弓形虫抗原,抗体检测及其临床意义

弓形虫病（toxoplasmosis）又称弓形体病,是由弓形虫（toxoplasma gondii）所引起的一种人兽共患性疾病。在人体多为隐性感染,由于弓形虫寄生部位及机体反应性的不同,发病者临床表现复杂,主要侵犯脑、眼、心、肝、淋巴结等。孕妇感染弓形虫后,可通过胎盘垂直传播给胎儿,损害胚胎发育,严重者致畸甚至死亡,同时可使孕妇流产或早产,其危险性较未感染孕妇大10倍。对于免疫抑制或免疫缺陷的病人（如肿瘤患者、器官移植或艾滋病患者等）,弓形虫更是一个重要的机会致病因素。 诊断弓形虫病最可靠的方法是确认病原体的存在,常采用涂抹标本检查或动物接种分离鉴定虫株,然而前者不易获得成功,后者则需较长时间才能报告结果,因此应用血清学方法诊断弓形虫病十分重要。 应用于弓形虫病的血清学方法种类很多,但可     

刚地弓形虫SAG3基因体外扩增及生物信息学分析

目的获取刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）RH株表面抗原SAG3目的基因片段,对其结构和功能进行生物信息学分析,预测其编码蛋白作为候选抗原基因的可行性。方法提取弓形虫的基因组DNA,自行设计一对寡核苷酸引物,PCR体外扩增SAG3基因,用生物信息学方法对SAG3蛋白的理化性质、结构和功能进行预测。结果扩增出的基因片段约1174bp,测序后鉴定其为弓形虫RH株SAG3基因片段。预测SAG3蛋白相对分子质量约为41785．2。能形成两个功能结构域,氨基酸序列的前38（或39）位为信号肽序列。通过多种预测方法分析SAG3氨基酸序列抗原表位可能位于第10、50、80、95、160、180、220、250、300、330和360位点内或附近。结论成功获得SAG3基因,为深入研究该基因结构奠定了基础。     

弓形虫循环抗原与抗体检测在妇产科的应用价值探讨

弓形虫病过去由于国内缺乏灵敏、特异的检测手段,因此临床较难发现此病,况且此病又无特殊的临床症状,所以临床医师较少考虑到弓形虫病,随着医学科学的发展,目前检测弓形虫病有放射免疫分析法、酶联免疫法、PCR法等。近年来,国内已有酶联免疫法检测弓形虫循环抗原、抗体IgM、IgG的试剂盒供应;PCR法检测弓形虫抗原的试剂盒供应;放射免疫分析试剂盒正在加紧研制。为了使临床能加快对弓形虫病的认识和进行交流,本刊特开辟弓形虫病专栏,介绍有关弓形虫病的诊断、治疗、预防等方面的文章,以飨读者。     

弓形虫ROP1基因的体外扩增及克隆

弓形虫棒状体蛋白（ROP1）存在于速殖子棒状体内。根其已知基因序列设计合成一对引物，用PCR技术从弓形虫RH及ZS2株的基因组DNA中扩增出编码ROP1的基因片段，将扩增产物与pBV220原核高效表达质粒重组，构建成功pBV200-RCP1重组子，转化大肠杆菌TG1，DHSα，以进一步诱导表达RCP1非融合蛋白，用于对弓形虫侵入机制及免疫特性的研究。     

弓形虫抗体在人体内的消长情况及其临床意义

弓形虫病(Toxoplasmosis)是由弓形虫引起的一种人兽共患的寄生虫病,分布范围广,对人类危害大,孕妇感染弓形虫后,可通过胎盘垂直传播给胎儿,损害胚胎发育,引起胎儿严重的神经系统发育畸形和智力障碍,降低人口素质,甚至引起死亡。自五十年代起,国外学者从不良妊娠结局者的月经血、乳汁、恶露、胎盘、羊水及胚胎等标本中分离出弓形虫。近期国内研究表明,我国孕妇弓形虫感染亦较普遍,对下一代的健康带来严重威胁。因此,弓形虫病已成为围产医学中一个重要的原虫病。 弓形虫病最可靠的诊断方法是确认病原,但一般比较困难,因此,应用血清学方法检测弓形虫抗休已被公认是重要的辅助诊断手段。 弓形虫病的血清学方法种类很多,如Sabin-Fe-     

