连云港市473例慢性乙肝患者乙型肝炎病毒基因型及耐药基因研究

目的 探讨连云港市慢性乙肝（CHB）患者乙型肝炎病毒（HBV）基因型及耐药基因特点。方法 选择2019年5月至2021年7月连云港市某医院诊断为CHB的患者作为研究对象,采用PCR和反向杂交技术进行HBV的基因序列分型,同时检测HBV的耐药突变位点,并分析不同基因型的耐药突变发生率。结果 共纳入473例HBV患者进行研究,HBV基因型构成比前3位为B型、C型及D型,分别占35.52%、30.02%、14.16%。不同性别HBV基因型比较差异无统计学意义（P>0.05）。检出耐药基因突变100例,突变率为21.14%;共检测出14种耐药突变基因,其中rt180M+rt204V的突变率最高,其次为rt204I、rt204V。100例耐药基因突变中由高到低分别为C型、B型、D型,突变率分别为30.3%、19.0%、11.9%,不同性别间差异有统计学意义（P<0.01）。结论 连云港市HBV基因型以B型及C型为主,其中C型基因的突变率最高,rt180M+rt204V、rt204I、rt204V是本地区常见耐药突变位点,C型基因更容易发生rt204I、rt180M突变。     

杭州地区乙型肝炎病毒基因型和P区耐药突变模式的相关性研究

目的研究杭州地区乙型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布、P区耐药突变基因状况及两者的相关性。方法利用荧光定量PCR和DNA测序技术,对慢性乙型肝炎患者的血清标本进行HBV基因型及P区耐药突变位点检测。结果 217例慢性乙型肝炎患者中检出HBV基因B型59例,C型127例,D型2例,B+C混合型6例,B+D混合型1例。对拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦和替比夫定耐药数分别是39例、18例、25例和71例。突变基因以M204I、L180M和M204V最多。YMDD突变类型在B、C基因型中的分布差异无统计学意义(P0.05),而YMDD中的M204I、M204V发生在B、C基因型中的差异有统计学意义(P0.05)。结论杭州地区HBV基因型以B型和C型为主,HBV耐药突变以M204I、L180M和M204V多见。应根据基因分型和耐药突变情况对慢性乙型肝炎患者选择适合的治疗方案。     

两种人乳头瘤病毒检测方法的比较

目的 通过对宫颈病灶组织的人乳头瘤病毒分型基因芯片法和宫颈分泌物的PCR荧光定量法检测结果 比较,为临床人乳头瘤病毒的诊断提供比较恰当的选择方法 .方法 采用人乳头瘤病毒分型基因芯片检测系统,对200例患者的子宫颈癌新鲜冻存组织进行人乳头瘤病毒分型检测,其中的134例患者同时采用荧光定量PCR方法 对宫颈病灶分泌物进行人乳头瘤病毒16、18型检测.结果 人乳头瘤病毒分型基因芯片检测的人乳头瘤病毒阳性率为94.00%(188/200),均为高危型.其中存在人乳头瘤病毒16和/或18的占90.00%(180/200),而荧光定量PCR检测的人乳头瘤病毒16和/或18阳性率为36.57%(49/134).荧光定量法检测为阳性的49例均在基因芯片法检测结果 中显示含有HPV16和/或18型.两种方法 的人乳头瘤病毒检出率有明显差异(χ2=106.2862,P＜0.005).结论 虽同以PCR技术为基础,但人乳头瘤病毒分型基因芯片检测系统的敏感性要优于荧光定量PCR检测方法 ,同时前者还可对人乳头瘤病毒分型,是临床应用的较好选择.     

