男性不育患者精浆miR-135a-5p 和miR-135b-5p水平检测的价值*

摘要:目的探讨精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p表达特征及其在男性不育患者精浆中变化和价值。方法选取2019年1月至2021年12月于江苏省中医院检验科留存的血清、晨尿胸水、脑脊液和精浆标本各30例;进一步选取2010年至2019年江苏省中医院和南京大学医学院附属金陵医院冻存的非梗阻性无精子症患者精浆标本、弱精子症患者精浆标本及正常对照精浆标本各54例。实时荧光定量PCR( RT-qPCR)检测不同体液、不育患者精浆和正常对照精浆中miR-135a-5p 和miR-135b-5p表达。ROC曲线分析精浆miR-135a-5p、miR-135b-5p水平区分男性不育患者及对照的ROC曲线下面积(AUCROC);相关性分析精浆miR-135a-5p . miR-135b-5p水平与精液参数的相关性。结果5 种不同体液间miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=64.88 ,P<0.01和H=64.7,P<0.01),二者在血清和精浆中水平均最高,在尿液中水平均最低。无精子症组、弱精子症组及正常对照组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=32.14, P<0.01;H=21.37 ,P<0.01)。与正常对照组相比,无精子症组2种miRNA水平均显著降低( U= 687 ,P<0.01;U=843,P<0.01);弱精子症组与正常对照组差异无统计学意义(P均>0.05);无精子症组与弱精子症组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平具有显著差异(U=635,P<0.01;U= 779, P<0.01)。精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p区分无精子症与正常对照及弱精子症患者AUCROC 分别为0.764(95%CI:0.675~ 0.854) ,0.711( 95%CI:0.612~0.810)和0.782( 95%C1:0.695 ~0.869) ,0.733(95% CI:0.637-0.829)。相关性分析结果显示,精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平与精子浓度、精子活动率、前向运动精子百分率和非前向运动精子百分率均呈正相关(P均<0.01)。结论miR-135a-5p 和miR-135b-5p 为精浆高表达miRNA,在无精子症患者中显著降低,二者与男性不育发生关系密切。     

肾细胞癌患者血清miR-135b-5p表达变化的价值及功能

摘要:目的检测肾细胞癌(renalcellcarcinoma,RCC)患者血清微小核糖核酸(microRNA,miRNA)-135b-5p的表达水平变化，探究其临床应用价值及其参与RCC发生、发展的作用机制。方法采用 荧光定量逆转录PCR( qRT-PCR)检测2022年1月至 6月于东部战区总医院泌尿外科就诊且经病理学确诊的60例RCC患者及60例健康人对照血清miR-135b-5p的表达水平变化,评估其对于RCC患者的临床辅助筛查价值。体外培养RCC细胞系(ACHNCaki-1)和正常肾小管上皮细胞系(HK-2),qRT-PCR检测细胞及细胞分泌的细胞外囊泡( extracellular vesicles ,EVs)中miR-135b-5p 的表达水平;进一步应用生物信息学分析、EVs与细胞共培养、细胞功能等方法探究EVs miR-135b-5p 参与RCC的初步作用分子机制。结果RCC 患者血清miR-135b-5p水平[ 6.932(5.524, 9.964)]与健康人对照[5.534(4.373, 6.555)]比较显著升高(U= 1 042,P<0.01)。血清miR-135b-5p水平对于RCC筛查的ROC曲线下面积( AUCR0C)为0. 711( 95% CI:O. 619~ 0.802)。ACHN和Caki-1 细胞中miR-135b-5p水平较正常HK-2 细胞中的表达倍数显著明显升高(分别升高了7.821 倍和1.919倍。P值分别为0.000 3和0.000 1);同时,ACHN和Caki-1 EVs中miR-135b-5p 水平较HK-2 EVs中的表达倍数亦显著增高(分别升高了3.783 倍和2.627倍。P值分别为0.0001和0.0004)。生物信息学分析结合文献调研显示,miR-135b-5p可能通过调控潜在靶基因血管生成素样蛋白4( angiopoietin-like protein 4 ,ANGPTL4)的表达而参与血管生成。RCC EVs与人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)共培养结果显示,RCC细胞分泌的富含miR-135b-5p EVs在与HUVEC温育的不同时间点(4h 6h和8 h)均可明显促进内皮细胞成环,差异具有统计学意义(P值分别为0.011 2 ,0.005 7,0.001 7)。Western blot结果显示，mimics 组ANGPTL4蛋白的表达水平为( 0.616+0.003) ,较NC组( 1.00+0.05)显著降低,差异具有统计学意义(t=12.44,P=0.000 2)。进一步分析发现与NC组相比, HUVEC中miR-135b-5p过表达组在连续观察时间内(2h、4h、6h和8 h)的成环数明显增加(P值分别为0.000 1 ,0.0001,0.0032,0.0095)。结论RCC患者血清、细胞系及细胞分泌的EVsmiR-135b-5p表达水平均显著升高，血清miR-135b-5p水平测定对于RCC具有较高的临床辅助筛查价值,RCC细胞分泌EVsmiR-135b-5p可通过调控ANGPTL4的表达,参与血管生成。     

