细菌壁缺陷对沙门菌代谢特性影响

目的了解细胞壁缺陷沙门菌的代谢特性、某些酶活性及化学构成的特点,探讨细胞壁缺陷对沙门菌代谢的影响及其可能机制.方法定量检测与分析伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌及其经L型变异后形成的细胞突变株(CWDM)和伤寒沙门菌CWDM返祖菌的细胞裂解物中无机离子磷(PO43-)、镁(Mg2+)、钙(Ca2+)、及总蛋白、三酰甘油(TG)、胆固醇(Tch)含量及某些代谢酶的活性,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)检测伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的细菌型、CWDMs及伤寒沙门菌CWDM返祖菌的乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶同功酶.结果沙门菌CWDMs的PO43-、Mg2+、Ca2+含量明显低于其亲代细菌型和伤寒沙门菌粗糙型返祖菌( P＜0.01).两菌的CWDMs均可检测出Tch和TG,而其亲代细菌型及伤寒沙门菌返祖菌则不能检出Tch和TG.代谢酶活性检测显示两菌的CWDMs乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)的活性明显低于其亲代细菌型或返祖菌(P＜0.01).PAGE检测显示两菌的CWDMs及其亲代细菌型和伤寒沙门菌返祖菌均具有乳酸脱氧酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)同功酶活性,细菌型及返祖菌有4种不同泳动速率的LDH同功酶,CWDMs仅显示2种快泳动的LDH同功酶,但缺乏慢泳动的2种LDH同功酶.两菌的细菌型和伤寒沙门菌粗糙型返祖菌经PAGE电泳可见一条漫泳动MDH同功酶带,CWDMs电泳后可见快慢泳动2条MDH同功酶带.分光光度法检测证实,细菌型与粗糙型的MDH活性相似;CWDMs的活性则明显较低.结论细胞壁缺陷可导致沙门菌的多种代谢酶活性及某些离子含量明显降低,具有与其亲代细菌型不相同的乳酸脱氧酶同功酶和苹果酸脱氨酶同功酶谱以发显著的Tch和TG代谢活性.由于沙门菌的细胞壁缺陷突变株在获得外源遗传物质时能够有规律地返祖并恢复与其亲代细菌型相同的各种代谢特性,提示细胞壁缺陷所导致沙门菌的代谢改变极可能与相关基因的的表达被抑制或开放有关.在沙门菌的染色体上可能存在有胆固醇代谢等基因,也可能是由于细胞壁缺陷导致了沙门菌的基因发生重排.     

沙门菌玻片凝集血清分型与多重荧光PCR血清分型检测试剂盒方法比较

目的探讨在肠道多病原监测中,沙门菌多重荧光PCR血清分型检测试剂盒的适用性,扩展沙门菌的分子分型和鉴定方法,提高分型效率,以更快更好地应对由沙门菌引起的腹泻事件。方法利用沙门菌多重荧光PCR血清分型检测试剂盒和传统玻片凝集血清分型方法,对2013 — 2018年北京市丰台区肠道多病原监测中分离获得的95株沙门菌进行分型分析,比较2种结果的符合程度。结果采用传统玻片凝集法,95株沙门菌被分为21种血清型。 采用多重荧光PCR血清分型检测试剂盒,85株沙门菌被分为17种型别,10株菌无法分型,包含Salmonella Goldcoast、S. London、S. Senftenberg、S. Thompson、S. Panama、S. Othmarsche 6种血清型。 在试剂盒成功分型的85株菌中,83株菌的分型结果与玻片凝集法一致,符合率为97.65%。结论在沙门菌分型中,玻片凝集法应用良好,多重荧光PCR血清分型检测试剂盒与前者分型结果一致性高,检测效率显著提升,对不常见血清型的鉴定有待扩充,2种方法联合使用可全面提高实验室对沙门菌的分型检测效率和准确率。     

