血浆外泌体miR-21对胃癌细胞药物敏感性的影响

目的 探索外泌体来源的miR-21作为胃癌奥沙利铂化疗过程中评价药物敏感性生物标志物的价值。方法透射电镜观察外泌体的形态;构建SGC7901奥沙利铂耐药细胞株,并利用RT-qPCR检测耐药细胞和亲本细胞中miR-21的表达水平;CCK8检测miR-21对SGC7901耐药细胞株增殖抑制率的影响;Western blot检测外泌体的标记蛋白;使用受试者工作特征曲线（ROC）分析奥沙利铂治疗胃癌的过程中miR-21评估药物敏感性的价值。结果miR-21过表达后,亲本细胞对奥沙利铂的敏感性由IC50 16.40μmol/L增加至39.46μmol/L;miR-21在化疗耐药患者血浆外泌体中的相对表达量较化疗敏感患者高,在化疗敏感患者血浆外泌体中的相对表达量为2.235±1.491,而在耐药患者血浆外泌体中的相对表达量为7.682±4.490;ROC曲线结果显示,外泌体miR-21预测胃癌患者化疗敏感性的曲线下面积为0.792(95%CI:0.7118-0.8725,P<0.001),灵敏度和特异性分别为62.90%和96.77%。结论 胃癌患者血浆外泌体来源的miR-21可能作为预测奥...     

miR-181a-5p和miR-451a在胃癌诊断和预后评估中的临床价值

目的探讨miR-181a-5p和miR-451a在胃癌诊断和预后评估的临床价值。方法选取2014年1月至2016年12月在该院就诊的胃癌患者血清标本117例为胃癌组,选择同期在该院行胃镜检查诊断为息肉的患者血清标本75例和健康体检者血清标本45例分别设为胃息肉组和健康对照组。比较各组研究对象血清miR-181a-5p和miR-451a表达水平,观察胃癌患者血清miR-181a-5p和miR-451a表达水平与临床病理因素和随访2年胃癌患者预后的关系,以及其在诊断胃癌和预测胃癌患者2年内死亡的效能。结果胃癌组术前血清miR-181a-5p表达水平明显高于胃息肉组和健康对照组(P<0.01),而胃息肉组miR-181a-5p表达水平明显高于健康对照组(P<0.01),胃癌术后血清miR-181a-5p表达水平较术前明显降低(P<0.01);胃癌组术前血清miR-451a表达水平明显低于胃息肉组和健康对照组(P<0.01),而胃息肉组的血清miR-181a-5p表达水平明显高于健康对照组(P<0.01),胃癌组术后血清miR-451a表达水平较术前明显升高(P<0.01)。血清miR-181a-5p和miR-451a联合检测诊断胃癌的灵敏度为77.8%,特异度为97.3%,曲线下面积均明显高于miR-181a-5p和miR-451a单项检测(P<0.01),而miR-181a-5p与miR-451a的曲线下面积差异无统计学意义(P>0.05)。血清miR-181a-5p和miR-451a表达水平在不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移和浸润深度的胃癌患者中差异有统计学意义(P <0.001)。死亡组患者血清miR-181a-5p表达水平明显高于存活组(P <0.01),而血清miR-451a表达水平明显低于存活组(P<0.01)。血清miR-181a-5p和miR-451a联合检测在预测胃癌患者2年内死亡的灵敏度为100.0%,特异度78.6%,曲线下面积明显高于miR-181a-5p和miR-451a单项检测(P<0.05),而miR-181a-5p与miR-451a的曲线下面积差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合检测血清miR-181a-5p和miR-451a在胃癌诊断中具有重要临床价值,其表达水平与患者的预后具有重要关系,在预测2年内死亡具有较高的效能。     