血清miR-125b-5p、miR-146a-5p表达水平与乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭患者预后的相关性研究

目的探讨血清微小核糖核酸miR-125b-5p、miR-146a-5p表达水平与乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者预后的关系。方法纳入青海省第四人民医院2016年7月至2019年7月收治的80例HBV-ACLF患者行前瞻性研究。收集患者临床资料,根据1年后的预后情况,分成生存组(59例)、死亡组(21例)。比较两组血清miR-125b-5p、miR-146a-5p表达水平及常规肝功能指标[总胆红素(TBil)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、清蛋白(ALB)]水平。采用Pearson相关分析HBV-ACLF患者血清miR-125b-5p、miR-146a-5p表达水平与肝功能指标的相关性。采用COX比例风险回归模型分析HBV-ACLF患者预后的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-125b-5p、miR-146a-5p对患者预后的评估价值。结果患者随访1年内的病死率为26.25%(21/80)。死亡组中性粒细胞绝对值(NE)、TBil、AST、ALT、miR-125b-5p表达水平明显高于生存组,而miR-146a-5p表达水平低于生存组(P0.05)。死亡组消化道出血、肝性脑病占比分别为42.86%、38.10%,明显高于生存组的10.17%、6.78%(P0.05)。Pearson相关分析显示,血清miR-125b-5p表达水平与TBil、AST、ALT呈正相关(P0.05),血清miR-146a-5p表达水平与TBil、AST、ALT呈负相关(P0.05)。血清miR-125b-5p、miR-146a-5p单独检测预测HBV-ACLF患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.733(95%CI 0.597~0.869)、0.741(95%CI 0.618~0.865),二者联合检测预测预后的AUC为0.845(95%CI 0.736~0.955)。COX比例风险回归模型分析显示,消化道出血、肝性脑病及血清miR-125b-5p、miR-146a-5p是HBV-ACLF患者预后的影响因素(P0.05)。结论 HBV-ACLF患者血清miR-125b-5p上调与miR-146a-5p下调可增加死亡风险,且二者与血清TBil、AST、ALT存在相关性,对HBV-ACLF预后有一定评估价值。     

miR-20a-5p/miR-20b-5p在胃癌细胞和组织中的表达及调控靶基因信号通路富集分析

目的观察miR-20a-5p/miR-20b-5p在胃癌细胞和胃癌组织中的表达,并用生物信息学方法分析其靶基因和富集的信号通路,探讨其生物学行为和功能。方法采用实时荧光定量PCR法检测miR-20a-5p/miR-20b-5p在不同分化程度(高、中、低)的胃癌细胞和正常胃黏膜细胞以及其在胃癌组织和癌旁组织中的表达水平,并分析其临床意义,采用mir WALK网站数据库的预测软件预测其靶基因,选择该网站10个软件中具备3个以上软件支持的靶基因,用DAVID 6.7在线富集其靶基因参与的信号通路。结果 miR-20a-5p/miR-20b-5p在不同分化程度(高、中、低)的胃癌细胞中表达上调(P均0.05),胃癌组织相对于癌旁组织亦明显上调表达(P0.05),miR-20b-5p表达上调与胃癌淋巴结侵袭转移以及浸润深度关系密切(P均0.05);生物信息学分析提示,miR-20a-5p/miR-20b-5p的靶基因富集存在于肿瘤相关的多个信号通路中。结论 miR-20a-5p/miR-20b-5p在胃癌细胞系及组织中呈高表达,并于与淋巴结侵袭转移以及浸润深度有关,可作为胃癌潜在的生物学标志物。     