利用实时荧光定量聚合酶链式反应快速检测人及动物粪便中的沙门菌

目的为了快速检测、鉴定沙门菌属细菌,提高食源性疾病暴发应对能力,本研究建立了针对沙门菌属的实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测方法,并对其特异性、敏感性和检测下限进行评价。方法筛选针对沙门菌的属特异基因,并建立该基因的qPCR检测体系,利用肠道不同种属细菌、不同亚种及血清型沙门菌属细菌、动物及人粪便样本评价该体系的特异度、灵敏度及检测下限。结果获得沙门菌的属特异基因ttrA,建立基于该基因的qPCR检测方法。发现该方法对纯DNA的最低检测下限为2拷贝/反应。对沙门菌属以外的肠道致病菌无扩增,对1 100株不同亚种及血清型的沙门菌的扩增结果均为阳性,对150份沙门菌致腹泻患者的粪便增菌液和210份动物带菌粪便增菌液均检测阳性。结论本研究建立的基于单一基因的沙门菌属快速分子检测方法具有特异度高、灵敏度高的特点,可用于快速筛查、鉴定沙门菌及由其引起的感染性腹泻。     

微生物实验室检验质量控制结果分析

目的通过参加室间质控考核提高微生物实验室的检验质量。方法回顾性分析2006年参加重庆市疾病预防控制中心室间质控考核情况,对盲样菌种进行分离培养,并接种到多种平板上,同时做15种细菌生化鉴定生长,取W0320a号TSI斜面菌苔做沙门血清凝集试验,W0320b号TSI斜面菌苔做致泻大肠埃希菌和志贺菌凝集试验。结果质控考核为奇异变形杆菌、鸭沙门菌、致病大肠埃希菌、宋内氏志贺菌4种致病菌,检测结果上报市疾病预防控制中心微生物检验所,结果全部正确。结论参加室间质控考核是对检验人员技能、实验室内质量控制情况的一种检验,不断提高检验人员检测水平,保证其测定数据达到确定检验质量标准。     

一株金黄色葡萄球菌及其L型感染的药敏试验分析

我室把今年用常规方法培养出部分需氧菌或未培养出细菌标本2份(血1份、分泌物1份)同时进行了需氧菌、细菌L型3次培养检测结果报告如下.     

一起肠炎沙门菌引起的食物中毒检测分析

通过分析一起食物中毒所检出4株肠炎沙门菌的鉴定结果，探讨沙门菌的病原学特征以及检测方法。根据流行病学调查和细菌学检验分析，确认这起食物中毒是由肠炎沙门菌所导致的。这次食物中毒所分离的4株菌为肠炎沙门菌。目前，沙门菌是引起食物中毒最常见的细菌之一，检测部门应该探索先进的检测方法，力求提高沙门菌的检出率，尽可能杜绝沙门菌的传染源(尤其是人源)，降低食物中毒的发生率。     

实时荧光定量PCR法与常规细菌鉴定法检测肠道致病菌的对比研究

目的探讨常规细菌鉴定法及实时荧光定量PCR法检测肠道致病菌的价值。方法就诊的3330例腹泻患者的粪便标本,同时进行常规细菌鉴定法及实时荧光定量PCR法检测,观察肠道致病菌中沙门菌及志贺菌检测阳性率。结果 3330例粪便标本中,常规细菌鉴定法检测沙门菌阳性率为3.90%(130/3330),志贺菌阳性率为1.65%(55/3330);实时荧光定量PCR法检测沙门菌阳性率为4.11%(55/3330),志贺菌阳性率为1.80%(60/3330),两种方法检测沙门菌及志贺菌阳性率比较,差异无统计学意义(P均0.05)。所有实时荧光定量PCR法检测阳性标本均经常规细菌鉴定确诊,阳性率为100%。结论实时荧光定量PCR法可直接从粪便中提取DNA,检测肠道致病菌,具有简便、快速等优点,大大缩短了检出时间,为临床早期诊断和治疗提供了依据,值得临床推广。     