miR-494-3p在胃癌患者血清外泌体中的表达及价值

摘要:目的探究微小 RNA-494-3p(miR-494-3p)在胃癌患者血清外泌体中的表达水平及临床意义。方法采用 TaqMan探针 法RT-qPCR检测44例胃癌患者和44例健康人对照组血清外泌体中miR-494-3p的表达水平,采用ROC曲线分析并评估其对 胃癌的鉴别诊断价值。同时,在14例胃癌组织和16例胃良性疾病对照患者胃组织中进行进一步验证。结果与健康人对照 组( 1.00+0.36)相比,胃癌组血清外泌体中miR-494-3p的相对表达水平(0.21+0.03)显著降低,差异有统计学意义(Z=3.64,P< 0.01);胃癌组织中miR-494-3p的相对表达水平(0.22+0.07)亦显著低于胃良性疾病对照组( 1.00+0.39),差异有统计学意义 (Z= 2.66, P<0.01)。血清外泌体miR-494-3p筛查胃癌和健康人的ROC曲线下面积( AUCROC )为0.725( 95% CI :0.622 ~0.829 , P<0.01),当ecut-off 值为0.370时,其敏感性为50.0%，特异性为86.4%,阳性预测值为63.3%,阴性预测值为78.6%,准确性为 68.2%。结论miR-494-3p 在胃癌患者血清外泌体中呈低表达，有望成为胃癌筛查和辅助鉴别诊断的潜在生物学标志物。     

血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p联合检测对妊娠期糖尿病的诊断价值

目的探讨血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p对妊娠期糖尿病的诊断价值。方法选择2018年5—6月该院收治的妊娠期糖尿病患者10例和妊娠24~28周的健康孕妇10例,采用转录组测序技术(RNA-seq)分析血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p的相对表达水平。选择2018年5月至2020年5月该院收治的妊娠期糖尿病患者100例为观察组,妊娠24~28周的健康孕妇100例为对照组。通过实时荧光定量PCR检测2组受试者血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p的相对表达水平。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p单独或联合检测对妊娠期糖尿病的诊断价值。结果RNA-seq检测结果显示,10例妊娠期糖尿病患者血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p的相对表达水平较10例健康孕妇高8倍以上。观察组血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p的相对表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p单独检测对妊娠期糖尿病的诊断灵敏度分别为95%、97%、94%,特异度分别为95%、96%、95%,血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p联合检测对妊娠期糖尿病的诊断灵敏度为98%,特异度为93%,准确性为96%。结论血清miR-16-5p、miR-17-5p和miR-330-3p可作为妊娠期糖尿病的潜在诊断标志物。     

转移性宫颈癌细胞衍生的外泌体miR-21-5p促进宫颈癌侵袭及转移

目的 探讨转移性宫颈癌组织的旁分泌作用对肿瘤细胞扩散的影响。方法 选择22例转移性宫颈鳞癌患者的手术标本（癌组织和癌旁组织）和血清标本,以及22名健康体检者的血清标本,采用逆转录-实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-21-5p在癌组织和癌旁组织中的表达水平;分别转染miR-21-5p模拟物/抑制剂到宫颈癌SiHa细胞,采用RT-qPCR、细胞集落形成实验、Transwell迁移实验、噻唑蓝（MTT）比色法、蛋白免疫印迹法、双荧光素酶报告分析差异;采用高速离心法提取血清外泌体;采用纳米颗粒跟踪分析（NTA）技术、蛋白免疫印迹法、透射电子显微镜（TEM）对外泌体进行表征鉴定;采用RT-qPCR 检测宫颈鳞癌患者和健康体检者血清外泌体中miR-21-5p的表达差异;采用受试者操作特征（ROC）曲线分析血清外泌体中miR-21-5p对肿瘤转移的诊断效能。结果 miR-21-5p在转移性宫颈鳞癌组织中表达上调;miR-21-5p过表达能促进宫颈鳞癌SiHa细胞集落形成以及细胞增殖与迁移（P均< 0.01）;双荧光素酶报告显示,miR-21-5p可以靶向快速发育生长因子同源蛋白2抗体（SPRY2）,对SPYR2的表达水平进行调控;miR-21-5p模拟物转染的SiHa细胞中,磷酸化丝裂原和应激激活的蛋白激酶、磷酸化核糖体S6蛋白激酶、磷酸化原癌基因C-RAF、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激酶和磷酸化MAPK蛋白的表达均上调（P均< 0.05）。miR-21-5p在宫颈鳞癌患者的血清外泌体中上调（P < 0.05）。血清外泌体评估宫颈癌转移的ROC曲线下面积为0.9375。结论 转移性宫颈鳞癌患者组织中miR-21-5p通过外泌体传递促进肿瘤转移,其机制可能与靶向SPRY2/细胞外调节蛋白激酶/MAPK信号通路有关。     