探讨hsa-miR-199a-5p表达对缺血性脑卒中的预测作用

目的:探讨hsa-miR-199a-5p在缺血性脑卒中(IS)患者血清中的表达和意义。方法:收集118例IS患者及125例健康人群的血清标本。通过实时荧光定量PCR(q PCR)检测血清hsa-miR-199a-5p的表达,用ROC曲线分析hsa-miR-199a-5p表达应用于诊断IS的价值,并对hsa-miR-199a-5p表达与研究人群的临床特征进行相关性分析。结果:hsa-miR-199a-5p在IS患者中的表达显著高于健康人群(P0.05),且IS患者在疾病的急性期、亚急性期和恢复期时hsa-miR-199a-5p的表达表现出显著的降低趋势(P0.05)。hsa-miR-199a-5p的表达与IS患者血清CRP水平呈显著正相关(r=0.782,P0.05)。ROC预测结果显示,hsa-miR-199a-5p诊断IS的灵敏度为94.8%,特异度为96.2%,曲线下面积(AUC)为0.812(95%CI为0.613~0.919,P=0.003)。结论:hsa-miR-199a-5p或许可成为IS的生物标志物。     

HBV相关慢加急性肝衰竭患者血清miRNA表达谱及临床预测价值

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)与慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中微小RNA(miRNA)差异表达谱,寻找HBV-ACLF具有预测价值的miRNA标志物。方法采用miRNA芯片技术检测10例HBV-ACLF患者和5例CHB患者血清中miRNA的差异表达,筛选出差异明显的miRNA,应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)进一步评价其在HBV-ACLF中的预测价值。结果与CHB组相比,HBV-ACLF组中17种miRNA表达下调,两组之间差异有统计学意义(P0.05),9种miRNA表达上调,差异有统计学意义(P0.05)。HBV-ACLF组表达上调超过2倍的miRNA有hsa-miR-4281、hsa-miR-6126、hsa-miR-1275,表达下调超过2倍的miRNA有hsa-miR-15a-5p、hsa-miR-92b-3p、hsa-miR-25-3p、hsa-miR-92a-3p、hsa-miR-106b-5p、hsa-miR-140-3p、hsa-miR-16-5p、hsa-miR-451a、hsa-miR-486-5p。ROC曲线分析结果表明,hsa-miR-4281、hsa-miR-6126、hsa-miR-16-5p、hsa-miR-25-3p等4种miRNA在ROC曲线下面积超过0.800,其中hsa-miR-4281对HBVACLF预测的灵敏度及特异度最高。结论HBV-ACLF与CHB患者血清中miRNA谱存在表达差异,hsa-miR-4281在预测HBV-ACLF严重性方面有一定价值。     

子宫肌瘤患者血清和组织中 hsa-miR-15b-5p，hsa-miR-21-5p的水平与组织中 ER，PR蛋白表达的相关性研究

目的　检测子宫肌瘤患者血清和组织中 hsa-miR-15b-5p和 hsa-miR-21-5p水平,并分析其与组织中雌激素受体（estrogen receptor, ER）、孕激素受体（ progesterone receptor,PR）蛋白之间的相关性,进而探讨子宫肌瘤发生发展的作用机制。方法　选取 2019年 8月～ 2020年 12月于陆军军医大学士官学校附属医院妇科就诊的 60例子宫肌瘤患者作为研究对象,另取同期因子宫脱垂行切除术的 60例患者作为对照,通过免疫组化 SP法和 Westerblot法检测所有患者肌瘤组织和正常肌层组织中 ER和 PR蛋白的相对表达;术前采所有患者的空腹外周静脉血,通过 qRT-PCR法分别检测患者血清和组织中 hsa-miR-15b-5p和 hsa-miR-21-5p mRNA的相对表达水平,并分析组织中 hsa-miR-15b-5p和 hsa-miR-21-5p水平与 ER,PR蛋白表达的相关性。结果　免疫组化结果显示, ER蛋白在子宫肌瘤组和正常子宫肌层组的阳性表达率分别为 73.3%（44/60）和 38.3%（23/60）（χ2=14.903,P=0.002）,PR蛋白在子宫肌瘤组和正常子宫肌层组阳性表达率分别为 65.0%（39/60）和 31.7%（19/60）（χ2=13.348,P=0.005）,差异均有统计学意义。 Westernblot结果显示,子宫肌瘤组 ER水平（ 0.98±0.21）较正常子宫肌层组（ 0.62±0.15）显著升高（ t=22.147,P＜ 0.001）,子宫肌瘤组 PR水平（ 0.80±0.14）较正常子宫肌层组（ 0.38±0.08）亦显著升高（ t=38.265,P＜ 0.001）,差异均有统计学意义。 qRT-PCR结果表明,与正常子宫肌层组相比,hsa-miR-15b-5p（1.98±0.12 vs 1.02±0.11）和 hsa-miR-21-5p（2.21±0.15 vs 0.93±0.18）mRNA在子宫肌瘤患者血清中表达水平均显著增加（ t=46.080,63.944,均 P＜ 0.001）,在肌瘤组织中两者表达水平较正常肌层组织亦显著升高（ t=39.852,52.046,均 P＜ 0.001）,差异均有统计学意义。 Pearson法分析发现,组织中 hsa-miR-15b-5p和 hsa-miR-21-5p表达水平与 ER和 PR蛋白表达水平呈明显正相关（ r=0.744～ 0.902,均 P＜ 0.001）。结论　hsa-miR-15b-5p和 hsa-miR-21-5p在子宫肌瘤患者血清和组织中表达水平均显著升高,子宫肌瘤组织中 ER和 PR蛋白亦呈高表达,并且 hsa-miR-15b-5p和 hsa-miR-21-5p水平与 ER和 PR表达水平呈明显正相关,可能协同诱导子宫肌瘤发生发展。     

