肝癌细胞HepG2外泌体对其自身生长行为的影响及其机制研

目的探讨肝癌细胞HepG2外泌体对细胞增殖、迁移、周期和凋亡的影响及其机制.方法培养肝癌细胞HepG2并用差速离心法提取其外泌体,采用粒径分析、透射电镜、蛋白质印迹法(Western blot)等方法对其进行鉴定.将外泌体与肝癌细胞HepG2共培养,采用细胞划痕实验比较其对细胞增殖能力的影响;采用Transwell实验...     

雌激素通过NF-κB信号通路影响肝癌细胞的肿瘤学行为研究

目的探讨雌激素对HepG2和BEL7402两种肝癌细胞增殖及迁移能力的抑制和诱导凋亡的作用及其相应机制。方法利用MTS试验检测不同浓度的雌激素在不同时间点对HepG2和BEL7402两种肝癌细胞增殖能力的影响。Annexin V/PI流式细胞术检测不同浓度的雌激素诱导HepG2和BEL7402细胞凋亡的情况。Transwell迁移实验检测雌激素对HepG2和BEL7402细胞迁移能力的影响。采用Western blotting法检测不同浓度下雌激素对肝癌细胞中NF-κB信号通路的活性及其下游相关基因c-Myc、Cyclin D1、基质金属蛋白酶(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)和Bcl-2表达的影响。结果 MTS试验结果显示,在不同时间点雌激素有效抑制了HepG2和BEL7402细胞的增殖,并随着雌激素浓度的升高其抑制肝癌细胞增殖的效果逐渐增强,与此同时,雌激素也降低了c-Myc、Cyclin D1等增殖相关基因的表达。Annexin V/PI流式细胞术数据显示雌激素诱导HepG2和BEL7402细胞的凋亡并呈明显剂量依赖性,而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达出现下降。Transwell迁移实验证明雌激素明显抑制了HepG2和BEL7402细胞的迁移能力并且降低了MMP-9和VEGF的表达。验证了雌激素可有效抑制HepG2和BEL7402肝癌细胞中NF-κB信号通路的活性。结论雌激素通过下调NF-κB信号通路的活性及下游相关分子的表达,而抑制肝癌细胞的增殖与迁移并诱导其凋亡。     

LRRC1通过DLG1/YAP信号通路促进肝癌细胞增殖的研究

目的研究富含亮氨酸的重复序列蛋白1(LRRC1)通过巨盘状蛋白1(DLG1)/Yes相关蛋白(YAP)信号通路调节肝癌细胞增殖的机制。方法在原发性肝细胞癌患者的癌灶组织及配对癌旁组织中,检测LRRC1的表达水平。使用小干扰RNA(siRNA)抑制HepG2及Huh7中LRRC1的表达后,检测细胞增殖能力及YAP、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)表达水平。通过共聚焦显微镜,定位HepG2细胞中LRRC1与DLG1分布。结果肝细胞癌患者癌灶中LRRC1表达量较癌旁组织升高。siRNA抑制HepG2及Huh7细胞中LRRC1基因表达后,细胞增殖能力受到抑制,YAP、Cyclin D1及CDK4表达水平下降。镜下发现HepG2细胞中LRRC1与DLG1均主要分布于细胞膜内侧面,两者分布位置高度重叠。结论 LRRC1通过DLG1/YAP信号通路调控细胞周期,促进肝癌细胞增殖。     