2型糖尿病肾病患者尿液外泌体中miRNA的表达谱分析研究

目的研究2型糖尿病肾病(DN)患者尿液外泌体中miRNA的表达谱。方法采用miRNA芯片技术,分别检测8例健康受试者(对照组)、8例2型糖尿病(T2D)患者(T2D组)、8例2型DN患者(DN组)的尿液来分析期内外泌体的miRNA的表达谱。并用实时定量荧光PCR进行验证;挑选表达差异最大的miRNA与微量蛋白尿进行相关分析。结果 DN组与对照组、T2D患者比较,存在16个miRNA表达异常(大于2倍),其中14个miRNA(miR-320c、miR-6068、miR-1234-5p、miR-6133、miR-4270、miR-4739、miR-371b-5p、miR-638、miR-572、miR-1227-5p、miR-6126、miR-1915-5p、miR-4778-5P和miR-2861)表达上调,而2个miRNA(miR-30d-5p和miR-30e-5p)表达下调。miRNA miR-320c和miR-6068在DN组尿液外泌体中表达最多。尿液外泌体miR-320c表达上调与肾小球滤过率预计值的增加呈负相关(筛选序列:R~2=0.23,P=0.11;确认序列:R~2=0.61,P=0.004)。DN组尿液外泌体miR-320c的水平与肾小球滤过率预计值在筛选队列和确认队列中都没有显著相关性(筛选队列:R~2=0.08,P=0.55;确认队列:R~2=0.01,P=0.87),但与尿清蛋白肌酐比值成显著正相关(R~2筛选队列:R~2=0.69,P=0.02;确认队列:R~2=0.94,P=0.005)。结论 DN组与T2D组尿液外泌体中miRNA水平有差异,表达异常的miR-320c可能通过靶蛋白血小板反应蛋白1(TSP-1)对转化生长因子(TGF)-β信号转导通路产生影响,miR-320c有望作为DN的一种新候选标志物,用于在今后研究中评估疾病进展。     

外泌体miR-21及miR-184与乳腺癌骨转移的相关性

目的探讨乳腺癌骨转移患者外泌体miR-21、miR-184表达情况及其与骨转移的关系。方法乳腺癌患者110例为乳腺癌组,乳腺良性肿块患者80例为良性组,体检健康者100例为对照组,比较3组外泌体miR-21、miR-184相对表达量。乳腺癌组根据随访期间是否发生骨转移分为骨转移组50例和非骨转移组60例,比较骨转移组和非骨转移组外泌体miR-21、miR-184相对表达量及不同骨痛程度和转移分级患者外泌体miR-21、miR-184相对表达量。采用Pearson相关分析乳腺癌骨转移患者外泌体miR-21与miR-184相对表达量的相关性,采用多因素logistic回归分析外泌体miR-21、miR-184相对表达量对乳腺癌患者发生骨转移的影响;绘制ROC曲线,评估外泌体miR-21、miR-184相对表达量对乳腺癌患者发生骨转移的预测价值。结果乳腺癌组患者外泌体miR-21、miR-184相对表达量(2.02±1.17、1.17±0.03)高于良性组(0.31±0.05、0.04±0.02)和对照组(0.30±0.04、0.04±0.01)(P0.05),良性组与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。骨转移组外泌体miR-21、miR-184相对表达量(3.04±0.52、1.69±0.31)高于非骨转移组(1.17±0.41、0.74±0.22)(P0.05),且随骨痛程度加重、骨转移分级升高外泌体miR-21、miR-184相对表达量升高(P0.05);乳腺癌骨转移患者外泌体miR-21与miR-184相对表达量呈正相关(r=0.940,P0.001);外泌体miR-21、miR-184相对表达量增高是乳腺癌患者发生骨转移的影响因素(OR=9.995,95%CI:3.513～28.434,P0.001;OR=8.215,95%CI:2.436～27.699,P=0.001);外泌体miR-21、miR-184相对表达量最佳截断值为2.540、1.565时,预测乳腺癌患者发生骨转移的AUC分别为0.878(95%CI:0.808～0.947,P0.001)、0.861(95%CI:0.761～0.918,P0.001),灵敏度分别为98.30%、86.70%,特异度分别为74.80%、76.00%。结论外泌体miR-21、miR-184可能参与了乳腺癌患者骨转移的发生与发展,二者在乳腺癌骨转移患者中表达呈正相关,早期检测对乳腺癌患者骨转移有一定预测价值。     