MiR-15a-5p在肾癌中的表达分析及临床意义研究

目的检测肾癌及癌旁配对组织、肾癌及正常肾细胞系中mi R-15a-5p的表达水平,比较配对组织及细胞系之间的表达水平,分析表达水平与患者临床特征之间的关系,探究mi R-15a-5p作为肾癌标记物应用于临床的可能性。方法提取肾癌及正常肾细胞系、36对肾癌与配对癌旁组织标本中的总RNA,经反转录、q PCR检测mi R-15a-5p的表达,使用统计软件分析组织间、细胞系之间mi R-15a-5p的表达差异,分析mi R-15a-5p表达水平与患者临床特征间的关系。通过转染mi R-15a-5p干扰敲低肾癌细胞中mi R-15a-5p表达水平,利用流式细胞术评估其对肾癌细胞的凋亡影响。利用SPSS 19.0进行配对t检验及Fisher确切概率检验。结果 mi R-15a-5p在肾癌组织中表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.05),癌组织中表达水平为癌旁组织的(9.95±0.92)倍。肾癌细胞系(786-O、ACHN)中mi R-15a-5p表达量分别是正常肾细胞系(HEK-293T)的(8.40±1.74)倍、(2.94±0.11)倍(P<0.05)。标本中共有26例(72.2%)肾癌标本mi R-15a-5p表达上调,癌组织中mi R-15a-5p表达水平与肾癌临床分期相关(P<0.05)。敲低mi R-15a-5p表达水平可诱导肾癌细胞凋亡,786-O细胞凋亡率为(14.01±0.81)%(敲低mi R-15a-5p)和(2.47±0.28)%(阴性对照)(P<0.05),ACHN细胞凋亡率为(20.30±0.47)%(敲低mi R-15a-5p)和(11.45±0.61)%(阴性对照)(P<0.05)。结论 mi R-15a-5p在肾癌组织及细胞系中表达明显上调,且和肾癌分期相关,mi R-15a-5p可调节肾癌细胞凋亡,提示其在肾癌的发生发展中起着一定的作用,有作为肾癌标记物应用于临床的可能。     

IL-32α通过调控miR-216b-5p/AKR1B10轴抑制食管癌KYSE450细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨IL-32α对食管癌KYSE450细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法 IL-32α诱导KYSE450细胞、IL-32α作用于转染miR-216b-5p mimics或si-AKR1B10的KYSE450细胞后,MTT检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,qRT-PCR检测miR-216b-5p和AKR1B10 m RNA水平,Western Blot法检测AKR1B10、CyclinD1、p21、MMP-2和MMP-9蛋白水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-216b-5p与AKR1B10靶向关系。结果与对照组比较,IL-32α组KYSE450细胞抑制率、p21蛋白和miR-216b-5p水平显著升高(P0.05),迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2和MMP-9的蛋白及AKR1B10的mRNA和蛋白水平均显著降低(P0.05),且呈剂量依赖性。mi R-216b-5p过表达或抑制AKR1B10均提高KYSE450细胞抑制率(P0.05),促进p21蛋白表达(P0.05),降低迁移和侵袭细胞数及CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达(P0.05)。miR-216b-5p靶向负调控AKR1B10表达。抑制miR-216b-5p表达逆转了IL-32α对KYSE450细胞增殖、迁移和侵袭的影响(P0.05)。结论 IL-32α可抑制食管癌细胞KYSE450增殖、迁移和侵袭,其机制与IL-32α上调miR-216b-5p表达进而靶向负调控AKR1B10表达有关。     