着丝粒蛋白F在肝癌中的表达和对肝癌细胞生物学行为的影响

目的探讨肝癌中着丝粒蛋白F(CENPF)的表达量与细胞增殖、迁移等生物学行为的关系及其作用机制。方法比较肝癌细胞与正常肝细胞、肝癌组织与癌旁正常组织中CENPF的表达量。利用慢病毒包被的质粒转染肝癌细胞干扰CENPF的表达,分别使用MTS试剂、台盼兰染色法、transwell迁移小室方法研究CENPF的表达对细胞增殖、存活、迁移的影响,并利用Western blotting法探究其对细胞周期调控蛋白c-Myc、Cyclin D1表达的影响,明确CENPF作用机制。结果与正常肝细胞和癌旁正常组织相比,肝癌细胞和肝癌组织中CENPF蛋白表达量显著增加。使用病毒包被的质粒抑制CENPF的表达可显著降低肝癌细胞的增殖能力、存活率和迁移能力,同时调控细胞增殖和细胞周期的蛋白(c-Myc、Cyclin D1)的表达降低。结论肝癌中过表达的CENPF可通过激活细胞周期调控蛋白c-Myc和Cyclin D1,提高肝癌细胞的增殖、存活、迁移能力,诱导肝癌的发生和发展。     

阿卡波糖对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡与细胞周期的影响

目的 探讨阿卡波糖对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡与细胞周期的影响。方法 将处于生长对数期的人脐静脉内皮细胞分为正常组(给予不含任何药物的培养基),模型组(给予33.3 mmol/L葡萄糖),阿卡波糖组(给予33.3 mmol/L葡萄糖+1μg/L,3μg/L,10μg/L阿卡波糖)。MTT法及流式双染检测细胞活力及细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p21及细胞周期蛋白(Cyclin D1)蛋白表达量。结果 与正常组比较,模型组中细胞活力降低,细胞凋亡率提高,细胞周期阻滞在G1期,Bax及p21表达量上调,Bcl-2及Cyclin D1表达量下调;与模型组比较,阿卡波糖组中细胞活力提高,细胞凋亡率降低,G1期延长,Bax及p21表达量下调,Bcl-2及Cyclin D1表达量上调,且呈剂量依赖性。结论 阿卡波糖能抑制高糖诱导的HUVEC凋亡,并缩短G1期,与调节细胞凋亡相关蛋白及细胞周期相关蛋白表达有关。     

汉黄芩苷通过调控AKT信号通路促进肝癌细胞HepG2凋亡的研究

目的 探究汉黄芩苷(Wogonoside)对抑制肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响及其机制。方法 体外培养肝癌细胞HepG2,随机分为对照组、汉黄芩苷治疗组、AKT激动剂处理组。通过CCK-8实验检测不同浓度汉黄芩苷对细胞活力的影响,运用Western blot实验检测肝癌细胞内Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平及AKT蛋白磷酸化水平,通过流式细胞技术检测肝癌细胞凋亡程度。结果 与对照组比较,汉黄芩苷治疗组细胞增殖能力显著降低(P<0.05),且存在量效关系,凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax表达水平显著增加(P<0.05),而抗凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达水平以及AKT蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),凋亡程度显著增加(P<0.05)。与汉黄芩苷治疗组相比,AKT激动剂处理组凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax表达水平显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著增加(P<0.05),凋亡程度显著降低(P<0.05)。结论 汉黄芩苷具有抑制肝癌HepG2细胞增殖并促进其凋亡的作用,其机制与调节AKT信号通路...     

lncRNA MEG3对肝癌细胞增殖凋亡的影响及机制研究

目的探讨lncRNA MEG3对肝癌细胞增殖凋亡的影响及机制。方法 RT-PCR检测人肝癌HepG2细胞转染48 h后MEG3的mRNA表达;CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测ki67、PCNA、Cleaved caspase3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达。结果与pc DNA3.1组比较,pc DNA3.1-MEG3组MEG3的mRNA表达显著上升,pcDNA3.1-MEG3组细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著升高,Cleaved caspase3蛋白表达显著上调,ki67、PCNA、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达显著下调(P0.01)。结论 lncRNA MEG3高表达可抑制肝癌细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制与Wnt/β-catenin信号通路的调控有关。     

