改良Hodge试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌

摘要：目的：用改良Hodge试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,初步推测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的流行情况。 方法：筛选出2009年4月~2010年4月对碳青霉烯类抗生素耐药以及敏感性下降或者碳青霉烯类抗生素敏感而一种以上三代头孢菌素耐药的肠杆菌科细菌23株,用改良Hodge试验检测其碳青霉烯酶。 结果：23株菌中21株（91.3%）呈多重耐药,其中5株菌改良Hodge试验阳性,分别为肺炎克雷伯菌1株、弗劳地枸橼酸杆菌1株、大肠埃希菌1株和霍氏肠杆菌2株。 结论：改良Hodge试验阳性提示所测菌株中有产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌的存在,因此要加强对此类细菌的院内感染管理监测。     

应用改良Hodge试验检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的研究

目的应用改良Hodge试验(MHT)检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的应用价值。方法应用MHT检测对碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的24株肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的情况。同时利用聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶的基因,包括KPC、NDM、IMP、SIM和VIM,PCR阳性的产物测序结果与Gen Bank数据库进行比对。综合分析MHT和PCR检测碳青霉烯酶的效率。结果对碳青霉烯酶抗菌药物敏感性降低的24株肠杆菌科细菌应用MHT检测碳青霉烯酶的阳性菌株共为13株,而PCR检测出碳青霉烯酶基因的只有5株。且PCR产物测序结果经比对后证实1株为KPC-2和4株为IMP-4。对比分析MHT和PCR的检测结果可知有4株肠杆菌科细菌的MHT和PCR同时检测出碳青霉烯酶;有9株肠杆菌科细菌的MHT为阳性,但PCR没检测出碳青霉烯酶的基因;有1株肠杆菌科细菌MHT为阴性,但PCR检测出碳青霉烯酶的基因。结论 MHT作为筛查碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的准确性值得继续探讨。     

改良Hodge试验检测肠杆菌科IMP型碳青霉烯酶的性能评价

目的探讨改良Hodge试验（modified Hodge test,MHT）在检测肠杆菌科细菌IMP型碳青霉烯酶中的应用价值。方法以VITEK2Compact全自动细菌鉴定及药敏系统进行细菌鉴定和药敏试验,筛选2010-2012年非重复临床分离的碳青霉烯类药物敏感性降低的肠杆菌科细菌,以MHT进行产碳青霉烯酶表型确证试验,PCR检测碳青霉烯酶blaKPC、blaIMP;6如VIM、blaoXA-48及blandm-1基因型,阳性结果进行测序并Blast比对确定基因型。以基因测序结果为金标准,分析统计MHT检测肠杆菌科碳青霉烯酶的各项性能指标。结果本实验共收集62株碳青霉烯类药物敏感性降低的肠杆菌科细菌,包括肺炎克雷伯菌42株,阴沟肠杆菌12株,大肠埃希菌5株,产酸克雷伯菌3株;MHT检测阳性51株,占总株数的82．26％,肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、产酸克雷伯菌分别占各自菌种的比例为83．33％,75．0％,80．0％,100．0％;经PCR扩增并测序证实27株为产IMP-4型菌株,20株为产IMP-8型菌株,其他15株为碳青霉烯酶阴性菌株;MHT检测肠杆菌科细菌产IMP型碳青霉烯酶的灵敏度为97．87％％,特异性为66．67％,阳性预测值为90．2％,阴性预测值为90．91％,检验效能为90．32％。结论MHT检测肠杆菌科细菌产IMP型碳青霉烯酶具有良好的灵敏度,但特异性偏低,建议进一步使用分子生物学技术检测碳青霉烯酶肠杆菌科细菌基因型。     