miR-100-5p对胃癌细胞增殖、转移和化疗耐药的作用及机制研究

目的探讨miR-100-5p对胃癌细胞增殖、转移和化疗耐药的作用及机制。方法收集2017年1月—2019年6月证实的胃癌组织和癌旁组织各70例,采用qRT-PCR检测miR-100-5p在胃癌组织、癌旁组织及胃癌细胞系GES-1、MKN1、MKN45和人正常胃黏膜上皮细胞系RGM-1中的表达,分析miR-100-5p表达与胃癌患者临床病理参数关系。选择miR-100-5p低表达的胃癌细胞系MKN45,转染miR-100-5p mimic,分为NC组和miR-100-5p mimic组,采用MTS实验检测两组细胞增殖能力,Transwell实验检测两组细胞转移能力;采用不同浓度奥沙利铂处理两组细胞48 h, MTS实验和流式细胞凋亡实验检测两组细胞对奥沙利铂化疗敏感性;采用Western blotting检测两组细胞中ERK1/2和pERK1/2蛋白表达。结果 miR-100-5p相对表达量胃癌组织低于癌旁组织,胃癌细胞系GES-1、MKN1、MKN45均低于人正常胃黏膜上皮细胞系RGM-1,差异有统计学意义(P0.01)。miR-100-5p表达与胃癌患者淋巴结转移、TNM分期和化疗效果相关(P0.05或P0.01)。细胞中miR-100-5p相对表达量miR-100-5p mimic组高于NC组,MKN45细胞增殖能力及MKN45细胞穿膜细胞数miR-100-5p mimic组低于或少于NC组,MKN45细胞对奥沙利铂化疗敏感性miR-100-5p mimic组较NC组增加,细胞中pERK1/2蛋白表达miR-100-5p mimic组低于NC组,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论 miR-100-5p可能通过调控ERK1/2信号通路抑制胃癌细胞增殖、转移和对奥沙利铂化疗耐药,是治疗胃癌的潜在靶标。     

胃癌组织中miR-133a-3p、miR-4317的表达及临床意义

目的检测胃癌组织中微小RNA(miR)-133a-3p和miR-4317表达情况,并探究二者的临床意义。方法收集60例胃癌患者的癌组织及其相对应的癌旁组织,采用实时荧光定量反转录PCR(RT-qPCR)技术检测组织样品中miR-133a-3p和miR-4317表达水平,同时分析miR-133a-3p和miR-4317表达与患者临床特征之间的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线分析miR-133a-3p和miR-4317表达与患者预后的关系。结果RTqPCR试验结果显示,胃癌组织中miR-133a-3p、miR-4317相对表达量均低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中miR-133a-3p表达水平与肿瘤TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05);miR-4317表达水平与淋巴结转移、远处转移及肿瘤TNM分期有关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,miR-133a-3p高表达胃癌患者的5年生存率高于低表达者,术后生存时间长于低表达者(P<0.05);miR-4317低表达胃癌患者的5年生存率低于高表达者,术后生存时间短于高表达者(P<0.05)。结论胃癌组织中miR-133a-3p和miR-4317均表现为低表达,二者有可能作为胃癌预测和预后判定的潜在标志物,为胃癌患者的预测和预后判定提供一定的参考价值。     