急性缺血性脑卒中患者血清miR-106b-5p的异常表达及意义

目的检测急性缺血性脑卒中(IS)患者血清miR-106b-5p表达水平,探讨其作为IS分子诊断指标的可行性。方法用miRNA表达谱芯片筛选4例急性IS及10例健康体检者(NC)血清中差异表达的miRNAs。用实时荧光定量PCR法检测53例急性IS患者及50例NC血清中miR-106b-5p的含量。通过分析受试者工作特征曲线(ROC)判断miR-106b-5p在急性IS诊断中的敏感性和特异性。结果 IS组患者血清miR-106b-5p含量(67.13±4.13)fmol/L高于NC组(40.48±2.62)fmol/L,差异有统计学意义(t=5.41,P0.01)。miR-106b-5p诊断急性IS的ROC曲线下面积为0.78(95%CI:0.69~0.87)。当cut off值为40 fmol/L时,miR-106b-5p诊断急性IS的敏感性为79.25%,特异性为64.71%。结论 miR-106b-5p在IS患者血清中表达水平升高,与临床症状结合可提高诊断的准确性。     

类风湿关节炎患者血清miR-125a-5p、miR-132的表达及意义

摘要:目的探究类风湿关节 炎(RA)患者血清miR-125a-5p. miR-132 的表达水平及临床应用价值。方法选取2021年1月至2022年1月湖北省十堰市太和医院收治的92例RA患者作为RA组,同期体检健康者80例为健康人对照组,采集各研究对象的空腹静脉血标本，实时荧光定量PCR( qRT-PCR)检测miR- 125a-5p和miR-132的表达水平;Pearson法分析miR- 125a-5p与miR-132的相关性以及二者与红细胞沉降率( ESR)、类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)和28个关节疾病活动度评分( DAS28)的相关性;ROC曲线评估miR-125a-5p、miR-132 对RA的临床筛查价值。结果与健康人 对照组相比,RA组ESR、RF和CRP的含量以及miR-125a-5p的表达水平均显著升高,而miR-132 的表达水平显著降低，差异有统计学意义(P均<0.05)。高活动组miR-125a-5p的表达水平和DAS28评分显著高于中活动组和低活动组,且中活动组显著高于低活动组(P均<0.05);高活动组miR-132的表达水平显著低于中活动组和低活动组,且中活动组显著低于低活动组(P均<0.05)。RA患者血清miR-125a-5p 的表达与DAS28 评分、ESR、RF CRP呈正相关(P<0.05),而miR-132 的表达与miR-125a-5p 、DAS28评分、ESR、RF .CRP呈负相关( P<0.05)。miR-125a-5p. miR-132 联合检测筛查RA发生的ROC曲线下面积( AUCROC )为0.986(95%CI:0.973~0.998),显著高于二者单独筛查的0.948( 95% CI:0.919~ 0.976)和0. 884( 95%CI:0.834~0.934),差异有统计学意义( Z= 3.638, P<0.001;Z=3.184,P=0.023)。结论RA 患者血清miR-125a-5p表达水平升高,miR-132表达水平降低,二者联合对RA具有一定的临床筛查价值。     