HBV基因分型和耐药突变基因检测

目的研究HBV基因分型和耐药突变基因的特点及核苷(酸)类似物耐药突变情况。方法收集HBV患者血清141例,PCR点杂交法检测HBV基因分型和耐药突变基因。结果 105例HBV DNA阳性患者中,B基因型占62.86%,C基因型占37.14%,差异有统计学意义(P0.05);B基因型和C基因型的耐药突变率分别为31.82%和30.77%,差异有统计学意义(P0.05)。B基因型以204I和180M+204V+204I突变多见。HBV耐药突变模式以rt204I(11.43%)和180M+204V+204I(8.57%)为主。LAM耐药率显著高于ADV,差异有统计学意义(P0.05),但与Ld T+ETV耐药率差异无统计学意义(P0.05)。B基因型和C基因型耐药均以LAM+Ld T+ETV为优势模式。结论本地区HBV基因B型多于基因C型,204I和180M+204V+204I基因突变模式多见,LAM和LAM+Ld T+ETV耐药模式多见。     

乙型肝炎病毒(HBV)耐药基因突变检测研究

目的 建立HBV基因分型、耐药变异以及前C区/BC P区突变检测技术,为乙型病毒性肝炎诊断及监测提供依据.方法 选取某院2010年1月～2011年1月收治的54例乙型病毒性肝炎患者的血清样本,利用MassARRAY Assay 和PCR技术对样本进行耐药基因检测.结果 ① 54例患者中B基因型28例(51.85％)；C基因型22例(40.74％)；B,C混合基因型2例(3.70％)；无D基因型；B,C,D以外的其他基因型1例(1.85％).②54例患者中,37例对拉米夫定耐药,37例患者对拉米夫定耐药的患者中,突变基因型均为B和C基因型.突变基因型主要是180M型(56.76％),无207I型,而且突变基因多见于C基因型,比例为72.97％,高于B基因型(27.03％),比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 对拉米夫定耐药的患者中,HBV-DNA突变基因型主要是180M型,而且多见于C基因型,MassARRAYAssay技术可以准确检测HBV基因型及耐药基因突变位点,可以为临床诊断治疗提供依据.     

基因芯片检测系统在分枝杆菌属鉴定及耐药性分析的临床应用

目的探讨基因芯片检测系统在分枝杆菌属鉴定及耐药性分析的临床应用价值,以及不同类型标本检出率的差异。方法应用基因芯片技术,对患者的痰液、脓液、胸腹水、脑脊液等标本进行分枝杆菌属DNA检测,进一步对结核分枝杆菌阳性标本进行耐药性分析。结果 900份临床样本的鉴定结果总阳性率为10.6%,洗肉水、穿刺物、脓液等阳性率较高;进一步对40份结核阳性标本进行耐利福平基因rpoB及耐异烟肼kat Gi、nhA基因检测,共有9例检测到了突变的耐药基因。结论基因芯片检测系统可以直接进行分枝杆菌属鉴定及耐药性分析,适用于不同类型标本,简便快速,灵敏度高,特异性好。     

测序仪对乙型肝炎病毒耐药突变基因的检测与分析

目的:研究测序仪对乙型肝炎病毒耐药突变基因的检测结果。方法:从2017年1月~2018年12月,本院收治的患者中选择连续服用拉米夫定、阿德福韦酯等核苷酸类药物2年以上,临床表现为病毒学突破,且HBVDNA>3×10~3IU/mL的慢乙肝患者中选取104例参与研究,进行乙肝病毒突变基因检测,分析突变位点,并对病毒进行基因分型。结果:研究组患者的104例慢性乙型肝炎血清当中,使用测序法进行检验有B型和C型两种基因型。两种基因型数量分别为11例和93例,所占比重分别为10.58%和89.42%。测序法能够检出12个突变位点,主要耐药的药物为拉米夫定。结论:测序仪能够很好的检验乙型肝炎病毒耐药突变基因。     

乙型肝炎拉米夫定耐药的发生与乙型肝炎病毒基因型的关系

目的:探讨拉米夫定耐药的发生与乙型肝炎病毒(HBV)B、C基因型的关系。方法:选取65例拉米夫定治疗耐药患者的血清采用基因芯片技术检测其乙肝病毒的基因型。结果:65例拉米夫定耐药患者中,B基因型为27例(41.54%),C基因型为38例(58.46%);C基因型的Y IDD变异率明显高于B基因型(86.84%对37.04%,P<0.01),且病毒复制水平明显高于B基因型,而B基因型的YVDD变异率明显高于C基因型(62.96%对13.16%,P<0.01)。结论:发生拉米夫定变异时乙肝C基因型多发生Y IDD变异,乙肝B基因型多发生YVDD变异,且变异后基因型C的病毒复制水平比B基因型要高。拉米夫定耐药患者B、C基因型病毒学特性的研究可对拉米夫定耐药患者的临床用药有指导意义。     