破骨细胞外泌体miR-183-5p靶向程序性细胞死亡因子4促进肺腺癌细胞增殖及侵袭

目的 探讨破骨细胞来源外泌体(osteoclast-derived exosomes)中miR-183-5p靶向程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4, PDCD4)对肺腺癌侵袭增殖的影响。方法 利用RAW264.7细胞诱导分化破骨细胞并提取外泌体,透射电镜及粒度仪对其进行鉴定。将外泌体与A549细胞共培养,通过CCK8法检测细胞活性,观察miR-183-5p对A549细胞增殖的作用;检测A549细胞周期分布,观察miR-183-5p对细胞周期的作用;利用Transwell侵袭实验,观察miR-183-5p对A549细胞侵袭能力的作用。Western blotting检测PDCD4、周期蛋白D1(Cyclin D1, CCND1)和周期蛋白依赖性激酶4(cyclin dependent kinase, CDK4)相对表达,观察miR-183-5p靶蛋白表达情况及其对A549细胞侵袭、增殖的影响。结果 外泌体呈边缘透亮清晰的椭圆形囊泡状结构,粒径分布范围30-200nm左右,荧光探针发现外泌体能够较快的被肺腺癌细胞A549摄取,并且共培养后A549细胞中miR-183-5p表达水平明显增高(p<0.01)。miR-183-5p高表达可以明显促进A549细胞的侵袭、细胞增殖和周期(p<0.05)。A549细胞中miR-183-5p过表达后,PDCD4表达降低,同时CCND1、CDK4也高表达(p<0.05)。结论 破骨细胞来源的外泌体与A549细胞共培养可提高细胞中miR-183-5p的表达,miR-183-5p通过靶向抑制PDCD4表达可促进肺腺癌细胞侵袭、增殖和迁移能力。     

漆树酸联合紫杉醇对肝癌细胞生长抑制和凋亡的影响

目的:评价漆树酸和紫杉醇联合用药对人肝癌HepG2细胞是否具有协同作用.方法:人肝癌HepG2细胞经漆树酸和(或)紫杉醇处理后,MTS法检测细胞增殖情况,流式细胞仪技术检测细胞凋亡,Western blot方法检测Bax、Bcl-2及Caspase-3、8、9和PARP凋亡相关蛋白的变化.结果:漆树酸和紫杉醇联合应用能够明显增强对HepG2细胞的增殖抑制,与单独用药组相比具有明显的协同作用.漆树酸联合紫杉醇可以明显诱导HepG2细胞凋亡.两药联合作用可以诱导Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比率增加,引起Caspase-3、8、9的活化,PARP的切割.结论:漆树酸和紫杉醇联合用药具有协同作用,明显增强抑制HepG2细胞的增殖和诱导细胞凋亡,其作用机制可能与Caspase系统活化相关.     

LASS2通过AMPKα/mTORC1信号通路诱导HepG2肝癌细胞自噬和凋亡

目的 研究LAG1长寿保障基因2(LASS2)过表达对HepG2肝癌细胞凋亡、自噬的作用及可能的信号通路。方法 采用HepG2肝癌细胞进行研究,设置空白对照组、空载组(重组腺病毒Adv-GFP感染细胞)、实验组(重组腺病毒Adv-LASS2-GFP感染细胞)。感染48 h后分别提取各组细胞总RNA和蛋白,采用实时荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)、Western blot检测LASS2 mRNA、蛋白表达水平的变化;CCK-8实验评价各组细胞增殖能力的差异及流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白(BCL2、Bax)、自噬相关蛋白(SQSTM1、LC3A/B、Beclin-1)及单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)α/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)信号通路相关蛋白(t-AMPKα、p-AMPKα、t-Raptor和p-Raptor)的表达水平。结果 与空白对照组、空载组相比,实验组LASS2 mRNA、蛋白相对表达水平均明显上调(P<0.001),且HepG2肝癌细胞增殖能力明显被抑制(P<0.001)。流式细胞仪检...     

