VEGFMMP-3在子宫内膜异位症异位在位内膜中的表达

<正>子宫内膜异位症(EMs)是严重影响中青年妇女健康和生活质量的多发病、常见病,其发病机制复杂不明确。1921年,Sampson提出经血种植逆流学说,但该学说无法解释90%育龄妇女经血逆流却只有10%~15%患EMs。因此,有人认为经血逆流是诱因,而异位的子宫内膜的黏附、侵袭和局部血管     

益气活血方对糖尿病肾病大鼠肾组织中NF-κB表达的影响

目的:探讨益气活血方对糖尿病大鼠肾脏损害的保护作用,及对肾皮质氧自由基代谢状态及NF-κB表达的影响。方法:雄性大鼠60只,随机分为4组,正常组、模型组、益气活血方组、贝那普利片组,除正常组外,其余各组大鼠均采用高糖高脂+手术+STZ法复制糖尿病肾病模型,3天后血糖≥16.7mmol/L者视为造模成功。分别给药或水,益气活血方剂量为0.9ml/100g体重,贝那普利片治疗剂量为0.9mg/100g。治疗4周后,肾脏组织进行电镜病理观察腹主动脉取血,室温静置1~2小时后,2500rpm离心10min,分离上清,存放于2.0ml冻存管中,-80℃保存备用,采用免疫组化法检测各组大鼠血清中NF-κB的表达。结果:与正常组比较,糖尿病肾病模型大鼠肾脏组织中NF-κB表达明显上调,而益气活血方治疗后NF-κB表达又有所下调。结论:益气活血方可降低糖尿病大鼠肾脏蛋白排泄,其机制可能是通过抑制NF-κB活性有关。     

内异康复栓对子宫内膜异位症大鼠异位和在位内膜雌、孕激素受体的影响

目的观察内异康复栓直肠给药对子宫内膜异位症大鼠异位和在位内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的不同影响,探讨其作用机理。方法将子宫内膜异位症大鼠随机分为内异康复栓高、中剂量组及丹那唑组、丹莪妇康煎膏组、模型组、空白组,采用免疫组化SP法检测ER、PR的表达。结果内异康复栓高、中剂量组能显著降低异位内膜ER、PR的表达(P<0.05),并对在位内膜下降的ER、PR水平有上调作用(P>0.05)。结论内异康复栓可能通过抑制异位内膜细胞内ER、PR的合成而发挥治疗作用,且对在位内膜异常的ER、PR表达有一定的调节作用。     

痛经宁对子宫内膜异位症大鼠在位与异位内膜中抑癌基因PTEN表达的影响

目的探索抑癌基因PTEN在子宫内膜异位症(EMs)发病中的作用,观察痛经宁对EMs大鼠在位与异位内膜组织中PTEN蛋白及mRNA表达的影响。方法自体移植法建立EMs大鼠模型,随机数字表法分5组,分别给予孕三烯酮与高、中、低剂量的痛经宁药液及蒸馏水对照。28天后,通过HE染色观察各组大鼠在位与异位内膜组织的病理结构;免疫组化(S-P)法、免疫印迹(Western Blot)法测定PTEN蛋白的表达情况;qPCR法测定PTENmRNA的表达情况。结果在位及异位内膜组织中,EMs大鼠PTEN蛋白及mRNA呈低表达(P0.05),异位内膜低于在位内膜。高剂量的痛经宁药液使之表达强度上升最多,差异具有统计学意义(P0.05)。病理结构显示,各剂量的痛经宁药液均可使异位内膜萎缩,以高剂量组最为明显,不改变在位内膜的结构。而孕三烯酮可使在位及异位内膜均萎缩。结论 PTEN的降低是EMs的发病机制之一,痛经宁可通过上调PTEN蛋白及mRNA的表达而起效,可使异位内膜出现凋亡性病理改变,而不影响在位内膜的病理结构。     