急性心肌梗死患者血浆外泌体miR-21-3p/PTEN/AKT 表达水平及诊断价值研究

目的　探讨急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）患者血浆外泌体miR-21-3p/PTEN/AKT 表达水平及诊断价值。方法　选取2019 年2 月~ 2021 年8 月于陕西省汉中市三二〇一医院内分泌与风湿免疫科住院并诊断为急性心肌梗死的120 例患者作为AMI 组,另选同期在该科住院,经冠脉造影发现冠脉无明显狭窄患者120 例为对照组。提取所有研究对象的血浆外泌体,并采用透射电镜和Western blot 鉴定。qRT-PCR 法检测外泌体中miR-21-3p 表达水平,Western blot 检测外泌体中蛋白酪氨酸酶基因（PTEN）和丝苏氨酸激酶（AKT）蛋白的表达水平。Pearson 相关分析明确AMI 患者血浆外泌体中miR-21-3p,PTEN 与AKT 表达水平之间的相关性。绘制受试者工作特征（receiver operatorcharacteristic curve,ROC）曲线,根据曲线下面积（area under curve, AUC）分析血浆外泌体miR-21-3p,PTEN 及AKT对AMI 的联合诊断价值。结果　透射电镜观察到,血浆外泌体呈双层膜的泡状结构,且外泌体特征蛋白CD9,CD63和CD81 在外泌体中表达明显升高。与对照组相比,AMI 患者的miR-21-3p（1.45±0.31 vs 1.05±0. 17）和AKT（1.23±0.27 vs 1.03±0.15）表达显著上升,而PTEN（0.68±0.10 vs 1.01±0. 23 ）表达水平显著下降,差异有统计学意义（t=125.735,112.628,72.309,均P ＜ 0.001）。Pearson 相关性分析显示,AMI 患者血浆外泌体中miR-21-3p 和PTEN 呈明显负相关（r=-0.440,P=0.000）,PTEN 和AKT 呈明显负相关（r=-0.674,P =0.000）,而miR-21-3p 和AKT 之间无明显相关性（r=-0.072,P=0.438）。ROC 曲线结果显示,血浆外泌体miR-21-3p,PTEN 及AKT 单独检测时,其对应曲线下面积（AUC）分别为0.805,0.782 及0.720,联合检测时AUC 为0.885,比单独检测更具有诊断价值,差异有统计学意义（P<0.001）。结论　AMI 患者血浆外泌体中miR-21-3p 表达上升,其与PTEN 呈负相关,PTEN 又负向调控AKT 表达。三项指标均可作为辅助诊断AMI 的潜在标志物,且联合检测对AMI 有较高的诊断价值。     

血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501检测对乙型肝炎相关早期肝细胞癌的诊断价值

目的探讨血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501检测对乙型肝炎(简称乙肝)相关早期肝细胞癌的诊断价值。方法选取2018年1月至2019年12月该院收治的乙肝相关早期肝细胞癌患者120例作为肝癌组,120例肝炎患者作为肝炎组,120例健康体检者作为对照组。通过实时荧光定量PCR检测患者血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501相对表达水平。用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501相对表达水平用于乙肝相关早期肝细胞癌诊断的价值。结果 3组间外泌体miR-15b、miR-224、miR-501相对表达水平比较,差异有统计学意义(P0.05),其中肝癌组外泌体miR-15b、miR-224、miR-501相对表达水平高于肝炎组和对照组(P0.05),肝炎组外泌体miR-15b、miR-224、miR-501相对表达水平高于对照组(P0.05)。血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501检测用于鉴别乙肝相关早期肝细胞癌和肝炎的灵敏度分别为93.00%、93.00%、95.00%,特异度分别为94.00%、93.00%、93.00%;用于诊断乙肝相关早期肝细胞癌的灵敏度分别为95.00%、96.00%、94.00%,特异度分别为95.00%、95.00%、93.00%。血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501联合检测用于乙肝相关早期肝细胞癌诊断的灵敏度为93.33%,特异度为92.92%,准确度为93.05%。结论血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501是乙肝相关早期肝细胞癌诊断的潜在标志物。     