槲皮素抑制肝癌HepG2细胞的增殖及促凋亡机制的研究

目的观察槲皮素对HepG2细胞增殖和凋亡的影响并探讨其机制。方法人肝癌HepG2细胞系,分为6组,A～E组加入终浓度分别为12.5,25.0,50.0,100.0,200.0μmol/L槲皮素,F组为空白对照组,加入等量营养液。采用MTT法及流式细胞检测技术检测各组人肝癌HepG2细胞对槲皮素的敏感性,应用免疫细胞化学技术检测细胞中Bcl-2及Bax蛋白的表达情况。结果槲皮素对肝癌HepG2细胞的增殖呈浓度依赖性的抑制作用,作用48h后,A～E组抑制率与凋亡率高于F组,差异均有统计学意义(P<0.05);槲皮素作用HepG2细胞24h后,D组G1期细胞比率高于F组,差异有统计学意义(P<0.05),S和M期细胞比率差异无统计学意义(P>0.05);作用48h后,D组Bcl-2和Bax表达灰度值与F组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论槲皮素对肝癌HepG2细胞具有生长抑制作用,并通过激活线粒体凋亡途径来促进细胞凋亡。     

沙棘提取物通过CD68对淋巴瘤细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

目的探讨沙棘提取物对淋巴瘤细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法用终浓度为0.185 mg/ml、0.37 mg/ml、0.74 mg/ml的沙棘提取物处理细胞Raji,作为沙棘提取物低、中、高浓度(HrL-L、HrL-M、HrL-H)组;未添加药物的细胞作为正常对照(Con)组。将si-NC、si-CD68转染至细胞Raji中,记为si-NC组、si-CD68组;pcDNA3.1、pcDNA3.1-CD68转染至细胞Raji后再用0.74 mg/mL的沙棘提取物处理,记为HrL-H+pcDNA3.1组、HrL-H+pcDNA3.1-CD68组。蛋白质印迹(Western Blot)检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、CD68蛋白表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡。结果与对照组相比,沙棘提取物低、中、高浓度组Cyclin D1表达水平显著降低,P21表达水平显著升高,细胞活性显著降低,且呈浓度依赖性(P0.05);沙棘提取物高浓度组中Bax表达水平显著升高,Bcl-2表达水平显著降低,细胞凋亡率显著升高,CD68表达水平显著降低(P0.05)。抑制CD68表达,Cyclin D1、Bcl-2表达水平显著降低,P21、Bax表达水平显著升高,细胞活性显著降低,细胞凋亡率显著升高(P0.05)。过表达CD68逆转了沙棘提取物对细胞Raji增殖抑制和凋亡促进作用。结论沙棘提取物可抑制细胞Raji增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与下调CD68的表达有关。     

瑞芬太尼抑制人肝癌细胞Notch信号通路及细胞生长的研究

目的 探讨瑞芬太尼对肝癌细胞增殖、周期和凋亡及其相关Notch信号通路的影响。方法 通过体外培养肝癌细胞HepG2,采取不同浓度(0、5、50、500 ng/mL)的瑞芬太尼处理细胞,并设为瑞芬太尼各剂量组。采用500 ng/mL瑞芬太尼和20μmol/L Notch通路抑制剂DAPT处理细胞,分别设为瑞芬太尼组、瑞芬太尼+DAPT组。采用CCK8检测细胞的增殖;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;Western blot检测p27、Cyclin D1、Bax、cleaved cas-3和Notch通路相关蛋白的表达。结果 0、5、50、500 ng/mL的瑞芬太尼均可以降低肝癌细胞的450 nm处的光密度值(OD_{450 nm}值)、S期细胞比率,增加G₀/G₁期细胞比率、细胞凋亡率,上调p27、Bax、cleaved cas-3蛋白表达,下调Cyclin D1、Notch1、Hes1蛋白表达,并呈浓度依赖性。瑞芬太尼+DAPT组的OD_{450 nm}值、S期细胞比率、Cyclin D1蛋白表达低于瑞芬太尼组,...     