肝病患者血清弓形虫抗原、抗体的检测及临床意义

本文总结了２７４例肝病患者血清弓形虫抗原、抗体的检测结果 ,以此来探讨肝病和弓形虫之间的关系及临床价值。材料和方法一、对象 :（一）对照组 :本院健康成人体检者１５０人（男９５ ,女５５） ,年龄为２０岁～６０岁 ,均无器质性病变。（二）肝病组 :本院门诊及传染病医院住院病人共２７４例（男１６６ ,女１０８） ,年龄为１８岁～７５岁 ,且有临床症状 ,并经化验、Ｂ超等证实为肝病者。二、方法 :由上海放射免疫分析技术研究所提供试剂盒 ,用酶免法检测弓形虫循环抗原（ＣＡｇ）、ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体 ,操作按说明书。结果结果见表１。…     

弓形虫ZS1株抗原基因的扩增及克隆

本文采用PCR技术，自行设计一对寡核酸引物(P1，P2)，从弓形虫ZS2基因组DNA中特异扩增出编码P30抗原的基因片段。扩增的目的片段经纯化后用FxcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,克隆到真核表达质粒pcDNA3中，转化人大肠杆菌TG1，用氨苄青霉素和PCR初筛，将PCR扩增阳性的重组子用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定。结果成功地构成建真棱型表达质粒pcDNA-P30，从而为进一步进行重组P30抗原的体外表达创造有利条件。     

基于量子点及免疫磁珠技术快速检测弓形虫抗体的实验研究

目的 应用量子点及免疫磁珠技术,建立一种简便、快速的弓形虫IgG抗体检测方法.方法 采用碳二亚胺交联法,将弓形虫抗原包被住磁性微球表面作为固相载体,量子点标记二抗作为检测抗体.检测待检血清中的弓形虫特异性抗体,并对检测条件进行优化.结果 量子点与二抗的最佳偶联条件:pH6.0、反应时间为2 h、二抗浓度为20 μg/mL.确立检测的最佳反应条件:抗原包被浓度50μg/mL,量子点标记二抗工作浓度为1:200.用本方法检测弓形虫抗体阳件血清的最大稀释度为1:1 000,而EHSA为1:500.结论 成功建立了弓形虫IgG抗体快速检测方法,该方法具有较好的特异性和灵敏度,且操作简便快速.     

ELISA弓形虫IgG抗体试剂盒的研制

弓形虫病 (Ｔｏｘｏｐｌａｓｍｏｓｉｓ)是一种人兽共患的寄生虫病。病原体为弓形虫 (Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ) ,属球虫类原虫 ,广泛分布于世界各地 ,人和动物普遍易感。许多欧美国家的血清试验阳性率达 2 5～ 50 %。我国自 1 980年以来 ,在全国范围内进行了人和动物弓形虫病的流行病学调查 ,所调查地区均发现弓形虫感染 ,说明我国弓形虫感染和弓形虫病分布十分广泛 ,人体感染弓形虫后 ,体内最先产生的是循环抗原 (ＣＡｇ) ,最早出现的抗体是ＩｇＭ抗体 (病期的 7～ 8天 ) ,它是早期弓形虫感染诊断的主要指标 ,随后出现ＩｇＡ抗体…     

免疫金银染色法检测抗弓形虫抗体

免疫金银染色法检测抗弓形虫抗体张阳根解放军第１７５医院漳州３６３０００弓形虫病是一种广泛流行的人畜共患疾病，多数为隐性感染及临床症状的非典型性，使得其病原学诊断不易成功。目前常用的方法有ＥＬＩＳＡ．ＩＦＡＴ、ＩＨＡ等［１～３］，但都存在一定的局限性，...     