胸部放疗患者血浆外泌体中miR-7-5p与miR-17-5p的表达及临床意义

目的　检测胸部放疗患者放疗50Gy 血浆外泌体中miR-7-5p 与miR-17-5p 较放疗前表达的差异，探讨其预测放射性肺损伤（radiation-induced lung injury，RILI）中的价值。方法　选取在南通市肿瘤医院行胸部放疗并发放射性肺炎的80 例患者为研究对象，按照美国肿瘤放射治疗协作组和欧洲肿瘤治疗研究协作组（RTOG/EORTC）诊断分级标准，分为≥ 3 级RILI 患者组16 例和<3 级RILI 患者组64 例，检测患者放疗前和放疗50Gy 预留血浆外泌体差异，深度测序筛查出放疗50Gy 时差异表达明显的miRNA，qRT-PCR 方法检测放疗前，放疗50Gy 血浆外泌体miR-7-5p 与miR-17-5p 表达量，利用ROC 曲线分析血浆外泌体 miR-7-5 与miR-17-5p 预测≥ 3 级RILI 的临床意义。结果　放疗50Gy 后外泌体标志蛋白CD9，CD63 和TSG101 表达较放疗前明显升高，而Albumin 较放疗前明显下降，差异均具有统计学意义（t=5.714~20.159，均P < 0.05）。两组患者放疗50Gy 后，miR-7-5p 与miR-17-5p 表达丰度显著升高，且≥ 3 级RILI 组升高幅度高于<3 级RILI 患者，差异均具有统计学意义（t =8.652~11.233，均P < 0.05）。miR-7-5p 的曲线下面积（AUC）为 0.705（95％置信区间:0.618~0.795），灵敏度和特异度分别为0.762 和0.681。miR-17-5p 的曲线下面积（AUC）为0.683（95％置信区间:0.585~0.764），灵敏度和特异度分别为0.708，0.715。结论　放疗至50Gy，血浆外泌体中miR-7-5p 与miR-17-5p 高表达可能是预测与诊断严重RILI 的重要生物学标志。     

外泌体miR-9-3p在非小细胞肺癌血清中表达及检测的临床意义

目的 分析外泌体miR-9-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)血清中的表达水平,探讨血清外泌体miR-9-3p检测在NSCLC诊断中的临床意义.方法 收集2016年1月至2017年12月在山东省青岛疗养院诊疗的80例NSCLC患者(NSCLC组)、50例肺部良性病变患...     

血清miR-18a-5p、miR-21在老年胃癌临床诊断及预后评估中的应用

目的 探讨血清微小RNA-18a-5p(miR-18a-5p)、微小RNA-21(miR-21)在老年胃癌临床诊断及预后评估中的价值。方法 收集85例胃癌患者(胃癌组)术前和术后血清,以及45例非胃癌对照者(对照组)血清,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测两组受试者血清样本中miR-18a-5p和miR-21的表达水平,分析其在不同临床病理特征老年胃癌患者中的表达,探讨其表达水平在临床诊断及预后评估中的价值。结果 胃癌组血清miR-18a-5p、miR-21、癌胚抗原(CEA)及糖类抗原199(CA199)水平均高于对照组(P<0.05);血清miR-18a-5p、miR-21、CEA及CA199诊断胃癌的曲线下面积(AUC)分别为0.750、0.807、0.656、0.690,4项联合诊断的AUC为0.879,明显高于各单一指标(P<0.05);不同TNM分期、肿瘤最大径、肿瘤浸润深度、组织分化程度及淋巴结转移情况的胃癌患者miR-18a-5p、miR-21表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与术前比较,术后患者miR-18a-5p、miR-21、CEA...     

血清miR-21、miR-135a对胃癌患者化疗后复发和转移的预测价值

目的 探讨血清miR-21和miR-135a表达对胃癌患者化疗后复发和转移的预测价值。方法 选取行化疗的胃癌患者100例(胃癌组),以50名体检健康者作为正常对照组。收集所有患者的临床资料,化疗后1个月开始随访,随访时间为24个月。检测正常对照者和胃癌患者化疗前及化疗后第3、8、13、18、24个月的血清miR-21、miR-135a相对表达量。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-21和miR-135a判断胃癌预后的效能。结果 与正常对照组比较,胃癌组化疗前血清miR-21相对表达量升高(P<0.05),miR-135a相对表达量降低(P<0.05)。化疗前血清miR-21和miR-135a相对表达量与胃癌患者淋巴结转移、分化程度、浸润深度有关(P<0.05),与年龄、性别、TNM分期、有无远处转移无关(P>0.05)。100例胃癌患者失访3例,有66例(68%)出现复发或转移。复发或转移患者化疗后血清miR-21相对表达量随随访时间的延长而升高(P<0.05),血清miR-135a相对表达量随随访时间的延长而降低(P<0.05)。ROC曲线...     

