重组NADPH-细胞色素P450还原酶在大肠杆菌中的表达和纯化

目的 在大肠杆菌中表达重组NADPH-细胞色素P450还原酶(CPR)并纯化获得有活性的CPR蛋白。方法 将已构建的NADPH-细胞色素P450还原酶重组质粒pMWl72a-CPR采用温和转化法转入大肠杆菌BL-21中,依次使用超速离心、DE52纤维素阴离子交换层析和2’-5’ADP亲和层析的方法纯化CPR,并检测酶的活性。结果 获得了纯度达99％以上的可溶性CPR蛋白,纯化倍数5、20倍,检测酶的比活性为每分钟1045．49nmol／mg。结论获得了纯度高、有活性的CPR蛋白,可作为工具酶用于某些相关酶的研究,同时也为CPR的工业纯化提供了可行的参考路线。     

中华大蟾蜍细胞色素P450还原酶基因克隆、表达与功能鉴定

目的：从中华大蟾蜍（Bufo gargarizans Cantor）肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因（BgCPR,GenBank登录号：OQ572435）进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法：基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCPR基因两端特异性引物,以蟾蜍肝脏组织总RNA逆转录成的cDNA为模板进行PCR扩增。利用生物信息学分析BgCPR蛋白理化性质、空间结构并构建系统进化树;基于CRISPR/Cas9基因编辑系统将蟾蜍BgCPR基因表达框经同源重组整合进入酿酒酵母基因组,利用聚乙二醇法制备转化子微粒体,验证其对细胞色素C的还原功能。结果：克隆得到全长2 043 bp的BgCPR基因cDNA,编码680个氨基酸,相对分子质量77 852 Da。结构预测显示,BgCPR蛋白为非分泌蛋白;有一段跨膜螺旋区,位于蛋白的第24～46位氨基酸之间;亚细胞定位预测显示该蛋白定位于内质网上。采用体外酶活实验证明其具有传递电子功能。结论：本研究克隆得到中华大蟾蜍BgCPR基因,并构建了表达具有生物活性的BgCPR的酿酒酵母工程细胞,为进一步...     

探针药物在人类细胞色素P450研究中的作用

细胞色素氧化酶Ｐ４５０在药物代谢、前致癌物激活的过程中起重要的作用,且在不同个体之间活性存在差异。本语文针对探针药物在各类细胞色素Ｐ４５０酶活性测定及研究中的作用,进行较全面客观的综述。     

细胞色素P450与体温调节

细胞色素P450（cytochrome,CYP450)是一类以还原态与CO结合后在450nm处具有最高吸收峰的含血红素的单链蛋白质。它于1958年被发现以来，就引起了人们的广泛重视。近年来每年发表的有关CYP450的研究论文已超过2000篇。花生四烯酸一旦从膜磷脂中释放出来可被三个主要的酶系统氧化：环氧化酶、脂氧化酶和依赖于CYP450的单氧化酶。环氧化酶化酶途径导致发热，这一点已被大量的研究结果所证实。一些学者报导脂氧化酶途径不参与体温调节，依赖于CYP450的单氧化酶途径有参与解热和控制发热上限的作用。     

细胞色素P450酶系统在中医药研究中的应用

细胞色素P450发现于50年代,30多年来取得很大进展。在药物代谢、毒理学、肿瘤生化等的研究中,都涉及到细胞色素P450及其同功酶的作用。     

细胞色素P450的研究进展

细胞中,细胞色素P450主要分布在内质网和线粒体内膜上,作为一种末端加氧酶,参与了生物体内的甾醇类激素合成等过程。近年来,对细胞色素P450的结构、功能特别是对其在药物代谢中的作用的研究有了较大的进展。最新研究表明细胞色素P450还是药物代谢过程中的关键酶,而且对细胞因子和体温调节都有重要影响。     

植物成分与细胞色素P450相互作用的研究进展

细胞色素P450（CYP450）是体内参与药物代谢的重要酶系,其活性在受到诱导或抑制后将干扰药物的作用。植物成分普遍存在于食物与药物中,与CYP450的相互作用将产生广泛影响。总结近年来植物成分与细胞色素P450的7个亚型CYP1A2、CYP2A6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4相互作用的研究结果,为临床上合理用药提供参考。     

植物成分与细胞色素P450相互作用的研究进展

细胞色素P450（CYP450）是体内参与药物代谢的重要酶系,其活性在受到诱导或抑制后将干扰药物的作用。植物成分普遍存在于食物与药物中,与CYP450的相互作用将产生广泛影响。总结近年来植物成分与细胞色素P450的7个亚型CYP1A2、CYP2A6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4相互作用的研究结果,为临床上合理用药提供参考。     