温经汤对子宫内膜异位症小鼠TLR4/NF-κB通路的影响研究

目的 观察温经汤对子宫内膜异位症小鼠Toll样受体4(TLR4)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路表达的影响,探讨温经汤抑制异位内膜生长的可能作用机制。方法 取54只雌性BALB/c小鼠,采用腹腔内注射子宫内膜碎片法建立子宫内膜异位症模型。将建模成功的50只小鼠随机分为5组,每组10只。温经汤低、中、高剂量组分别给予7.97 g/kg、15.93 g/kg、31.85 g/kg温经汤灌胃,西药组给予孕三烯酮0.5 mg/kg灌胃,模型组给予10 mL/kg生理盐水灌胃。另取5只健康雌性BALB/c小鼠作为空白组,给予10 mL/kg生理盐水灌胃。各组小鼠均连续灌胃21 d后处死,收集异位内膜病灶并称重,ELISA法检测血清和腹腔上清液中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)含量,RT-PCR法和Western blot法测定异位内膜病灶中TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB、转录激活蛋白1(AP-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的mRNA和蛋白表达情况。结果 与模型组比较...     

内异康复栓对子宫内膜异位症异位和在位内膜组织形态学的影响

目的：探讨内异康复栓直肠给药对子宫内膜异位症（EMT）大鼠异位和在位内膜组织形态学的不同影响。方法：建立大鼠EMT模型,随机设内异康复栓高、中剂量组、丹那唑组、丹莪妇康煎膏组、模型组、空白组,造模30天后连续给药30天,观察各组药物对EMT大鼠异位和在位内膜组织形态学的影响。结果：内异康复栓中剂量组和丹那唑组显著减少EMT大鼠异位内膜的腺体数目（P〈0.05）,内异康复栓高、中剂量组明显缩小EMT大鼠异位内膜被覆上皮面积,使被覆上皮厚度明显变薄,但对EMT大鼠在位内膜的腺体数目和面积无明显影响。结论：内异康复栓可促进异位病灶组织萎缩,而对在位内膜组织结构无明显影响。     

本事琥珀散对子宫内膜异位症大鼠“3A”模式细胞因子的影响

目的通过比较本事琥珀散治疗前后子宫内膜异位症(EMs)大鼠模型血清ICAM-1、MMP-9和VEGF含量的变化,探讨本事琥珀散对EMs大鼠异位病灶形成"3A"模式中的作用机制。方法采用自体内膜移植法建立EMs大鼠模型,随机分为空白对照组、伪手术组、模型组、本事琥珀散高剂量组、本事琥珀散中剂量组、本事琥珀散低剂量组和西药对照组,给药4周后ELISA法检测EMs大鼠血清ICAM-1、MMP-9和VEGF水平。结果与空白对照组比较,模型组MMP-9含量明显降低;本事琥珀散高剂量组能够明显升高血清ICAM-1含量,以上差异均有统计学意义(P0.05)。结论 EMs大鼠模型血清MMP-9的变化可能来自于手术造模。手术造模对血清ICAM-1和VEGF影响不大。本事琥珀散对EMs大鼠"3A"模式各环节的影响可能并不体现在外周血中,但依然存在量效关系。     

复方莪术散对子宫内膜异位症患者异位和在位内膜中VEGF表达的影响

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在内异症患者异位和在位子宫内膜中的表达变化及意义.研究复方莪术散对内异症患者异位和在位子宫内膜中VEGF表达的影响,从而探讨其临床治疗内异症的作用机制.方法:采用免疫组化SP法分别检测2009年7月至2011年1月我院妇科因卵巢型内异症行腹腔镜手术治疗的患者23例术前予复方莪术散治疗3个月的内异症患者(治疗组)、30例未经治疗的内异症患者(内异症组),了解异位和在位子宫内膜及30例子宫肌瘤患者(对照组)的子宫内膜中VEGF的表达水平.结果:内异症患者在位内膜中VEGF的表达水平(0.3263 ±0.0285)显著高于对照组子宫内膜(0.1730 ±0.0143)(P ＜0.05),异位内膜中VEGF的表达水平(0.2258 ±0.0093)明显低于在位内膜(P＜0.01),而高于对照组子宫内膜(P＜0.05),差异均有统计学意义.复方莪术散治疗组异位、在位内膜中VEGF的表达水平(0.1820±0.0056,0.2587 ±0.0091)明显降低,与内异症组比较,差异有统计学意义(均P＜0.01).结论:内异症患者异位和在位内膜中VEGF的表达明显增强,与内异症的发生、发展密切相关.复方莪术散可下调内异症患者异位、在位内膜中VEGF的表达水平,从而可能在抑制内膜组织新生血管形成方面发挥治疗作用.     