血清miR-33a、miR-29c、miR-126联合检测对脑动脉粥样硬化的诊断价值

目的探讨血清miR-33a、miR-29c、miR-126联合检测对脑动脉粥样硬化的诊断价值。方法选择2018年1月至2020年1月该院收治的脑动脉粥样硬化患者120例为研究组,同期体检健康者120例为对照组。根据不同脑动脉硬化严重程度将患者分为单动脉组(23例)、双动脉组(53例)、多动脉组(44例)。采用实时荧光定量PCR检测研究组与对照组及不同脑动脉粥样硬化严重程度患者血清miR-33a、miR-29c、miR-126的相对表达水平。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-33a、miR-29c、miR-126对脑动脉粥样硬化的诊断价值。结果研究组血清miR-33a、miR-29c、miR-126的相对表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-33a、miR-29c、miR-126在不同脑动脉粥样硬化严重程度患者中的相对表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-33a、miR-29c、miR-126单项检测对脑动脉粥样硬化诊断的灵敏度分别为95.00%、93.00%、92.00%,特异度分别为95.00%、92.00%、91.00%。血清miR-33a、miR-29c、miR-126联合检测对脑动脉粥样硬化诊断的灵敏度为96.67%,特异度为90.00%,准确度为93.33%。结论血清miR-33a、miR-29c、miR-126可作为联合诊断脑动脉粥样硬化的潜在标志物。     

血清外泌体miR-744-5p在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义

目的研究血清外泌体miR-744-5p在非小细胞肺癌中的表达变化及临床应用价值。方法回顾性研究。收集南方医科大学南方医院2016年11月至2018年2月就诊的92例非小细胞肺癌患者和91名健康对照者的血清,分离血清外泌体,同时进行RNA提取。应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清外泌体miR-744-5p的表达量,利用受试者工作特征(ROC)曲线评价外泌体miR-744-5p的诊断效能。结果非小细胞肺癌患者血清外泌体miR-744-5p的表达水平(0.0122±0.0197)较健康对照组(0.0936±0.0819)明显下调,差异有统计学意义(U=553.5,P<0.001)。在肺癌组中,早、晚期肺癌患者血清外泌体miR-744-5p的表达水平(0.0117±0.0139,0.0126±0.0212)与健康对照组相比,均明显降低(U=72.5,U=471.5,P均<0.001);肺腺癌外泌体miR-744-5p表达水平(0.0106±0.0203)低于肺鳞癌(0.0173±0.0178),差异具有统计学意义(U=394.5,P<0.001)。ROC曲线显示血清外泌体miR-744-5p能够有效区分非小细胞肺癌患者和健康人群,曲线下面积为0.9339(95%CI=0.8996~0.9681,P<0.0001);外泌体miRNA-744-5p能够有效诊断早期肺癌,曲线下面积为0.9431(95%CI=0.8837~1.0000,P<0.0001)。结论血清外泌体miR-744-5p有希望作为非小细胞肺癌非侵入性的分子诊断标志物,但尚需要进一步比较研究和扩大验证。     