基因芯片对人乳头瘤病毒的快速检测和分型

目的针对HPV DNA亚型的异质性,建立HPV DNA亚型的基因芯片快速检测方法,为HPV感染病例提供诊断依据.方法18种HPV DNA亚型(HPV6 、16、18、31、33、35、39、11、45、51、52、53、56、58、42、59、66、68)特异性探针,固定于硝酸纤维素膜制备成基因芯片,生物素标记引物经通用引物介导PCR(GD-PCR)扩增HPV DNA,PCR产物与基因芯片经反向点杂交检测HPV亚型;同时采用荧光定量PCR检测HPV6、11、16和18亚型.结果31例标本中,基因芯片的阳性检出率为74.2%,其中HPV6/18、HPV11/16、HPV33/58和HPV6/11/33多重感染各1例(3.2%);荧光定量PCR阳性检出率为67.7%,与前种方法相比较,漏诊率为6.5%.结论HPV分型基因芯片可1次检测HPV多种亚型,灵敏度高和特异性强,有利于对HPV多重感染的诊断.     

唐山地区CHB患者HBV基因型与耐药种类和耐药位点的分析研究

目的探讨唐山地区慢性乙型肝炎病毒(CHB)患者乙型肝炎病毒(HBV)基因分型,核苷酸类抗病毒药物的耐药种类分布和耐药位点的相关性。方法选择2009年10月-2014年4月就诊于唐山市传染病医院门诊和住院的467例慢性乙型肝炎病毒患者,通过使用毛细管电泳仪采用双脱氧终止法测序技术,对患者血清进行HBV基因分型和耐药位点的检测,使用统计学软件对数据进行统计分析。结果唐山地区CHB患者的467例样本中检测出HBV基因型445例,其中B基因型64例占14.38%,C基因型380例占85.39%,D基因型1例占0.22%;共检出耐药患者283例,其中对恩替卡韦、拉米夫定和替比夫定多药耐药的160例占56.54%;对阿德福韦酯的主要耐药位点是rtA181V/T/S突变,其次是rtA181V/T/S和rtN236T同时突变,B基因型与C基因型对阿德福韦酯的耐药位点突变分布比较差异有统计学意义(P<0.05);对拉米夫定、恩替卡韦和替比夫定多药耐药的主要耐药位点是rtL180M和rtM204I/V/S同时突变,其次是单独rtM204I/V/S突变。结论唐山地区HBV感染者的基因型主要以C基因型为优势基因型;通过对耐药位点的分析,B基因型CHB患者应用阿德福韦酯不易耐药,HBV基因型B型和C型的CHB患者对拉米夫定、恩替卡韦和替比夫定耐药的多药耐药位点分布无差异。     

拉米夫定治疗后乙肝病毒耐药基因突变检测及其临床意义

目的 检测服用拉米夫定治疗后乙型肝炎病毒发生基因突变的情况,分析其临床意义.方法 选取2009年1月～2011年6月在某院收治的128例乙型肝炎患者,随机均分为观察组和对照组,观察组患者给予拉米夫定治疗,对照组给予除拉米夫定以外的其他综合治疗,应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测所有研究对象的乙型肝炎病毒(HBV-DNA)耐药基因180位点和204位点突变的情况.结果 观察组患者基因突变各模式的阳性率均高于对照组,比较差异有统计学意义(P＜0.05).观察组患者基因突变阳性率与服药时间成正比,用药时间越长发生突变阳性率越高(P＜0.05).结论 长时间服用拉米夫定可引起乙型肝炎病毒发生基因突变,而且基因突变阳性率与服药时间成正比,用药时间越长发生突变阳性率越高.通过YMDD变异株的检测,可为临床诊治提供依据,指导临床正确用药.     