消异方对子宫内膜异位症大鼠异位内膜VEGF的影响

目的:探讨消异方对子宫内膜异位症大鼠异位内膜VEGF表达的影响。方法:60只SD大鼠造模成功后随机分为模型组、米非司酮组、散结镇痛胶囊组、消异方低、中、高剂量组。给药4W后,检测各组大鼠异位内膜组织中VEGF的表达。结果:模型组异位内膜中VEGF的表达水平明显高于米菲司酮组、散结镇痛胶囊组和中药消异方各剂量组(P<0.05)。结论:消异方能降低大鼠异位子宫内膜VEGF的含量,以达到治疗子宫内膜异位症的作用。     

莪术散对子宫内膜异位症模型大鼠异位内膜组织Cyclin A及P21表达的影响

目的:探讨子宫内膜异位症(内异症)大鼠在位和异位组织中细胞周期蛋白A(Cyclin A)及P21表达的差异,从细胞周期调控的角度探讨莪术散治疗子宫内膜异位症的相关机制,以及对其调节作用。方法:用自体移植法建立内异症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分成复方莪术散高、低剂量组,孕三烯酮对照组,模型对照组和空白对照组,共5组,以1 mL/100 g灌胃给药。采用免疫组化法测定给药后大鼠在位以及异位内膜组织中Cyclin A及P21的表达。结果:Cyclin A在子宫内膜异位症组中其阳性表达率较其在正常子宫内膜组织中增高,P21蛋白在子宫内膜异位症组中其阳性表达率较其在正常子宫内膜组织中明显降低,Cyclin A与P21蛋白在子宫内膜异位症组中的表达呈负相关;复方莪术散在一定剂量关系上能显著抑制异位组织的生长,缩小异位病灶体积,抑制Cyclin A的表达,提高P21蛋白的表达,与模型对照组比较有统计学差异(P0.05)。结论:莪术散可抑制Cyclin A的表达,提高P21蛋白的表达,从细胞周期调控的角度证实复方莪术散对子宫内膜异位症具有调节作用,这可能是其治疗子宫内膜异位症的机制之一。     

升带汤对子宫内膜异位症模型大鼠异位内膜的影响

目的:研究《傅青主女科》升带汤对子宫内膜异位症模型大鼠的异位内膜的病理影响。方法:自体移植法制备子宫内膜异位症大鼠模型,随机分为模型组、治疗组。模型组每日给予2mL生理盐水灌胃,中药组每日给予升带汤10mL/kg,连续给药20d。处死大鼠,剥取在位及异位子宫内膜组织,石蜡病理切片,HE染色观察。结果:模型组大鼠在位、异位内膜比较。当大鼠在位内膜处于增生晚期时,其异位内膜组织处于增生早期状态。治疗组大鼠在位、异位内膜比较。大鼠在位子宫内膜处于分泌期时。其异位内膜组织亦处于分泌期,间质部分蜕膜样变。结论:子宫内膜异位症模型大鼠异位与在位内膜组织存在不同步发育现象。升带汤有促使大鼠异位内膜组织蜕膜样变的作用。     

消瘤丸对子宫内膜异位症大鼠异位病灶的影响

目的:观察消瘤丸对子宫内膜异位症大鼠异位病灶的作用,研究其对异位子宫内膜雌激素受体(ER)的影响。方法:SD雌性大鼠100只,采用手术诱导法建立子宫内膜异位症大鼠模型,成模大鼠随机分成模型组、桂枝茯苓丸阳性对照组、消瘤丸低、中、高剂量组。各组大鼠灌胃给药8周,模型组大鼠给予生理盐水;治疗结束后,观察各组大鼠异位内膜的面积变化及对异位子宫内膜ER的影响。结果:消瘤丸低、中、高剂量组大鼠异位子宫内膜生长活动受抑制,异位子宫内膜面积较治疗前显著缩小(P<0.01);消瘤丸低、中、高剂量组治疗后异位子宫内膜面积无显著性差异(P>0.05);消瘤丸低、中、高剂量组对大鼠异位子宫内膜ER的影响无统计学差异(P>0.05),说明药物没有通过ER表达。结论:消瘤丸对子宫内膜异位症大鼠有显著的治疗作用,其对异位子宫内膜的抑制作用与异位内膜局部总的ER可能无直接关系。     