新多胺类似物四丁基丙二胺对人肝癌HepG2细胞增殖及侵袭迁移的影响

目的研究新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutyl propanediamine,TBP)对人肝癌HepG2细胞增殖及侵袭迁移的影响。方法 MTT比色法分析细胞增殖影响,流式细胞术检测细胞周期改变,Transwell体外迁移/侵袭实验检测迁移侵袭能力的变化,Western Blot用于分析细胞多胺代谢相关蛋白精胺氧化酶(SMO)的表达水平,化学发光法测定SMO活性,反相高效液相色谱法分析TBP对细胞多胺含量的影响。结果 TBP有效抑制HepG2细胞增殖水平,对细胞的侵袭、迁移能力也有明显抑制作用。TBP抑制细胞DNA复制,导致S期细胞比例显著性下降,G0/G1期细胞比例升高。细胞浆中SMO含量明显升高,但其酶活性下降。TBP显著性增加了细胞的腐胺水平,但对精脒和精胺无影响。结论 TBP能够抑制人肝癌HepG2细胞增殖、降低HepG2细胞侵袭和迁移的能力,其机制可能与影响肿瘤细胞DNA合成,改变细胞周期时相分布有关。     

塞来昔布联合索拉非尼对人肝癌HepG2细胞迁移与侵袭能力的影响

目的评价塞来昔布联合索拉非尼对人肝癌HepG2细胞迁移与侵袭能力的影响。方法采用MTT法检测药物对HepG2细胞增殖的抑制率;通过划痕实验、Transwell实验评价药物对HepG2细胞迁移与侵袭作用的影响;采用Western blot法检测相关蛋白E-cadherin、COX-2、Notch1、Snail的表达。结果塞来昔布与索拉非尼联用有协同抑制HepG2细胞增殖的作用。与对照组比较,两药单独用药及联合用药均可抑制HepG2细胞迁移与侵袭作用(P<0.05或P<0.01)。塞来昔布无显著增强索拉非尼诱导HepG2细胞E-cadherin表达增加的作用,也无显著降低索拉非尼诱导HepG2细胞Notch1、Snail表达下降的作用;索拉非尼无显著增强塞来昔布诱导HepG2细胞COX-2表达下降的作用。结论塞来昔布可增强索拉非尼的抗HepG2细胞增殖作用,但不影响索拉非尼抑制的HepG2细胞迁移与侵袭作用。     

RPB5介导蛋白与HBx蛋白共表达对肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的通过乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与RPB5介导蛋白(RMP)在肝癌Hep G2细胞中的共表达,探索RMP与HBx对肝癌细胞凋亡的影响。方法脂质体介导瞬时转染细胞;实时荧光定量RT-PCR和western blot分别检测RMP与HBx在肝癌Hep G2细胞中的表达量;流式细胞仪检测细胞凋亡率;逆转录PCR检测细胞凋亡相关基因Bax、Caspase3、P53、Bcl-2 mRNA相对表达水平,western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果与未经任何处理的Hep G2细胞比较,转染RMP质粒的稳定表达HBx的Hep G2细胞中RMP、HBx在基因及蛋白质水平表达均显著升高(P0.01);细胞凋亡率显著降低;促凋亡基因Bax、Caspase3和P53 mRNA相对表达水平均显著下调(P0.01),凋亡抑制基因Bcl-2 mRNA相对表达水平显著上调(P0.01);促凋亡蛋白Bax表达量明显降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达量明显升高。结论 RMP与HBx共表达可降低肝癌Hep G2细胞凋亡率,提示RMP和HBx可能在肝癌发生和发展过程中起着重要的作用。     

姜黄素对人类绒毛膜癌细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨姜黄素对人类绒毛膜癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法将人类绒毛膜癌细胞JEG-3细胞株随机分为对照组和姜黄素干预组。姜黄素干预组加入100μl不同浓度的姜黄素与细胞孵育24 h;对照组只加入PRMI 1640培养液与等体积的二甲基亚砜(DMSO),MTT检测检测细胞抑制率。姜黄素干预组加入100μl姜黄素(终浓度为40μmol/L)与细胞孵育24 h后,TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blot检测增殖相关蛋白Ki-67和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达,以及凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)和Bcl2相关X蛋白(Bax)的表达。结果与对照组相比,姜黄素干预组JEG-3细胞培养24 h后吸光度显著下降(P 0. 05);姜黄素对JEG-3细胞抑制作用呈药物浓度依赖性,半抑制浓度(IC50)为(39. 33±1. 02)μmol/L;与对照组相比,JEG-3细胞的凋亡率明显升高,增殖相关蛋白Ki-67和Cyclin D1的表达显著降低(P 0. 05),凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的蛋白表达量显著升高(P 0. 05),Bcl-2的表达量显著降低(P 0. 05)。结论姜黄素可以下调人类绒毛膜癌细胞增殖相关蛋白的表达,上调凋亡相关蛋白的表达,调控其增殖和凋亡。     