CHROMager(R)显色培养基分离沙门菌的初步应用和评估

目的初步评估CHROMagar@显色培养基(CAS)检测肛拭中沙门菌的效果.方法以实验室保存沙门菌和非沙门菌作为测试菌共190株,测试CAS、武汉SS平板(WS)上细菌生长的敏感性、特异性;并应用CAS与WS对1 717份餐饮业人员肛拭作沙门菌的现场分离效果比较.结果 CAS对测试菌和现场检测的敏感性均为100%,明显优于WS的57.14%和31.58%;两者在肛拭样品中沙门菌检出率分别为1.11%(19/1 717)和0.35%(6/1 717).结论 CAS平板具有敏感性高、检出率高、易于掌握等特点,建议作为粪便常规分离或鉴别沙门菌的首选培养基.     

CHROMager显色培养基分离沙门菌的初步应用和评估

目的初步评估CHROMagar显色培养基(CAS)检测肛拭中沙门菌的效果。方法以实验室保存沙门菌和非沙门菌作为测试菌共190株，测试CAS、武汉SS平板(WS)上细菌生长的敏感性、特异性；并应用CAS与WS对1717份餐饮业人员肛拭作沙门菌的现场分离效果比较。结果CAS对测试菌和现场检测的敏感性均为100％，明显优于WS的57．14％和31．58％；两者在肛拭样品中沙门菌检出率分别为1．11％(19／1717)和0．35％(6／1717)。结论CAS平板具有敏感性高、检出率高、易于掌握等特点，建议作为粪便常规分离或鉴别沙门菌的首选培养基。     

蔗糖发酵型伤寒杆菌生化变异的鉴定

根据国际微生物学会对沙门菌属细菌的定义 ,沙门菌属细菌的生化反应特点之一 ,是对蔗糖不发酵和硫化氢试验一般为阳性。我们自 1996～ 1998年先后检出 12株蔗糖发酵迅速而硫化氢试验阴性的伤寒沙门菌 ,经生化鉴定及血清凝集鉴定试验 ,符合伤寒沙门菌 ,按伤寒沙门菌感染治疗 ,患者在短期内治愈出院。现报告如下。一、材料和方法1 标本来源 :12株蔗糖发酵型伤塞沙门菌 ,均来自我院住院患者的血液 (7株 )、骨髓 (3株 )、粪便 (2株 )标本。2 培养与鉴定 :将上述标本按常规方法进行培养后 ,取无色透明或半透明的菌落按肠杆菌科生化试验进行鉴定…     

HMGB1和PSA联合检测对前列腺癌诊断价值的研究

目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)和前列腺特异性抗原(PSA)联合检测对前列腺癌(PCa)的诊断价值。方法选取在陆军第八十三集团军医院确诊为PCa和良性前列腺增生(BPH)的患者各60例,以及同期男性体检健康者60例,分别纳为PCa组、BPH组和对照组。检测3组的HMGB1和PSA水平,比较各组的HMGB1和PSA水平的差异,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)及曲线下面积(AUC)分析HMGB1、PSA对PCa的诊断效能。结果3组间血清HMGB1和PSA水平比较差异有统计学意义(P<0.05);3组间两两比较,PCa组、BPH组的HMGB1、PSA水平高于对照组,PCa组的HMGB1、PSA水平高于BPH组,差异均有统计学意义(P<0.05)。HMGB1诊断PCa的AUC为0.7742,灵敏度为84.2%,特异度为73.0%,约登指数为0.572;PSA诊断PCa的AUC为0.8617,灵敏度为66.7%,特异度为82.1%,约登指数为0.488;二者联合检测诊断PCa的AUC为0.8813,灵敏度为90.1%,特异度为71.7%,约登指数为0.618。结论HMGB1和PSA联合检测可提高PCa的诊断效能。     

