α—双炔失碳酯诱导阿霉素抗药的MCF—7乳癌细胞凋亡

目的 研究α－双炔失碳酯（α－ａｎｏｒｄｒｉｎ,ＡＮＯ）对阿霉素抗药的ＭＣＦ－７乳癌细胞（ＭＣＦ－７＾ａｄｒ细胞）的凋亡诱导作用。方法 采用形态学、ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法。结果：ＡＮＯ１０～５０μｍｏｌ／Ｌ作用４８ｈ明显抑制７＾ａｄｒ细胞的生长,诱导ＭＣＦ－７＾ａｄｒ细胞核碎裂,染色质凝缩,电泳显示核小体之间ＤＮＡ裂断。流式细胞术检测发现经ＡＮＯ作用后约有２６％的细胞出现在“亚Ｇ１     

鹤莲克癌临对肝癌H22细胞周期及其细胞凋亡的影响

应用流式细胞术（ＦＣＭ）分析了中药复方制剂鹤莲克癌临对小鼠移植性肝癌Ｈ２２细胞周期影响及其细胞凋亡作用的影响。结果表明,鹤莲克癌蝇药组）ＤＮＡ合成期（Ｓ细胞明显减少,百分率下降,而ＤＮＡ合成前期（Ｇ１）细胞显著增强,在ＤＮＡ直方图上Ｇ１峰前出现明显的细胞凋亡峰,其细胞凋亡率为２８％,而模型组和５－Ｆｕ组的细胞凋亡率分别为２０．５％和１７．８％,提示鹤莲克癌临抗癌细胞学机制是阻滞癌细胞增殖周期并诱导     

表皮生长因子受体单抗诱导人肺癌SPC A1细胞凋亡

目的 观察表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）单克隆抗体是否可诱导人肺癌ＳＰＣ Ａ１细胞凋亡，以进一步说明ＥＧＦＲ单抗所具有的抗肿瘤作用。方法 以不同浓度的ＥＧＦＲ单克隆抗体干预培养人肺腺癌ＳＰＣ Ａ１细胞株７２ｈ，收集癌细胞并提取ＤＮＡ，采用凝民泳法和流式细胞仪分析细胞凋亡现象。结果 凝胶电泳显示，单抗浓度为１．０ｕｍｏｌ／Ｌ时，可见明显的凋亡梯状条带出现。流式细胞仪分析发现，在ＥＧＦＲ单抗干预培养的各     

顺铂对肝癌细胞凋亡中wtp53,C—myc基因表达的影响

目的 研究顺铂对抑癌基因ｗｔｐ５３及癌基因Ｃ－ｍｙｃ在肝癌细胞凋亡过程中表达的影响。方法 用抑癌药顺铂诱导凋亡,通过细胞形态学检查,ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳证明调亡发生,采用原位杂交技术检测ｗｔｐ５３,Ｃ－ｍｙｃ基因在人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１凋亡过程中的表达。结果 ｗｔｐ５３基因在顺铂作用后１ｈ开始表达,６ｈ达到高峰,１２ｈ则明显下降。Ｃ－ｍｙｃ基因在顺铂作用后表达逐渐增强,１２ｈ达到高峰。结论     

VP—16诱导HL—60细胞凋亡的研究

探讨ｔｏｐｏⅡ抑制剂的抗瘤机制。方法：选择人急性早幼粒细胞白血病细胞株ＨＬ－６０为实验模型，以ＶＰ－１６为诱导剂，用形态学观察、ＤＮＡ电泳及流式细胞术（ＦＣＭ）等方法人凋亡情况进行了研究。结果：经ＶＰ－１７处理的ＨＬ－６０细胞呈典型凋亡形态学改变，出现梯状ＤＮＡ条带（ＤＮＡ ｌａｄｄｅｒ），ＦＣＭ ＤＮＡ直方图上Ｇ０／Ｇ１峰前是明显的亚二倍体凋亡峰。表明经ＶＰ－１６处理的ＨＬ－６０细胞的确发生了凋     

利用流式细胞术研究榄香烯对肝癌腹水瘤细胞系Hca—F25／CL—1 …

采用小鼠肝癌腹水瘤细胞系Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３,利用流式细胞术研究了榄香烯对肿瘤细胞的作用,对Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｃｌ－１６Ａ３细胞周期的影响、ＤＮＡ含量的分析以诱导细胞凋亡。结果表明：榄香烯可以明显抑制Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３细胞的增殖,有效地杀伤肿瘤细胞;榄香烯对ＣＯ／ＧＩ期细胞无明显作用,主要作用于Ｓ期,阻止由Ｓ期进入Ｇ２／Ｍ期,从而抑制肿瘤生长;可以ＧＯ／ＧＩ期前出现一个凋亡特异     