中药对细胞色素P450影响的研究进展

通过对国内外有关中药影响CYP450的文献进行检索和总结,综述了当前该研究领域的研究进展;提出研究中药,特别是中药复方对CYP450的影响是中药现代化的重要内容之一,对指导临床合理用药具有非常重要的意义。     

小肠CYP450酶在药物代谢中的作用

小肠是口服药物的主要吸收器官,同时也是进行药物代谢的重要场所。小肠黏膜上皮细胞含有大量Ⅰ、Ⅱ药物代谢酶,其中以CYP450酶最为重要,参与众多药物的生物转化。小肠CYP450主要有CYP1A1、CYP2C9、CYP2C19、CYP2J2、CYP2D6、CYP3A 6种同工酶,其中CYP3A和CYP2C在小肠中表达最高,分别约占CYP450总含量80%和16%。与肝脏相比,小肠CYP450酶活性及其表达更易受到外源性化合物影响。本文重点讨论小肠CYP450s活性与表达及其在药物代谢中的作用以及由CYP450s的诱导或抑制引起的药物相互作用。     

细胞色素P450 2E1在酒精性肝损伤中的作用及研究进展

Cytochrome P450 2E1 (CYP2E1) may be a key pathway in generating oxidative stress,nitrosative stress,lipid peroxidation,and causing alcoholic liver injury by various hepatotoxins.It was found that CYP2E1 induction and liver injury occur with co-administration of ethanol and hepatotoxins.CYP2E1 inducers including alcohol and pyrazole could potentiate the hepatotoxicity caused by FAS antibody or LPS,suggesting that overexpression of CYP2E1 might contribute to the synergy and susceptibility of the liver to FAS/LPS-induced liver injury.Thus,CYP2E1 and its polymorphism have important role in liver injury caused by ethanol and are also associated with nonalcoholic steatohepatitis (NASH).Ethanol ingestion and toxin administration drive more CYP2E1 induction contributing to the more severe liver injury.Potential mechanisms involved in the potentiated toxicity include elevated oxidative stress,nitrosative stress,lipid peroxidation,apoptosis,hypoxia,TNF-α production,decreased level of antioxidants and activation of MAP kinase.Clarification of CYP2E1-dependent liver injury and interactions with other hepatotoxins will lead to a better understanding to the pathogenesis of hepatotoxicity and may help to give strategies which protect the liver from alcoholic liver injury.     

植物化学物对细胞色素P450的影响

近年来植物化学物已被广泛用作保健食品和临床药物，它们可抑制或诱导细胞色素P450，从而可能影响治疗药物的药理作用和毒副反应。因此，全面认识植物化学物对细胞色素P450的作用及其调节机制，有助于临床合理用药和减少药物的不良反应。     

细胞色素氧化酶CYP1A2的研究进展

CYP1A2是一种重要的细胞色素P450酶,可代谢多种临床常用药物,并参与活化许多前毒物和前致癌物.CYP1A2酶活性可受到基因多态性、药物、饮食等因素的影响,其中基因多态性是导致CYP1A2活性及可诱导性产生个体差异的基础,对CYP1A2基因多态性的鉴定分型在个体化用药中具有重要的指导意义.     

P450 3A亚型的测定

细胞色素P450 3A是人体代谢许多内源性化合物、外源性底物及其前致癌物的一类最重要的肝脏药物氧化代谢酶.一个理想的表型测定方法应该是安全、快速、对同一个体的重复性好、预测药物的处置准确.由于表型测定更能反映患者个体间的差异,影响因素较多,临床的重要性更大,通过CYP3A表型的测定,以推动个体化给药在我国的发展.     

P450 3A亚型的测定

细胞色素P4503A是人体代谢许多内源性化合物、外源性底物及其前致癌物的一类最重要的肝脏药物氧化代谢酶。一个理想的表型测定方法应该是安全、快速、对同一个体的重复性好、预测药物的处置准确。由于表型测定更能反映患者个体间的差异，影响因素较多，临床的重要性更大，通过CYP3A表型的测定，以推动个体化给药在我国的发展。     

脑肿瘤组织细胞色素P450的研究进展

细胞色素P450（即CYP450）在各种内外源性物质包括致癌物及药物代谢中发挥重要作用。既往研究表明脑肿瘤同其他正常组织及其他类型肿瘤一样表达多种CYP450。本综述概括了脑肿瘤内CYP450的分布、多型性、单核苷酸多态性及在脑肿瘤的发生发展、化学治疗中CYP450的重要作用。     

昆虫细胞色素P450的诱导和抗药性

可诱导性是细胞色素P450酶系的重要特征,经过诱导,昆虫体内P450解毒酶含量增加解毒作用增强,面细胞色素P450参与的杀虫剂抗药性均表现为P450酶活性的增高或酶量的增加,解毒作用增强,二的最大不同在于持续的时间上,了解P450酶系的诱导机制及其与抗药性的关系,对认识P450参与的抗药性的发生发展机制具有重要意义。