耐拉米夫定乙型肝炎病毒聚合酶P区变异与基因分型

目的：分析拉米夫定耐药的慢性乙型肝炎患者HBV P区变异和基因分型的关系,为制定针对不同HBV基因型抗病毒的个体化方案提供依据。方法应用聚合酶链反应（ PCR）和酶联免疫吸附试验（ ELISA）对187例拉米夫定耐药患者的HBV DNA载量及HBV-M进行检测,用特异的引物对待检标本HBV P区进行全序列测定,对不同性别、年龄的测序结果的基因分型作比较;并对C、B基因型发生实变模式作分析。结果187例慢性乙型肝炎患者感染的HBV均为B和C基因型,B基因型51例（27.27%）,C基因型134例（71.66%）,并存在混合感染2例（1.07%）;HBeAg含量在B基因型和C基因型间差异有统计学意义（ P〈0.05）;P区基因突变结果显示,B基因型以单纯YMDD突变为主,C基因型以YMDD突变＋ rtL180M 突变为主。结论本研究对象的HBV基因型主要是C型,不同基因型可能决定了与耐药相关的P区变异模式。     

焦磷酸测序与PCR产物直接测序在乙型肝炎病毒耐药基因检测中的敏感性比较

目的 通过与PCR产物直接测序比较,评价焦磷酸测序法在乙型肝炎病毒耐药基因检测中的应用价值.方法 选取临床使用拉米夫定抗病毒治疗慢性乙型肝炎患者,分别采用巢式PCR焦磷酸测序法与巢式PCR产物直接测序法检测拉米夫定相关耐药位点rtl80变异情况,比较两种方法的敏感性与特异性.结果 焦磷酸测序与PCR产物直接测序均能准确的检测出优势病毒株(占总群＞90％),焦磷酸测序中rt180M所占比例在90％～50％时,PCR产物直接测序法检出率下降至76.92％及50.00％;焦磷酸测序样本中rtl80M所占比例为50％～10％,PCR产物直接测序法对耐药基因的检出率降至15.38％～10.00％;准种(占总群＜10％)焦磷酸测序可以测出,但PCR产物直接测序法无法检测出.结论 焦磷酸测序的方法监测乙型肝炎病毒变异同PCR产物直接测序法相比,有更好的灵敏性,在抗病毒治疗过程中能够检测HBV准种及种群漂移,对于研究抗病毒疗效及耐药预测具有重要意义.     

福州市健康人群中乙肝病毒感染的检测分析

目的了解福州市健康人群中乙肝病毒感染情况及HBV流行株的基因分布特性,为福州市乙型肝炎防制工作提供科学依据。方法采用ELISA方法检测乙肝病毒免疫学标志物,应用荧光定量PCR检测HBV-DNA含量,用型特异性引物套式PCR进行乙型病毒基因分型。结果1710份样品中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb阳性率分别为12.51%、50.23%、2.40%、16.73%、60.18%;201份HBsAg阳性样品中HBV-DNA阳性率为76.12%;HBV-DNA阳性标本中,B型62份(41.89%)、C型57份(38.51%)、B、C混合型7份(4.73%)、未能分型22份(14.86%)。结论福州市健康人群中HBsAg携带率为12.51%,高于全国平均水平,HBV基因型以B、C型为主,应该加强乙肝的预防控制工作。     

开封市慢性乙型肝炎患者耐药现状及常见核苷(酸)类治疗药物耐药基因突变位点研究

目的探究慢性乙肝(CHB)患者耐药现状及常见核苷(酸)类治疗药物耐药基因突变位点。方法以2020年1月1日至2021年9月30日开封市传染病医院及河南大学淮河医院的CHB患者为研究对象,回顾性收集病例资料并对患者进行常见核苷(酸)类治疗药物耐药基因突变位点检测,采用描述性分析方法对结果进行分析。结果本研究共纳入2141例CHB患者,其中男1635例,女506例,年龄20~42岁,平均(31.5±10.5)岁,HBV DNA载量(4.88±1.54)×10^(7)U/mL。30~42岁CHB患者耐药率显著高于20~29岁者(P<0.01)。CHB患者对拉米夫定耐药性较高,对替诺福韦酯、阿德福韦酯敏感性较高。2141例CHB患者检出HBV耐药基因突变788例,占36.81%。M204I、M204V、M250I+M250L是HBV耐药突变位点前3位,分别占22.08%、13.20%、9.64%。B基因型患者为主(占62.20%)。C基因型与B+C混合型患者突变率明显高于B基因型患者,B基因型患者多基因位点突变率明显高于C基因型与B+C混合型患者(P<0.01)。单一药物治疗组与多种药物序贯治疗组耐药基因突变率差异无统计学意义(P>0.05)。停药组耐药基因突变率高于非停药组(P<0.01)。结论长期常见核苷(酸)类药物治疗多出现耐药,可导致多种形式的HBV聚合酶变性,是HBV感染治疗的主要阻碍。临床检测耐药突变位点有利于治疗方案制定,指导治疗药物选择与长期防治。     