宫颈癌患者血清hsa-miR-200a-3p的表达及其意义

目的探讨宫颈癌患者血清hsa-miR-200a-3p的表达水平及其对宫颈癌的辅助诊断价值。方法收集55例宫颈癌患者、32例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者、39例子宫肌瘤患者及47例健康对照者血清样本,分别测定hsa-miR-200a-3p的表达水平及糖链抗原125(CA125)和人鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)水平。分析血清hsa-miR-200a-3p的表达水平与临床病理特征、CA125和SCCAg之间的关系。用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价3项指标单独及联合检测对宫颈癌的辅助诊断价值。结果宫颈癌患者血清hsa-miR-200a-3p的相对表达量均高于子宫肌瘤患者和健康对照者,差异有统计学意义(P0.001)。CIN患者血清hsa-miR-200a-3p的相对表达量均高于子宫肌瘤患者和健康对照者,差异有统计学意义(P0.05)。子宫肌瘤患者和健康对照者血清hsa-miR-200a-3p的相对表达量差异无统计学意义(P0.05)。宫颈癌患者血清hsa-miR-200a-3p的表达水平在年龄大小、是否绝经、肿瘤最大直径、FIGO分期间差异均无统计学意义(P0.05),宫颈癌患者血清hsa-miR-200a-3p相对表达量与CA125(r2=0.012,P=0.421)、SCCAg(r2=0.004,P=0.647)无相关性。ROC曲线分析血清has-miR-200a-3p检测对宫颈癌患者的辅助诊断价值,宫颈癌区分于子宫肌瘤时,ROC曲线下面积(AUC)为0.753;宫颈癌患者区分于健康对照者时,AUC为0.771。结论宫颈癌患者血清hsamiR-200a-3p相对表达量高于子宫肌瘤组和健康对照组,有可能成为宫颈癌辅助诊断的重要生物学指标。血清hsa-miR-200a-3p的表达水平或可用于CIN的辅助诊断。     

基于miR-106b-5p调控CCND1基因研究幽门螺杆菌促进食管癌细胞增殖的功能机制

目的 研究幽门螺杆菌(Hp)感染通过miR-106b-5p/细胞周期蛋白D1(CCND1)途径促进食管癌细胞增殖的作用机制。方法 收集手术切除的食管癌组织46份,检测Hp感染情况及miR-106b-5p、CCND1的表达水平。培养食管癌TE-1细胞株,分别给予不处理、Hp感染、转染阴性对照(NC)序列、转染miR-106b-5p模拟物、转染NC序列同时加入Hp菌液、转染miR-106b-5p模拟物同时加入Hp菌液处理,分别作为对照组、Hp组、miR-NC组、miR-106b-5p组、miR-NC+Hp组、miR-106b-5p+Hp组,检测细胞增殖情况、细胞周期及miR-106b-5p、CCND1的表达水平。结果 Hp阳性的食管癌组织中miR-106b-5p的表达水平低于Hp阴性的食管癌组织,CCND1的表达水平高于Hp阴性的食管癌组织,差异有统计学意义(P<0.05)。食管癌组织中miR-106b-5p与CCND1的表达水平呈负相关(r=-0.414,P=0.004);Hp组TE-1细胞的A₄₉₀水平、细胞周期S期及G2/M期比例、CCND1的表达水平高于...     

miR-181a-5p和miR-451a在胃癌诊断和预后评估中的临床价值

目的探讨miR-181a-5p和miR-451a在胃癌诊断和预后评估的临床价值。方法选取2014年1月至2016年12月在该院就诊的胃癌患者血清标本117例为胃癌组,选择同期在该院行胃镜检查诊断为息肉的患者血清标本75例和健康体检者血清标本45例分别设为胃息肉组和健康对照组。比较各组研究对象血清miR-181a-5p和miR-451a表达水平,观察胃癌患者血清miR-181a-5p和miR-451a表达水平与临床病理因素和随访2年胃癌患者预后的关系,以及其在诊断胃癌和预测胃癌患者2年内死亡的效能。结果胃癌组术前血清miR-181a-5p表达水平明显高于胃息肉组和健康对照组(P<0.01),而胃息肉组miR-181a-5p表达水平明显高于健康对照组(P<0.01),胃癌术后血清miR-181a-5p表达水平较术前明显降低(P<0.01);胃癌组术前血清miR-451a表达水平明显低于胃息肉组和健康对照组(P<0.01),而胃息肉组的血清miR-181a-5p表达水平明显高于健康对照组(P<0.01),胃癌组术后血清miR-451a表达水平较术前明显升高(P<0.01)。血清miR-181a-5p和miR-451a联合检测诊断胃癌的灵敏度为77.8%,特异度为97.3%,曲线下面积均明显高于miR-181a-5p和miR-451a单项检测(P<0.01),而miR-181a-5p与miR-451a的曲线下面积差异无统计学意义(P>0.05)。血清miR-181a-5p和miR-451a表达水平在不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移和浸润深度的胃癌患者中差异有统计学意义(P <0.001)。死亡组患者血清miR-181a-5p表达水平明显高于存活组(P <0.01),而血清miR-451a表达水平明显低于存活组(P<0.01)。血清miR-181a-5p和miR-451a联合检测在预测胃癌患者2年内死亡的灵敏度为100.0%,特异度78.6%,曲线下面积明显高于miR-181a-5p和miR-451a单项检测(P<0.05),而miR-181a-5p与miR-451a的曲线下面积差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合检测血清miR-181a-5p和miR-451a在胃癌诊断中具有重要临床价值,其表达水平与患者的预后具有重要关系,在预测2年内死亡具有较高的效能。     