紫杉醇诱导9L胶质瘤细胞凋亡的体外实验研究

目的：通过体外实验探讨紫杉醇对恶性胶质瘤９Ｌ细胞株有否凋亡诱导作用。方法：在经ＭＴＴ比色法测试到紫杉醇对９Ｌ细胞具有细胞毒作用的前提下,进一步通过形态学观察,ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪来检测其细胞毒作用是否与诱导细胞凋亡有关。结果：紫杉醇对９Ｌ细胞具显著细胞毒作用;０１μｍｏｌ／Ｌ紫杉醇作用下９Ｌ细胞分裂主要被阻滞在Ｇ２／Ｍ期,并在第７２ｈ出现凋亡细胞峰,此时培养细胞ＨＥ染色表现出典型的凋亡细胞形态特征,抽提其ＤＮＡ做琼脂糖凝胶电泳显示凋亡特有的ＤＮＡ“阶梯”。结论：紫杉醇具有抗胶质瘤作用,其机制与诱导细胞凋亡有关,通过进一步的体内实验,可为其最终广泛应用于临床脑胶质瘤病人提供充分的理论依据。     

粒细胞集落刺激因子对顺铂对卵巢癌细胞的细胞毒作用的影响

目的　了解粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ ＣＳＦ）对顺铂对卵巢癌细胞的细胞毒作用的影响;方法　采用ＸＴＴ 比色法检测不同浓度顺铂对卵巢癌细胞株ＳＫＯＶ３、３ＡＯ 细胞生长影响;以及５０ ｍｇ／Ｌ 顺铂分别与不同浓度Ｇ－ ＣＳＦ 共同使用对ＳＫＯＶ３、３ＡＯ细胞生长的影响。结果　５０ ｍｇ／Ｌ 顺铂单独使用和与不同浓度Ｇ－ ＣＳＦ 共同使用２４ ｈ 对ＳＫＯＶ３、３ＡＯ 细胞生长的影响无显著性差异。结论　Ｇ－ ＣＳＦ 对顺铂对ＳＫＯＶ３、３ＡＯ 细胞的细胞毒作用无显著影响。     

EL一4细胞凋亡与细胞周期的辐射效应

采用流式细胞术（ＦＣＭ）研究了０．５、１、２、４ＧｙＸ射线照射后，小鼠淋巴瘤细胞ＥＬ一４的凋亡与细胞周期的剂量效应关系。结果表明：以上剂量照射后２４ｈ，Ｇ１期细胞呈剂量依赖性增加，出现明显的Ｇ１阻滞；而Ｓ期细胞则剂量依赖性减少；Ｇ２期出现明显的Ｇ２阻滞；细胞凋亡亦呈剂量依赖性增力。该结果提示：ＥＬ一４细胞经较高剂量ｘ射线照射后，出现明显的ＤＮＡ合成抑制和Ｇ２阻滞，致使ＥＬ一４细胞的有丝分裂延迟。统计分析表明：Ｇ１阻滞与细胞凋亡高度相关ｒ＝０．９１。     

NDGA对内皮细胞增殖抑制的作用研究

目的：探讨去甲二氢愈创木酸（ＮＤＧＡ）对内皮细胞增殖活性的影响及特点。方法：采用形态学观察、细胞计数、流式细胞仪分析、免疫组织化学等技术方法观测不同浓度ＮＤＧＡ作用下人脐静脉内皮细胞ＥＣＶ－３０４细胞增殖活性的变化。结果：①不同沈度（５０～２００ｕｍｏｌ／Ｌ）的ＮＤＧＡ处理ＥＣＶ－３０４细胞２４～７２ｈ后或一定浓度（１００ｕｍｏｌ／Ｌ）的ＮＤＧＡ处理ＥＣＶ－３０４细胞不同时间（１～８ｄ）后,均出现     