100例乙型肝炎病毒基因分型的探讨

目的:为了解宁波及毗邻地区乙型肝炎患者HBV基因型分布、优势型与临床的相关性。方法:选择宁波及毗邻地区HBV DNA阳性的HBV感染者100例,应用基因芯片对其进行基因分型,其中7例优势基因型进行S基因序列同源性测序复核。结果:100例HBV阳性的血清标本分型率为96.0%,其中B基因型36例(37.5%),C基因型47例(48.9%),BC混合基因型11例(11.5%)及BCD混合基因型2例(2.1%),未分出型的4例。乙型肝炎感染者检出的基因型以B、C型为主;重型肝炎与肝癌组中C型检出率分别为60%和55%,明显高于其他基因型(P<0.05),B、C基因型与HBV DNA拷贝数、丙氨酸氨基转移酶水平及总胆红素在统计学上无显著差异(P>0.05)。结论:基因芯片分型方法可应用于HBV基因的分型。宁波及毗邻地区的HBV基因型以B、C为优势基因型,重型肝炎和肝癌患者检出的基因型多为C型,提示C基因型患者预后较差。     

儿童乙型肝炎血清HBVcccDNA及病毒基因型研究

目的 了解甘肃省儿童血清乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)及病毒基因型情况.方法 随机选择HBV-DNA阳性124例乙肝患儿(男性84例,女性40例),其中HBV携带者65例、慢性乙肝59例(轻度31例、中度18例、重度10例),对以上患儿进行基因分型、肝功、HBV-DNA载量和血清HBV cccDNA检测.结果 中、重度慢性乙肝患儿HBV cccDNA阳性率高于携带者和轻度组(F=25.429,P＜0.01);HBeAg阳性患儿HBV cccDNA检出率高于HBeAg阴性患儿(F=28.386,P＜0.01);HBV cccDNA阳性组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素均高于阴性组(t值分别为13.241、11.347、15.013,均P＜0.01);124例肝炎患儿中,以C、B基因型为主,C基因型为优势,B/C混合型占一定比例,还有一些其他基因型;C基因型患儿中HBV cccDNA阳性的比例高于B基因型患儿(F=23.216,P＜0.01);而B基因型患儿中HBVcccDNA阴性的比例高于C基因型患儿(F=26.364,P＜0.01).结论 病情越重外周血HBVcccDNA检出率越高,HBV cccDNA和基因型的检测可以较好地反映HBV复制程度和临床严重程度,对诊治乙肝具有一定的指导意义.     

乙肝基因分型与耐药位点突变的关系

目的:检测本地区乙肝病毒复制病人中基因型分布情况,探讨HBV基因型与抗病毒疗效关系。方法:应用乙肝病毒型特异性引物采用巢式PCR方法,对45例HBV-DNA阳性患者进行HBV基因型分析,用DNA测序方法检测耐药位点突变。结果:B型7例,占15.56%;C型34例,占75.56%;未分型3例,占6.67%;B+C混合型1例,占2.22%。未发现其他型别。C型病人人均病毒载量5.67±1.61(1oglncopies/m1)较B+C混合型5.54(只有1例)、B型(4.42±1.39)及未分型(2.65±0.57)高。C型病人耐药变异位点多,病人比例高。结论:浙江等地区HBV—DNA基因分型以C、B为主,而B基因型抗病毒治疗疗效最好,C型、混合型及其它型对抗病毒治疗药物疗效较差。