宫颈癌癌组织中miR-365、miR-135a-5p及STAT3的表达水平及意义

目的 探讨宫颈癌癌组织中miR-365、miR-135a-5p及STAT3的表达水平及意义.方法 选取2016年6月-2018年7月在医院行宫颈癌手术切除的存档蜡块和癌旁正常组织(距病变部位>5cm处,且证实为无癌浸润)石蜡标本各90例作为研究对象.采用免疫组化法检测宫颈癌组织中STAT3的表达,实时定量荧光聚合酶链反...     

miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响及机制

目的探讨miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响以及潜在的作用机制。方法设置miR-con组、miR-219a-5p组、anti-miR-con组、anti-miR-219a-5p组、miR-219a-5p+pcDNA组、miR-219a-5p+pcDNA-SMC4组、miR-con+SMC4-WT组、miR-con+SMC4-MT组、miR-219a-5p+SMC4-WT组、miR-219a-5p+SMC4-MT组,转染均用脂质体法。qRT-PCR检测miR-219a-5p和SMC4 mRNA表达水平;Western Blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于人正常皮肤细胞HaCaT,皮肤鳞状细胞癌细胞HSC-2、Colo-16、SCL-1中SMC4 mRNA和蛋白表达水平显著升高,miR-219a-5p表达水平显著降低(P<0.05)。过表达miR-219a-5p可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡;促进Caspase-3蛋白表达,抑制Cyclin D1蛋的表达;抑制Wnt/β-catenin信号通路激活。miR-219a-5p靶向负调控SMC4的表达,转染SMC4野生型表达载体的HSC-2细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05);而转染SMC4突变型表达载体的HSC-2细胞荧光素酶活性差异不显著。且过表达miR-219a-5p,SMC4表达水平显著降低;抑制miR-219a-5p表达,SMC4表达水平显著升高。过表达SMC4能逆转miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞HSC-2的增殖抑制和凋亡促进的作用。结论miR-219a-5p可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与Wnt/β-catenin及SMC4信号通路有关,将为皮肤鳞状细胞癌的预防和治疗提供新靶点。     

miR-15b-5p通过靶向LATS2基因调控 前列腺癌细胞侵袭、迁移以及凋亡的分子机制

目的探讨miR-15b-5p靶向大肿瘤抑制分子(LATS2)基因对前列腺癌PC-3细胞侵袭、迁移及凋亡的影响及机制。方法将anti-miR-15b-5p及anti-miR-15b-5p+si-LATS2(同时抑制miR-15b-5p和LATS2表达)转染前列腺癌PC-3细胞,48 h后,通过qRT-PCR检测miR-15b-5p mRNA表达,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡率。双荧光素酶报告系统检测miR-15b-5p与LATS2的靶向关系。Western blotting检测LATS2、β-catenin、MMP-2和Bax蛋白表达。结果 PC-3细胞转染anti-miR-15b-5p后,miR-15b-5p mRNA表达明显降低,细胞侵袭和迁移能力明显降低,细胞凋亡率明显升高(P 0. 05)。miR-15b-5p与LATS2存在靶向关系,抑制LATS2表达后可明显减弱anti-miR-15b-5p对PC-3细胞侵袭、迁移、凋亡及β-catenin、MMP-2和Bax蛋白表达的影响(P 0. 05)。结论抑制miR-15b-5p可明显降低前列腺癌PC-3细胞的侵袭和迁移能力,并诱导细胞凋亡,其机制与靶向LATS2抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