量子共振检测对精神障碍患者自知力的诊断价值

目的探讨量子共振检测精神障碍患者自知力的可靠性。 方法采用双盲试验方法,对精神分裂症、心境障碍、分离性障碍患者的自知力,进行量子共振检测仪的检测,并与临床医师的诊断结果进行一致性研究。数据结果采用SPSS 17.0进行统计处理,采用敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比、Kappa值、Youden指数以及AUC作为诊断性试验的评价指标。 结果量子共振检测仪检测精神分裂症患者自知力的敏感度为96.2%、特异度为85.7%、准确度为95.0%、阳性预测值为98.1%、阴性预测值为75.0%、阳性似然比为6.727、阴性似然比为0.026、Youden指数为0.758、Kappa值为0.772。检测心境障碍躁狂发作患者自知力的敏感度为94.1%、特异度为93.8%、准确度为94.0%、阳性预测值为97.0%、阴性预测值为88.2%、阳性似然比为15.2、阴性似然比为0.044、Youden指数为0.879、Kappa值为0.864。检测心境障碍抑郁发作患者的敏感度为88.9%、特异度为86.4%、准确度为87.5%、阳性预测值为84.2%、阴性预测值为86.4%、阳性似然比为5.450、阴性似然比为0.128、Youden指数为0.753、Kappa值为0.749。对分离性障碍患者自知力的检测结果中敏感度为89.5%、特异度为92.9%、准确度为90.9%、阳性预测值为94.4%、阴性预测值为86.7%、阳性似然比为12.605、阴性似然比为0.113、Youden指数为0.824、Kappa值为0.816。精神分裂症、心境障碍、躁狂发作、心境障碍、抑郁发作、分离性障碍患者的自知力ROC曲线下面积分别为0.910,0.926,0.876,0.912。 结论量子共振检测可为精神障碍患者自知力评定提供新的诊断依据。     

CRP在慢性阻塞性肺疾病诊断中的应用

目的探讨C-反应蛋白(CRP)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的诊断价值,为COPD的诊断发掘新的标志物。方法收集COPD患者199例、肺恶性肿瘤患者159例,以及同期健康体检者115例,检测并比较3组的全血CRP水平,绘制CRP诊断COPD的受试者工作特征曲线(ROC曲线),计算灵敏度、特异度和约登指数,寻找诊断界值Cut-off值。结果与健康体检者比较,CRP在COPD患者及肺恶性肿瘤患者中均显著升高,差异有统计学意义(P0.05);ROC曲线下面积为0.768,最大约登指数为0.418,灵敏度和特异度分别为64.7%和77.1%,对应的Cut-off值为49.75mg/L。结论 CRP对COPD具有一定的诊断价值,可作为COPD诊断的新指标。     

甲状腺影像报告和数据系统分类联合声弹性图在甲状腺良恶性结节鉴别诊断中的应用价值

目的探讨甲状腺影像报告和数据系统（TI—RADS）分类联合声弹性图在甲状腺良恶性结节鉴别诊断中的应用价值。方法回顾性分析经病理证实的204例（340个结节）甲状腺结节患者的临床资料,并运用受试者操作特性（ROC）曲线评价TI—RADS分类、声弹性图及2种方法联合应用在甲状腺良恶性结节鉴别诊断中的价值。结果在340个甲状腺结节中,TI-RADS分类4b类以上考虑恶性,其诊断敏感度、特异度、准确性分别为88．1％、86．7％、87．1％,Kappa值为0．683,ROC曲线下面积为0．915;声弹性图≥3分考虑恶性,其诊断敏感度、特异度、准确性分别为83.3％、90．6％、88．8％,Kappa值为0．711,ROC曲线下面积为0．913;TI-RADS分类联合声弹性图评分≥7分考虑恶性,其诊断敏感度、特异度、准确性分别为85．7％、95.3％、92．9％,Kappa值为0．810,ROC曲线下面积为0．966。结论TI—RADS分类联合声弹性图对甲状腺良恶性结节的诊断较单一方法更具优势。     