加硼酸或氯唑西林的改良Hodge试验检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的研究

目的 探讨加硼酸或氯唑西林的改良Hodge试验在碳青霉烯酶类药物敏感性降低的细菌中检测碳青霉烯酶的临床应用价值.方法 收集2009年～2010年南京军区总医院对碳青霉烯酶类药物敏感性降低(亚胺培南、美罗培南或厄他培南的MIC≥2 μg/ml)的肠杆菌科细菌65株;采用琼脂倍比稀释法测定其对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的MIC;通过改良Hodge试验和加硼酸或氯唑西林的改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;采用PCR检测多种β-内酰胺酶基因,并对PCR阳性产物测序鉴定.结果 65株临床分离菌中,53株菌对亚胺培南不敏感(MIC＞4 μg/ml),51株菌对美罗培南不敏感(MIC＞4 μg/ml),58株菌对厄他培南不敏感(MIC＞2 μg/ml).65株菌中38株改良Hodge试验阳性,包括7株弱阳性和31强阳性;33株加硼酸或氯唑西林的改良Hodge试验阳性,包括改良Hodge试验弱阳性2株和强阳性31株.经过对菌株进行β-内酰胺酶基因PCR和测序,发现加硼酸或氯唑西林的改良Hodge试验阳性菌株均携带blaKPC-2;32株阴性菌株均未携带碳青霉烯酶酶基因,但其中5株改良Hodge试验弱阳性菌株携带blampC/blaESBL.结论 加硼酸或氯唑西林的改良Hodge试验可快速、有效地区分改良Hodge试验的真、假阳性,是检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的简便可靠方法,适用于临床微生物实验室.     

低产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的筛选及耐药基因检测

目的:了解临床分离碳青霉烯类表型敏感的肠杆菌科细菌碳青霉烯酶耐药基因携带情况。方法:VITEK-2系统进行药物的最低抑菌浓度(MIC)检测;改良Hodge试验(MHT)筛查低产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌;EDTA双纸片增效法检测金属β-内酰胺酶(MBL);PCR法检测相关耐药基因。结果:115株实验菌有12株MHT阳性;12株阳性菌中,3株EDTA双纸片增效试验阴性,9株阳性,这9株菌除阿米卡星、多粘菌素B敏感外,其他抗菌药物均呈耐药,含I类整合子,且检出IMP-4(blaIMP-4)和IMP-1(blaIMP-1)型的MBL基因,未检出KPC型碳青霉烯酶基因及其他MBL基因。结论:厄他培南对肠杆科细菌产碳青霉烯酶的筛选比亚胺培南、美洛培南敏感;经MHT筛选阳性的,潜在产碳青霉烯酶的肠杆科细菌,应进一步用基因检测法确认。     

用改良Hodge试验筛查低产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌

目的 筛查临床分离的对碳青霉烯类表型敏感但携带碳青霉烯酶耐药基因的肠杆菌科细菌,分析改良Hodge试验(MHT)的筛查效果。 方法 用MHT筛查低产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌;M-H琼脂稀释法和纸片扩散法（K-B）检测对第三代头孢菌素和碳青霉烯类药物的敏感度;EDTA 双纸片协同试验检测金属碳青霉烯酶;PCR检测细菌相关耐药基因。 结果 203株表型第三代头孢菌素耐药的碳青霉烯类敏感肠杆菌科细菌中,24株MHT阳性,EDTA双纸片协同试验均阴性;M-H琼脂稀释法结果对头孢他啶（CAZ）2株敏感,2株中介,其余均耐药;对厄他培南（ETP）、亚胺培南（IPM）和美洛培南（MEM）均敏感;碳青霉烯酶、β内酰胺酶基因特异性PCR扩增,4株扩增出KPC基因,2株扩增出CTX-M基因,13株扩增出TEM基因。 结论 经MHT筛检出临床分离株中存在潜在的产KPC型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌。阳性结果需用基因检测的方法进一步确认。     

肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的检测

目的调查本院肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的情况。方法收集2010年1～5月临床分离的肠杆菌科细菌,采用K-B纸片法进行药敏试验,以三代头孢菌素、亚胺培南、美罗培南为检测药物,筛选出可能产碳青霉烯酶的菌株120株,采用改良的Hodge试验进行确证。结果在120株耐一种或多种三代头孢菌素,提示可能产生碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌中,通过表型确证试验确证为阳性的细菌有4株,肺炎克雷伯菌2株,大肠埃希菌1株,弗劳地枸橼酸杆菌1株。结论表型确证试验阳性的细菌中,如需准确辨别亚型,最好用分子生物学方法检测基因序列。     

mCIM与eCIM在产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌表型筛查中的价值

目的 分析改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)与乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验(eCIM)对产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌表型筛查的效能及应用价值.方法 收集碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)117株(实验组)、碳青霉烯类敏感肠杆菌科细菌50株(对照组).分别采用改良Hodge试验(MHT)、mCIM和eCIM进行表型筛查,采用...     

rCIM与mCIM对产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的检测性能比较

目的 比较快速碳青霉烯灭活试验(rapid carbapenem inactivation method,rCIM)与改良碳青霉烯灭活试验(modified carbapenem inactivation method,mCIM)对产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌(carbapenemase-producing Enter-o...     

肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的研究进展

<正>碳青霉烯类抗菌药物是抗菌谱广、抗菌活性强、杀菌作用快的β-内酰胺类药物,其良好的细胞通透性、高度的酶稳定性及较低的毒性等特点已成为目前临床治疗严重细菌感染最主要的抗菌药物之一,但是随着碳青霉烯类抗菌药物耐药的肠杆菌科细菌的出现及不断的增多,该类药物的临床应用受到了严峻的挑战。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要机制是产碳青霉烯酶。因此,快速、准确地检测产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌,对于预防和控制产酶菌株的传播具有重要意     

改良Hodge试验检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的性能评估

目的 评估改良Hodge试验在碳青霉烯类药物敏感性降低的肠杆菌科细菌中检测碳青霉烯酶的效能.方法 收集2004-2008年我国16家教学医院的49株碳青霉烯类药物敏感性降低(亚胺培南、美罗培由或厄他培南的MIC≥2μg/ml)的肠杆菌科细菌;采用对倍琼脂稀释法测定其对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的MIC;通过改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;利用加苯硼酸或苯唑西林的改良Hodge试验区分碳青霉烯酶或AmpCs/ESBLs导致的阳性结果 ;采用PCR检测包括NDM-1型碳青霉烯酶基因在内的多种β内酰胺酶基因,并对PCR阳性产物测序鉴定.结果 49株菌中,36株菌对亚胺培南不敏感(MIC>4μg/ml),31株菌对美罗培由不敏感(MIC>4μg/ml),47株菌对厄他培南不敏感(MIC>2μg/ml).49株临床分离菌中23株菌改良Hodge试验刚性,包括9株弱阳性和14株强阳性.经过对菌株进行β内酰胺酶基因PCR和测序,发现9株Hodge弱阳性菌株中2株携带blaKPC-2,7株不携带碳青霉烯酶基因,但携带blaampC/blaESBL;14株强阳性菌株中4株携带blaKPC-2,8株携带blaIMP-4,2株携带blaIMP-8;26株改良Hodge试验阴性菌株均未携带碳青霉烯酶基因.所有49株菌均未检测到blaNDM-1.以碳青霉烯酶基因检测为标准,则改良Hodge试验对检测碳青霉烯类药物敏感性降低的肠杆菌科菌中碳青霉烯酶的敏感度为100%,特异度为79%,阳性预测值为70%,阴性预测值为100%,准确性为86%.结论 改良Hodge试验具有很好的敏感性,但存在一些假阳性结果 .利用苯硼酸和苯唑西林可有效区分改良Hodge试验的假阳性和真阳性.     