补肾助孕方对LPD模型大鼠子宫内膜NF-κB、NLRP3、COX-2表达水平的影响

目的 研究补肾助孕方对于由米非司酮诱导的LPD模型大鼠子宫内膜炎性因子NF-κB、NLRP3、COX-2表达水平的影响,探讨补肾助孕方治疗LPD的相关机制。方法 随机将60只雌性SD育龄期大鼠分为空白组、模型组、阳性药地屈孕酮组、补肾助孕方低、中、高剂量治疗组,每组10只进行相应造模给药。分别采用qPCR、Western Blot法检测各组大鼠子宫内膜NF-κB、NLRP3、COX-2的mRNA和蛋白表达水平。结果 与空白组相比,模型组NF-κB、NLRP3的蛋白及mRNA表达水平明显上升(P<0.01),COX-2蛋白及mRNA表达水平明显下降(P<0.01)。与模型组相比,NF-κB中药各剂量组的蛋白及mRNA表达均下调(P<0.05),但地屈孕酮组无统计学差异(P>0.05);NLRP3阳性药、补肾助孕方低、中、高剂量治疗组的mRNA均明显下降(P<0.05),但蛋白水平,仅中、高剂量中药组有统计学差异;补肾助孕方刺激了COX-2表达,其蛋白表达水平在各组间有显著上升(P<0.05),其中中剂量组效果最佳,mRNA水平仅中药高剂量组有统计学差异...     

内异方调控NF-КB p65改善大鼠子宫内膜异位症的机制研究

目的:探讨内异方改善大鼠子宫内膜异位症(Endometriosis,EM)的作用机制。方法:构建大鼠EM模型,随机分成假手术组、模型组、内异方24. 8 g/kg、49. 6 g/kg、99. 2 g/kg组、孕三烯酮0. 25 mg/kg组,灌胃21天后剖解观测内异灶,ELISA法检测腹腔冲洗液中TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6的水平,qP CR、Western-blot法检测NF-κB p65基因、蛋白表达和磷酸化,免疫组化法检测NF-κBp65入核情况。结果:EM大鼠给予内异方治疗后,明显抑制內异灶的生长,改善盆腔粘连;显著降低了腹腔冲洗液TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6的含量;明显抑制NF-κB p65的基因、蛋白表达和磷酸化;显著抑制NF-κB p65核表达。结论:內异方可能通过抑制NF-κB p65的表达和活化,进而抑制炎症反应,抑制异位内膜的生长和黏附而改善EM。     

内异康复栓对子宫内膜异位症大鼠异位和在位内膜细胞色素C和生存素表达的影响

目的 探讨内异康复栓直肠给药对子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)模型大鼠异位和在位内膜细胞色素C（cytochrome C,cytC）、生存素(Survivin)的不同影响。方法 将EMT大鼠随机分为内异康复栓高、低剂量组,丹那唑组,丹莪妇康煎膏组,模型组和空白组,采用免疫组化SP法检测cytC、Survivin的表达。结果 （1）内异康复栓高、低剂量组异位内膜cytC（IOD值）表达（分别为6.08±0.35、6.23±0.35）均显著增加,与模型组（5.07±0.70）及丹莪妇康煎膏组（5.98±1.02）比较,差异均有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）;内异康复栓高、低剂量组 Survivin（IOD值）表达（分别为5.73±0.93、5.62±0.93）显著降低,与模型组(6.01±1.16)比较,差异均有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）。（2）内异康复栓高、低剂量组能显著上调在位内膜下降的cytC水平,与模型组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;内异康复检高、低剂量组在位内膜Survivin的表达,与模型组和空白组比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 内异康复栓可能通过增加异位内膜cytC的表达并降低Survivin的表达,起到诱导凋亡的作用,而对在位内膜可上调cytC表达,对Survivin表达无明显影响。     

益胃汤对子宫内膜异位症模型大鼠异位内膜组织形态学的影响

目的:观察益胃汤(YWT)对子宫内膜异位症(EMs)模型大鼠异位内膜的影响。方法:采用大鼠自体子宫内膜移植建立子宫内膜异位症(内异症)大鼠模型。将造模成功大鼠随机分为模型对照组,反应停对照组,达那唑对照组,益胃汤高、中、低剂量组,连续给药4周后,测定异位内膜体积,并在光镜下观察YWT对异位内膜形态学变化的影响。结果:YWT治疗4周后,与模型对照组比较,YWT各剂量组异位内膜体积显著缩小(P<0.05),抑制率明显升高(P<0.05);光镜观察结果显示,益胃汤各剂量组与模型组相比均见异位内膜呈萎缩性改变,异位内膜腺体数目变少,腺腔变小。结论:YWT能明显抑制异位内膜生长,阻止新血管的形成,抑制炎症反应。     

