体积明显小于生理盐水组(P〈0.01);盐酸法舒地尔组神经功能评分普遍优于生理盐水组。盐酸法舒地尔组较盐水对照组血清S100β蛋白浓度低,且出现浓度高峰延迟。结论急性大面积脑梗塞超早期(6h)开始使用盐酸法舒地尔7d后能明显缩小梗塞面积,明显改善预后,其作用之一可能归功于抑制炎症反应、促进神经修复,在治疗急性大面积脑梗塞时值得临床进一步推广。  相似文献   

19.
目的探讨氯化镉(CdCl_2)对人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)线粒体功能、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子α(PGC-1α)蛋白表达的影响,以及CdCl_2致HK-2细胞线粒体氧化损伤的机制。方法体外培养HK-2细胞,以0、10、20、30、40、50和60μmol/L CdCl_2干预24 h后收集细胞,MTT法观察细胞活力;Mito SOXTM活细胞荧光染色观察线粒体中活性氧(ROS)生成情况,多功能酶标仪测定线粒体中呼吸链复合物Ⅲ活性,流式细胞仪分析线粒体膜电位变化;Western blot法检测CdCl_2对HK-2细胞总蛋白中PGC-1α表达的影响。结果与对照组相比,当CdCl_2浓度增加到20、60μmol/L作用24 h后HK-2细胞存活率下降为(77.60±0.82)%和(41.97±1.22)%(P0.01);并呈剂量依赖性引起线粒体呼吸链复合物Ⅲ的活性下降和线粒体ROS增多(P0.05),JC-1单体阳性率的比值分别为对照组的1.51、1.58、1.72、2.41和3.47倍(P0.01);而细胞总蛋白中PGC-1α蛋白的表达随氯化镉剂量的增加而减少(P0.05)。结论氯化镉可通过抑制PGC-1α蛋白表达,抑制线粒体呼吸链复合物Ⅲ的活性,促进线粒体ROS生成,诱导线粒体膜电位下降,导致对HK-2细胞的毒性损伤。  相似文献   

20.
摘要:目的 为了探讨20-羟基蜕皮甾酮(20-hydroxyecdysone,20E)对Ⅰ型糖尿病小鼠降糖作用及相关机制。方法 小鼠(体重20±2 g)随机分3组,用150 mg/kg腹腔注射链脲佐菌素造模,之后正常对照组和Ⅰ型糖尿病组小鼠灌服蒸馏水10 ml/kg;20E治疗组按5 mg/kg剂量灌服20E。药物干预3周后,观察肝脏形态学改变,测定血糖和肝脏糖原含量,分析糖酵解过程中的第一个限速酶—葡萄糖激酶和核心炎症因子—肿瘤坏死因子-α的表达。结果 与Ⅰ型糖尿病组相比,20E处理后肝细胞损伤程度减轻;血糖浓度比Ⅰ型糖尿病组降低了92.7%(P<0.01),肝脏糖原含量增加了64.1%(P<0.05);Real-time PCR结果显示,20E处理后葡萄糖激酶mRNA水平增加了107.3%(P<0.01),肿瘤坏死因子-α表达水平降低了68.7%(P<0.05)。结论 20E具有降低Ⅰ型糖尿病小鼠血糖的作用,其机制可能与诱导肝脏葡萄糖激酶表达、增加肝脏糖原储备和增强肝脏保护作用有关。  相似文献   

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