弓形虫抗原,抗体检测在眼病诊断中的应用

弓形虫并是由专性细胞内鼠弓形体所起,它是引起后部葡萄膜炎最常见的原因。其发生无种族和性别差异,其典型改变为,在陈旧性视网膜脉络膜瘢痕附近出现局灶性坏死性视网膜脉络膜炎。临床上根据其典型的病灶特征可以作出诊断,但对高度疑是弓形虫感染者,作血清抗原抗体的检查,对明确诊断是很有帮助的。我们用ELISA对临床上已诊断为葡萄膜炎患者进了弓形虫循环抗原、特异性抗体的检测。旨在确定可能的病因。 材料和方法     

我国弓形虫病研究进展

近年来,由于生命科学技术的广泛应用,使弓形虫及弓形虫病的研究不断深入。本文将从弓形虫感染情况、致病、诊断及防治等方面研究的进展作一综述。     

弓形虫病患儿静脉血感染豚鼠的实验研究

本实验用２１例弓形虫病患儿的静脉血做豚鼠腹腔内注射接种,７日后阶段取豚鼠耳静脉血查弓形虫ＤＮＡ及弓形虫抗体ＩｇＧ,１８例次,２４只豚鼠获阳性结果,阳性率８５．７％,基本说明ＰＣＲ技术作为对弓形虫病的诊断是可信的检验方法。ＰＣＲ－弓形虫ＤＮＡ阳性是确诊儿童弓形虫病的主要依据。     

重组弓形虫P30抗原诊断弓形早病的初步探讨

为探讨重组弓形虫P30抗原（rP30)对弓形虫病的诊断价值。将rP30包被于酶标反应板微孔,用常规ELISA检测血清抗体。结果4例染色试验阳性血清,抗-rP30IgG全部阳性,阳性符合率为100%;27例虫体IgG/IgM抗体阳性血清中,22例rP30I-ELISA阳性,符合率为85.2%;100例门诊病人和50例献血员血清的阳性检出率分别为9.0%和8.0%。说明rP30检测弓形虫病患血清具有一定的敏感性和特异性,可望替代天然的弓形虫抗原用于弓形虫病的诊断。     

中国人群弓形虫病的流行特征分析

弓形虫病Toxoplasmsis是由刚地弓形虫Toxoplasma gondii引起的一种人兽共患寄生虫病,呈世界性分布.近年来我国人们生活方式和饮食习惯的改变及＂宠物热＂的现象增多,增加了弓形虫的感染机会,为探讨我国人群弓形虫感染情况,本文对近年来我国弓形虫病流行病学研究情况作一综述.     

TORCH与优生：Ⅲ用聚合酶链反应结合地高辛分子杂交产前诊断弓形虫感染

根据本实验室筛选出的弓形虫(ZS2株)特异DNA克隆片段的部分顺序分析的数据，设计并合成特异的寡核苷酸引物对，建立多聚酶链反应(PCR)诊断弓形虫感染的方法。不同来源弓形虫株和阳性标本DNA的PCR产物经电泳检测，均出现特异的扩增片段。以地高辛标记的该PCR产物中弓形虫特异顺序的寡核苷酸为探针，对扩增产物进行斑点杂交分析，该探针能与阳性病例的扩增产物杂交，而不与阴性病例的扩增产物杂交。用PCR结合地高辛分子杂交方法对不良生育史孕妇进行产前诊断，34例外周血白细胞DNA检测，2例阳性，分别为出生水肿胎儿和死胎；76例羊水细胞DNA检测，3例阳性，其中2例出生为无脑儿；30例绒毛DNA检测，4例阳性，均为难免流产。PCR产物结合地高辛分子杂交方法可测出少至10fg（10^-1g)的弓形虫DNA，本方法更加特异敏感。