消瘤方对子宫内膜异位症大鼠盆腔粘连的影响

目的:探讨消瘤方对子宫内膜异位症大鼠模型盆腔粘连的影响及机制。方法:采用自体移植构建盆腔子宫内膜异位症大鼠模型,分别使用不同剂量的消瘤方提取物[1.89、3.78 g/(kg·d)],米非司酮混悬液及0.9%氯化钠溶液连续灌胃4周后剖腹探查。采用美国生殖医学会粘连分级(AFS)、Haber评分法对盆腔粘连情况进行评估,酶联吸附(ELISA)法检测大鼠血清中白介素-6、白介素-15、白介素-18、粘连组织组织型纤溶酶原激活剂(tPA)活性,免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子1(ICAM1)表达水平、微血管密度计数(MVD)。结果:与空白对照组相比,米非司酮和消瘤方处理大鼠后的盆腔粘连评分明显降低,血清中IL-6、IL-15、VEGT、TNF-α、ICAM1等表达水平均明显降低,血清中IL-18、粘连组织tPA活性均升高(P<0.05),异位内膜组织VEGF、TNF-α、ICAM1蛋白表达水平、微血管密度计数均显著降低(P<0.05); 与低剂量消瘤方组[1.89 g/(kg·d)]相比,高剂量消瘤方组[3.78 g/(kg·d)]和米非司酮组,盆腔粘连评分高,异位病灶生长好,血清各细胞因子水平表达均降低,IL-18、异位内膜组织VEGF、TNF-α、ICAM1蛋白表达、tPA活性高(P<0.05); 高剂量消瘤方组和米非司酮组在病灶生长情况、盆腔粘连评分、血清各细胞因子水平及异位组织蛋白表达无统计学差异(P>0.05)。结论:消瘤方能明显减轻盆腔炎症环境,抑制内异症病灶生长、改善盆腔粘连。     

补肾调经汤内服对子宫内膜异位症体液免疫及异位子宫内膜的影响

目的:探讨补肾调经汤内服对子宫内膜异位症体液免疫及异位子宫内膜的影响。方法:选取我院子宫内膜异位症患者进行回顾性分析,随机分为治疗组和对照组各51例,对照组采用西药治疗,治疗组在对照组的基础上内服补肾调经汤,观察两组患者的体液免疫及异位子宫内膜的变化。结果:治疗组的血清内IgG、IgA与C3水平明显优于对照组,具有统计学意义(P0.05);治疗组的不良反应发生率(5.9%)明显少于对照组(25.5%),具有统计学意义(P0.05)。治疗组患者在接受联合治疗后,胸腺明显减少,子宫缩小,已基本接近正常值,且卵巢缩小幅度也比较明显,与对照组相比差异显著,P0.05。结论:采用内服补肾调经汤治疗子宫内膜异位症,患者的体液免疫及异位子宫内膜均得到明显改善。     

少腹逐瘀汤对子宫内膜异位症模型大鼠异位内膜HIF-1α表达的影响

目的观察少腹逐瘀汤对子宫内膜异位症模型大鼠异位病灶中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨少腹逐瘀汤治疗内异症的机制。方法 48只动情周期正常的SD雌性大鼠采用自体移植法建立EMT大鼠模型,造模成功的38只大鼠随机分为模型组及治疗组,治疗组给予少腹逐瘀汤灌胃,给药4周。测量治疗前后子宫内膜异位病灶体积,HE染色观察异位内膜组织形态,western blot法检测HIF-1α蛋白表达。结果治疗前模型组与治疗组异位病灶体积差异无统计学意义(P0.05);治疗后,模型组异位病灶体积较治疗前增大(P0.05),治疗组异位病灶体积较治疗前缩小(P0.01),治疗组异位病灶体积小于模型组(P0.01)。治疗组异位病灶中HIF-1α蛋白表达明显低于模型组(P0.05)。结论少腹逐瘀汤能够明显缩小内异症模型大鼠异位病灶体积,可能与减少了HIF-1α的蛋白表达有关。