An evaluation of multiple phenotypic screening methods for Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC)-producing Enterobacteriaceae

Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC)-producing Enterobacteriaceae may display MICs to carbapenems within susceptible or intermediate ranges, prompting confirmatory testing. Four phenotypic methods to detect KPC producers were evaluated against a collection of clinical Enterobacteriaceae isolates. Meropenem–phenylboronic acid double disk synergy testing demonstrated the best performance with 100% sensitivity and specificity.     

Prevalence and molecular characterization of Enterobacteriaceae producing NDM-1 carbapenemase at a military hospital in Pakistan and evaluation of two chromogenic media

The aim of this study was to assess the frequency and genotypic diversity of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae (CPE) in stool samples from patients attending a military hospital in Pakistan. Further aims included the identification of factors that might predispose to faecal carriage and evaluation of 2 chromogenic culture media: Brilliance CRE and chromID CARBA. Of 175 patients, 32 (18.3%) had faecal carriage of CPE and all produced NDM-1 carbapenemase. All of these 32 patients were detected using chromID CARBA compared with 20 patients (62.5%) detected using Brilliance CRE (P = 0.0015). Duration of hospitalization and treatment with co-amoxyclav were statistically associated with a higher likelihood of carriage of CPE (P ≤ 0.05). The majority of NDM-1–producing Enterobacteriaceae co-produced CTX-M-1 group extended spectrum β-lactamase, and one third produced armA-type methylase. NDM-1 carbapenemase was most commonly found amongst commensal types of Escherichia coli, especially phylogenetic group B1.     

河南地区少见CRE耐药性分析及碳青霉烯酶初筛实验的临床应用

目的 了解河南省直第三人民医院少见碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（CRE）检出情况及耐药特点,探讨新的CRE酶型初筛实验的临床应用,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法 收集2019年分离自临床样本的非重复少见CRE,分析其检出情况及体外药物敏感性试验结果。从中随机选择22株,采用乙二胺四乙酸（EDTA）联合3-氨基苯硼酸（APBA）碳青霉烯酶抑制实验和胶体金免疫层析法检测其碳青霉烯酶酶型。结果 共检出1 111株CRE,其中阴沟肠杆菌49株（15.4%）,产酸克雷伯菌14株（19.2%）、枸橼酸杆菌12株（13.8%）。CRE对亚胺培南的耐药率均为100%。肠杆菌属、产酸克雷伯菌、枸橼酸杆菌属对替加环素、多黏菌素B均敏感,对多黏菌素B及替加环素天然耐药的变形杆菌属和普罗威登斯菌属对氨曲南的耐药率分别为5.3%和14.3%。随机选择的22株CRE中检出NDM型金属酶13株、KPC型丝氨酸酶3株、OXA型丝氨酸酶1株、KPC+IMP+NDM型1株、KPC+NDM型1株。结论 河南地区CRE耐药形势严峻,应及时监测,并根据药物敏感性试验结果合理用药。少见CRE产酶类型多样,应合理优化碳青霉烯酶...     

胶体金免疫层析法快速检测CRE碳青霉烯酶效果评价

目的 评估胶体金免疫层析法(GICA)快速检测耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)碳青霉烯酶类别的临床应用价值.方法 收集CRE非重复临床分离株73株,采用聚合酶链反应(PCR)鉴定碳青霉烯酶基因型,并采用GICA快速检测CRE的碳青霉烯酶.以PCR为参考方法,评估GICA快速检测CRE碳青霉烯酶的准确性.结果 PCR检...     

3-氨基苯硼酸联合乙二胺四乙酸碳青霉烯酶抑制增强试验检测肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶的研究

目的 了解3-氨基苯硼酸(PBA)联合乙二胺四乙酸(EDTA)碳青霉烯酶抑制剂增强试验(PBA-EDTA法)用于检测肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶的检测结果.方法 使用PBA-EDTA法测定275株经金标准PCR及DNA测序已明确为产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶结果的符合率,并与CLSI推荐的mCIM联合eCIM改良碳...