雪旺细胞来源的外泌体miR-21通过靶向SPRY2促进大鼠坐骨神经损伤后修复的研究

摘要 目的：研究高表达miR-21的雪旺细胞（Schwann cells,SC）来源外泌体对坐骨神经损伤（sciatic nerve injury,SNI）的修复作用及机制。 方法：分别采用空载慢病毒和高表达miR-21的慢病毒感染SC株,收集SC上清外泌体并进行鉴定。采用神经断端吻合术建立SNI大鼠模型,术后随机分为模型组、SC来源外泌体组和高表达miR-21的SC来源外泌体组（n=10）。其中,SC来源外泌体组和高表达miR-21的SC来源外泌体组分别采用体外收集的外泌体局部注射进行治疗,3周后行为学实验检测神经功能恢复,免疫荧光染色评价SNI后轴突髓鞘再生,RT-qPCR检测血清外泌体miR-21及神经组织中miR-21和SPRY2的表达水平,双荧光素酶报告基因实验体外验证miR-21和SPRY2之间的靶向互作。 结果：与模型组相比,其余各组大鼠坐骨神经功能和神经再生情况均出现明显改善,RT-qPCR结果显示血清外泌体及神经组织中miR-21的表达水平显著升高,神经组织中SPRY2的表达水平显著降低,其中高表达miR-21的SC细胞来源外泌体组较SC来源外泌体组变化更显著;双荧光素酶报告基因实验表明miR-21靶向调节SPRY2的表达。结论：高表达miR-21的SC来源外泌体通过靶向SPRY2显著促进SNI后修复。     

男性不育症患者精浆外泌体miR-202-5p水平变化及临床意义

目的探讨男性不育症患者精浆外泌体微小RNA-202-5p(miR-202-5p)水平变化及其在男性生殖中的临床意义。方法选取于解放军东部战区总医院、江苏省中医院及温州医科大学附属第一医院就诊的男性不育症患者107例为研究对象,其中无精症患者53例,弱精症患者54例;另选取同期招募的53例正常生育的健康男性为对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测精浆外泌体miR-202-5p水平,分析其在男性不育症中的诊断价值及与精液参数的相关性,采用生物信息学分析软件预测其靶基因、相关通路及靶蛋白相互作用网络。结果与对照组比较,弱精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平明显增加(P0.05),无精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平明显降低(P0.05);无精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平较弱精症患者明显降低(P0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,精浆外泌体miR-202-5p诊断弱精症的曲线下面积(AUC)为0.664,诊断无精症的AUC为0.785,对弱精症和无精症鉴别诊断的AUC为0.878。弱精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平与a+b级前向运动精子比例呈负相关(r=-0.312,P0.05),与不动精子比例呈正相关(r=0.308,P0.05)。精浆外泌体miR-202-5p是弱精症和无精症发生的危险因素(P0.05)。生物信息学分析发现,miR-202-5p的靶基因明显富集于生殖和精子功能密切相关的蛋白调控通路。结论男性不育症患者精浆外泌体miR-202-5p水平与正常生育的健康男性存在明显差异,且与精子活力密切相关,可能参与了男性不育症的发生、发展过程。     

血清外泌体 miR-221 和 miR-378 水平检测在胃癌诊断中的应用研究

目的　研究血清外泌体中 miR-221 和 miR-378 水平及其联合检测对诊断胃癌的价值。方法　选取延安市人民医院收治的胃癌患者 92 例为试验组,选取同期诊断为胃息肉的患者 68 例和同期健康体检者 50 例为对照组,空腹采集静脉血提取血清外泌体用 Western Blot 和 Nanosight 法鉴定,用实时荧光定量 PCR 检测血清外泌体 miR-221 和 miR-378水平,用 ROC 曲线分析 miR-221 和 miR-378 联合检测对胃癌的诊断效能。结果　血清外泌体标本经 Western Blot 蛋白标志物检测鉴定和 Nanosight 颗粒浓度检测鉴定,结果显示所提取的标本中确实含有外泌体。用实时荧光定量 PCR 对标本进行定量检测结果显示,血清外泌体中 miR-221 和 miR-378 水平胃癌组高于胃息肉组,胃息肉组又高于健康对照组,差异均有统计学意义（F=7.112~10.986,均 P ＜ 0.01）。ROC 曲线分析显示,miR-221 和 miR-378 联合检测对胃癌诊断的特异度、灵敏度、诊断符合率以及阴性预测值都明显高于单独检测,差异均有统计学意义（P ＜ 0.05）,说明这两种miRNA 联合检测对胃癌的诊断效能高于单独检测。结论　血清外泌体 miR-221 和 miR-378 水平联合检测对诊断胃癌有潜在的应用价值