三氧化二砷对肝癌HepG2细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对人肝癌细胞系HepG2的凋亡诱导作用及其发生机制。方法体外培养HepG2细胞,用不同浓度的As2O3对HepG2细胞进行干预;采用MTT、Annexin V/PI双染及TUNEL法,观察其对HepG2细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用;采用流式细胞术定量检测凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax表达的变化。结果 As2O3在体外能明显抑制HepG2细胞生长,具有时间剂量依赖关系。Annexin V/PI双染及TUNEL法结果显示:5～20μmol/L的As2O3作用24h均可诱导HepG2细胞凋亡,且呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(t分别=-2.96、-4.15、-7.33,P均<0.05);As2O3作用HepG2细胞24h时Bcl-2表达下降,Bax表达上升,Bcl-2/Bax比值降低,呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(t分别=3.59、5.65、6.94、7.62、7.92,P均<0.05)。结论一定浓度的As2O3能抑制HepG2细胞增殖,促进其凋亡,其机制可能与调控Bcl-2、Bax表达有关。     

DcR3表达在肝癌细胞凋亡和增殖中的作用研究

目的通过体外试验探讨诱骗受体3(DcR3)对肝癌细胞凋亡和增殖的影响。方法构建DcR3慢病毒载体和慢病毒非特异性载体,转染HepG2细胞株后,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)判断转染效率。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测DcR3蛋白表达水平;并绘制生长曲线检测细胞增殖情况;采用荧光定量PCR (qPCR)方法检测细胞凋亡指标半胱天冬酶-3 (caspase 3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)转录水平变化。结果检测3株肝癌细胞HepG2、MHCC-LM3和MHCC-97H的DcR3蛋白表达水平,发现细胞株HepG2较MHCC-LM3、MHCC-97H中的DcR3蛋白表达水平明显低,差异具有统计学意义(P0.05)。上调HepG2细胞株的DcR3的mRNA水平后,细胞凋亡指标caspase 3和Bax转录水平明显下降,抗凋亡基因Bcl-2转录水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。当培养到第4天时,LV-DcR3组增殖速度[(39.45±3.61)]与LV-NC组[(25.98±5.34)]比较,差异具有统计学意义(P=0.022);当培养到第6天时,LV-DcR3组增殖速度[(65.84±6.16)]较LV-NC组[(33.34±4.55)],差异有统计学意义(P=0.002)。结论DcR3具有促进肝癌细胞增殖和抗凋亡作用,其机制可能与上调抗癌基因Bcl-2的表达有关。     

人脐带间充质干细胞条件培养基对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨人脐带间充质干细胞条件培养基(UCMSC-CM)对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响及其机制。方法体外培养肝癌细胞系HepG2和BEL-7402, 常规培养肝癌细胞系作为对照组, UCMSC-CM处理的肝癌细胞系作为UCMSC-CM组。采用细胞增殖与毒性检测(CCK-8)法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;划痕试验和Transwell侵袭试验分别检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、p-GSK-3β、Bak、Bax、兔抗人大分子B淋巴细胞瘤蛋白(BCL-XL)、髓细胞白血病-1蛋白(MCL-1)、存活素蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中上皮间质转化(EMT)相关标志物mRNA的表达水平。结果 CCK-8法检测结果显示, UCMSC-CM处理HepG2细胞和BEL-7402肝癌细胞24、48、72 h后的光密度值与对照组比较, 差异无统计学意义(P>0.05);流式细胞术检测结果显示, UCMSC-CM组与对照组处理HepG2、BEL-7402细胞早期(Q4)、晚期(Q2)凋亡率比较, 差...