血清miR671-3-p、miR135b-水平与老年乳腺癌患者化疗耐药性的相关性

目的 分析血清微小核糖核酸(miR)-671-3p、miR-135b水平与老年乳腺癌患者化疗耐药性的关系。方法 回顾性分析2019年1月至2020年2月在该院接受化疗且化疗结束后产生耐药性的52例老年乳腺癌患者作为耐药组,同期选取在该院接受化疗且化疗结束后未产生耐药性的52例老年乳腺癌患者作为敏感组,全部患者均接受6个周期新辅助化疗方案化疗,其患者资料完整,包括一般资料、实验室指标检测结果资料,重点分析化疗前血清miR-671-3p、miR-135b水平与老年乳腺癌患者化疗耐药性的关系。结果 耐药组血清miR-671-3p mRNA相对表达量低于敏感组,miR-135b mRNA相对表达量高于敏感组,差异有统计学意义(P<0.05);组间其他实验室指标比较差异无统计学意义(P>0.05);Spearman相关分析结果显示,老年乳腺癌患者血清miR-671-3p mRNA相对表达量与miR-135b mRNA相对表达量呈负相关(r<0,P<0.05);回归分析结果显示,血清miR-671-3p mRNA相对表达量高表达是老年乳腺癌患者化疗耐药性的保护因素(OR&l...     

前列腺癌组织中ABCC4、miR-125b-5p表达水平与患者术后预后的关系

目的 探究前列腺癌(PCa)组织中三磷酸腺苷结合盒转运体C4(ABCC4)、微小RNA-125b-5p(miR-125b-5p)表达水平与患者术后3年内生存的关系。方法 选取2017年11月至2020年2月在该院确诊的PCa患者60例,术中收集PCa组织(PCa组)和癌旁组织(对照组)。检测样本中ABCC4 mRNA、miR-125b-5p表达水平及ABCC4的表达情况;对患者术后随访3年。分析PCa组织中ABCC4 mRNA和miR-125b-5p表达水平的相关性,二者与临床病理特征及预后的关系,影响PCa患者预后的因素,二者对患者3年内生存的预测价值。结果 PCa组ABCC4 mRNA表达水平和阳性表达率高于对照组,miR-125b-5p表达水平低于对照组(P<0.05);PCa组织中ABCC4 mRNA与miR-125b-5p表达水平呈负相关(P<0.05);PCa组织ABCC4 mRNA、miR-125b-5p表达水平与肿瘤分期、血清前列腺特异性抗原、Gleason评分、肿瘤转移有关(P<0.05);ABCC4 mRNA高表达组、miR-125b-5p低表达组...     

精神分裂症患者血清miR-132-3p 和miR-34a-5p 表达水平与认知功能以及诊断的相关性研究

目的 探讨血清微小核糖核酸(micro RNA，miR）-132-3p，miR-34a-5p 表达与精神分裂症患者认知功能的关系，分析其诊断精神分裂症的价值。方法 选择2019 年2 月～ 2021 年10 月武汉钢铁(集团) 公司第二职工医院收治的208 例精神分裂症患者(精神分裂症组）和同期71 例健康体检者(对照组）。检测血清miR-132-3p 和miR-34a-5p表达，Pearson 相关性分析其与精神分裂症患者阳性和阴性症状量表(positive and negative symptom scale，PANSS)、精神分裂症认知功能成套测验(采用MATRICS consensus cognitive battery，MCCB）、Stroop 色词测验评分相关性。受试者工作特征(receiver operating characteristic，ROC）曲线分析miR-132-3p 和miR-34a-5p 诊断精神分裂症的价值。结果 精神分裂症组血清miR-132-3p（3.26±0.84），miR-34a-5p（5.02±1.39）表达均高于对照组(1.05±0.33，1.62±0.5)，差异有统计学意义（t=21.782，20.276，均P ＜ 0.05） ；精神分裂症组MCCB，Stroop 色词测验评分均低于对照组(t=6.651 ～ 16.778，均P ＜ 0.05）。精神分裂症患者血清miR-132-3p，miR-34a-5p 表达与PANSS 总分呈正相关(r=0.502，0.477，均P ＜ 0.05），与连线测验、持续操作测验、语言记忆、Stroop 单词测验评分呈负相关(rmiR-132-3p=-0.501 ～ -0.368，rmiR-34a-5p=-0.483 ～ -0.317，均P ＜ 0.05）。miR-132-3p，miR-34a-5p 诊断精神分裂症的最佳截断值为2.16，3.35，曲线下面积为0.694，0.712，联合miR-132-3p 和miR-34a-5p 诊断精神分裂症的曲线下面积为0.895，大于单独miR-132-3p，miR-34a-5p 诊断(Z=5.747，5.665，均P ＜ 0.05）。结论 miR-132-3p 和miR-34a-5p 表达上调，与精神分裂症症状加重以及认知功能受损有关，miR-132-3p 和miR-34a-5p 联合检测在精神分裂症诊断中具有较高价值。