孤立性肺肿块CT诊断能力的统计评价

目的：通过分析不同工作经历医师的CT诊断差异,探讨提高孤立性肺肿块CT诊断的方法及途径。方法：3位不同工作经历医师用双盲法对孤立性肺肿块CT图像进行定性诊断,与病理结果对照,分别计算其CT诊断的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值、Youden指数及与病理诊断之间的Kappa值、ROC曲线下面积。根据其诊断结果,进行诊断试验的统计评价。结果：3位医师对同一组孤立性肺肿块CT图像进行6次判断,其总敏感度为83.76%（196/234）,特异度为53.33%（32/60）,准确度为77.55%（228/294）,阳性预测值87.50%（196/224）,阴性预测值45.71%（32/70）,Youden指数为0.371,与病理结果比较的Kappa值为0.349（标准误：0.64,P=0.000）。ROC曲线下面积比较无统计学差异。观察者之间CT诊断结果稳定性存在统计学差异。结论：CT在一定程度上能够反映肺结节的良恶性病理学特点。随访和专题培训是提高影像医师诊断水平的良好方法。     

TCD联合血清D-D检测对急性脑梗死患者颅内动脉狭窄的诊断价值

探讨经颅多普勒超声(TCD)联合血清D二聚体(D-D)对急性脑梗死颅内动脉狭窄的诊断价值。【方法】选取2018年7月至2020年7月在本院诊治的急性脑梗死患者112例为研究对象。所有患者均接受CT血管造影(CTA)和TCD检查,且均采集静脉血检测其血清D-D水平。比较TCD与CTA检测颅内动脉狭窄的结果,以CTA检测结果为金标准,分析TCD对颅内血管狭窄的诊断价值,用受试者工作曲线(ROC)分析血清D-D诊断颅内血管狭窄的诊断价值,记录曲线下面积(ALTC)。【结果】CTA检查结果显示:112例患者中检出颅内血管狭窄者81例,总检出狭窄血管202条,无狭窄者31例。TCD检测出狭窄血管191条,TCD对狭窄血管的诊断一致性较好,Kappa值=0.762,其中TCD对双侧大脑中动脉(MCA)血管狭窄的诊断价值最高,灵敏度为91.76%,阳性预测值为93.98%,一致性最好,Kappa值=0.852。ROC曲线分析结果显示:血清D-D诊断颅内血管狭窄的AUrC值为0.714,以>0.85 mg/L为分界点时诊断价值最高,灵敏度为48.15%,特异度为87.10%;TCD联合血清D-D诊断颅内血管狭窄的灵敏度为93.83%,准确性为95.54%,明显高于血清D-D单一检测(P<0.05),与TCD单一检测比较差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】TCD联合血清D-D检测对急性脑梗死颅内动脉狭窄的诊断价值较高,尤其对MCA血管狭窄诊断准确性较高。     

血清miR-765和CA153联合检测对乳腺癌的诊断价值

目的 探讨血清miR-765与CA153联合检测对乳腺癌的诊断价值。方法 收集乳腺癌患者58例,乳腺良性疾病患者28例及体检健康者30例,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-765的表达水平,受试者工作特征曲线分析单一和联合检测对早期乳腺癌的诊断价值。结果 乳腺癌患者血清miR-765相对表达量均显著低于乳腺良性疾病患者和健康对照者(F=35.97,均P<0.01); 单独检测miR-765的ROC曲线下AUC为0.843(95%CI:0.767～0.919),灵敏度为87.9%,特异度为81.0%; miR-765与CA153联合检测的ROC曲线下AUC为0.903(95%CI:0.844～0.962),灵敏度为89.7%,特异度为86.2%; CA153<25U/ml的乳腺癌患者血清miR-765的ROC曲线下AUC为0.840(95%CI:0.746～0.934),灵敏度为87.5%,特异度为82.4%。结论 miR-765对乳腺癌的诊断具有一定价值,与CA153联合检测可为临床提供一种潜在的辅助方法。     