柴胡及甘草酸对小鼠肝细胞凋亡的影响

目的：研究柴胡（ＲＢ）及甘草酸（ＧＬ）对小鼠肝细胞凋亡的影响。方法：以肝／体重比，肝组织ＤＮＡ含量，组织学改变及原位凋亡细胞ＴＵＮＥＬ反应为指标，观察ＲＢ（１２．０ｇ／ｋｇ）及ＧＬ（５０ｍｇ／ｋｇ）ｉｐ，１次／８ｈ，对撇除苯巴比胺钠（ＰＢ）后引起的小鼠肝细胞凋亡的影响。结果：与对照组Ｃ相比，ＲＢ组小鼠肝／体重比及肝ＤＮＡ含量无明显回落，组织学检查未见明显凋亡改变，ＴＵＮＥＬ反应阴性，ＧＬ组小鼠肝／     

抗癌药物引起胃癌细胞系BGC-823凋亡的作用观察

目的 观察多种抗癌药物对体外培养胃癌细胞系ＢＧＣ－８２３的作用及引起凋亡的机制。方法 选用丝裂霉素（ＭＭＣ）、卡铂、５－Ｆｕ、卡铂＋５－Ｆｕ,作用于呈指数生长的ＧＢＣ－８２３胃癌细胞系细胞,在作用２４,４８ｈ时,分别细胞的凋亡情况,利用镜下细胞计数方法,计数细胞凋亡的百分数;并分别留取正常培养１２,２４ｈ,抗癌药物作用２４,４８ｈ的培养液上清、测定癌胚抗原（ＣＥＡ）的含量,结果 用５－Ｆｕ、ＭＭＣ     

亮氨酸脑啡肽对缺氧时肺动脉平滑平细胞增殖的影响

目的：研究缺氧对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）增殖、ＤＮＡ合成和细胞周期的作用,并观察亮氨酸脑啡肽（Ｌ－Ｅｎｋ）和阿片受体阻断剂纳洛酮（Ｎａｌ）的影响．方法：离体培养兔ＰＡＳＭＣ,采用四唑盐比色试验（ＭＴＴ）,３Ｈ－ＴｄＲ参入技术和流式细胞仪分析细胞周期等方法,观察ＰＡＳＭＣ增殖、ＤＮＡ合成和细胞周期的变化．结果：ＰＡＳＭＣ缺氧培养１２ｈ,２４ｈ后,ＭＴＴ的Ａ值和３Ｈ－ＴｄＲ参入量分别为（１７９±１９．１）％,（１８５±２０．３）％和（１５８±１３．６）％,（１６７±１７．４）％,比常氧对照组（１００％）显著增加（Ｐ＜０．０１）．缺氧培养２４ｈ后,在Ｇ２,Ｍ期的细胞比例显著升高,Ｇ０,Ｇ１期的细胞比例显著减少（Ｐ＜０．０１）．Ｌ－Ｅｎｋ（１×１０－４ｍｏｌ／Ｌ）可明显抑制缺氧促进ＰＡＳＭＣ增殖和ＤＮＡ合成的作用（Ｐ＜０．０１）,该抑制作用可被Ｎａｌ阻断．结论：Ｌ－Ｅｎｋ可抑制缺氧时ＰＡＳＭＣ的增殖和ＤＮＡ的合成作用,该抑制效应是通过阿片受体介导的．     

茶碱对小脑颗粒神经元凋亡的保护作用及其作用机理

为探讨茶碱对神经元凋亡的影响及其作用机理,建立小脑颗粒神经元的低钾凋亡模型,用ＤＮＡ凝胶电泳、ＦＤＡ染色和放射免疫等方法,发现经不同浓度茶碱（１～２０ｍｍｏｌ／Ｌ）处理,低钾培养的小脑颗粒神经元存活率相应提高２２％～１００％,量效关系有高度显著性（Ｐ＜０．０１）,ＥＣ５０＝２．９７ｍｍｏｌ／Ｌ;经茶碱（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）处理的细胞,其ＤＮＡ凝胶电泳带没有“梯子”状分布;与不同浓度茶碱（５～８０ｍｍｏｌ／Ｌ）在ＣＯ２培养箱孵育１５ｍｉｎ,小脑颗粒神经元内ｃＡＭＰ均升高,且是剂量依赖性的。认为茶碱对撤去极化浓度氯化钾诱发小脑颗粒神经元的凋亡有保护作用,此作用产生除与其升高小脑颗粒神经元内ｃＡＭＰ有关外,还有其它机理。     

一种快速灵敏分离凋亡细胞DNA片断的方法

一些资料表明氧应激能导致小鼠胸腺细胞凋亡。用含有２０μｍｏｌ／Ｌ的地氧化氢和０．１ｍｍｏｌ／Ｌ硫酸亚铁的磷酸缓冲液处理胸腺细胞１０ｍｉｎ后去掉处理液，再用含有１０％的小牛血清的ＲＰＭＩ１６４０培养基在３７℃５％ＣＯ２条件下分别培养０，１，２和４ｈ。测量凋亡细胞的ＤＮＡ片段的百分数，同时比较了两种ＤＮＡ抽提方法对凋亡细胞“ＤＮＡｌａｄｄｅｒ”的影响。结果提示快速一步法抽提凋亡细胞的“ＤＮＡ ｌａｄｄ     

顺铂诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡的观察

在体外采用光镜、电镜及ＤＮＡ断片检测方法对顺铂作用于人食管癌Ｅｃａ１０９细胞后的形态学及生化改变进行了观察。药物作用后细胞皱缩变小，呈圆形，细胞核固缩、破裂或消失，胞浆红染，有的细胞似出芽状，可见到凋亡小体及凋亡小体被吞噬的现象。顺铂低浓度时凋亡现象不明显，５ｍｇ／Ｌ以上时作用明显。药物作用２４ｈ时经ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳，可见到呈梯状的条带。结果提示：顺铂可引起Ｅｃａ１０９细胞凋亡，ＤＮＡ降解是细胞凋亡过程中的重要变化之一。     

顺铂诱导人肝癌细胞凋亡模型的构建

目的 建立肝癌细胞凋亡模型,探讨顺铂抗癌作用机理,为进一步研究细胞凋亡分子机制打下基础。方法 用抗癌药顺铂诱导增减的人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞发生凋亡,用四氮甲唑蓝比色试验（ＭＴＴ）,细胞形态学检查,ＤＮＡ凝胶电泳检测。结果 顺铂可显著抑制ＳＭＭＣ－７７２１细胞的生长,并有很好的量效和时效关系,经药物作用后,肝癌细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变,ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳吴现明显的梯度     

胃癌细胞凋亡过程中PKC活性表达的变化

目的：探讨胃癌细胞凋亡过程中胞浆、胞膜和总蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性的变化。方法：选择顺铂诱导胃癌细胞凋亡,采用光镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡;应用竞争蛋白结合法检测ＰＫＣ活性。结果：顺铂浓度为２μｇ／ｍｌ作用于胃癌细胞２４ｈ出现典型的凋亡改变,即凋亡小体、细胞皱缩,染色质固缩和片段化,ＤＮＡ梯状条带,流式细胞仪上见“凋亡峰”;胃癌细胞凋亡过程中,从３０ｓ到２４ｈ,胞浆、胞膜和总ＰＫＣ活性均低于对照组。结论：胃癌细胞凋亡过程中,胞浆、胞膜和总ＰＫＣ活性呈下调趋势     

蛋白合成抑制剂促进TNFα诱导大肠癌细胞凋亡

目的探索放线菌酮和ＴＮＦ。协同诱导人大肠癌Ｌ。ＶＯ细胞凋亡的发生规律。方法用细胞体外培养方法，以放线菌酮和均小剂量作用于人大肠癌ＬｏＶｏ细胞，经Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８荧光染色，光镜观察形态改变，并用流式细胞术检测ＤＮＡ断裂情况。结果单用ＴＮＦａ５万［Ｊ／Ｌ或放线菌酮４ｍｇ／Ｌ，均未引起ＬｏＶｏ细胞凋亡效应。而两者协同，作用１２ｈ至４８ｈ，ＬＯＶＯ细胞逐渐出现明显的凋亡形态学改变和ＤＮＡ断裂。结论小剂量的放线菌阴和ＴＮＦＱ协同作用于人大肠癌Ｌ。ＶＯ细胞，出现明显的凋亡效应。     

茶多酚诱导人胃癌细胞凋亡

为寻找新的肿瘤细胞凋亡诱导剂，选用茶的主要活性成分茶多酚，采用噻唑蓝（ＭＴＴ）还原法，ＤＮＡ凝胶电泳以及透射电镜技术，观察茶多酚对人胃癌细胞（ＭＧＣ－８０３）凋亡的影响。结果表明，被１２５μｇ·ｍｌ－１茶多酚作用２４ｈ后，ＭＧＣ细胞进行凝胶电泳呈现出典型的ＤＮＡ条带，透射电镜下看到凋亡小体；茶多酚对ＭＧＣ细胞凋亡的诱导活性平行于它的细胞毒作用。