血浆 vWF，D-二聚体水平与外周血中性粒细胞 /淋巴细胞比值联合检测在血栓性疾病中的临床诊断价值

目的　探讨血浆血管性血友病因子（von willeBrand factor,vWF）,D- 二聚体（D-Dimer,D-D）和外周血 中性粒细胞/ 淋巴细胞比值（NLR）联合检测在血栓性疾病中的临床应用价值。方法　检测52 例血栓性疾病患者和 42 例非血栓性疾病患者的vWF ,D-D 与NLR 水平,采用受试者工作特征（ROC）曲线计算vWF ,D-D 与NLR 单独 及联合检测时,在诊断血栓性疾病中的诊断临界值、曲线下面积（AUC）、敏感度和特异度。结果　血栓性疾病组患 者的血浆vWF,D-D 与NLR 均高于非血栓组,差异均有统计学意义（t =2.988~5.398,均P <0.05）。ROC 曲线分析表 明,vWF ,D-D 与NLR 的诊断临界值分别设定为136.85%,1.14mg/L 和2.857 时,其在诊断血栓性疾病中的ROC 曲 线下面积（AUC）分别为0.783,0.720 和0.766,灵敏度分别为78.85%,63.46% 和73.08%,特异度分别为76.19%, 76.20% 和71.43%。vWF, D-D 与NLR 联合诊断血栓性疾病的AUC 为0.82,灵敏度为82.69%,特异度为71.43%。结论　 vWF,D-D 与NLR 升高与血栓性疾病的发生存在明显相关性,联合检测优于各单独指标的应用。     

尿mALB、RBP、CysC及其联合检测在Ⅱ型糖尿病肾病早期诊断中的临床意义

目的探讨尿微量清蛋白(mALB)、视黄醇结合蛋白(RBP)和胱抑素C(CysC)及其联合检测在Ⅱ型糖尿病肾病(DN)早期诊断中的应用价值。方法收集该院2014年6月至2015年12月住院的DN患者92例(DN组)和体检健康者90例(对照组),对所有受试者的尿mALB、尿RBP和尿CysC水平进行检测,并对结果进行统计学分析。结果DN组患者的尿mALB、尿RBP和尿CysC水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。三项指标中,尿mALB检测DN的阳性率最高,为94.57%,三项联合检测的阳性率(97.83%)显著高于各项单独检测,差异有统计学意义(P0.05)。三项指标联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和Youden指数均高于各项单独检测。ROC曲线结果显示,尿mALB诊断DN的AUC为0.732,诊断阈值为43.58mg/L;尿RBP的AUC为0.685,诊断阈值为1.47mg/mL;尿CysC的AUC为0.701,诊断阈值为1.42mg/L,联合检测的AUC为0.928。结论尿mALB、尿RBP和尿CysC为反映肾脏损伤的较好指标,三者联合检测可提高诊断DN的阳性率、灵敏度和特异度。监测糖尿病患者的尿mALB、尿RBP和尿CysC水平,对诊断糖尿病早期肾损伤的发生、发展和DN的预防、治疗和延缓疾病的进程具有重要意义。     

高效液相色谱法检测血红蛋白A2诊断β-地中海贫血携带者的最佳阈值

目的确定高效液相色谱法（HPLC）检测血红蛋白A2（HbA2）诊断β-地中海贫血（β地贫）携带者的最佳阈值,以提高HbA2作为β地贫携带者诊断指标的应用价值,减少漏诊与误诊。方法以反向点杂交技术（RDB）为金标准方法,将近两年来已确诊的1007例β地贫携带者和606例正常对照采用HPLC检测HbA2的结果按不同阈值界定的范围分为真阳性、假阳性、真阴性和假阴性,并评估出敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、尤登（Youden脂数等评价指标,同时绘制受试者工作特征曲线（ROC）,确定HPLC诊断β地贫携带者HbA2的最佳阈值。结果以HbA2≥4．0％作为HPLC诊断β地贫携带者的阈值时,其敏感度为99．21％,特异度为99．34％,阳性似然比为150．30,阴性似然比为0．008,尤登指数为0．99,其中尤登指数优于其它阈值,且对应的切点在ROC曲线上最靠近左上方。结论HbA：≥4．0％为HPLC诊断D地贫携带者的最佳阈值,其敏感度与特异度的综合评价陛能最理想,诊断试验的真实性最好。